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潍坊医学院学报 2011年第3期33卷 161-164页

作者：孙晓红于志刚张雪莉庄宝祥张圣明潍坊医学院组织胚胎学教研室山东潍坊261053 潍坊医学院附属潍坊市人民医院血液病科潍坊医学院形态学实验室

目的观察钙离子螯合剂对白血病患者骨髓单个核细胞（BMMNC）生成硫化氢（H2S）的影响.方法采用BAPTA-AM和EGTA螯合细胞内外的钙离子,用敏感硫电极检测细胞外硫离子,计算出H2S含量的变化;免疫组化方法和图像分析系统检测bcl-2,bax的表... 详细信息

目的观察钙离子螯合剂对白血病患者骨髓单个核细胞（BMMNC）生成硫化氢（H2S）的影响.方法采用BAPTA-AM和EGTA螯合细胞内外的钙离子,用敏感硫电极检测细胞外硫离子,计算出H2S含量的变化;免疫组化方法和图像分析系统检测bcl-2,bax的表达变化.结果 BAPTA-AM和EGTA各实验组与对照组比较,H2S生成量均明显降低（P〈0.05）.免疫组化结果显示,bcl-2和bax均表达于细胞浆和胞膜上.图像分析光密度值（OD值）,BAPTA-AM和EGTA各实验组bcl-2蛋白表达与对照组比较,12h,24h和48h均高于对照组（P〈0.05）.bax蛋白的表达在BAPTA-AM和EGTA各实验组与对照组相比,12h,24h和48h均低于对照组（P〈0.05）.结论细胞内外钙离子螯合剂均能减少白血病患者BMMNC生成H2S,H2S生成降低在较短时间内可能抑制细胞凋亡,促进细胞增殖.

关键词：钙离子螯合剂白血病细胞凋亡 H2S

从制造到智造:维生素B12与合成生物学的不解之缘

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科学通报 2025年第1期 44-59页

作者：康倩吕荣玉张大伟中国科学院天津工业生物技术研究所中国科学院天津工业生物技术研究所低碳合成工程生物学重点实验室天津科技大学生物工程学院

合成生物学以生命科学为基础,辅以工程化思维,融合了物理学、化学、计算机科学等学科知识,旨在改造、设计、构建新型的生物体系.维生素B12作为横跨医学、化学和生物学三学科的“明星小分子”,近百年来一直备受研究人员的重视,其生物制... 详细信息

合成生物学以生命科学为基础,辅以工程化思维,融合了物理学、化学、计算机科学等学科知识,旨在改造、设计、构建新型的生物体系.维生素B12作为横跨医学、化学和生物学三学科的“明星小分子”,近百年来一直备受研究人员的重视,其生物制造在合成生物学发展的推动下不断创新.本文探讨了自1926年维生素B12小分子被发现至今的重要研究成果和内容,其中囊括在早期医学、化学研究时期,维生素B12相关研究的重要诺奖级成果;天然合成维生素B12菌株挖掘、催化途径解析及遗传工具开发;人工重组合成维生素B12菌株和体系的构建及优化等重要内容.聚焦近30年来,合成生物学系统研究方法的提出和推进对维生素B12生物制造有显著促进作用.这些进展推动了维生素B12从简单的天然菌种“制造”过程走向更具设计性、智能化的人工菌种与人工体系的“智造”过程转变.此外,维生素B12复杂的天然合成途径成为经典的研究范本,为合成生物学发展提供了优秀的经典案例,与合成生物学的发展结下“不解之缘”.

关键词：合成生物学维生素B12 生物制造细胞工厂无细胞合成

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江浙蝮蛇毒碱性磷脂酶A2的溶血位点

生物化学与生物物理学报 2002年第3期34卷 383-387页

作者：焦浩漭金茜赵晶晶冯波吴祥甫周元聪中国科学院生物化学与细胞生物学研究所中国科学院生物化学与细胞生物学研究所上海200031

用聚合酶链式反应 (PCR)对江浙蝮蛇毒碱性磷脂酶A2 基因进行点突变 ,使对应 34位氨基酸残基由Arg分别突变为Glu和Gln ,将其基因克隆至温敏表达载体pBLMVL2 ,并在大肠杆菌RR1中成功诱导表达 ,表达产物以包涵体的形式存在。对包涵体进行... 详细信息

用聚合酶链式反应 (PCR)对江浙蝮蛇毒碱性磷脂酶A2 基因进行点突变 ,使对应 34位氨基酸残基由Arg分别突变为Glu和Gln ,将其基因克隆至温敏表达载体pBLMVL2 ,并在大肠杆菌RR1中成功诱导表达 ,表达产物以包涵体的形式存在。对包涵体进行变复性后 ,用凝胶过滤的方法纯化。对纯化后的产物进行酶活力测定及溶血活性测定。实验结果表明 ,突变后的表达产物维持原有磷脂酶A2 活性 ,且溶血活性显著降低 ,表明磷脂酶A2 的34位碱性氨基酸残基在溶血过程具有重要作用

关键词：江浙蝮蛇碱性磷脂酶A2 溶血

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脂肪组织的免疫功能

生物化学与生物物理进展 2004年第8期31卷 679-683页

作者：周一然宋建国中国科学院生物化学与细胞生物学研究所上海200031

脂肪组织不仅是能量的储备器官 ,也是一个重要的内分泌器官 .它协助神经系统和其他内分泌器官维持机体的内平衡 .近年来 ,一些研究表明脂肪组织与免疫反应有着密切的联系 .人们发现脂肪细胞分泌的瘦素不仅调节机体的能量代谢和控制脂肪... 详细信息

脂肪组织不仅是能量的储备器官 ,也是一个重要的内分泌器官 .它协助神经系统和其他内分泌器官维持机体的内平衡 .近年来 ,一些研究表明脂肪组织与免疫反应有着密切的联系 .人们发现脂肪细胞分泌的瘦素不仅调节机体的能量代谢和控制脂肪的积累 ,还参与调节单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞的免疫功能 ,是一种作用广泛的细胞因子 .脂肪细胞分泌的其他因子如脂联素也有免疫调节作用 .免疫刺激还会作用于淋巴结周围的脂肪组织 ,引起这些脂肪细胞发生脂解作用 .脂肪组织与免疫系统的相互作用 ,进一步表明生命是由各系统组成的一个有机统一体 .随着对这一领域的研究不断深入。

关键词：脂肪组织免疫功能内分泌器官瘦素细胞因子免疫细胞

多聚谷氨酰胺延伸蛋白募集细胞内正常蛋白质或RNA的分子机制

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生物化学与生物物理进展 2018年第12期45卷 1204-1213页

作者：岳宏伟胡红雨中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所上海200031

多聚谷氨酰胺(PolyQ)疾病,是一类由编码蛋白质的基因中CAG三核苷酸重复序列的异常延伸所引发的神经退行性疾病.CAG三核苷酸重复序列导致所编码蛋白质的PolyQ序列的异常延伸,使蛋白质发生错误折叠和积聚,并在细胞内形成包涵体.包涵体的... 详细信息

多聚谷氨酰胺(PolyQ)疾病,是一类由编码蛋白质的基因中CAG三核苷酸重复序列的异常延伸所引发的神经退行性疾病.CAG三核苷酸重复序列导致所编码蛋白质的PolyQ序列的异常延伸,使蛋白质发生错误折叠和积聚,并在细胞内形成包涵体.包涵体的形成是神经退行性疾病的一个重要特征.PolyQ蛋白在积聚过程中,可以将细胞内与其特异相互作用的蛋白质或RNA募集到包涵体中.被募集的其他蛋白质或RNA不仅自身的可溶性组分减少,而且由于被"挟持"到包涵体中其在细胞内的有效组分也相应地减少,从而影响其正常的生物功能.根据特异相互作用的模式,我们将募集作用分为以下几种类型:蛋白质(含Poly Q蛋白)的共积聚;特定结构域或模体介导的募集作用(包括泛素等修饰介导的募集作用);RNA介导的募集作用;以及对分子伴侣蛋白的募集作用.PolyQ延伸蛋白的积聚和对其他组分的募集可能是引发细胞毒性和神经退行性病变的重要原因.

关键词： PolyQ疾病积聚包涵体募集作用功能损伤细胞毒性神经退行性

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真核生物mRNA 3′非翻译区的功能

生物化学与生物物理进展 2008年第9期35卷 980-985页

作者：王海震王莹刘定干中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所上海200031

真核生物mRNA的3′非翻译区的功能复杂多样,不仅能调控其mRNA的稳定性、控制mRNA的亚细胞定位,而且还在特定氨基酸的编码过程中起着指导作用.一些真核生物mRNA的3′非翻译区内的突变可引起疾病的发生.近几年的研究又发现,一些真核生物m... 详细信息

真核生物mRNA的3′非翻译区的功能复杂多样,不仅能调控其mRNA的稳定性、控制mRNA的亚细胞定位,而且还在特定氨基酸的编码过程中起着指导作用.一些真核生物mRNA的3′非翻译区内的突变可引起疾病的发生.近几年的研究又发现,一些真核生物mRNA的3′非翻译区还具有抑制肿瘤生长的功能.

关键词： mRNA 3′非翻译区功能

普萘洛尔通过磷脂酶D的活化诱导磷脂酸水平的增高(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2001年第9期22卷 11-18页

作者：柴敏强陈军松赵晟宋建国中国 200031 分子生物学国家重点实验室中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所生物化学与细胞生物学研究所上海

目的:考察普萘洛尔诱导细胞内磷脂酶D的活化,分析该酶的活化与普萘洛尔刺激引起胞内磷脂酸水平升高的关系,研究蛋白激酶C在此过程中的作用。方法:[~3H]-豆蔻脂酸放射性标记细胞,通过转磷脂酰反应,抽提细胞脂类分子用薄层层析法分析磷脂... 详细信息

目的:考察普萘洛尔诱导细胞内磷脂酶D的活化,分析该酶的活化与普萘洛尔刺激引起胞内磷脂酸水平升高的关系,研究蛋白激酶C在此过程中的作用。方法:[~3H]-豆蔻脂酸放射性标记细胞,通过转磷脂酰反应,抽提细胞脂类分子用薄层层析法分析磷脂酶D的产物。用蛋白激酶C的抑制剂来抑制蛋白激酶C的活性或通过佛波酯长时间处理细胞来下调蛋白激酶C的水平。以免疫印记法分析蛋白激酶C的含量。结果:在正丁醇的存在下,普萘洛尔处理A-549细胞引起磷脂酶D的活性快速增高,普萘洛尔诱导磷脂酰丁醇的生成导致磷脂酸生成水平的下降。用蛋白激酶C的抑制剂星形孢菌素(staurosporine),Ro-31-8220及粗糠柴毒素(rottlerin)预处理细胞或通过佛波酯长时间处理下调胞内蛋白激酶C的水平对普萘洛尔诱导的磷脂酶D的活性没有抑制作用,而有增强效应。结论:普萘洛尔引起细胞内磷脂酸水平的提高是由于普萘洛尔对磷脂酶D活性的强烈诱导作用而导致的,蛋白激酶C对该过程可起到负调节作用。

关键词：磷脂酶D 磷脂酸类蛋白激酶C 普萘洛尔星形孢菌素 A-549细胞免疫印迹法

同步辐射μ-XRF用于金银花中砷的吸收分布和转运趋势研究

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北京联合大学学报 2025年第1期39卷 69-77页

作者：周俊彤张伊彤彭聪男霍清刘美北京联合大学生物化学工程学院北京100023

金银花因环境因素影响,砷超标问题严重。采用水培法,模拟有机砷与无机砷胁迫,探究金银花的主要酶活性变化,并应用同步辐射X射线荧光光谱(μ-XRF)技术解析砷在金银花中的吸收、分布及转运趋势。使用不同形态不同浓度的砷胁迫金银花植株,... 详细信息

金银花因环境因素影响,砷超标问题严重。采用水培法,模拟有机砷与无机砷胁迫,探究金银花的主要酶活性变化,并应用同步辐射X射线荧光光谱(μ-XRF)技术解析砷在金银花中的吸收、分布及转运趋势。使用不同形态不同浓度的砷胁迫金银花植株,测定叶片的生化指标,包括过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD),生化结果显示:在低浓度砷胁迫下,多个生化指标能够积极响应,低浓度无机砷与高浓度有机砷胁迫对POD活性的影响相近,两种形态的砷长时间胁迫,都会使POD显著上升;高浓度有机砷胁迫使CAT急剧下降,表明植物自身的保护机制受损;SOD的变化因砷形态而异,无机砷条件下呈V型波动,有机砷条件下则持续降低,表明植物细胞调节能力受限。μ-XRF分析显示:无机砷主要蓄积于植物的根部表皮层,根与茎共同形成拦截屏障;有机砷主要蓄积于金银花根部维管柱。这为评估重金属污染对药材品质的影响及探索减少药用部位重金属积累策略提供科学依据。

关键词：砷金银花抗氧化酶形态分布

应用定点突变与分子模建方法研究蛋白酶抑制剂eglin C突变体对蛋白酶furin和kexin的抑制活力(英文)

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生物化学与生物物理学报 2001年第6期33卷 591-599页

作者：费浩罗明娟叶玉珍丁达夫戚正武中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所分?

蛋白质前体加工酶参与许多重要蛋白质前体的加工成熟过程 ,哺乳动物来源的furin和酵母中的kexin是该家族的重要成员。首先人工合成了编码枯草杆菌蛋白酶抑制剂eglinC的基因片段 ,组装后在大肠杆菌中得到表达。以定点突变方法在野生型egl... 详细信息

蛋白质前体加工酶参与许多重要蛋白质前体的加工成熟过程 ,哺乳动物来源的furin和酵母中的kexin是该家族的重要成员。首先人工合成了编码枯草杆菌蛋白酶抑制剂eglinC的基因片段 ,组装后在大肠杆菌中得到表达。以定点突变方法在野生型eglinC抑制活性中心的P1、P2 和P4 位引入碱性氨基酸残基可以将其改造为很强的furin抑制剂 (Ki约 10 -9mol/L) ,和kexin抑制剂 (Ki 约 10 -11mol/L)。同时根据枯草杆菌蛋白酶和eglinC复合物的晶体结构 ,计算机同源模建了前体加工酶与eglinC突变体结构之间的相互作用 ,并结合实验数据得到以下结果 :(1)P1位引入的碱性残基是该抑制剂活力的前提 ;(2 )P4 位碱性残基的引入可以极大地提高抑制剂活力约两个数量级 ;(3)P2 位的碱性残基将有效提高抑制剂的活力 ,然而同时可以破坏抑制剂本身的稳定性 ;(4 )野生型P3 位的疏水性残基参与抑制剂活性环附近疏水核心的构成。

关键词：蛋白质前体加工酶蛋白酶抑制剂定点突变分子模建

多聚谷氨酰胺延伸蛋白募集细胞内转录因子及对基因转录调控的影响

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生物化学与生物物理进展 2023年第5期50卷 1159-1166页

作者：张祥乐胡红雨中国科学院分子细胞卓越创新中心/上海生物化学与细胞生物学研究所上海200031

多聚谷氨酰胺(polyglutamine,PolyQ)疾病是由特定基因序列中CAG三核苷酸的不稳定重复扩增所引发的一类神经退行性疾病。至今已发现9种类型的PolyQ疾病,其中多数疾病的致病蛋白质在转录调控中发挥着重要的病理作用。PolyQ蛋白中谷氨酰胺... 详细信息

多聚谷氨酰胺(polyglutamine,PolyQ)疾病是由特定基因序列中CAG三核苷酸的不稳定重复扩增所引发的一类神经退行性疾病。至今已发现9种类型的PolyQ疾病,其中多数疾病的致病蛋白质在转录调控中发挥着重要的病理作用。PolyQ蛋白中谷氨酰胺的异常重复延伸会引发蛋白质错误折叠并在细胞中积聚形成包涵体。积聚的蛋白质可通过自身结构域、泛素修饰和RNA等介导的相互作用,有效地募集细胞内的转录因子、泛素接头或受体蛋白,以及分子伴侣等组分到包涵体中。这些组分在细胞中的可溶性比例减少,使得机体内的转录调控系统功能受损,造成转录失调从而诱发疾病。因此,研究异常延伸的PolyQ蛋白对细胞内转录因子及其他组分的募集作用,可在分子水平上解释神经退行性疾病的发病机制,从而为临床应用提供潜在的预防和治疗方法。

关键词：多聚谷氨酰胺疾病多聚谷氨酰胺蛋白蛋白质积聚募集作用转录因子转录失调