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携载microRNA-140外泌体/海藻酸钠/胶原水凝胶修复关节软骨损伤

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中国组织工程研究 2025年第16期29卷 3326-3334页

作者：陈明伟余雯莉夏苏杭陈宾陈文忠李锋侦周宇司文腾郑州市骨科医院(河南大学附属郑州市骨科医院)关节病科Ⅰ 河南省郑州市450000 郑州大学第一附属医院静脉用药调配中心河南省郑州市450000

背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microR... 详细信息

背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microRNA-140参与骨关节炎的相关机制。方法:利用慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞使其过表达microRNA-140,随后分离提取外泌体,得到过表达microRNA-140的外泌体。制备负载外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。采用随机数字表法将32只SD大鼠随机分为4组,每组8只:正常对照组不进行任何处理,骨关节炎组、未转染外泌体组、转染外泌体组均通过膝关节腔内注射碘乙酸钠的方式建立骨关节炎模型,造模2周后,骨关节炎组膝关节腔内注射PBS,未转染外泌体组、转染外泌体组膝关节腔内分别注射负载未过表达microRNA-140与过表达microRNA-140外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。造模后第6周,检测大鼠机械刺激缩足反应阈值、滑膜液炎症因子浓度、软骨相关基因表达、膝关节软骨组织的组织学变化与焦亡相关蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组比较,骨关节炎组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均减少(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平增加(P<0.05),基质金属蛋白酶13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)mRNA表达增加(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18蛋白表达均增加(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1免疫荧光强度增强(P<0.05),软骨组织损伤严重。②与骨关节炎组比较,两外泌体组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均增加(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平减少(P<0.05),基质金属蛋白酶13 mRNA表达减少(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18的蛋白表达均减少(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1的免疫荧光强度减弱(P<0.05),软骨组织损伤减轻(P<0.05),并且转染外泌体组的作用更强。③结果表明,microRNA-140可通过抑制炎症、维持软骨稳态、抑制软骨焦亡来减轻骨关节炎大鼠的疼痛反应,降低软骨损伤,发挥骨关节炎治疗作用。

关键词：骨关节炎软骨损伤外泌体 microRNA-140 海藻酸钠/胶原水凝胶焦亡

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微重力导致骨质疏松的机制

中国组织工程研究 2025年第10期29卷 2132-2140页

作者：向德剑梁晓远王胜红陈长顺田聪闫振兴耿彬夏亚一兰州大学第二临床医学院甘肃省兰州市730000 兰州大学第二医院骨科甘肃省兰州市730000 甘肃省骨科临床研究中心甘肃省兰州市730000 甘肃省智能骨科行业技术中心甘肃省兰州市730000

背景:在微重力环境中骨吸收和骨形成的失衡,导致航天员出现严重的骨质流失。现有研究表明,微重力环境下的骨质流失是由多种细胞、组织和系统共同作用的结果。目的:综述微重力对不同的细胞、组织或系统产生不同的生物学效应,总结微重力... 详细信息

背景:在微重力环境中骨吸收和骨形成的失衡,导致航天员出现严重的骨质流失。现有研究表明,微重力环境下的骨质流失是由多种细胞、组织和系统共同作用的结果。目的:综述微重力对不同的细胞、组织或系统产生不同的生物学效应,总结微重力导致骨质疏松发生的机制。方法:在Pub Med、Web of Science和Cochrane图书馆数据库检索2000-2023年的相关文献,纳入标准为与微重力导致骨质疏松相关的组织工程研究和基础研究的所有文章,最终对85篇文献进行综述。结果与结论:(1)在微重力环境下,骨髓间充质干细胞更倾向于向成脂细胞分化,减少向成骨细胞分化,而微重力环境中的造血干细胞则更倾向于分化为破骨细胞,减少向红系分化;同时,微重力抑制成骨细胞增殖和分化、促进成骨细胞凋亡、改变细胞形态及降低成骨细胞矿化能力,显著增加破骨细胞数量和活性并且阻碍成骨细胞向骨细胞分化,促进骨细胞的凋亡。(2)在微重力环境下,人体会出现骨骼肌萎缩、微血管重塑、骨微循环障碍及内分泌紊乱等组织或系统的变化,这些变化会导致骨骼微环境下机械应力卸载,血液灌注不足以及钙循环紊乱等,对骨质疏松的发生产生了重要的影响。(3)目前,微重力导致骨质疏松的机制较为复杂,通过更深入的研究这些生理机制对于确保航天员在长期太空任务中的健康至关重要,并为预防和治疗骨质疏松症提供了理论依据。

关键词：微重力成骨细胞骨形成破骨细胞骨吸收骨质流失机械卸载骨稳态增殖分化细胞凋亡

合并糖尿病眼底病变患者白内障术后的黄斑水肿和视力观察

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国际眼科杂志 2012年第1期12卷 109-111页

作者：蒋玲月陈朝阳中国湖南省永州市中心医院眼科 425000

目的:探讨合并糖尿病眼底病变患者白内障术后与正常眼底的患者白内障术后的黄斑水肿和视力恢复情况。方法:选取63例63眼白内障患者,其中33例伴有轻至中度糖尿病眼底改变,为糖尿病组;另外30例正常眼底为对照组。相同的术式、手术医生及... 详细信息

目的:探讨合并糖尿病眼底病变患者白内障术后与正常眼底的患者白内障术后的黄斑水肿和视力恢复情况。方法:选取63例63眼白内障患者,其中33例伴有轻至中度糖尿病眼底改变,为糖尿病组;另外30例正常眼底为对照组。相同的术式、手术医生及术后处理。于术前、术后1,6wk及6mo检查视力及眼底情况,于术前、术后6wk行荧光素眼底血管造影检查,观察两组术后黄斑水肿及视力恢复情况。结果:糖尿病患者32例及对照组29例患者完成检查并随访。术后6wk,糖尿病组有24例(75%)出现眼底渗漏,而对照组只有6例(21%);糖尿病组有5例(16%)出现临床型黄斑囊样水肿(CME),对照组有2例(7%)出现临床型CME;术后6mo,两组视力水平差异无显著性,黄斑水肿恢复。结论:白内障术后不管是对正常眼底还是对伴轻中度糖尿病视网膜病变都可发生CME,但视力恢复无明显差异,发生CME予随诊,一般不需处理,多能自行恢复。

关键词：黄斑囊样水肿白内障糖尿病眼底病变荧光素眼底血管造影

压应力激活SOST/Wnt/β-catenin 通路诱导软骨终板细胞退变

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中国组织工程研究 2025年第5期29卷 951-957页

作者：项攀车艳军罗宗平苏州大学附属第一医院骨科研究所江苏省苏州市215006 南京医科大学附属苏州医院骨科与运动医学中心江苏省苏州市215000

背景:在许多可以导致椎间盘退变的因素中(衰老、营养匮乏、机械因素等),力学负荷被认为是极其重要的因素,但其机制尚不清楚。目的:探讨硬骨素和Wnt/β-catenin信号通路在压应力诱导终板软骨退变中的作用。方法:提取4周龄雄性SD大鼠软骨... 详细信息

背景:在许多可以导致椎间盘退变的因素中(衰老、营养匮乏、机械因素等),力学负荷被认为是极其重要的因素,但其机制尚不清楚。目的:探讨硬骨素和Wnt/β-catenin信号通路在压应力诱导终板软骨退变中的作用。方法:提取4周龄雄性SD大鼠软骨终板细胞,体外利用力学加载仪器对终板软骨细胞施加压应力,于压缩细胞1,3,5,7 d,采用CCK-8法测定细胞活力;Western blot、RT-qPCR及细胞免疫荧光等检查终板软骨细胞内软骨标记物(聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原)、钙化相关因子(Runx2、骨钙素)、细胞外基质降解酶及信号通路基因(硬骨素、β-catenin)等表达。结果与结论:①压应力作用下,终板软骨细胞活力会随着压应力时间、强度增加而降低;②终板软骨细胞的软骨标记物(聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原)表达下降,而钙化相关因子(Runx2、骨钙素)表达上升;③压应力能促进终板软骨细胞的细胞外基质降解,基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13表达量增加;④细胞内Wnt/β-catenin信号通路表达出现异常,其特异性抑制因子硬骨素伴随着β-catenin的异常积累而表达下降。结果说明:在压应力作用下,终板软骨细胞内硬骨素的表达下降,导致Wnt/β-catenin信号通路激活,促进软骨终板的钙化、退变与细胞外基质的降解,进而促进椎间盘退变。

关键词：软骨终板软骨细胞 SOST Wnt/β-catenin 压应力椎间盘退变

circRAD18/miR-516b/PDK1轴调节葡萄糖代谢重编程与结直肠癌增殖的关系

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中国普通外科杂志 2023年第10期32卷 1522-1530页

作者：李威唐云云彭娟蒋训归湖南省永州市中心医院肛肠疝外科湖南永州425006 永州职业技术学院公共基础学部湖南永州425100

背景与目的:环状RNA circRAD18被发现在乳腺癌和甲状腺癌的进展中起了促进作用,但其在其他恶性肿瘤的表达及作用尚未被充分揭示。笔者前期通过生物信息学软件预测circRAD18可与miR-516b互补结合,而葡萄糖代谢关键调节酶丙酮酸脱氢酶激酶... 详细信息

背景与目的:环状RNA circRAD18被发现在乳腺癌和甲状腺癌的进展中起了促进作用,但其在其他恶性肿瘤的表达及作用尚未被充分揭示。笔者前期通过生物信息学软件预测circRAD18可与miR-516b互补结合,而葡萄糖代谢关键调节酶丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)可能是miR-516b的靶基因。因此,本研究初步探讨circRAD18在结直肠癌细胞中的表达及作用,及其对靶miRNA及下游靶基因的调控关系。方法:用qRT-PCR检测不同结直肠癌细胞系(SW480、SW620、HT-29)及正常结直肠上皮细胞(NCM460)中circRAD18的表达;用si-circRAD18沉默结直肠癌细胞中circRAD18的表达后,分别用CCK-8实验和相应的试剂盒检测细胞的增殖情况以及葡萄糖摄取量和乳酸产生量。用双荧光素酶报告基因实验与RNA免疫沉淀(RIP)实验分析circRAD18、miR-516b及PDK1之间的结合关系;最后,采用过表达/敲低实验进一步验证三者之间的关系。结果:与正常结直肠上皮细胞比较,circRAD18在各结直肠癌细胞系中的表达均明显上调(均P<0.05);转染si-circRAD18后,结直肠癌细胞增殖能力、葡萄糖摄取及乳酸产生量均明显降低(均P<0.05);双荧光素酶报告基因实验与RIP实验证实circRAD18可与miR-516b结合,而PDK1是miR-516b的下游靶基因。miR-516b模拟物及si-circRAD18的转染可明显抑制细胞葡萄糖摄取、乳酸产生及PDK1蛋白表达,且补充PDK1可逆转该抑制作用(均P<0.05)。结论:circRAD18在结直肠癌细胞中表达上调,并与结直肠癌细胞增殖能力的增强密切相关,作用机制可能与circRAD18通过海绵样吸附miR-516b后,上调PDK1表达,从而导致结直肠癌细胞葡萄糖代谢重编程有关。

关键词：结直肠肿瘤 RNA,环状代谢细胞增殖

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16层螺旋CT肺部低剂量扫描的应用

广东医学 2012年第2期33卷 226-227页

作者：陈世林杨季春李磊龚铮鸣黄佳玲李剑湖南省永州市中心医院CT室 425000

目的探讨16层螺旋CT肺部低剂量扫描对图像质量的影响,探索16层螺旋CT肺部低剂量的最佳扫描参数。方法对110例健康体检者完成常规检查扫描后,再选取相同层面分别作40、30、20、15 mAs扫描。结果图像质量评价结果,115、40、30、20、15 mA... 详细信息

目的探讨16层螺旋CT肺部低剂量扫描对图像质量的影响,探索16层螺旋CT肺部低剂量的最佳扫描参数。方法对110例健康体检者完成常规检查扫描后,再选取相同层面分别作40、30、20、15 mAs扫描。结果图像质量评价结果,115、40、30、20、15 mAs正常图像质量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在16层螺旋CT肺部低剂量扫描中,采用15 mAs扫描,可以在保证图像质量同时有效降低放射剂量,保护患者。

关键词：肺低剂量体层摄影术 X线计算机

TGF-β_3基因转染诱导滇南小耳猪BMSCs向软骨分化的初步研究

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中国修复重建外科杂志 2014年第2期28卷 149-154页

作者：王慧建李彦林陈建明王鑫赵沣凯曹树海昆明医科大学第一附属医院运动医学科昆明650032 湖南省永州市中心医院骨科

目的观察TGF-β3基因转染滇南小耳猪BMSCs后目的基因的表达和向软骨细胞分化的作用。方法以血清5型重组腺病毒（recombinantadenovirus5，rAd5）构建系统为基因载体，包装为重组腺病毒***-β3，行双酶切及PCR鉴定。采集2月龄滇南小耳猪... 详细信息

目的观察TGF-β3基因转染滇南小耳猪BMSCs后目的基因的表达和向软骨细胞分化的作用。方法以血清5型重组腺病毒（recombinantadenovirus5，rAd5）构建系统为基因载体，包装为重组腺病毒***-β3，行双酶切及PCR鉴定。采集2月龄滇南小耳猪（体重12～15kg）骨髓分离培养制备BMSCs，取第2代细胞用于实验。将实验分为3组，实验组和对照组分别用rAd5-TGF-β3人腺病毒阴性空病毒载体转染BMSCs，以未转染的BMSCs为空白对照组。流式细胞仪检测转染效率，免疫荧光染色、Westernblot检测各组TGF-β3蛋白表达情况；培养后各时间点倒置相差显微镜观察细胞形态变化，Westernblot检测各组II型胶原蛋白表达情况。结果rAd5-TGF．瞰重组腺病毒成功构建并转染BMSCs，在细胞内表达并迅速扩增，免疫荧光显微镜下可观察到强绿色荧光。流式细胞仪检测示转染72h时病毒达最佳转染效果（转染效率为84．86％）。免疫荧光染色示，***-β3转染BMSCs72h，细胞质内有明显TGF-β3蛋白表达；转染后7、21dWesternblot检测示，实验组在相对分子质量为30×10^3处有TGF-β3阳性条带，而对照组和空白对照组均呈阴性。转染后体外培养，倒置相差显微镜下示实验组向软骨细胞分化明显。培养21d时Westernblot检测示，实验组在相对分子质量为130×10^3处有II型胶原阳性条带，对照组和空白对照组均呈阴性。结论重组腺病毒***-β3可成功转染BMSCs,TGF-β3蛋白可稳定表达，并促使BMSCs向软骨细胞方向分化，为软骨缺损修复的局部基因治疗奠定了实验基础。

关键词：软骨组织工程TGF—β3 BMSCs 软骨分化基因转染滇南小耳猪

胃肠道神经内分泌癌的临床病理特征和诊治分析

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胃肠病学 2012年第9期17卷 564-566页

作者：桂双元湖南省永州市中心医院北院胃肠外科 425006

背景:胃肠道神经内分泌癌(NEC)是一种相对罕见的胃肠道恶性肿瘤,临床表现复杂,早期极易误诊。目的:分析胃肠道NEC的临床病理特征、诊治方法和预后。方法:纳入2001年1月～2010年12月永州市中心医院北院收治的胃肠道NEC患者,对入组患者的... 详细信息

背景:胃肠道神经内分泌癌(NEC)是一种相对罕见的胃肠道恶性肿瘤,临床表现复杂,早期极易误诊。目的:分析胃肠道NEC的临床病理特征、诊治方法和预后。方法:纳入2001年1月～2010年12月永州市中心医院北院收治的胃肠道NEC患者,对入组患者的临床和病理表现、诊治方法、预后进行回顾性分析。结果:共15例患者纳入研究,无一例患者有类癌综合征表现,组织病理学示溃疡型6例,结节型9例。神经元特异性烯醇化酶(NSE)、嗜铬粒蛋白A(CGA)、突触蛋白(SYN)阳性率分别为86.7%、53.3%、80.0%。患者术前误诊率达86.7%。所有患者均接受手术治疗,其中根治性全胃切除术3例,根治性远端胃大部切除术1例,小肠部分切除术4例,根治性右半结肠切除术3例,经腹直肠癌切除术2例,姑息性切除术2例。本组患者5年生存率为42.8%,中位生存期为53.7个月。肿瘤浸润深度超过肌层者的生存期显著低于浸润深度未超过肌层者(P<0.01);淋巴结转移者的生存期显著低于无淋巴结转移者(P<0.01)。结论:胃肠道NEC的临床表现无特异性,确诊需依靠组织病理学检查。手术是治疗胃肠道NEC的有效方法。

关键词：神经内分泌癌胃肠道诊断外科手术预后

早期清创闭合负压引流二期修复治疗颈椎前路术后并发食道瘘的疗效观察

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中国脊柱脊髓杂志 2012年第11期22卷 994-998页

作者：张保亮唐朝阳肖东民姜德红唐海军高杨郭威南华大学附属永州市中心医院脊柱外科湖南省永州市425000

目的：观察早期清创闭合负压引流二期修复治疗颈椎前路手术后并发食道瘘的效果。方法：2006年2月-2012年2月我院收治颈椎前路手术后并发食道瘘患者5例,其中我院行颈椎前路手术728例中术后并发食道瘘3例,外院转入2例。4例术后5-9d出现食... 详细信息

目的：观察早期清创闭合负压引流二期修复治疗颈椎前路手术后并发食道瘘的效果。方法：2006年2月-2012年2月我院收治颈椎前路手术后并发食道瘘患者5例,其中我院行颈椎前路手术728例中术后并发食道瘘3例,外院转入2例。4例术后5-9d出现食道瘘,1例术后46d出现。经食道镜确诊食道瘘后,立即放置胃管,改鼻饲营养支持,静脉使用广谱抗菌素,沿原手术切口进入,拆除所有缝线,行清创术。1例迟发性食道瘘患者术中发现植骨颗粒已经部分感染、溶解,取出内固定和植骨块,术后行Halo外固定架固定;其余4例内固定均予保留。彻底清创后,将负压引流泡沫修剪成合适大小楔形放置于切口内,缝合皮肤固定泡沫,用生物贴膜覆盖泡沫贴紧于切口周围皮肤上以保持切口内密闭状态,接负压引流持续冲洗10-12d后,拆除密闭负压引流装置,常规换药2-3d后行二期食道修补术,食道瘘口均使用可吸收线缝合;迟发性食道瘘者瘘口较大术中加用生物蛋白胶覆盖已修复的瘘口,并再次行自体髂骨植入,使用Halo外固定架固定。术后常规放置切口引流管2-3d,9-12d切口拆线。结果：4例患者食道修补术后颈部切口愈合良好;随访6个月-6年,原颈部切口瘢痕愈合,无吞咽困难与颈部疼痛,无迟发性感染出现。1例迟发性食道瘘患者食道修补术拆线后切口仍有少许淡黄色透明分泌物,常规换药后1周瘢痕愈合,出院后1个月在家中死亡,死因不明,死亡时颈部切口愈合良好。结论：早期清创闭合负压引流二期修复治疗颈椎前路术后并发食道瘘有效。

关键词：食道瘘颈椎前路手术清创术闭合负压引流术食道修补术效果