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中药和天然产物精准调控自噬的策略及其在神经退行性疾病模型中的应用

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中国科学:生命科学 2024年

作者：董雨路嘉宏澳门大学中药质量研究国家重点实验室(澳门大学)中华医药研究院

自噬是真核细胞中高度保守且精细的自我更新与降解机制,对维持神经稳态至关重要.随着年龄增长,自噬功能可能出现失调,具体表现为逐渐丧失清除受损细胞器和异常蛋白质的能力.细胞内部废物的积累可能导致一系列问题,包括细胞骨架破坏、轴... 详细信息

自噬是真核细胞中高度保守且精细的自我更新与降解机制,对维持神经稳态至关重要.随着年龄增长,自噬功能可能出现失调,具体表现为逐渐丧失清除受损细胞器和异常蛋白质的能力.细胞内部废物的积累可能导致一系列问题,包括细胞骨架破坏、轴突运输障碍、线粒体损伤,进一步诱导神经炎症、氧化应激及突触功能异常.这些情况最终导致神经退化,促进神经退行性疾病的进展.中药和天然产物小分子在调节自噬活性和治疗神经退行性疾病方面展现出显著的潜力.然而,这些天然小分子的作用靶点不明确以及针对特定自噬相关调控通路的筛选方法局限性,制约了其作为自噬调节剂的深入研究和临床应用.本研究依据药理学文献,系统地归纳和剖析了典型药物调节自噬的关键靶点和分子机制,旨在为研发具有高特异性和显著疗效的中药和天然产物自噬调节剂提供关键的参考信息和理论支持,进而为神经退行性疾病的治疗提供更有效的策略.

关键词：中药药物靶点自噬神经退行性疾病衰老

UPLC结合一测多评法测定药典中淫羊藿的13种化学成分

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 981-988页

作者：刘鑫何小英刘柏龙宋平顺甘肃中医药大学甘肃兰州730030 甘肃省药品检验研究院国家中药材及饮片质量控制重点实验室甘肃省中藏药检验检测技术工程实验室甘肃兰州730030

建立淫羊藿Epimedium brevieornu中13种化学成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的一测多评法,考察该方法在评价不同产地和不同品... 详细信息

建立淫羊藿Epimedium brevieornu中13种化学成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的一测多评法,考察该方法在评价不同产地和不同品种的淫羊藿药材质量中具有一定的可行性和准确性。通过对实验方法的科学性及准确性考察,采用外标法测定淫羊藿中13种化学成分的含量,同时,以淫羊藿苷为内标,分别建立淫羊藿苷与新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的相对较正因子,计算淫羊藿中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的含量,实现用一测多评法测定其含量,最后比较实测值与计算值的差异,来验证一测多评法在测定中的准确性及科学性。各成分相对校正因子重复性较好,外标法测定结果与一测多评测定结果无显著性差异。以淫羊藿苷为内标,同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的一测多评法可用于淫羊藿的定量分析。

关键词： UPLC 一测多评法淫羊藿淫羊藿苷相对校正因子

基于网络药理学探讨麻黄活性成分治疗血管痉挛的作用机制

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中国畜牧兽医 2024年第6期51卷 2680-2696页

作者：武博文颜培宇武密山澳门科技大学中医药学院中国澳门999078 澳门科技大学中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078

【目的】运用网络药理学和体外细胞试验探究麻黄活性成分治疗血管痉挛的相关分子机制。【方法】从中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)、SwissTargetPrediction和PharMapper数据库获取麻黄的主要活性成分及作用靶点,通过DrugBank、Ge... 详细信息

【目的】运用网络药理学和体外细胞试验探究麻黄活性成分治疗血管痉挛的相关分子机制。【方法】从中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)、SwissTargetPrediction和PharMapper数据库获取麻黄的主要活性成分及作用靶点,通过DrugBank、GeneCards、OMIM数据库获取疾病靶点,取交集得到药物成分-疾病交集靶点。利用STRING数据库进行蛋白-蛋白互作(PPI)分析,通过Cytoscape 3.9.1软件筛选得到核心靶点与核心成分。采用Metascape平台进行GO功能与KEGG通路富集分析,AutoDock Vina平台进行分子对接。在此基础上,通过MTT法检测麻黄活性成分对血管紧张素Ⅱ所致血管平滑肌细胞(vSMCs)增殖影响的机制。【结果】麻黄的有效活性成分主要包括木犀草素、槲皮素、β-槲皮素、圣草酚、柚皮素、豆甾醇、山柰酚等,这些药物成分主要作用靶点488个,血管痉挛的相关靶点394个。麻黄防治血管痉挛有67个预测靶点,主要包括基质金属肽酶Ⅸ(MMP9)、MMP2、血管紧张素Ⅱ受体1型(AGTR1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、表皮生长因子受体(EGFR)、一氧化氮合酶2(NOS2)等。对上述67个靶点进行富集分析发现,与正向调节细胞迁移、对外来刺激反应、对缺氧反应、血管生成正向调节等生物过程,等离子体膜、突触后膜、突触前膜、树突、膜筏、轴突末端等细胞组分,RNA聚合酶Ⅱ转录因子活性、配体激活序列特异性DNA结合、丝氨酸型内肽酶活性、肽链内切酶活性、酶结合、锌离子结合等分子功能,以及钙信号通路、血管平滑肌收缩、松弛素信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路(PI3K-Akt)、鞘脂类信号通路等途径相关。分子对接结果表明,麻黄主要活性成分木犀草素、槲皮素与关键靶点MMP2和MMP9结合具有稳定构象。体外试验结果表明,麻黄活性成分木犀草素能抑制血管紧张素Ⅱ所致vSMCs增殖,其机制可能与其抑制MAPK1信号转导通路的活化有关。【结论】麻黄多种活性成分通过作用于MMP2、MMP9、血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)、NOS2等靶点治疗血管痉挛,本研究结果为麻黄活性成分治疗血管痉挛的作用机制研究提供了科学参考。

关键词：麻黄网络药理学分子对接血管痉挛细胞增殖血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ

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基于糖谱法的地黄药材及饮片定性定量分析

中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 157-163页

作者：戴梦茹李春李娆娆林丽美沈春修张永欣冯伟红王智民中国中医科学院中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室北京100700 宜春学院江西省作物生长发育调控重点实验室江西宜春336000 湖南中医药大学长沙410208

目的:以地黄中低聚糖类成分为研究对象,建立含量测定方法及薄层色谱法(TLC)鉴别方法,探究不同地黄药材及饮片中低聚糖类成分含量及分布规律。方法:收集鲜地黄和生地黄药材各10批,生地黄和熟地黄饮片各12批,采用硅胶G薄层板,以乙酸乙酯-... 详细信息

目的:以地黄中低聚糖类成分为研究对象,建立含量测定方法及薄层色谱法(TLC)鉴别方法,探究不同地黄药材及饮片中低聚糖类成分含量及分布规律。方法:收集鲜地黄和生地黄药材各10批,生地黄和熟地黄饮片各12批,采用硅胶G薄层板,以乙酸乙酯-水-无水甲酸-冰乙酸(12∶6∶5∶4)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂,建立地黄中果糖、蔗糖、棉籽糖、甘露三糖和水苏糖的TLC鉴别方法;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),建立不同地黄药材及饮片中果糖、葡萄糖、蔗糖、蜜二糖、棉籽糖、甘露三糖和水苏糖7种糖类成分的含量测定方法。对不同地黄药材及饮片中7种糖类成分含量进行主成分分析(PCA)及偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1筛选差异性成分。结果:TLC鉴别结果显示,鲜地黄、生地黄药材和生地黄饮片样品在与水苏糖、棉籽糖和蔗糖对照品相应的位置上显现相同颜色的斑点,而熟地黄饮片在此基础上与甘露三糖和果糖对照品相应的位置上显示相同颜色的斑点。7种待测成分的方法学考察结果均符合含量测定的要求。鲜地黄、生地黄药材中仅检出葡萄糖、蔗糖、棉籽糖和水苏糖,其在鲜地黄药材中的平均质量分数分别为0.84%、4.62%、2.42%和57.90%,在生地黄药材中的平均质量分数分别为3.16%、9.36%、7.05%和38.10%。生地黄饮片中,果糖、葡萄糖、蔗糖、蜜二糖、棉籽糖、甘露三糖和水苏糖的平均质量分数分别为1.68%、4.27%、9.96%、0.53%、6.85%、3.05%和37.52%;熟地黄饮片中,上述7种糖的平均质量分数分别为10.62%、11.01%、1.25%、3.35%、1.12%、28.16%和6.39%。多元统计分析结果显示,糖类成分可明显区分鲜地黄、生地黄和熟地黄,三者的主要差异性成分分别为水苏糖、蔗糖、棉籽糖和甘露三糖。结论:地黄不同药材及饮片中糖类成分的含量及种类存在较大差异,且基于此建立的薄层色谱鉴别方法可用于区分生地黄和熟地黄,可为地黄质量标准提升和地黄不同炮制品中低聚糖开发及应用奠定基础。

关键词：地黄单糖低聚糖定性分析定量分析主成分分析(PCA) 偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)

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基于UPLC-Q/TOF-MS和UPLC-QQQ-MS/MS的血栓心脉宁片和胶囊质量分析

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中国中药杂志 2024年

作者：刘雅婷纪亮陈两绵谢天择刘晓谦王智民刘传贵朱继忠高慧敏天津中医药大学中国中医科学院中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室吉林华康药业股份有限公司

血栓心脉宁片和胶囊是处方相同、制法不同但功能主治相同的2种中成药制剂，具有益气活血，开窍止痛的功效。该研究首次采用UPLC-Q/TOF-MS对血栓心脉宁胶囊进行定性分析，从中鉴定出61个化合物，其中酚酸类9个、蟾蜍甾类10个、皂苷类15... 详细信息

血栓心脉宁片和胶囊是处方相同、制法不同但功能主治相同的2种中成药制剂，具有益气活血，开窍止痛的功效。该研究首次采用UPLC-Q/TOF-MS对血栓心脉宁胶囊进行定性分析，从中鉴定出61个化合物，其中酚酸类9个、蟾蜍甾类10个、皂苷类15个、胆汁酸类5个以及其他类22个，与血栓心脉宁片相比，两者化学成分种类略有差异。在此基础上，通过网络药理学研究，构建成分-靶点-通路网络图，明确血栓心脉宁治疗冠心病、心绞痛、缺血性脑卒中的活性成分36个及共有靶点31个。针对效毒一体的蟾蜍甾类成分，采用UPLC-QQQ-MS/MS技术建立了其中日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量测定方法，方法学验证结果表明精密度、稳定性、重复性均符合定量分析要求，6个待测成分的平均加样回收率依次为80.84%、98.65%、104.6%、102.7%、83.46%、104.9%。10批血栓心脉宁片中6个成分的质量分数分别为4.13～10.3、20.6～57.9、11.0～32.2、9.52～22.7、1.64～3.39、11.3～19.5 μg·g-1；15批血栓心脉宁胶囊中6个成分的质量分数分别为0.647～5.36、2.69～72.1、2.05～17.6、2.14～24.2、1.19～7.58、2.71～21.8 μg·g-1。结果提示不同剂型、不同厂家、不同批次样品中6个成分的含量均存在一定的差异。该研究明确了血栓心脉宁片和胶囊的化学成分组成，并通过网络药理学方法预测了其治疗冠心病、心绞痛和缺血性脑卒中的活性成分以及共有靶点和信号通路，为明确其药效物质奠定了基础，同时为完善两者的质量标准、提升质量控制水平提供了检测方法，建议在生产过程中关注血栓心脉宁的投料原料蟾酥的质量。

关键词：血栓心脉宁片血栓心脉宁片胶囊网络药理学蟾蜍甾 UPLC-Q/TOF-MS,UPLC-QQQ-MS/MS

基于体外透皮成分分析的靶向网络药理学结合分子对接的儿泻康贴膜药效物质基础及作用机制研究

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药物评价研究 2024年第10期 2261-2276页

作者：王甜宋紫腾罗春郝艳琦朱加华余彩霞许浚张铁军刘昌孝天津中医药大学天津药物研究院药物成药性评价与系统转化全国重点实验室中药现代制剂与质量控制技术国家地方联合工程实验室天津市中药质量标志物重点实验室和光中药科技(天津)有限公司上海儿童营养中心

目的通过高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（HPLC-Q-TOF-MS/MS）分析儿泻康贴膜体外透皮接收液的化学成分，结合网络药理学和分子对接技术初步预测其治疗小儿腹泻、腹痛的药效物质基础及作用机制。方法采用HPLC-QTOF-MS/MS于正、负... 详细信息

目的通过高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（HPLC-Q-TOF-MS/MS）分析儿泻康贴膜体外透皮接收液的化学成分，结合网络药理学和分子对接技术初步预测其治疗小儿腹泻、腹痛的药效物质基础及作用机制。方法采用HPLC-QTOF-MS/MS于正、负离子模式下扫描，确认儿泻康贴膜透皮化学成分。选取19个主要活性成分为研究对象，利用Swiss Target prediction数据库收集化合物潜在作用靶点；通过GeneCards、OMIM、Drugbank数据库获取小儿腹泻、腹痛相关疾病靶点；借助String 12.0网络分析平台，获得活性成分与疾病交集靶点的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，从而筛选出核心靶点；利用Omicsbean在线分析平台对交集靶点进行基因本体（GO）功能分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，进一步通过Cytoscape3.9.1软件构建网络图；运用Schr?dinger2020 Maestro12.4软件将10个主要活性成分与15个核心靶点进行分子对接，验证其结合能力。结果儿泻康贴膜体外透皮接收液共鉴定出90个成分，包括生物碱类、黄酮类、有机酸类、苯丙素类、三萜类、苦味素及其他类；选取的19个活性成分治疗小儿腹泻、腹痛的潜在作用靶点共260个，经PPI网络分析筛选出肿瘤蛋白p53(TP53)、信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)、表皮生长因子受体（EGFR）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)等15个核心靶点；KEGG通路富集共得到166条通路，筛选出与疾病密切相关的通路共90条，包括磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、神经营养素信号通路、白细胞介素17信号通路等重要信号通路。分子对接结果显示，儿泻康贴膜中10个主要活性成分与15个核心靶点蛋白间结合能力较强，能形成稳定的复合物。结论通过HPLC-Q-TOF-MS/MS获得儿泻康贴膜体外透皮成分，结合网络药理学和分子对接技术初步确定了儿泻康贴膜发挥多成分、多靶点、多途径治疗小儿腹泻、腹痛的潜在药效物质基础及作用机制。

关键词：儿泻康贴膜体外透皮成分网络药理学分子对接桂皮醛丁香酚乙酸丁香酚酯柠檬苦素吴茱萸碱胡椒碱吴茱萸次碱

不同厂家银杏叶片中5种黄酮类成分的溶出度测定及其质量分析

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中国药学杂志 2024年第14期59卷 1300-1311页

作者：崔起平易红李春吴哲刘洪宇郭凤倩刘晓谦王智民广东药科大学广州510006 中国中医科学院中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室北京100700

目的针对“原料相同所生产的中成药质量不同,如何开展质量一致性评价?”的问题,以原料组成基本清楚的银杏叶提取物为对象,构建流通池法测定银杏叶片溶出度的方法,并对其参数进行优化,以探讨中成药溶出度用于质量一致性评价的可行性。方... 详细信息

目的针对“原料相同所生产的中成药质量不同,如何开展质量一致性评价?”的问题,以原料组成基本清楚的银杏叶提取物为对象,构建流通池法测定银杏叶片溶出度的方法,并对其参数进行优化,以探讨中成药溶出度用于质量一致性评价的可行性。方法采用流通池闭环系统,将银杏叶片置于装满玻璃珠的流通池内,流速8 mL·min^(-1),溶出介质为150 mL水,温度37℃,脉动频率0 Hz,于30,60,120,240,360,480 min取样3 mL(同时补充已预热的新鲜溶出介质3 mL),HPLC法测定各指标成分(manghaslin、蝶豆素、芦丁、烟花苷、水仙苷)含量,并计算累积溶出度,绘制溶出曲线。选择3个厂家9个批次的市售产品进行溶出度检查,并对其溶出曲线的相似因子和释放方程进行拟合。结果不同厂家同规格的银杏叶片的含量虽然一致性较好,但不同厂家不同批次的5种黄酮苷4 h的累计溶出度从10%到90%不等,差异极大,且多数低于70%的常规标准,说明尽管原料相同,不同的制剂水平和生产工艺细节,产品质量和临床疗效可能差异极大,因此要保证中成药制剂质量的有效性和一致性,开展溶出度检查至关重要。结论所建立的流通池溶出度测定方法能够较好地区分不同厂家样本的溶出行为,在一定程度上能够反映工艺及处方对产品质量的影响,对于规范药品生产具有应用价值。

关键词：银杏叶片黄酮苷流通池法溶出度溶出曲线

Chemerin在多囊卵巢综合征中的研究进展

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生理学报 2024年第3期76卷 429-437页

作者：朱晓娟邱杭刘圣兰戴伟胡海波黄浩赣南医科大学药学院国家中药现代化工程技术研究中心-客家中医药资源研究分中心赣州341000 澳门科技大学中药质量研究国家重点实验室中国澳门999078 比利时荷语鲁汶大学生物系鲁汶3000

Chemerin作为一种多功能脂肪因子,通过内分泌和旁分泌起作用,它可以与已知的三个受体(ChemR23、GPR1和CCRL2)结合参与能量代谢、糖脂代谢和炎症等多种病理生理过程,尤其在代谢性疾病中发挥重要作用。多囊卵巢综合征(polycystic ovary sy... 详细信息

Chemerin作为一种多功能脂肪因子,通过内分泌和旁分泌起作用,它可以与已知的三个受体(ChemR23、GPR1和CCRL2)结合参与能量代谢、糖脂代谢和炎症等多种病理生理过程,尤其在代谢性疾病中发挥重要作用。多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是最常见的内分泌疾病之一,严重困扰育龄女性的正常生活。PCOS患者血清chemerin含量显著升高,且其卵巢中chemerin高表达。越来越多的研究表明chemerin通过影响肥胖症、胰岛素抵抗、高雄激素血症、氧化应激和炎症反应等参与PCOS的发生和发展过程。本文主要综述了chemerin蛋白的产生、亚型、功能和受体,从代谢、生殖、炎症等角度总结并探讨chemerin蛋白在PCOS中的研究现状,为PCOS的临床诊断和治疗提供理论基础和参考依据。

关键词： chemerin 多囊卵巢综合征病理机制

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蒙药材蓝玉簪龙胆的化学成分研究

中国现代应用药学 2024年第1期41卷 27-32页

作者：宝钢图诺木拉朝格巴达拉夫苏达毕力格何陈林敖敦格日乐其日格尔拉喜那木吉拉内蒙古民族大学蒙医药学院国家药品监督管理局中药(蒙药)质量控制重点实验室内蒙古通辽028000 蒙医药研发工程教育部重点实验室内蒙古通辽028000

目的研究蒙药材蓝玉簪龙胆的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型HPLC等色谱手段进行分离纯化,并通过波谱数据和理化常数鉴定化合物结构。结果从蓝玉簪龙胆花中分离得到10个化合物,化合物分别鉴定为2... 详细信息

目的研究蒙药材蓝玉簪龙胆的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型HPLC等色谱手段进行分离纯化,并通过波谱数据和理化常数鉴定化合物结构。结果从蓝玉簪龙胆花中分离得到10个化合物,化合物分别鉴定为2,3-二羟基苯甲醇β-吡喃葡萄糖苷(1)、龙胆苦苷(2)、 2’-(O,m-Dihydroxybenzoyl)sweroside(3)、异荭草素(4)、异荭草素-3’-甲基醚(5)、异牡荆苷(6)、异荭草素-4’-O-吡喃葡萄糖苷(7)、异肥皂草苷(8)、熊果酸(9)、β-谷甾醇(10)。结论化合物1为新的苄醇糖苷类化合物,化合物10为首次从该植物中分离得到。

关键词：蒙药材蓝玉簪龙胆哈日-珠勒根-其木格化学成分