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探讨自噬相关基因介导乳腺癌预后及免疫浸润的潜在机制及干预中药预测

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中草药 2024年第13期55卷 4463-4477页

作者：钟悦王志宇杨博文王能广州中医药大学基础医学院广东广州510006 广东省中医证候临床研究重点实验室广东广州510120 粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室广东广州510120 省部共建中医湿证国家重点实验室(广州中医药大学第二附属医院) 广东广州510120

目的利用生物信息学研究乳腺癌自噬相关分子模式和肿瘤微环境免疫细胞浸润特征,同时预测具有潜在治疗作用的中药。方法从TCGA和GEO数据库下载乳腺癌数据,从UCSC Xena数据库获得乳腺癌拷贝数相关数据。使用R语言和Perl分析乳腺癌自噬相... 详细信息

目的利用生物信息学研究乳腺癌自噬相关分子模式和肿瘤微环境免疫细胞浸润特征,同时预测具有潜在治疗作用的中药。方法从TCGA和GEO数据库下载乳腺癌数据,从UCSC Xena数据库获得乳腺癌拷贝数相关数据。使用R语言和Perl分析乳腺癌自噬相关基因在肿瘤组织和癌旁组织表达以及自噬相关基因的拷贝数情况。通过单因素Cox分析、Kaplan-Meier生存分析、最小绝对收缩和选择算子(logistic least absolute shrinkage and selection operator,Lasso)分析、受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)、列线图构建自噬相关预后模型并评估其预后价值。利用基因集变异分析(gene set variation analysis,GSVA)、京都百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)、单样本基因集富集分析(single-sample gene set enrichment analysis,ssGSEA)和CIBERSORT算法,探索其在乳腺癌中的潜在生物学功能和免疫细胞浸润情况。在此基础上,将关键基因导入SymMap数据库获取相关中药,采用Cytocaspe构建“中药-成分-靶点”网络图,并通过体外实验验证代表性自噬相关中药对乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响。结果大部分自噬相关基因在乳腺癌肿瘤组织和癌旁组织中有表达差异和拷贝数变异,其中肿瘤蛋白P53(tumor protein P53,TP53)的突变频率最高。构建的自噬相关预后模型提示高风险乳腺癌患者预后更差。通过ssGSEA、ESTIMATE和CIBERSORT进一步表明,所建立的模型可能对免疫细胞丰度、免疫细胞类型等产生影响。此外,预测结果提示调控乳腺癌自噬的中药功效以清热解毒、活血化瘀、补阳类为主,药性以辛、苦、甘、寒为主,主要归肝、肺、胃经。实验验证进一步表明,清热解毒药白花蛇舌草、活血化瘀药郁金、补阳药肉苁蓉/淫羊藿可通过调控自噬活性抑制乳腺癌发展。结论自噬指示乳腺癌不良预后,并与肿瘤免疫浸润密切相关。调控乳腺癌自噬的中药以清热解毒、活血化瘀、补阳类为主,为乳腺癌的免疫和中医药治疗提供新的方向。

关键词：生物信息学自噬调控乳腺癌预后肿瘤微环境白花蛇舌草郁金肉苁蓉淫羊藿

穴位埋线治疗寻常型银屑病不良事件/不良反应的系统评价

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针刺研究 2022年第4期47卷 369-376页

作者：罗亚姚丹霓卢传坚广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广州中医药大学第二附属医院广州510120 省部共建中医湿证国家重点实验室广州510120 粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室广州510120 广东省中医证候临床研究重点实验室广州510120

目的:系统评价穴位埋线治疗寻常型银屑病(PV)不良事件/不良反应(AEs/ARs)的发生情况,评价其安全性。方法:计算机检索各大中英文数据库中穴位埋线治疗PV的随机对照试验、有对照的临床试验、队列研究、病例对照研究、病例系列和病例报告,... 详细信息

目的:系统评价穴位埋线治疗寻常型银屑病(PV)不良事件/不良反应(AEs/ARs)的发生情况,评价其安全性。方法:计算机检索各大中英文数据库中穴位埋线治疗PV的随机对照试验、有对照的临床试验、队列研究、病例对照研究、病例系列和病例报告,检索时限为各数据库建库至2021年1月7日;对穴位埋线治疗PV相关的AEs/ARs进行描述性统计,并分析其发生的可能原因。结果:最终纳入16篇文献,涉及1 158例患者,共报道79例与穴位埋线治疗PV有关的AEs/ARs,程度均为轻中度,无严重AEs/ARs及死亡病例报道。最常见的AEs/ARs类型为局部红肿热痛(31.65%,25/79)和低热、乏力(29.11%,23/79),其次为同形反应(16.46%,13/79)、局部硬结(13.92%,11/79)和晕针(8.86%,7/79)。穴位埋线治疗PV的AEs/ARs中,埋线材质以使用羊肠线(93.67%,74/79)占比最高,针具以腰穿针或其他穿刺针(49.37%,39/79)占比最高,治疗间隔≤2周(67.09%,53/79)及疗程≤8周(55.70%,44/79)占比最高。因无法计算AEs/ARs发生率,故尚不能精确评估穴位埋线治疗PV的风险度和安全性。结论:现有证据表明穴位埋线治疗PV可产生一系列轻中度AEs/ARs,临床应用应引起重视,注意严格掌握适应证、禁忌证,并通过规范操作、改良埋线材质等预防相关AEs/ARs的发生。

关键词：穴位埋线寻常型银屑病不良事件/不良反应系统评价

机器人辅助椎弓根置钉临床疗效的系统评价再评价

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中国循证医学杂志 2024年第5期24卷 584-590页

作者：孙文熙高泽辉丘明旺林锐王洪伸陈博来林涌鹏广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广东省中医院广州510120 广州中医药大学第二附属医院/中医证候全国重点实验室广州510120

目的对机器人辅助椎弓根置钉疗效的系统评价/Meta分析(SR/MA)进行再评价。方法计算机检索CNKI、VIP、WanFang Data、SinoMed、PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science数据库,搜集有关机器人辅助椎弓根置钉的SR/MA,检索时... 详细信息

目的对机器人辅助椎弓根置钉疗效的系统评价/Meta分析(SR/MA)进行再评价。方法计算机检索CNKI、VIP、WanFang Data、SinoMed、PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science数据库,搜集有关机器人辅助椎弓根置钉的SR/MA,检索时限均为建库至2023年4月28日。由2名研究者独立筛选文献、提取资料后,分别使用PRISMA、AMSTAR-Ⅱ、ROBIS和GRADE工具评价纳入研究的报告质量、方法学质量、偏倚风险以及证据质量强度。结果共纳入20篇SR/MA。纳入研究结论显示机器人辅助椎弓根置钉准确性相比徒手置钉可能更高,并发症数量更少。所有SR/MA的报告质量、方法学及置钉疗效的证据质量均为低或极低,偏倚风险为高风险。其主要原因包括纳入研究的异质性偏高,研究方法和选择标准模糊、关键报告流程缺失等。结论机器人辅助椎弓根置钉相比传统徒手置钉可能具有更好的临床疗效,但相关SR/MA的质量较低。

关键词：骨科手术机器人椎弓根螺钉系统评价再评价

中医湿证评估量表用于支气管哮喘慢性持续期患者的信度与效度——一项横断面调查

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中医杂志 2024年第11期65卷 1132-1138页

作者：池逸和范斐婷魏书珊李月炜肖晶旻吴蕾林琳陈远彬省部共建中医湿证国家重点实验室广东省广州市510000 广州中医药大学第二临床医学院广东省中医证候临床研究重点实验室粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室

目的考察中医湿证评估量表(DSSCM)应用于支气管哮喘(简称哮喘)慢性持续期的信度及效度,探讨湿证与哮喘临床特征的相关性。方法采用横断面调查方法,采集206例哮喘慢性持续期患者基本信息、辅助检查结果以及DSSCM得分、哮喘控制测试问卷(A... 详细信息

目的考察中医湿证评估量表(DSSCM)应用于支气管哮喘(简称哮喘)慢性持续期的信度及效度,探讨湿证与哮喘临床特征的相关性。方法采用横断面调查方法,采集206例哮喘慢性持续期患者基本信息、辅助检查结果以及DSSCM得分、哮喘控制测试问卷(ACT)、广泛性焦虑量表(GAD-7)、抑郁自评工具量表(PHQ-9)评分,评价DSSCM的信度及效度,并分析湿证与哮喘临床特征的相关性。结果206例患者DSSCM平均得分为(14.59±10.53)分,条目总体Cronbachα系数及Spearman-Brown分半信度系数均大于0.8,集合效度和区分效度的实验成功率均大于80%,验证性因子分析示,卡方自由度比值为2.309,近似误差均方根为0.08,均方根残差为0.049,而比较拟合指数、拟合优度指数、调整的拟合优度指数、规范拟合指数及增值拟合指数均<0.9。相关性分析提示,DSSCM得分与病程、GAD-7得分、PHQ-9得分呈正相关(P<0.05),与ACT评分呈负相关(P<0.01)。不同疾病严重程度分级患者间的DSSCM得分差异有统计学意义(H=10.92,P=0.01),过敏患者DSSCM得分高于非过敏患者,差异具有统计学意义(Z=-4.19,P<0.001)。结论DSSCM应用于哮喘慢性持续期患者具有可接受的信度和效度,其得分与哮喘患者病程、ACT得分、GAD-7得分、PHQ-9得分、疾病严重程度及过敏状态存在相关性。

关键词：支气管哮喘慢性持续期湿证量表

黄芩联合EGFR-TKIs对非小细胞肺癌的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：余娅娅雷尘静肖真真磨琪马长菊丁丽娜陈亚栋朱燕娟张海波广州中医药大学第二临床医学院/第二附属医院广东省中医院广东省中医防治慢病重点实验室广东药科大学中药学院广东省中医证候临床研究重点实验室粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室省部共建中医湿证国家重点实验室

目的：探讨黄芩联合表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors， EGFR-TKIs）对非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer， NSCLC）细胞增殖、凋亡、肿瘤干细胞（cancer stem cells， CSCs）标记物表达和代谢的影响。方法：采用细胞活性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8，CCK-8)、膜联蛋白 V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)细胞凋亡双染法检测黄芩和EGFR-TKIs（吉非替尼或奥希替尼）在NSCLC细胞中的抗肿瘤作用；CellTiter-Glo?3D细胞活力法检测黄芩和EGFR-TKIs在NSCLC细胞三维（three-dimensional， 3D）培养中的活性影响；实时定量聚合酶链式反应（Quantitative real time polymerase chain reaction， qRT-PCR）和蛋白印迹（western blot，WB）方法分别检测CSCs标志物性别决定区Y-box 2 （Sex Determining Region Y Box Protein 2，SOX2）和醛脱氢酶1家族成员A1 （Aldehyde Dehydrogenase 1 Family， Member A1，ALDH1A1）mRNA和蛋白水平的表达；染色法检测细胞内活性氧（reactive oxygen species， ROS）水平的变化，飞秒激光标记自由成像（Femtosecond laser labeling free imaging，FLI）法检测氧化还原比。结果：在NSCLC细胞二维（two-dimensional， 2D）和3D培养条件中，与空白组和EGFR-TKI组比较，联合组细胞活性降低、细胞凋亡率升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与EGFR-TKI组比较，联合组CSCs标记物mRNA和蛋白水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与EGFR-TKI组比较，联合组氧化还原比升高，差异有统计学意义（P＜0.05），且联合组ROS水平升高。结论：在NSCLC细胞中，黄芩促进氧化还原比，上调ROS水平，进而抑制CSCs标记物表达来增强EGFR-TKIs的抗肿瘤作用，为黄芩增强靶向药物敏感性提供了一种新的分子机制。

关键词：非小细胞肺癌黄芩表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂癌症干细胞活性氧氧化还原比

精神心理障碍与银屑病发病风险的孟德尔随机化研究

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现代预防医学 2024年第3期51卷 401-406+411页

作者：杨玉洁莫念郑旭威唐斌罗倩倩毕洋陈海明卢传坚广州中医药大学第二临床医学院广东省中医院皮肤科广州中医药大学第二附属医院省部共建中医湿证国家重点实验室粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室广东省中医证候临床研究重点实验室

目的采用两样本孟德尔随机化方法研究广泛性焦虑障碍、重度抑郁、精神分裂症、睡眠障碍和银屑病发病风险的因果效应。方法在全基因组关联研究数据库(genome wide association study,GWAS)中筛选符合条件的四种精神心理特征及银屑病的... 详细信息

目的采用两样本孟德尔随机化方法研究广泛性焦虑障碍、重度抑郁、精神分裂症、睡眠障碍和银屑病发病风险的因果效应。方法在全基因组关联研究数据库(genome wide association study,GWAS)中筛选符合条件的四种精神心理特征及银屑病的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)。通过逆方差加权法(inverse-variance weighted,IVW)、加权中位数法(weighted median, WM)、MR-Egger等方法分析暴露与结局之间的发病风险，结果主要以IVW的P值、优势比(odds ratio, OR)和95%可信区间(confidence interval, CI)评估。采用IVW、MR-Egger、MR-PRESSO等方法进行敏感性分析。结果 IVW结果显示精神分裂症与银屑病发病风险存在因果效应(OR=1.002,95%CI:1.000～1.003,P=0.023)。异质性检验中IVW法Cochran Q test检验的P=0.104,I2=19.60%，多效性检验中MR-PRESSO结果 P=0.106,MR-Egger回归截距P=0.272，各项敏感性分析结果稳健，结果不存在异质性及多效性。未发现广泛性焦虑障碍(OR=1.000,95%CI:0.999～1.001,P=0.791)、重度抑郁(OR=1.002,95%CI:0.998～1.005,P=0.246)、睡眠障碍(OR=0.999,95%CI:0.996～1.001,P=0.614)与银屑病发病存在因果关系。结论精神分裂症与银屑病风险存在因果关系，精神分裂症患者应加强对银屑病的筛查及预防，以降低患银屑病的风险。

关键词：银屑病精神心理障碍孟德尔随机化因果效应

感染后肠易激综合征肝郁脾虚夹湿证病证结合动物模型构建及评价

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北京中医药大学学报 2024年第1期47卷 49-61页

作者：秦书敏李玉龙杨元明陈慰欢吴皓萌郑欢黄绍刚广州中医药大学第二附属医院省部共建中医湿证国家重点实验室广州510006 广东省中医证候临床研究重点实验室广州中医药大学广州中医药大学东莞医院

目的建立感染后肠易激综合征(PI-IBS)肝郁脾虚夹湿证病证结合大鼠模型并对模型进行评价。方法将200只Wistar大鼠按体质量随机区组分为正常组、感染组、感染+应激组、感染+应激+外湿组、醋酸+应激组,每组40只,共8周。采用旋毛虫感染、慢... 详细信息

目的建立感染后肠易激综合征(PI-IBS)肝郁脾虚夹湿证病证结合大鼠模型并对模型进行评价。方法将200只Wistar大鼠按体质量随机区组分为正常组、感染组、感染+应激组、感染+应激+外湿组、醋酸+应激组,每组40只,共8周。采用旋毛虫感染、慢性束缚应激、人工高湿环境及醋酸灌肠分别对各组大鼠进行相应干预。分别于第1、2、4、6、8周,检测各组大鼠体质量增长率、24 h进食量与饮水量、粪便含水率,采用旷场实验、糖水消耗实验检测各组大鼠的行为特点,采用腹壁撤退反射(AWR)实验检测各组大鼠的内脏敏感性,HE染色法观察各组大鼠结肠组织的炎症程度,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠结肠组织5-羟色胺(5-HT)及水通道蛋白4(AQP4)含量。结果造模第1~8周,感染+应激+外湿组和醋酸+应激组大鼠体质量增长率均较正常组降低,感染+应激+外湿组和感染+应激组大鼠在造模第2~8周末24 h进食量均低于正常组,造模第2周末感染+应激+外湿组、醋酸+应激组和感染+应激组大鼠24 h饮水量较正常组降低;感染+应激+外湿组大鼠粪便含水率在造模第1、6、8周末均高于正常组(均P<0.05)。造模第4周末感染+应激+外湿组和醋酸+应激组大鼠活动总距离均低于正常组;感染+应激+外湿组大鼠在造模第1、4、8周末糖水偏好率均较正常组下降,且在第4、8周末较醋酸+应激组也降低(均P<0.05)。感染+应激+外湿组大鼠在第1周末60和80 mmHg(1 mmHg≈0.133 kPa)压力下、第4周末40、60、80 mmHg压力下和第6、8周末20、40、80 mmHg压力下AWR评分均高于正常组(均P<0.05)。造模第2、4周末各干预组大鼠结肠黏膜均可见大量炎症细胞浸润,炎症程度评分均高于正常组(P<0.05),第6、8周末各干预组肠黏膜组织炎症细胞浸润不明显,结肠黏膜恢复正常。造模的第6、8周末,感染+应激组、感染+应激+外湿组及醋酸+应激组大鼠结肠组织5-HT含量均高于正常组(P<0.05);造模第4周末,感染+应激+外湿组及醋酸+应激组大鼠结肠组织AQP4含量较正常组降低,第6周末,除醋酸+应激组外,其余各组AQP4含量均低于正常组,且感染+应激+外湿组低于醋酸+应激组(P<0.05);第8周末,仅感染+应激+外湿组AQP4含量低于正常组(P<0.05)。结论采用旋毛虫感染、慢性束缚应激及人工高湿气候复合因素能够制备出较稳定的PI-IBS肝郁脾虚夹湿证病证结合大鼠模型。

关键词：感染后肠易激综合征肝郁脾虚夹湿证病证结合模型大鼠

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中医健康工程发展的技术路线与基础数据研究

世界科学技术-中医药现代化 2015年第10期17卷 1992-1996页

作者：孙喜灵姜伟炜于东林叶蕾刘孟安滨州医学院山东省中医证候研究重点实验室烟台264003 滨州医学院附属烟台医院消化科烟台264003 烟台长恩医院中医科烟台264003

提出并发展中医健康工程,运用现代科学技术,来开展体现中医学特点的人体功能状态检测研究,是实现中医诊断及疗效评价客观化的重要途径。将中医健康工程融于信息技术,形成具有中医功能状态的智能辨识系统,延伸进入健康物联网,为大健康时... 详细信息

提出并发展中医健康工程,运用现代科学技术,来开展体现中医学特点的人体功能状态检测研究,是实现中医诊断及疗效评价客观化的重要途径。将中医健康工程融于信息技术,形成具有中医功能状态的智能辨识系统,延伸进入健康物联网,为大健康时代人体养生、保健与健康提供更准确和便捷的服务。而中医证候的辨识是实现这一目标的核心。运用中医证候结构表征数据,可以实现证候与理法方药数据的智能计算,形成中医辨证论治智能系统,对促进中医健康工程的发展具有重大的意义。

关键词：中医健康工程大健康功能状态检测中医功能状态智能辨识系统健康物联网

小柴胡颗粒的化学成分及大鼠口服后的入血成分分析

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中国中药杂志 2024年第15期49卷 4078-4090页

作者：刘晓丽欧沛思林爱华刘奕明广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006 广州中医药大学第二附属医院珠海医院广东珠海519000 广东省中医证候临床研究重点实验室广东广州510120

运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术及超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)对小柴胡颗粒化学成分及大鼠口服后的入血成分进行鉴定。采用CORTECS UPLC C^(+)_(18)色谱柱(2.1 mm×10... 详细信息

运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术及超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)对小柴胡颗粒化学成分及大鼠口服后的入血成分进行鉴定。采用CORTECS UPLC C^(+)_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源正、负离子模式下采集数据后与对照品比较保留时间、精确相对分子质量、二级离子碎片以及参照相关文献进行化学成分鉴别;通过皮下注射干酵母建立大鼠发热模型后,灌胃给予正常组及模型组大鼠小柴胡颗粒,给药后于不同时间点眼眶静脉取血,分离血浆,在多反应监测模式(MRM)下进行扫描鉴定入血成分。从小柴胡颗粒中共初步鉴定出112种化学成分,包括63种黄酮类、31种皂苷类、6种有机酸类、4种苯丙素类、3种氨基酸类以及5种其他类化合物;从血浆中鉴定得到18个入血原型成分。该研究鉴定了小柴胡颗粒化学成分及入血成分,为进一步的药效物质基础及质量控制研究奠定了基础。

关键词：小柴胡颗粒化学成分入血成分 UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS UPLC-MS/MS