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中国百日咳实验室检测及质量管理专家共识

中华检验医学杂志 2024年第5期47卷 498-505页

作者：中国妇幼保健协会临床诊断与实验医学分会柯江维冉飞钟龙青不详江西省儿童医院检验科贵州省人民医院检验科

百日咳是一种由百日咳杆菌通过飞沫传播,感染人类引起的急性呼吸道传染病。百日咳的规范化治疗的前提是早期、及时、准确识别感染者,实验室检测及质量管理对诊断和监测百日咳感染具有重要的临床价值。为提高百日咳实验室检测效率及质量... 详细信息

百日咳是一种由百日咳杆菌通过飞沫传播,感染人类引起的急性呼吸道传染病。百日咳的规范化治疗的前提是早期、及时、准确识别感染者,实验室检测及质量管理对诊断和监测百日咳感染具有重要的临床价值。为提高百日咳实验室检测效率及质量,为临床百日咳的诊断和治疗提供规范化数据支持和应用,中国妇幼保健协会临床诊断与实验医学分会组织专家参考国内外相关文献指南,总结梳理百日咳实验室检测及质量管理研究进展,形成本共识。重点阐述实验室检测方法及质量管理在百日咳诊疗方面的临床应用,使百日咳的实验室检测更有效地服务于百日咳患者诊疗和预后评估。

关键词：百日咳传染病实验室质量管理

多配体蛋白聚糖1和不对称二甲基精氨酸在2型糖尿病肾病早期诊断及病程监测的临床价值

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中华检验医学杂志 2024年第7期47卷 789-797页

作者：刘丽杨红梅张巧玲杨宏秀刘蕾李超袁宝军开滦总医院检验科唐山063100

目的:探讨内皮损伤指标多配体蛋白聚糖1(SDC1)、不对称二甲基精氨酸(ADMA)对2型糖尿病肾病(DKD)患者早期诊断及病程监测的临床价值。方法:横断面研究。选取2020年12月至2021年12月开滦总医院内分泌科住院的2型糖尿病患者232例进行回顾... 详细信息

目的:探讨内皮损伤指标多配体蛋白聚糖1(SDC1)、不对称二甲基精氨酸(ADMA)对2型糖尿病肾病(DKD)患者早期诊断及病程监测的临床价值。方法:横断面研究。选取2020年12月至2021年12月开滦总医院内分泌科住院的2型糖尿病患者232例进行回顾性分析,根据尿白蛋白/尿肌酐比值(UACR)和估算的肾小球滤过率(eGFR)分为单纯糖尿病组(50例)和DKD组(182例),其中DKD组根据DKD进展风险进一步分为低进展风险糖尿病肾病(LDKD)亚组90例、中进展风险糖尿病肾病(MDKD)亚组55例、高进展风险糖尿病肾病(HDKD)亚组37例。以同期体检中心40名健康者为健康对照组。根据N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶/尿肌酐(NAG/Ucr)水平四分位数值,将DKD组患者分为Q1~Q4亚组,分别为45、45、46和46例。检测各组一般生化指标、SDC1和ADMA水平。采用Spearman相关法分析DKD患者SDC1、ADMA与肾小球、肾小管损伤指标相关性。多因素有序Logistic回归分析DKD进展风险及肾小管损伤的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线评价SDC1、ADMA对DKD的诊断性能。结果:DKD组收缩压、舒张压、甘油三酯(TG)、血肌酐(Scr)、尿酸(UA)、NAG/Ucr、SDC1、ADMA水平高于SDM组和健康对照组(P均<0.05),总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(AporB)、糖化血红蛋白(HbA 1c)水平高于健康对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于健康对照组(P均<0.05)。HDKD亚组SDC1水平高于SDM组和LDKD亚组,ADMA水平高于SDM组,低于LDKD亚组(P均<0.05);MDKD亚组SDC1水平高于SDM组和LDKD亚组,ADMA水平高于SDM组,低于LDKD亚组(P均<0.05);LDKD亚组SDC1、ADMA水平高于SDM组(P均<0.05)。NAG/Ucr水平Q4亚组TC、AporB、HbA 1c、Scr、UACR、SDC1水平高于Q1亚组,Scr、UACR、SDC1水平高于Q2亚组,Q3亚组HbA 1c、Scr、UACR、SDC1水平高于Q1亚组(P均<0.05)。Spearman相关分析显示,SDC1与UACR、NAG/Ucr呈正相关(r=0.757、0.566,P均<0.05),与eGFR呈负相关(r=-0.337,P<0.05);ADMA与UACR、NAG/Ucr呈正相关(r=0.197、0.142,P均<0.05)。多因素有序Logistic回归分析显示,SDC1、NAG/Ucr、Scr是DKD进展的独立影响因素(OR=2.043、1.067、1.047,P均<0.05),SDC1、HbA 1c、UACR是DKD肾小管损伤的独立影响因素(OR=1.177、1.193、1.002,P均<0.05)。ROC曲线显示,SDC1诊断DKD的曲线下面积(AUC)为0.979,敏感度为92.31%,特异度为92.22%,ADMA诊断DKD的AUC为0.745,敏感度为81.32%,特异度为60.00%,两者联合诊断DKD的AUC为0.981、敏感度为90.66%、特异度为95.66%。结论:SDC1是DKD进展和肾小管损伤的独立影响因素,可用于诊断早期DKD,并可用于监测DKD进展;ADMA可用于DKD的早期筛查。

关键词：糖尿病,2型糖尿病肾病多配体蛋白聚糖1 不对称二甲基精氨酸

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阿尔茨海默病中BACE1相互作用蛋白筛选及功能分析

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生物化学与生物物理进展 2024年第8期51卷 1904-1919页

作者：刘聪聪王亚琦王培昌首都医科大学宣武医院检验科北京100053

目的β淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶1(β-site APP cleaving enzyme 1,BACE1)是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)中淀粉样斑块形成的限速酶,其表达水平与活性在AD发生发展中起到关键作用。BACE1的相互作用蛋白可以通过直接结合、间... 详细信息

目的β淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶1(β-site APP cleaving enzyme 1,BACE1)是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)中淀粉样斑块形成的限速酶,其表达水平与活性在AD发生发展中起到关键作用。BACE1的相互作用蛋白可以通过直接结合、间接结合、参与各种细胞信号转导通路等方式,直接或间接在BACE1的转录、翻译、修饰、胞内运输等各个环节对BACE1进行调节,从而参与AD的发生与疾病的进程。本研究拟筛选并验证BACE1的相互作用蛋白,为进一步深入阐明淀粉样斑块形成的机制提供新的依据。方法采用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)与质谱联合应用的技术富集并鉴定AD模型小鼠海马组织中BACE1的相互作用蛋白,通过生物信息学分析筛选与BACE1有潜在相互作用的蛋白质,采用Co-IP实验及免疫荧光共聚焦技术进行初步验证,并探究BACE1相互作用蛋白在AD细胞模型中蛋白质表达水平变化。结果本研究在AD组中共鉴定到与BACE1相互作用的差异表达蛋白614个。基因本体(GO)富集分析显示,AD组BACE1相互作用蛋白主要参与细胞内信号转导、靶向高尔基体囊泡的转运、浦肯野细胞层发育等生物学过程;京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析显示,AD中BACE1相互作用蛋白主要参与了PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路等神经退行性疾病相关通路。通过构建BACE1相互作用蛋白网络,筛选了12个可信度较高的相互作用蛋白,其中NSF、NUMB、HSP90aa1、SNAP91为首次发现的BACE1相互作用蛋白。经进一步验证,发现NSF与BACE1存在相互作用,并且在AD细胞模型中NSF表达水平上调。结论BACE1相互作用蛋白参与多种AD相关生物途径及信号通路,NSF为新鉴定到的BACE1相互作用蛋白,与BACE1存在相互作用。NSF在AD细胞模型中表达水平上调,预测NSF与BACE1蛋白间相互作用参与调节AD疾病的进程,为疾病的机制研究提供新的靶点和方向。

关键词： β淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶1 免疫共沉淀质谱法神经退行性疾病阿尔茨海默病

多参数流式细胞术筛选急性早幼粒细胞白血病免疫表型特征

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中华检验医学杂志 2024年第7期47卷 747-754页

作者：李婷伍平陈曼王爱先傅旻婧吴雪英甄军毅宫美维王卉北京陆道培医院病理与医学检验科北京100176 河北燕达陆道培医院检验科廊坊065201

目的:多参数流式细胞术(MFC)分析筛选急性早幼粒细胞白血病(APL)免疫表型特征。方法:回顾性描述性研究。纳入2016年1月1日至2023年12月31日于河北燕达陆道培医院就诊的130例急性髓系白血病(AML)患者,其中经典型APL(cAPL)组44例,微颗粒... 详细信息

目的:多参数流式细胞术(MFC)分析筛选急性早幼粒细胞白血病(APL)免疫表型特征。方法:回顾性描述性研究。纳入2016年1月1日至2023年12月31日于河北燕达陆道培医院就诊的130例急性髓系白血病(AML)患者,其中经典型APL(cAPL)组44例,微颗粒变异型APL(APLv)组24例,非APL[包括NPM1突变AML(NPM1 mut AML)、AML伴KMT2A重排等]组62例。采用MFC免疫分型法分析和比较各组侧向散射光(SSC)中位表达强度(MEI)及其白血病细胞与自身成熟淋巴细胞MEI比值(T/L MEIR),CD34、髓过氧化物酶(MPO)、CD64和CD9的中位荧光强度(MDFI)及其上述参数白血病细胞与自身成熟淋巴细胞MDFI比值(T/L MDFIR)差异;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价流式多参数模型对cAPL和非APL、APLv和非APL的鉴别诊断效能。结果:cAPL组SSC的MEI、T/L MEIR高于APLv组和非APL组(P均<0.05),且APLv组高于非APL组(P<0.05);cAPL组和APLv组CD34的MDFI均高于非APL组(P均<0.05),APLv组的CD34 T/L MDFIR高于非APL组(P<0.05);cAPL组和APLv组MPO、CD9的MDFI、T/L MDFIR均高于非APL组(P均<0.05);cAPL组CD64的MDFI、T/L MDFIR均高于非APL组(P均<0.05)。ROC曲线结果显示,SSC的MEI、CD64的MDFI、CD9的MDFI、SSC的T/L MEIR和CD9的T/L MDFIR诊断cAPL的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.932、0.816、0.893、0.960和0.894,诊断APLv的AUC分别为0.725、0.737、0.791、0.729和0.736,其对鉴别cAPL和非APL、APLv和非APL均有较好的诊断价值(P均<0.05)。结论:通过MFC方法可分析筛选APL的免疫表型特征,对cAPL、APLv和非APL患者进行鉴别诊断。

关键词：白血病,早幼粒细胞,急性流式细胞术免疫表型分型中位荧光强度鉴别诊断

新生儿肠沙门菌肠道亚种沃兴顿株引起血流感染1例

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中华检验医学杂志 2024年第2期47卷 184-186页

作者：屈龙凤张亚运重庆大学附属江津医院检验科重庆402260 重庆市江津区中医院检验科重庆402260

患儿女,出生6 d 19 h,以“皮肤黄染3 d,发热6 h”于2023年3月31日就诊于重庆大学附属江津医院。4月1日报告血培养危急值:革兰阴性杆菌,经质谱及生化经鉴定为沙门菌属,血清型AF多价(-),Vi(-),考虑为非A~F群沙门菌。传代培养后血清凝集试... 详细信息

患儿女,出生6 d 19 h,以“皮肤黄染3 d,发热6 h”于2023年3月31日就诊于重庆大学附属江津医院。4月1日报告血培养危急值:革兰阴性杆菌,经质谱及生化经鉴定为沙门菌属,血清型AF多价(-),Vi(-),考虑为非A~F群沙门菌。传代培养后血清凝集试验结果为:O13,23 Hz,l,w,利用16S rRNA和gyrB基因测序鉴定为肠沙门菌肠道亚种沃兴顿株,与血清学试验相符。患儿经氨苄西林舒巴坦抗感染治疗14 d后病情好转出院。沙门菌鉴定需同时进行细菌生化鉴定和血清学试验,以保证检测准确性,为临床提供可靠的病原学诊断依据。

关键词：沙门菌属血清分型血流感染

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检验前智慧化流程再造与效果评估

中华检验医学杂志 2024年第5期47卷 520-525页

作者：薛灏夏勇罗厚龙李明洋晏耀明纪玲北京大学深圳医院检验科深圳518036

目的:通过检验前智慧化流程再造,以提高工作效率并减少差错。方法:收集北京大学深圳医院2021年12月至2023年2月门诊的肿瘤和感染标志物检验样本,通过集成样本传输、样本分拣与二次转运及实验室自动化系统,并实现全流程信息化监控。比较... 详细信息

目的:通过检验前智慧化流程再造,以提高工作效率并减少差错。方法:收集北京大学深圳医院2021年12月至2023年2月门诊的肿瘤和感染标志物检验样本,通过集成样本传输、样本分拣与二次转运及实验室自动化系统,并实现全流程信息化监控。比较检验前智慧化流程自动识别的再造前后的样本人工介入节点、样本采集-检测、采集-报告的周转时间(TAT)、智能预稀释比例、自动识别出检验前差错数量,评估流程再造的效果。采用卡方检验、Fisher精确概率法、Mann-Whitney U检验进行统计学分析。结果:在实施智能化流程再造后,人工介入节点从原先的13个减少至2个;门诊患者肿瘤标志物一阶段改造后,采集-报告TAT中位数从185(141,242)min降至137(102,183)min( Z=-54.932, P检验前智慧化流程再造能够优化工作流程、提升效率、减少差错。

关键词：人工智能检验前智慧化流程再造周转时间预稀释

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关注尿沉渣评分助力肾损伤诊断

中华检验医学杂志 2024年第5期47卷 472-479页

作者：续薇曲林琳吉林大学第一医院检验科长春130021

尿液承载着人体代谢丰富的信息,尿液检查有助于急性肾损伤(AKI)和慢性肾脏病(CKD)的诊断分型及疗效观察,尿沉渣具有简便、初筛、定性、定位的特点,为鉴别红细胞来源、协助诊断肾小球疾病、泌尿系感染以及各种原因的肾实质损伤提供了重... 详细信息

尿液承载着人体代谢丰富的信息,尿液检查有助于急性肾损伤(AKI)和慢性肾脏病(CKD)的诊断分型及疗效观察,尿沉渣具有简便、初筛、定性、定位的特点,为鉴别红细胞来源、协助诊断肾小球疾病、泌尿系感染以及各种原因的肾实质损伤提供了重要依据。随着对早期诊断AKI尿生物标志物研发的不断深入,尿沉渣作为尿生物标志物用于AKI 诊断的临床意义被重新认识。尿沉渣镜检有形成分中基于肾小管上皮细胞(RTEC)和颗粒管型(GC)计数的尿沉渣评分方法,主要有尿沉渣评分(USS)、管型评分指数(CSI)、尿液显微镜检查评分(UMS)和连续尿沉渣显微镜检查(MicrExUrSed),可为AKI早期诊断、病因鉴别、评估分期、判断预后提供实验室信息。

关键词：尿尿沉渣评分急性肾损伤尿液有形成分肾小管上皮细胞管型

智慧化急诊流水线在提升急诊检验效能与质量中的应用与探讨

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中华检验医学杂志 2024年第5期47卷 514-519页

作者：田佳乐权文强寄晓义李冬同济大学附属同济医院检验科上海200065

目的:探讨智慧化流水线在急诊检验中的应用价值。方法:收集同济大学附属同济医院急诊检验2019年6月24日至28日和2023年7月24日至28日两个时间段的各项指标数据进行回顾性研究。对智慧化流水线应用(启用气动传输装置)前后样本量的变化,... 详细信息

目的:探讨智慧化流水线在急诊检验中的应用价值。方法:收集同济大学附属同济医院急诊检验2019年6月24日至28日和2023年7月24日至28日两个时间段的各项指标数据进行回顾性研究。对智慧化流水线应用(启用气动传输装置)前后样本量的变化,和检验前周转时间(TAT)中位数和第90百分位数(P90)分别进行比较;调取并分析启用智慧化流水线自动质控前后同一批号质控品的质控相关数据;分析比较智慧化流水线自动审核规则应用前后实验室内TAT中位数和P90数;统计启用智慧化流水线基于患者样本的实时质量控制(PBRTQC)功能和基于质控品的室内质控方式对失控的检出效能。正态分布资料采用两独立样本t检验,偏态分布计量资料组间比较采用Mann-Whitney U检验进行统计分析。结果:智慧化急诊流水线气动传输装置运行后,急诊标本检验前TAT由27.1(18.0,47.7)min下降到24.3(15.2,34.9)min,差异有统计学意义(Z=-9.173,P0.05),且自动质控CV值与手工质控CV值均在允许范围内;干式生化质控品消耗由750μl/次,减少为600μl/次,使用量减少20%;质控操作时间由30 min/次降低到20 min/次,时间节省33.3%;质控人员数、人员走动距离均明显减少;PBRTQC功能的开发后质控失控检出率由0.82%提升到0.98%。启用智慧化流水线自动审核系统后实验室内TAT启用自动审核功能前的37.1(21.3,49.2)min下降到34.4(16.5,46.3)min,差异有统计学意义(Z=-10.062,P检验全程周转时间(ToTAT)和TAT分别由56.7(45.8,102.5)、37.4(21.5,49.6)min下降到53.3(42.1,98.3)、33.2(16.4,47.9)min,且差异均有统计学意义(Z=-7.176和-8.245,均P检验样本周转时间,有效提升急诊检验的质量和效率。

关键词：人工智能流水线急诊检验基于患者样本的实时质量控制全程周转时间周转时间

结核分枝杆菌潜伏相关蛋白PapA4的功能域及靶向药物预测分析

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中国防痨杂志 2024年第S01期46卷 41-45页

作者：李海霞范玉梅潍坊市第二人民医院检验科潍坊261041

目的:采用生物信息学方法分析结核分枝杆菌的Rv1528c基因及其编码的Pap A4蛋白结构和功能,以期为结核分枝杆菌潜伏感染的治疗及预防提供研究思路。方法:从NCBI网站获取Rv1528c基因及Pap A4蛋白的基本信息;使用Protparam、Prot Scale和Pr... 详细信息

目的:采用生物信息学方法分析结核分枝杆菌的Rv1528c基因及其编码的Pap A4蛋白结构和功能,以期为结核分枝杆菌潜伏感染的治疗及预防提供研究思路。方法:从NCBI网站获取Rv1528c基因及Pap A4蛋白的基本信息;使用Protparam、Prot Scale和Prot Comp B预测Pap A4蛋白的理化性质、亲疏水性和亚细胞定位;使用Signal PServerv.4.0、TMHMMServerv.2.0、Net NGlyc1.0server和Net Phos Serverv.3.1预测Pap A4蛋白的信号肽、跨膜结构、糖基化及磷酸化位点;使用SOPMA预测Pap A4蛋白的二级结构;使用SWISS MODEL获取Pap A4蛋白的三级结构模型;使用ABCpred和SYFPEITHI预测Pap A4蛋白的抗原表位;使用MEGA软件构建系统发育树;使用STRING数据库查找Pap A4的相关蛋白并进行GO分析推测其功能;使用HDOCK进行蛋白-蛋白对接;使用Chem Draw完成小分子设计并通过Auto Dock软件完成分子对接。结果:Rv1528c基因全长498 bp,编码的Pap A4蛋白氨基酸数为165,分子式为C785H1252N244O_(2)34S7,等电点(p I)为8.84,平均亲水性系数为-0.208,预测其为亲水性蛋白,亚细胞可能定位于细胞膜。Pap A4蛋白无跨膜结构、信号肽和糖基化位点,有15个磷酸化位点;二级结构包含45.45%的α-螺旋(Hh)、12.73%的β-折叠(Ee)、9.70%的β-转角(Tt)、32.12%无规则卷曲(Cc)。Pap A4蛋白含有13个B细胞抗原表位、12个T细胞优势抗原表位和5个CTL抗原表位。系统进化树显示其高度保守。GO分析显示其主要功能与脂肪酸代谢有关。分子对接显示Pap A4蛋白有多个活性位点。结论:生物信息学预测Pap A4蛋白为胞膜蛋白,但无跨膜结构,具有多个磷酸化位点及B、T细胞抗原表位,发现多个功能位点,其主要功能可能是潜伏活化期间海藻糖的脂肪酸酰基化。为结核分枝杆菌潜伏的预防及治疗提供了药物靶点。

关键词：潜伏结核 PapA4 生物信息学分析分子对接