灵芝孢子中三萜类成分UPLC-Q-TOF-MS/MS定性分析和HPLC含量测定研究

作     者：乔灵芝 卢晨娜 刘晓谦 陈两绵 冯伟红 梁曜华 李春 王智民 

作者机构：天津中医药大学 中国中医科学院中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发计划项目(SQ2023YFC3500239) 中国中医科学院科技创新工程项目(CI2023E001TS03,CI2021A04402,CI2021A04412) 

主　　题：灵芝孢子 三萜 定性分析 含量测定 

摘      要：灵芝孢子为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum或紫芝G. sinense的干燥成熟孢子，在提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化等多方面有较强的生理活性，三萜是其活性成分之一，但目前没有可靠的含量测定方法。因此，该研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS定性分析灵芝孢子中的三萜类成分，并建立了同步测定灵芝孢子中5种三萜类成分含量的HPLC方法。在负离子模式下，通过与对照品保留时间、紫外光谱、裂解碎片比对，从灵芝孢子中确认了9种三萜类成分，分别是灵芝酸I、灵芝烯酸C、灵芝酸C2、灵芝酸C6、灵芝酸G、灵芝烯酸B、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸H；通过与文献比较，从灵芝孢子中推测了3种三萜成分，分别为赤芝酸E、（Z）-6-[（3S，5R，7S，10S，12S，13R，14R，17R）-12-乙酰氧基-3，7-二羟基-4，4，10，13，14-五甲基-11，15-二氧代-2，3，4，5，6，7，10，11，12，13，14，15，16，17-十四氢-1H-环戊烯并[α]菲-17-基]-2-甲基-4-氧代庚-5-烯酸和ganoderin A。以Ultimate HPLC XS-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm， 5 μm）为固定相，乙腈-0.072%磷酸水为流动相，梯度洗脱，流速1.2 mL·min-1，检测波长257 nm，柱温40 ℃，该条件下5种三萜类成分可实现同步定量测定，方法学考察结果符合含量测定要求。灵芝烯酸C、灵芝酸C2、灵芝酸C6、灵芝烯酸B和灵芝酸H这5种成分分别在0.93～16.08、3.44～23.88、4.28～59.40、1.40～16.16、3.53～61.20 μg·mL-1呈良好的线性关系(R20.999)，平均回收率在79.53%～93.60%，RSD在4.7%～7.6%。15批不同产地的灵芝孢子原粉和4批不同产地破壁灵芝孢子中5种三萜类成分的含量差别较大，15批不同产地原粉的5种成分总量在0.44～16.25 μg·g-1；4批不同产地的破壁灵芝孢子三萜总量在0.52～3.57 μg·g-1。该文建立的新方法操作简便、结果可靠，可以用于灵芝孢子中三萜类成分的准确测定，为灵芝孢子的质量评价提供了方法依据。