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大肠癌组织PIK3CA蛋白表达及其与大肠癌耐药相关性的研究

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中华肿瘤防治杂志 2010年第12期17卷 933-936页

作者：李扬扬吴淑华刘鲁英朱玉红滨州医学院病理学教研室山东滨州256603 滨州医学院附属医院病理科山东滨州256603

目的:观察PIK3CA蛋白在大肠癌的表达情况,并探讨其表达与大肠癌多药耐药(MDR)基因产物LRP、GST-π、TopoⅡ的相关性及临床意义。方法:应用免疫组织化学MaxVisionTM法检测108例大肠癌组织中PIK3CA及多药耐药(MDR)基因产物LRP、GST-π、T... 详细信息

目的:观察PIK3CA蛋白在大肠癌的表达情况,并探讨其表达与大肠癌多药耐药(MDR)基因产物LRP、GST-π、TopoⅡ的相关性及临床意义。方法:应用免疫组织化学MaxVisionTM法检测108例大肠癌组织中PIK3CA及多药耐药(MDR)基因产物LRP、GST-π、TopoⅡ的表达情况,并分析PIK3CA与大肠癌多药耐药的相关性。结果:1)PIK3CA蛋白的表达与大肠癌的分化、淋巴结转移及TNM分期有明显的相关性,P<0.05;2)PIK3CA蛋白的表达与GST-π、TopoⅡ具有相关性。结论:PIK3CA蛋白的表达与肿瘤的多药耐药具有相关性,检测PIK3CA蛋白对于大肠癌患者选择有效的化疗方法及判断预后具有重要的意义。

关键词： PIK3CA蛋白大肠癌肺耐药蛋白谷胱甘肽-s-转移酶π 拓扑异构酶Ⅱ

白细胞介素10工程化修饰人脐带间充质干细胞优效治疗炎症性肠病

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4878-4887页

作者：冯乙芮高天芸王亚萍黄亚红王斌南京大学医学院附属鼓楼医院临床干细胞研究室南京大学生命科学学院江苏省南京市210008 南京大学医学院附属鼓楼医院临床干细胞研究室江苏省南京市210008 临床干细胞研究室南京鼓楼医院南京中医药大学鼓楼临床医学院江苏省南京市210008 南京大学生命科学学院江苏省南京市210008

背景:间充质干细胞来源广泛、易体外增殖,并可分泌一系列免疫调节因子抑制炎症、促进组织修复再生,广泛应用于各种疾病治疗研究。但是对于多种疾病,间充质干细胞的治疗效果有限。针对疾病特定发病机制或者干预靶点进行工程化修饰间充质... 详细信息

背景:间充质干细胞来源广泛、易体外增殖,并可分泌一系列免疫调节因子抑制炎症、促进组织修复再生,广泛应用于各种疾病治疗研究。但是对于多种疾病,间充质干细胞的治疗效果有限。针对疾病特定发病机制或者干预靶点进行工程化修饰间充质干细胞是未来细胞治疗的重要发展方向。目的:白细胞介素10是一种典型的抗炎细胞因子,有助于调节免疫反应并诱导巨噬细胞向抗炎表型极化,该研究探讨白细胞介素10基因工程化修饰人脐带间充质干细胞对炎症性肠病的治疗效果。方法:通过电转染建立稳定过表达人白细胞介素10基因的人脐带间充质干细胞,并基于细胞治疗产品标准筛选出临床级细胞。给予C57BL/6J小鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠盐水溶液建立急性结肠炎模型,分别在造模前1 d(尾静脉途径)与造模后第4天(腹腔途径)注射空质粒转染的人脐带间充质干细胞或过表达人白细胞介素10基因的人脐带间充质干细胞(1×10~6个/只)。在造模后第6天取结肠组织进行苏木精-伊红染色评估组织学变化,免疫荧光染色检测增殖细胞核抗原与CD31的表达。结果与结论:构建的稳定过表达白细胞介素10的工程化人脐带间充质干细胞,满足临床级人脐带间充质干细胞质量标准;人脐带间充质干细胞对小鼠急性结肠炎具有修复效果,过表达白细胞介素10基因的人脐带间充质干细胞的治疗效果更加优效,更显著地抑制急性结肠炎小鼠的体质量下降(P基因人脐带间充质干细胞组结肠组织切片中增殖细胞核抗原阳性细胞与CD31阳性细胞显著多于人脐带间充质干细胞组,表明过表达白细胞介素10基因的人脐带间充质干细胞可能通过显著促进肠组织细胞增殖和血管再生进而促进结肠组织修复。

关键词：白细胞介素10 人脐带间充质干细胞工程化修饰间充质干细胞炎症性肠病再生修复细胞增殖肠再生

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苗草专用型大麦品种鉴定及全基因组关联分析

作物学报 2025年第1期51卷 91-102页

作者：马敏虎常华瑜陈朝燕仁增刘廷辉邢国芳郭刚刚山西农业大学农学院/杂粮种质创新与分子育种山西省重点实验室山西晋中030801 中国农业科学院作物科学研究所/农业农村部粮食作物基因资源评价利用重点实验室/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程北京100081 甘孜藏族自治州农业科学研究所四川甘孜626000

苗草工厂为实现草食动物的饲草周年供应提供了新的解决方案。针对苗草生产的品种需求,本研究对124份中国大麦育成品种(系)与种质开展了苗草转化率鉴定和生物量调控位点发掘。结果显示,大麦种子萌动后,水培条件下苗草生物量呈指数增长趋... 详细信息

苗草工厂为实现草食动物的饲草周年供应提供了新的解决方案。针对苗草生产的品种需求,本研究对124份中国大麦育成品种(系)与种质开展了苗草转化率鉴定和生物量调控位点发掘。结果显示,大麦种子萌动后,水培条件下苗草生物量呈指数增长趋势并在7 d后进入平台期。在植物工厂条件下,鉴定出冬青16、扎青6号等10个高苗草转化率品种且分析发现苗草生物量与籽粒千粒重呈一定的负相关。进一步通过全基因组关联分析,共鉴定到12个苗草生物量相关QTL位点,从中预测出8个调控苗草生物量的候选基因。本研究不仅为大麦苗草工厂化生产筛选出高转化率品种,同时也为苗草专用型大麦品种的遗传改良奠定了基础。

关键词：大麦苗草生物量调控位点全基因组关联分析

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乙型肝炎病毒变异与宿主免疫应答的研究进展

国外医学（微生物学分册） 1994年第4期17卷 148-150页

作者：吴广利滨州医学院传染病学教研室

分子生物学与免疫学的新进展使乙型肝炎病毒(HBV)的研究发生了革命性的变化。由突变HBV所致不同类型的感染是由宿主免疫系统、干扰素(IFN)的反应和病毒基因型之间的复杂相互作用所致。本文从病毒变异与宿主免疫应答两万面综述了近年来HB... 详细信息

分子生物学与免疫学的新进展使乙型肝炎病毒(HBV)的研究发生了革命性的变化。由突变HBV所致不同类型的感染是由宿主免疫系统、干扰素(IFN)的反应和病毒基因型之间的复杂相互作用所致。本文从病毒变异与宿主免疫应答两万面综述了近年来HBV分子生物学研究中的新进展。

关键词：乙型肝炎病毒宿主免疫应答

YBX3通过调节UCP1的表达调控棕色脂肪产热和能量消耗

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山东大学学报（医学版） 2024年第6期62卷 38-47页

作者：王文琴高贤龙巩永凤冯科滨州医学院基础医学院生理教研室山东烟台264003

目的探讨棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)中Y盒蛋白3(Y-box binding protein 3,YBX3)水平对小鼠产热和能量消耗的影响作用机制。方法将小鼠置于4℃环境作为冷刺激方法。用慢病毒侵染法构建过表达YBX3或者抑制YBX3表达的人血管... 详细信息

目的探讨棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)中Y盒蛋白3(Y-box binding protein 3,YBX3)水平对小鼠产热和能量消耗的影响作用机制。方法将小鼠置于4℃环境作为冷刺激方法。用慢病毒侵染法构建过表达YBX3或者抑制YBX3表达的人血管基质组分细胞系。测量细胞的耗氧率用于评估细胞的线粒体功能。向小鼠BAT注射YBX3的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)构建抑制小鼠BAT中YBX3表达的模型。检测小鼠的O_(2)消耗速率、CO_(2)释放速率和能量消耗速率用于评估小鼠能量代谢情况。采用qRT-PCR、Western blotting、免疫荧光染色法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1α,PGC-1α)、解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)和YBX3基因的表达。采用苏木精-伊红法染色检测BAT中脂肪细胞脂滴大小。采用RNA结合蛋白免疫沉淀提取与YBX3特异性结合的mRNA。采用二代测序方法鉴定mRNA。采用双荧光素酶报告基因系统检测YBX3与目的序列结合的情况。结果在寒冷刺激下野生型小鼠BAT中YBX3的表达显著增加(P基因PGC-1α和UCP1的表达(P基因表达被显著抑制(P<0.01),BAT中脂肪细胞脂滴大小显著增加(P<0.05)。与在25℃相比,4℃环境刺激下BAT中YBX3在细胞核中的表达显著增加(P<0.05)。YBX3能够特异性地与PGC-1αmRNA 3′非翻译区特定位点相结合(P<0.05)。YBX3能够特异性地与PGC-1α和UCP1启动子区域相结合(P<0.05)。结论BAT中YBX3能够通过调控PGC-1α和UCP1的表达影响产热和能量代谢。

关键词： Y-盒蛋白3 产热能量消耗棕色脂肪组织解偶联蛋白1

靶向同源盒基因A7的小干扰RNA筛选及功能鉴定

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肿瘤研究与临床 2013年第9期25卷 581-584,587页

作者：尹宝慧贾秀红李建厂李有杰滨州医学院附属医院儿科 256603 滨州医学院生化与分子生物学教研室

目的体外设计、合成及筛选高效沉默同源盒基因A7（HOXA7）表达的小干扰RNA（siRNA），并研究沉默HOXA7对人类肺腺癌细胞株LETP-a-2增殖、凋亡的影响。方法设计、合成三对针对HOXA7基因的siRNA（siRNAl、siRNA2、siRNA3）和一对阴性对照... 详细信息

目的体外设计、合成及筛选高效沉默同源盒基因A7（HOXA7）表达的小干扰RNA（siRNA），并研究沉默HOXA7对人类肺腺癌细胞株LETP-a-2增殖、凋亡的影响。方法设计、合成三对针对HOXA7基因的siRNA（siRNAl、siRNA2、siRNA3）和一对阴性对照（siRNAnc），分别用阳离子脂质体介导转染LETPIa-2细胞。实验分6组：细胞对照组、脂质体对照组、siRNAnc组、siRNAl组、siRNA2组、siRNA3组，反转录聚合酶链反应（***）和Westernblot分别检测各组HOXA7mRNA和蛋白表达情况，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法和流式细胞术分别检测沉默HOXA7后LETP—a-2细胞增殖、凋亡情况。结果siRNA成功转染LETP-a-2细胞，三对siRNA均能有效沉默HOXA7表达，其中以siRNA2沉默HOXA7的效果最佳，在mRNA和蛋白水平沉默率分别为（57．344±4．743）％和（52．219±0．550）％；三对siRNA沉默HOXA7后均能抑制LETP-a-2细胞增殖并促进其凋亡，其中以siRNA2组效果最明显，48h细胞增殖抑制率可达（48．144±4．992）％，凋亡率达（26．613±0．612）％。结论筛选出高效沉默HOXA7的siRNA2能有效抑制LETP—a-2细胞增殖并促进其凋亡，提示HOXA7可能成为肿瘤基因治疗的新靶点。

关键词：基因,同源盒 RNA干扰肺腺癌LETP-a-2细胞

大肠癌组织中PIK3CA和PIK3CB的表达及意义

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临床与实验病理学杂志 2013年第1期29卷 18-22页

作者：燕炜吴淑华李扬扬高向前孟晓滨州医学院病理学教研室滨州256603 滨州医学院附属医院病理科滨州256603

目的观察癌基因PIK3CA、PIK3CB在大肠癌组织中的表达及其相互关系,并分析PIK3CA和PIK3CB的表达对大肠癌患者预后的影响。方法采用免疫组化EnVision法染色并结合图像进行分析,探讨PIK3CA和PIK3CB在大肠癌组织及正常大肠黏膜组织中的表达... 详细信息

目的观察癌基因PIK3CA、PIK3CB在大肠癌组织中的表达及其相互关系,并分析PIK3CA和PIK3CB的表达对大肠癌患者预后的影响。方法采用免疫组化EnVision法染色并结合图像进行分析,探讨PIK3CA和PIK3CB在大肠癌组织及正常大肠黏膜组织中的表达;应用RT-PCR和Western blot技术分别检测PIK3CA mRNA和PIK3CB mRNA及其相应蛋白的表达;回访125例大肠癌术后患者,生存分析用Kaplan-Meier法,生存曲线用Log-Rank检验。结果在300例大肠癌蜡块组织及正常黏膜组织中,PIK3CA表达的平均光密度值分别为:10.087 9±2.148 7、6.937 6±2.065 3,PIK3CB表达的平均光密度值分别为:15.870 6±2.877 7、8.693 2±2.442 4。PIK3CA和PIK3CB在大肠癌组织中的表达具有相关性(r=0.68,P<0.05);RT-PCR检测结果显示,与正常大肠黏膜组织相比,大肠癌组织中PIK3CA mRNA和PIK3CB mRNA的表达水平均明显升高,且二者表达结果呈正相关(r=0.74,P<0.05);Western blot法检测发现PIK3CA和PIK3CB蛋白表达水平同样升高,二者表达结果呈正相关(r=0.71,P<0.05);生存分析显示PIK3CA和PIK3CB高表达与患者死亡风险具有明显相关性。结论 PIK3CA和PIK3CB在大肠癌组织中高表达,与正常黏膜组织中的表达相比差异较明显,且PIK3CA和PIK3CB在大肠癌的发生、发展中具有协同作用,PIK3CA、PIK3CB高表达亦是大肠癌患者预后相关的因素之一。检测大肠癌患者PIK3CA和PIK3CB的表达对于控制大肠癌的进展、确定大肠癌的靶点治疗及判断预后具有重要意义。

关键词：大肠肿瘤 PIK3CA PIK3CB 免疫组织化学

杂交瘤细胞在CelliGen培养器中大量连续培养

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生物工程学报 1992年第3期8卷 243-248页

作者：陈贻锴福建医学院基因工程研究室

鼠-鼠杂交瘤细胞DA4-4(ATCC,HB57)分泌抗人IgM的单克隆抗体IgGl,该细胞被培养在1.5L CelliGen-中空纤维柱连续灌注系统中,CelliGen细胞培养器显示很低的机械剪切力,提高搅拌速度到150rpm增加了氧的传递,但不对杂交瘤细胞造成损害。在连... 详细信息

鼠-鼠杂交瘤细胞DA4-4(ATCC,HB57)分泌抗人IgM的单克隆抗体IgGl,该细胞被培养在1.5L CelliGen-中空纤维柱连续灌注系统中,CelliGen细胞培养器显示很低的机械剪切力,提高搅拌速度到150rpm增加了氧的传递,但不对杂交瘤细胞造成损害。在连续培养时,DA4-4细胞密度可达20×10~6/ml以上,单克隆抗体浓度高达4.75mg/ml,该培养系统每日可收获抗体1.0g左右。

关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体细胞培养

家兔发热过程中单核细胞热休克蛋白70表达与白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-αmRNA表达的关系

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中国现代医学杂志 2014年第3期24卷 16-19页

作者：马中女杨丽娟蒋淑君刁汇玲郭莉滨州医学院生理教研室山东烟台264003

目的探讨HSP70参与体温调控的作用及其可能机制。方法复制家兔LPS发热模型,RT-PCR和Western blot检测在发热过程中单核细胞IL-1β、TNF-αmRNA与HSP 70的表达。结果注射LPS0.5μg/kg后家兔体温明显升高,出现两个体温高峰;由LPS引起的发... 详细信息

目的探讨HSP70参与体温调控的作用及其可能机制。方法复制家兔LPS发热模型,RT-PCR和Western blot检测在发热过程中单核细胞IL-1β、TNF-αmRNA与HSP 70的表达。结果注射LPS0.5μg/kg后家兔体温明显升高,出现两个体温高峰;由LPS引起的发热过程中单核细胞TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平分别在60 min和180 min达高峰,400 min以内降至基础水平;单核细胞HSP70的含量在注射LPS后160 min时开始升高,实验结束时达最高值;LPS引起发热的过程中单核细胞HSP70含量与单核细胞TNF-α、IL-1βmRNA的表达量之间呈负相关关系。结论 LPS致发热时,HSP70可能通过抑制TNF-α、IL-1β等内生致热原基因的表达而限制体温升高。

关键词：热休克蛋白70 白细胞介素1-β 肿瘤坏死因子α 发热热限