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雪旺细胞来源的外泌体miR-21通过靶向SPRY2促进大鼠坐骨神经损伤后修复的研究

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中国康复医学杂志 2024年第6期39卷 767-774页

作者：田明月杨溢铎覃琬婷朱晶国海东邵水金上海中医药大学中西医结合学院人体解剖教研室上海市201203

目的:研究高表达miR-21的雪旺细胞(Schwann cells,SC)来源外泌体对坐骨神经损伤(sciatic nerve injury,SNI)的修复作用及机制。方法:分别采用空载慢病毒和高表达miR-21的慢病毒感染SC株,收集SC上清外泌体并进行鉴定。采用神经断端吻合... 详细信息

目的:研究高表达miR-21的雪旺细胞(Schwann cells,SC)来源外泌体对坐骨神经损伤(sciatic nerve injury,SNI)的修复作用及机制。方法:分别采用空载慢病毒和高表达miR-21的慢病毒感染SC株,收集SC上清外泌体并进行鉴定。采用神经断端吻合术建立SNI大鼠模型,术后随机分为模型组、SC来源外泌体组和高表达miR-21的SC来源外泌体组(n=10)。其中,SC来源外泌体组和高表达miR-21的SC来源外泌体组分别采用体外收集的外泌体局部注射进行治疗,3周后行为学实验检测神经功能恢复,免疫荧光染色评价SNI后轴突髓鞘再生,RT-q PCR检测血清外泌体miR-21及神经组织中miR-21和SPRY2的表达水平,双荧光素酶报告基因实验体外验证miR-21和SPRY2之间的靶向互作。结果:与模型组相比,其余各组大鼠坐骨神经功能和神经再生情况均出现明显改善,RT-q PCR结果显示血清外泌体及神经组织中miR-21的表达水平显著升高,神经组织中SPRY2的表达水平显著降低,其中高表达miR-21的SC细胞来源外泌体组较SC来源外泌体组变化更显著;双荧光素酶报告基因实验表明miR-21靶向调节SPRY2的表达。结论:高表达miR-21的SC来源外泌体通过靶向SPRY2显著促进SNI后修复。

关键词：雪旺细胞外泌体 miR-21 坐骨神经损伤功能恢复神经再生

三维生物打印支架的拓扑结构介导的免疫反应对小鼠毛囊周期的影响

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第1期40卷 43-49页

作者：刘清华李曌恩和吉日嘎拉张超宋薇王玉振梁莉婷张孟德黄钰岩李筱贺黄沙内蒙古医科大学基础医学院呼和浩特010110 解放军总医院医学创新研究部创伤修复与组织再生研究中心北京100048 内蒙古医科大学基础医学院人体解剖学教研室呼和浩特010110

目的探讨具有不同拓扑结构的三维生物打印支架介导的免疫反应对小鼠毛囊周期的影响。方法该研究为实验研究。将海藻酸钠-明胶复合水凝胶用三维生物打印机打印成3种支架,并按照支架的3种拓扑结构(打印时打印喷头的旋转角度分别为45°、6... 详细信息

目的探讨具有不同拓扑结构的三维生物打印支架介导的免疫反应对小鼠毛囊周期的影响。方法该研究为实验研究。将海藻酸钠-明胶复合水凝胶用三维生物打印机打印成3种支架,并按照支架的3种拓扑结构(打印时打印喷头的旋转角度分别为45°、60°、90°),分别命名为T45支架、T60支架、T90支架,肉眼观察3种支架交联后的形态。取9只8周龄雌性C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为T45组、T60组、T90组,每组3只,分别于背部皮下埋植T45、T60、T90支架。于植入后7 d,观察小鼠背部脱毛区毛发生长情况,行苏木精-伊红染色观测支架周围的纤维囊厚度,行免疫荧光染色检测支架周围组织中CD68、骨形态发生蛋白2(BMP-2)、肿瘤坏死因子(TNF)蛋白的表达水平。以上实验样本数均为3。结果3种支架交联后均拓扑结构明显,保真度高。植入后7 d,T45组、T90组小鼠背部脱毛区毛发均生长明显;T60组小鼠支架植入区毛发生长缓慢,与未植入区差别明显。植入后7 d,与T90组[(18±4)μm]相比,T45组、T60组小鼠支架周围的纤维囊厚度[(39±4)、(55±8)μm]均明显增加(P<0.05);与T45组相比,T60组小鼠支架周围的纤维囊厚度明显增加(P<0.05)。植入后7 d,T60组小鼠支架周围组织中CD68蛋白的表达水平明显高于T45组和T90组(P值均<0.05);T60组小鼠支架周围组织中BMP-2蛋白的表达水平明显高于T45组、T90组(P值均<0.05),T45组小鼠支架周围组织中BMP-2蛋白的表达水平明显高于T90组(P<0.05);T60组小鼠支架周围组织中TNF蛋白的表达水平明显低于T45组和T90组(P值均<0.05)。结论具有不同拓扑结构的三维生物打印支架植入小鼠体内后会介导不同程度的免疫反应。适度的免疫反应可促进小鼠脱毛区毛发生长,过强的免疫反应抑制毛囊进入生长期。

关键词：组织工程打印,三维免疫组织支架毛囊拓扑

基于灌注系统对CUBIC组织透明化技术的优化

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解剖学报 2024年第3期55卷 363-370页

作者：宫川惠邱家怡印可馨张继茹何铖袁野吕广明南通大学医学院人体解剖学系江苏南通226001 南通大学医学院江苏南通226001 南通大学神经生物学研究所江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的为了缩短清晰无障碍脑成像鸡尾酒和计算分析(CUBIC)技术的透明时间,提高透明效率,探索亲水性组织透明技术应用的可能性,本研究对CUBIC技术进行灌注优化后,与4种亲水性透明化方法在组织透明效果、透明时间、面积变化、体积变化及腺... 详细信息

目的为了缩短清晰无障碍脑成像鸡尾酒和计算分析(CUBIC)技术的透明时间,提高透明效率,探索亲水性组织透明技术应用的可能性,本研究对CUBIC技术进行灌注优化后,与4种亲水性透明化方法在组织透明效果、透明时间、面积变化、体积变化及腺相关病毒(AAV)荧光保留情况等方面进行了比较。方法取6只成年美国癌症研究所(ICR)小鼠的脑、肝、脾和肾分别采用SeeDB、FRUIT、ScaleS、CUBIC的方法进行透明化处理,使用Image J 1.8.0测算样本的面积和灰度值,排水法测量透明前后体积,比较各组的透明效果、时间以及大小变形。通过改进灌注速率与最佳灌注剂量对CUBIC技术进行灌注优化,每组实验样本量为6。另在16只成年小鼠的大脑运动皮层定位注射AAV,4周后取其颈髓节段透明化处理,荧光照片经过ImageJ1.8.0测量平均荧光强度,评估不同技术的荧光保存情况。结果灌注CUBIC的最佳灌注速率和灌注剂量分别是15 ml/min和200 ml。对于透明能力和速度,灌注CUBIC技术的平均灰度值最低且用时最短,而CUBIC消耗的时间最长,SeeDB、FRUIT、ScaleS并没有显示出良好的透明能力。在面积和体积变化方面,几种技术对组织或器官透明后均有不同程度的膨胀。在荧光保留方面,灌注CUBIC对绿色荧光蛋白(GFP)荧光信号的保留效果最好,其次是CUBIC、ScaleS、FRUIT和SeeDB。结论灌注CUBIC技术与其他技术相比,组织透明效果最好,透明时间最短,AAV荧光保留最多。

关键词：组织透明化光学透明清晰无障碍脑成像鸡尾酒和计算分析亲水性组织透明化技术小鼠

脂肪干细胞源性外泌体对体外巨噬细胞迁移能力的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 718-727页

作者：袁博谢佳忆江思瑜孟亚军朱清华李晓飞付秀美谢利德承德医学院基础医学院人体解剖学教研室河北承德067000 承德护理职业学院病原生物与免疫教研室河北承德067000 河北省神经损伤与修复重点实验室河北承德067000 清华大学信息科学技术学院自动化系北京100062 河北医科大学第一医院中心实验室河北石家庄050000

目的:探讨脂肪干细胞源性外泌体(ADSC-Exos)对巨噬细胞RAW264.7迁移能力的影响,阐明其促进巨噬细胞功能的作用。方法:分离SD大鼠附睾旁脂肪组织,进行脂肪源性干细胞(ADSCs)原代培养,通过成脂和成骨分化诱导,结合油红O和茜素红染色检测AD... 详细信息

目的:探讨脂肪干细胞源性外泌体(ADSC-Exos)对巨噬细胞RAW264.7迁移能力的影响,阐明其促进巨噬细胞功能的作用。方法:分离SD大鼠附睾旁脂肪组织,进行脂肪源性干细胞(ADSCs)原代培养,通过成脂和成骨分化诱导,结合油红O和茜素红染色检测ADSCs的多向分化潜能。采用Western blotting法和免疫荧光法检测ADSCs标记物CD29及CD44阳性表达情况,采用外泌体(Exos)分离试剂盒提取ADSC-Exos,透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析仪检测ADSC-Exos的形态大小和粒径分布范围,Western blotting法检测Exos特异性标记物CD9和TSG101蛋白表达情况,示踪法观察巨噬细胞摄取ADSC-Exos情况。将巨噬细胞RAW264.7分为对照组、10 mg·L^(-1)ADSCExos组、20 mg·L^(-1)ADSC-Exos组和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组。5-乙基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色检测各组巨噬细胞活性,Transwell小室实验检测各组巨噬细胞迁移细胞数,荧光显微镜观察各组巨噬细胞黏附情况。结果:原代ADSCs培养24 h后细胞贴壁生长,呈散在、长梭形;培养7 d,贴壁细胞呈齿梳状、旋涡状有序排列,呈成纤维细胞样外观;培养10代后ADSCs形态不规则,增殖速度减慢。分离提取的ADSCs具有成骨和成脂分化潜能,CD29和CD44蛋白表达阳性。透射电子显微镜下ADSC-Exos呈茶碟状,ADSC-Exos的粒径主峰分布于132 nm附近,ADSC-Exos中CD9和TSG101蛋白表达阳性,即ADSC-Exos提取成功。荧光显微镜下RAW264.7细胞核周围可检测到红色荧光信号,即ADSC-Exos可以被巨噬细胞摄取。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组EdU阳性细胞率均明显升高(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20 mg·L^(-1)ADSC-Exos组EdU阳性细胞率均明显升高(P<0.05)。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞迁移细胞数均明显增加(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞迁移细胞数均明显增加(P<0.05)。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞黏附细胞数均明显增加(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20 mg·L^(-1)ADSCExos组巨噬细胞黏附细胞数明显增加(P<0.05)。结论:ADSC-Exos可被巨噬细胞摄取,其通过影响细胞黏附提高巨噬细胞的迁移能力。

关键词：脂肪干细胞外泌体巨噬细胞细胞迁移细胞黏附

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CT/MRI图像融合技术与CT引导三叉神经半月节射频热凝术的疗效对比

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安徽医科大学学报 2024年第3期59卷 538-541,546页

作者：沈静王梦格宋阳任振华安徽医科大学第一附属医院疼痛科合肥230022 安徽医科大学人体解剖学教研室合肥230032

目的对比CT/MRI图像融合技术和传统CT引导经皮三叉神经半月节射频热凝术的疗效。方法收集88例原发性三叉神经痛患者医疗信息,按不同影像引导方式随机平均分为对照组(CT引导三叉神经半月节射频热凝术)和融合组(CT/MRI图像融合技术辅助三... 详细信息

目的对比CT/MRI图像融合技术和传统CT引导经皮三叉神经半月节射频热凝术的疗效。方法收集88例原发性三叉神经痛患者医疗信息,按不同影像引导方式随机平均分为对照组(CT引导三叉神经半月节射频热凝术)和融合组(CT/MRI图像融合技术辅助三叉神经半月节射频热凝术);对穿刺操作时间、术中不适发生率以及术前、术中和术后的视觉模拟评分法(VAS)评分、巴罗神经学研究所(BNI)疼痛评分及术后并发症发生率进行比较。结果融合组穿刺操作耗时短于对照组(P<0.05);融合组术中和术后的VAS及BNI评分、术中不适、术后并发症发生率均低于对照组(P<0.05)。结论在提高疗效、减少术中不适、术后并发症方面,CT/MRI图像融合技术较CT引导更具优越性。

关键词： CT/MRI图像融合三叉神经痛射频热凝术半月神经节 CT引导术后并发症

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肩胛上动脉解剖变异类型及临床意义

中国临床解剖学杂志 2024年第4期42卷 475-479页

作者：肖晨曦周浩瑞郑心彤章浩民赖嘉豪苏继东周坤孙诗竹付饶中山大学医学院广东深圳510080 中山大学孙逸仙纪念医院放射介入专科广州510120 中山大学医学院基础与临床医学教学实验室广东深圳510080 中山大学医学院人体解剖学教研室广东深圳510080

肩胛上动脉是供应肩胛骨及其周围骨骼肌和构成肩胛动脉网的重要血管,常见起源部位是甲状颈干(42.10±2.05)%,锁骨下动脉(30.93±1.92)%,与颈横动脉共干起自甲状颈干(16.49±1.54)%。从胸廓内动脉发出、与颈横动脉共干起自锁骨下动脉和... 详细信息

肩胛上动脉是供应肩胛骨及其周围骨骼肌和构成肩胛动脉网的重要血管,常见起源部位是甲状颈干(42.10±2.05)%,锁骨下动脉(30.93±1.92)%,与颈横动脉共干起自甲状颈干(16.49±1.54)%。从胸廓内动脉发出、与颈横动脉共干起自锁骨下动脉和缺如等情况属于罕见变异[1]。临床陆续有一些肩胛上动脉细小属支血管的罕见异位报道。相比常见异位,罕见异位不仅起源异常,还可发生走行异常,导致该动脉与相邻解剖结构的位置关系发生较大变化而引起一系列临床症状和手术操作的不便[2]。此外,罕见异位的影像学表现不显著、易漏诊,往往是出现症状之后才发现,引发严重的并发症,如锁骨骨折导致血管破裂、进而导致冈上肌供血不足而萎缩[3]。

关键词：肩胛上动脉解剖变异临床意义

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睡眠-觉醒调控的神经环路研究

解剖学杂志 2024年第1期47卷 1-10页

作者：张凯莹袁向山复旦大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系上海200032

睡眠-觉醒是人类日常生活中不可或缺的生理状态,对身体健康和认知功能至关重要。在神经科学领域,研究人员长期致力于探索睡眠的调节机制和相关的神经环路。现对睡眠-觉醒神经环路的最新研究进展进行总结和展望,重点总结控制非快速眼动... 详细信息

睡眠-觉醒是人类日常生活中不可或缺的生理状态,对身体健康和认知功能至关重要。在神经科学领域,研究人员长期致力于探索睡眠的调节机制和相关的神经环路。现对睡眠-觉醒神经环路的最新研究进展进行总结和展望,重点总结控制非快速眼动睡眠的核团和神经元,快速眼动睡眠的启动和终止神经核团和神经元,以及负责觉醒的神经核团,为理解睡眠障碍的发生机制、提高睡眠质量以及改善大脑功能提供重要的基础。

关键词：觉醒快速眼动睡眠非快速眼动睡眠神经环路

基于网络药理学和分子对接探究香青兰保护脑卒中的作用机制

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包头医学院学报 2024年第6期40卷 1-6,13页

作者：吴鹏杨占君内蒙古分子病理学重点实验室内蒙古呼和浩特010000 包头医学院人体解剖学教研室

目的:基于网络药理学研究香青兰(Dracocephalum moldavica L.)对于脑卒中的保护作用机制。方法:通过NCBI、CNKI找出香青兰有效成分,使用Pubchem、swiss target prediction数据库预测香青兰的有效靶点,运用GeneCards、Omim数据库搜索与... 详细信息

目的:基于网络药理学研究香青兰(Dracocephalum moldavica L.)对于脑卒中的保护作用机制。方法:通过NCBI、CNKI找出香青兰有效成分,使用Pubchem、swiss target prediction数据库预测香青兰的有效靶点,运用GeneCards、Omim数据库搜索与脑卒中(cerebral stroke)相关靶基因,构建维恩图筛选交集基因,利用cytoscape建立药物、成分、靶点、疾病关系网络图并可视化,利用String软件构建蛋白网络互作图,利用DAVID数据库进行GO富集和KEGG分析。结果:通过查找文献共找出香青兰有效成分23个,对应的靶点有1682个,主要分子有NADPH氧化酶4(NOX4)、黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH)、髓过氧化物酶(MPO)等;通过PPI拓扑分析得到核心靶点57个;GO富集分析显示涉及生物过程(biological process,BP)443个、分子功能(molecular function,MF)104个、细胞组成(cellular component,CC)66个;KEGG结果显示共涉及信号通路有143个,其中主要有癌症通路(hsa05200:pathways in cancer)、PI3K-Akt信号通路(hsa04151:PI3K-Aktsignaling pathway)、神经活性配体-受体相互作用(hsa05022:neuroactive ligand-receptor interaction)等。结论:本研究初步揭示了香青兰可通过多种靶点、通路等治疗脑卒中,为进一步科学实验提供理论基础。

关键词：香青兰脑卒中网络药理学分子对接作用机制

蒙药香青兰总黄酮对大鼠脑缺血再灌注后缺血半暗带区血管内皮生长因子受体2表达的影响

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包头医学院学报 2024年第8期40卷 86-90页

作者：高天一翟维凯蔡志平崔成立李梁包头医学院基础医学与法医学院内蒙古包头014040 包头医学院基础医学与法医学院人体解剖学教研室

目的:观察蒙药香青兰总黄酮(total flavones of dracocephalum moldavica,TFDM)对大鼠脑缺血再灌注损伤后缺血半暗带区血管内皮生长因子2(vascular endothelial growth factor 2,VEGFR2)表达的影响,探讨其对血管生成的作用。方法:SD大... 详细信息

目的:观察蒙药香青兰总黄酮(total flavones of dracocephalum moldavica,TFDM)对大鼠脑缺血再灌注损伤后缺血半暗带区血管内皮生长因子2(vascular endothelial growth factor 2,VEGFR2)表达的影响,探讨其对血管生成的作用。方法:SD大鼠线栓法制备大脑中动脉闭塞再灌注模型,TFDM 50 mg/kg灌胃给药,在手术后第1、3、7、14天4个时相进行取材,免疫组织化学染色观测VEGFR2阳性标记的细胞及新生血管在缺血半暗带区的分布情况,Western blot检测缺血半暗带区VEGFR2的表达情况。结果:免疫组织化学染色结果显示,再灌注术后第3~14天时,TFDM给药组阳性细胞表达数量显著高于模型组(P<0.05),且在微血管、微动脉和微静脉附近表达增多;Western blot检测结果也显示,TFDM给药组VEGFR2表达上调。结论:TFDM可能通过上调VEGFR2蛋白的表达,促进脑缺血半暗带区微血管的生成,改善微循环功能。

关键词：香青兰总黄酮脑缺血再灌注血管内皮生长因子受体2 血管生成缺血半暗带区