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接种汉逊德巴利酵母对普洱茶发酵微生物群落与品质的影响

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食品科学 2025年第5期46卷 124-133页

作者：王藤伯年国沙艮卢万洋马燕赵明云南农业大学食品科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南省药用植物生物学重点实验室云南昆明650201 云南特色植物提取实验室云南昆明650106 云南农业大学茶学院云南昆明650201

本研究利用从普洱茶中分离的汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)PETY002接种强化发酵普洱茶(EF组)。结果表明,EF组的酵母菌落总数显著高于传统发酵(NF组)。感官审评发现,EF组茶汤颜色更深、滋味更醇厚、香气带有菌香。特征成分测定... 详细信息

本研究利用从普洱茶中分离的汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)PETY002接种强化发酵普洱茶(EF组)。结果表明,EF组的酵母菌落总数显著高于传统发酵(NF组)。感官审评发现,EF组茶汤颜色更深、滋味更醇厚、香气带有菌香。特征成分测定结果表明,与NF组相比,EF组的茶褐素和水浸出物的含量增加,而茶多酚、儿茶素类(儿茶素、表没食子儿茶素、没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯)以及咖啡碱的含量降低,黄酮组分和氨基酸组分差异较小。微生物群落分析表明,汉逊德巴利酵母是EF组中的优势真菌,德巴利酵母属(Debaryomyces)与嗜热真菌属(Thermomyces)存在相互竞争的关系。相关性分析表明,德巴利酵母属与茶褐素呈显著正相关,与可溶性糖和茶黄素呈显著负相关。综上,接种汉逊德巴利酵母强化发酵改变了发酵微生物群落的多样性和组成,通过与其他优势微生物相互作用提高了普洱茶的品质。

关键词：汉逊德巴利酵母普洱茶强化发酵特征成分微生物群落

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紫金龙异紫堇定生物合成相关6-OMT基因克隆与功能表征

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生物技术通报 2025年第2期 309-320页

作者：李明刘祥宇王益娜和四梅沙本才云南农业大学农学与生物技术学院云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室云南特色植物提取实验室

【目的】（S）-去甲乌药碱O-甲基转移酶（6-OMT）是异紫堇定生物合成的关键限速酶，通过克隆与体外酶活验证紫金龙6-OMT基因功能，为解析紫金龙异紫堇定生物合成途径奠定基础。【方法】从紫金龙转录组数据中挖掘DsOMT基因，通过PCR扩增... 详细信息

【目的】（S）-去甲乌药碱O-甲基转移酶（6-OMT）是异紫堇定生物合成的关键限速酶，通过克隆与体外酶活验证紫金龙6-OMT基因功能，为解析紫金龙异紫堇定生物合成途径奠定基础。【方法】从紫金龙转录组数据中挖掘DsOMT基因，通过PCR扩增获得全长cDNA序列，并通过生物信息学分析DsOMT蛋白结构；分析DsOMT基因在不同组织中的表达水平；构建pET-28a-DsOMT原核表达载体，将其转入大肠杆菌BL21 (DE3)进行诱导表达，纯化蛋白后进行体外酶反应，以表征其功能。【结果】从转录组数据中挖掘到4个DsOMT候选基因，分别命名为DsOMT07、DsOMT08、DsOMT010、DsOMT012，并成功扩增得到全长cDNA序列；4个DsOMT蛋白都不存在跨膜结构域和信号肽，属于膜外蛋白。系统发育显示4个DsOMT与6-OMT亚家族亲缘关系较近。对4个DsOMT的氨基酸序列进行分析，显示可能具有上游途径（S）-去甲乌药碱6-OH位点的催化活性。表达谱分析发现4个DsOMT基因在根中高表达。SDS-PACE结果表明DsOMT蛋白可溶性高，并在大肠杆菌中高效表达，体外酶反应后发现DsOMT010能够催化（S）-去甲乌药碱的C6的O-甲基化形成（S）-衡州乌药碱。【结论】成功克隆了4个DsOMT基因，属于膜外蛋白，与6-OMT亚家族亲缘关系较近，4个DsOMT基因在根中高表达；同时在大肠杆菌中实现了DsOMT的异源表达，并纯化蛋白进行了体外酶功能表征，鉴定到1个（S）-去甲乌药碱C6位O-甲基转移酶DsOMT010。

关键词：紫金龙 O-甲基转移酶生物信息学分析原核表达功能表征

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天麻多糖酶解工艺优化、结构表征及其抗氧化活性分析

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食品工业科技 2025年第4期46卷 205-214页

作者：胡云飞周德曾青兰和劲松赵明唐卿雁云南农业大学食品科学技术学院云南昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室/云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南昆明650201 云南农业大学茶学院云南昆明650201

多糖因其具有多种生物活性而备受关注,但天然多糖往往分子量较高,导致其低溶解率和生物利用率。本研究利用α-淀粉酶降解天麻多糖,以还原糖生成量为指标优化酶解工艺。在最佳酶解条件下酶解天麻多糖,并对酶解前后天麻多糖的溶解度、单... 详细信息

多糖因其具有多种生物活性而备受关注,但天然多糖往往分子量较高,导致其低溶解率和生物利用率。本研究利用α-淀粉酶降解天麻多糖,以还原糖生成量为指标优化酶解工艺。在最佳酶解条件下酶解天麻多糖,并对酶解前后天麻多糖的溶解度、单糖组成、相对分子量、官能团、微观结构进行考察。此外,体外检测了酶解前后天麻多糖对ABTS+和DPPH自由基的清除能力。结果表明,最佳酶解工艺为:酶添加量460 U/g、酶解时间100 min、酶解温度60℃、酶解pH5.4,在最佳工艺下,天麻多糖酶解后的还原糖生成量为0.441 mg/mL。酶解后天麻多糖的溶解率从81.28%提高至93.57%,单糖组成和官能团结构没有明显变化,两个多糖组分的分子量都显著降低(P研究为α-淀粉酶降解天麻多糖提供一定的科学依据。

关键词：天麻多糖酶解结构表征抗氧化活性

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人参属药用植物种质资源研究进展

中草药 2025年第1期56卷 360-373页

作者：线小云李葵秀李满桥陈中坚王勇魏富刚杨生超刘冠泽云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室云南农业大学农学与生物技术学院文山学院文山三七研究院文山苗乡三七科技有限公司红河学院

人参属Panax L.是重要的药用植物资源，具有广阔开发前景，备受国内外关注。随着植物化学和分子生物学研究深入，人参属资源研究取得显著进展，资源保护和合理开发成为当务之急。人参属遗传多样性是研究的重要方面，新品种选育取得显著... 详细信息

人参属Panax L.是重要的药用植物资源，具有广阔开发前景，备受国内外关注。随着植物化学和分子生物学研究深入，人参属资源研究取得显著进展，资源保护和合理开发成为当务之急。人参属遗传多样性是研究的重要方面，新品种选育取得显著成果，此外多组学技术在揭示次生代谢物质生物合成、生长发育等机制中发挥重要作用。但种质资源评价与利用程度较低、育种和繁育技术有待提升。从人参属资源分类、构成及保护现状、遗传多样性和新品种选育及多组学研究和皂苷合成等方面，概述了人参属种质资源开发利用、育种研究及存在问题，为人参属药用植物资源的开发与利用提供理论参考。

关键词：人参属种质资源品种选育人参皂苷基因组生物合成

三七磷酸吡哆醛依赖性酶和鸟氨酸环脱氨酶原核表达

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分子植物育种 2025年

作者：刘启泽彭玉青向贵生张广辉云南农业大学农学与生物技术学院云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室

三七素(dencichine)是药用植物三七(Panax notoginseng (Burkill) F. H. Chen)重要止血活性成分，其生物合成的直接前体是L-2，3-二氨基丙酸(L-DAP)。课题组提出了一个可能的三七中三七素生物合成途径，其中包括了磷酸吡哆醛依赖性酶(PA... 详细信息

三七素(dencichine)是药用植物三七(Panax notoginseng (Burkill) F. H. Chen)重要止血活性成分，其生物合成的直接前体是L-2，3-二氨基丙酸(L-DAP)。课题组提出了一个可能的三七中三七素生物合成途径，其中包括了磷酸吡哆醛依赖性酶(PALP)和鸟氨酸环脱氨酶(OCD)等关键酶，为了验证这两类基因的功能，解析三七中L-DAP的生物合成途径。本研究从三七中克隆了4条PALP基因和1条OCD基因，PnPALP基因全长915～1 428 bp，编码305～476个氨基酸，PnOCD全长1 023 bp，编码341个氨基酸。生物信息学分析发现，除了PnPALP3，其余理论等电点均低于7；除了PnPALP8，其余均为稳定性蛋白；所有蛋白均不存在跨膜结构域，二级结构主要是α-螺旋和无规则卷曲。蛋白三级结构预测显示，PnPALP1的蛋白结构与嗜热细菌HB8的色氨酸合酶的同源性为48%；PnPALP3、PnPALP5、PnPALP8的蛋白结构与拟南芥的半胱氨酸合酶的同源性分别为49%、55%、52%；PnOCD的蛋白结构与恶臭假单胞菌的鸟氨酸环脱氨酶的同源性为31%。原核表达显示，4个PnPALP蛋白均能在大肠杆菌BL21中表达得到可溶性蛋白，而PnOCD为包涵体蛋白，融合MBP标签后，增加了该蛋白的溶解性。本研究可为PnPALP和PnOCD基因的功能验证提供条件，为解析三七素前体L-DAP的合成途径提供参考。

关键词：磷酸吡哆醛依赖性酶鸟氨酸环脱氨酶 L-2,3-二氨基丙酸原核表达

凝结魏茨曼氏菌发酵普洱茶细菌群落与品质特征研究

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中国酿造 2025年第1期44卷 112-118页

作者：肖艳琴李若愚刘琨毅王藤雷鑫沙艮陈思琴李彬马燕赵明云南农业大学茶学院云南昆明650201 云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心云南昆明650201 宜宾职业技术学院五粮液技术与食品工程学院四川宜宾644100

该研究从普洱熟茶中分离益生菌,并对其进行形态学观察及分子生物学鉴定。按照106 CFU/g分别在普洱熟茶发酵30 d和36 d依次接入分离菌株,制备益生菌发酵普洱熟茶(WF)。以未接菌发酵样为对照(CK),比较发酵样品细菌群落及品质特征差异。结... 详细信息

该研究从普洱熟茶中分离益生菌,并对其进行形态学观察及分子生物学鉴定。按照106 CFU/g分别在普洱熟茶发酵30 d和36 d依次接入分离菌株,制备益生菌发酵普洱熟茶(WF)。以未接菌发酵样为对照(CK),比较发酵样品细菌群落及品质特征差异。结果表明,从普洱熟茶中分离鉴定到一株凝结魏茨曼氏菌(Weizmannia coagulans)PETB0001。WF样品中凝结魏茨曼氏菌的菌落数为(5.98±1.08)×10~6 CFU/g,是CK的11.59倍。线性判别分析效应大小(LEfSe)结果显示,芽孢杆菌属(Bacillus)和凝结魏茨曼氏菌是WF样品的生物标志物。WF样品的果香、醇厚度和甜度较CK显著增加(P<0.05),而涩味较CK降低;WF样品的可溶性糖、茶红素、甲硫氨酸、咖啡碱、儿茶素、表儿茶素、表没食子酸儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、花旗松素的含量显著高于CK(P<0.05),而茶多酚、儿茶素没食子酸酯、鞣花酸、杨梅素、水浸出物以及部分氨基酸组分的含量显著低于CK(P<0.05)。

关键词：普洱熟茶凝结魏茨曼氏菌发酵细菌群落品质特征

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基于UPLC多指标测定和指纹图谱对不同来源茵陈药材质量评价

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中草药 2025年第1期56卷 282-292页

作者：李敏乔旭魏建和李文伟林少辉栗孟飞王秋玲甘肃农业大学生命科学技术学院干旱生境作物学国家重点实验室中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所漳州片仔癀药业股份有限公司

目的建立不同来源茵陈Artemisiae Scopariae Herba药材的UPLC多成分含量测定和指纹图谱方法,对28个产地绵茵陈和22个产地花茵陈药材进行含量测定、指纹图谱分析和化学模式分析。方法以Waters ACQUITY UPLC BEH C18（100mm×2.1 mm,1.7... 详细信息

目的建立不同来源茵陈Artemisiae Scopariae Herba药材的UPLC多成分含量测定和指纹图谱方法,对28个产地绵茵陈和22个产地花茵陈药材进行含量测定、指纹图谱分析和化学模式分析。方法以Waters ACQUITY UPLC BEH C18（100mm×2.1 mm,1.7μm）色谱柱为固定相,0.1%甲酸水（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.25 mL/min,检测波长310nm,结合对照品比对进行色谱峰确认,对共50份不同来源茵陈药材进行14个化合物的含量测定,指纹图谱分析共有峰和进行相似度评价,采用聚类分析（hierarchical cluster analysis,HCA）和正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial least square s discrimination analysis,OPL S-DA）筛选茵陈药材的特征成分。结果建立了茵陈药材UPLC多成分含量测定和指纹图谱方法;结果表明,不同产地来源茵陈化学成分含量存在差异;指纹图谱法标定了绵茵陈、花茵陈各18、32个共有峰,化学模式分析表明化合物3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸可作为药材质量评价的标志性成分。结论建立的UPLC多成分含量测定方法和指纹图谱法适用于不同来源茵陈的质量评价;不同产地的含量测定结果、指纹图谱和化学模式分析结果可为茵陈药材产地选择、质量控制提供有益参考。

关键词：茵陈 UPLC 指纹图谱相似度化学模式识别新绿原酸绿原酸隐绿原酸咖啡酸 1,3-二咖啡酰奎宁酸对羟基苯乙酮芦丁金丝桃苷异槲皮苷 3,4-二咖啡酰奎宁酸 1,5-二咖啡酰奎宁酸 3,5-二咖啡酰奎宁酸 4,5-二咖啡酰奎宁酸滨蒿内酯

基于血浆药物化学结合网络药理学及药代动力学探究咳宁颗粒止咳祛痰的质量标志物

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中国中药杂志 2025年第04期 959-973页

作者：陈轻轻张元现王倩张金玲郑林黄勇金阳巩仔鹏李月婷贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室民族药与中药开发应用教育部工程研究中心国家苗药工程技术研究中心贵州医科大学药学院贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室

该研究基于药效、血浆药物化学、网络药理学及药代动力学等方法探讨咳宁颗粒止咳祛痰的质量标志物(Q-marker)。通过浓氨水引咳和酚红排泌试验评估咳宁颗粒的止咳、祛痰药效作用。采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-... 详细信息

该研究基于药效、血浆药物化学、网络药理学及药代动力学等方法探讨咳宁颗粒止咳祛痰的质量标志物(Q-marker)。通过浓氨水引咳和酚红排泌试验评估咳宁颗粒的止咳、祛痰药效作用。采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-Q-Exactive Plus Orbitrap HRMS)技术分析鉴定到咳宁颗粒的原型入血成分26个。网络药理学筛选出咳宁颗粒止咳祛痰的11个潜在活性成分,涉及IL6、TLR4、STAT3等40个共同靶点,主要参与PI3K/Akt、HIF-1、EGFR等信号通路。利用药代动力学定量分析了7个原型入血成分。通过有效性、传递性、可测性将壬二酸、咖啡酸、香草醛3个化合物作为咳宁颗粒止咳祛痰的质量标志物。该研究结果对于深入明确咳宁颗粒的药效物质基础、优化质量标准以及推动其临床应用具有重要意义。

关键词：咳宁颗粒止咳祛痰网络药理学质量标志物

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基于多组学整合策略探究艾迪注射液降低阿霉素诱导心脏毒性的作用机制

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中国中药杂志 2025年

作者：王艳丽涂玉洁朱建华郑林黄勇孙佳李勇军潘洁刘春花陆苑贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室/贵州省药物制剂重点实验室贵州医科大学药学院贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/贵州省民族药与中药开发应用工程技术研究中心

艾迪注射液（Aidi Injection， ADI）联合阿霉素(doxorubicin， DOX)是临床肿瘤治疗的常用策略，其在协同抗肿瘤同时，减轻DOX引起的心脏毒性。该研究采用多组学手段，系统阐明ADI降低DOX诱导心脏毒性的作用机制。采用DOX诱导的小鼠心... 详细信息

艾迪注射液（Aidi Injection， ADI）联合阿霉素(doxorubicin， DOX)是临床肿瘤治疗的常用策略，其在协同抗肿瘤同时，减轻DOX引起的心脏毒性。该研究采用多组学手段，系统阐明ADI降低DOX诱导心脏毒性的作用机制。采用DOX诱导的小鼠心脏毒性模型，通过生化指标和病理检查评价ADI的心脏保护作用。在此基础上，借助转录组学、蛋白组学和代谢组学技术分析不同生理状态下机体内源性物质的变化情况。将各组学中具有显著回调趋势的差异物进行整合分析，筛选出ADI发挥心脏保护作用的关键调控通路，并选取其中的重要靶蛋白进行ELISA试剂盒测定和免疫组化分析。结果表明，ADI能够显著降低模型组小鼠血清心肌肌钙蛋白T (cardiac troponin T，cTnT) 和N末端B型脑钠肽前体 (N-terminal pro-B-type natriuretic peptide，NT-proBNP) 的水平，有效改善心肌组织空泡化和心肌纤维化现象，表明ADI对DOX诱导的心脏毒性具有较好的干预作用。转录组学分析共筛选出400个ADI治疗后显著回调到正常水平的差异基因，富集结果主要涉及心肌纤维化进程、炎症反应和氧化应激反应等作用途径。蛋白组学分析共筛选出70个ADI治疗后显著回调到正常水平的差异蛋白，富集结果主要涉及机体炎症反应、心脏功能以及能量代谢等相关信号通路。代谢组学分析共筛选出51个ADI治疗后显著回调到正常水平的差异代谢物，富集结果主要涉及炎症反应、脂质代谢和能量代谢等多条信号通路。多组学整合分析结果显示亚油酸代谢、花生四烯酸代谢和甘油磷酸脂代谢通路在DOX诱导的机体炎症反应中具有重要作用，而ADI可能通过调控这些通路发挥治疗作用。重要靶蛋白的分析结果显示，ADI会显著调控DOX组中环氧合酶1（cyclooxygenase - 1， COX-1）、环氧合酶2（cyclooxygenase - 2， COX-2）、前列腺素H2 (prostaglandin H2，PGH2)和前列腺素D2 (prostaglandin D2， PGD2)的异常表达。综上，ADI可有效改善DOX诱导的心脏毒性，其作用机制可能与调控亚油酸代谢、花生四烯酸代谢和甘油磷酸脂代谢等通路，从而干预机体炎症反应进程有关。

关键词：艾迪注射液阿霉素心脏毒性转录组学蛋白组学代谢组学