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Trim9调控视网膜Müller细胞向神经节细胞定向分化

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中南大学学报（医学版） 2023年第10期48卷 1561-1571页

作者：李金香曾琦湖南师范大学第一附属医院(湖南省人民医院)眼科长沙410005

目的:青光眼是不可逆性致盲性眼病的主要病因,目前尚无有效疗法逆转青光眼的视觉系统损害。最近发现干细胞疗法有望使受损的视网膜神经元修复和再生,但是在干细胞来源方面仍然存在较大挑战。本研究探寻一种将视网膜Müller细胞去分化为... 详细信息

目的:青光眼是不可逆性致盲性眼病的主要病因,目前尚无有效疗法逆转青光眼的视觉系统损害。最近发现干细胞疗法有望使受损的视网膜神经元修复和再生,但是在干细胞来源方面仍然存在较大挑战。本研究探寻一种将视网膜Müller细胞去分化为视网膜干细胞,进一步高效定向分化为视网膜神经节细胞的方案,以期为青光眼的干细胞治疗提供新的细胞获取途径。方法:用表皮细胞生长因子和成纤维细胞生长因子2诱导大鼠视网膜Müller细胞去分化为视网膜干细胞。构建Trim9过表达慢病毒(PGC-FU-Trim9-GFP),感染由Müller细胞诱导去分化而来的视网膜干细胞,通过荧光显微镜观察和流式细胞术评估病毒感染效率。用视黄酸和脑源性神经营养因子处理过表达或未过表达Trim9的视网膜干细胞以诱导其分化为神经元和神经胶质细胞。采用免疫荧光、PCR/real-time RT-PCR和蛋白质印迹法检测各细胞标志物(GLAST、GS、rhodopsin、PKC、HPC-1、Calbindin、Thy1.1、Brn-3b、Nestin、Pax6)的表达。结果:表皮细胞生长因子和成纤维细胞生长因子2处理后的大鼠视网膜Müller细胞表达视网膜干细胞标志物Nestin和Pax6。视黄酸和脑源性神经营养因子处理后的过表达Trim9的视网膜干细胞Thy1.1阳性细胞明显增多,表明其定向分化为视网膜神经节细胞。结论:本研究成功将大鼠视网膜Müller细胞去分化为视网膜干细胞,并发现Trim9可有效促进由视网膜Müller细胞去分化而来的视网膜干细胞定向分化为视网膜神经节细胞。

关键词：青光眼 Müller细胞 Trim9 视网膜干细胞视网膜神经节细胞

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足月女婴生后呼吸困难机械通气不能脱机

中国当代儿科杂志 2020年第8期22卷 897-902页

作者：伍紫琦徐俊张爱民胡杏黄芙蓉湖南师范大学附属第一医院/湖南省人民医院新生儿科湖南长沙410005

患儿,女,43 d,生后气促发绀、呻吟,呼吸困难43 d。体检可见口唇发绀,明显三凹征,多次肺部影像学提示双肺弥漫性磨玻璃影,予以抗感染、持续机械通气治疗,症状无明显改善。基因检测证实患儿存在ABCA3基因复合杂合突变c.1890C>A(***630Ter)... 详细信息

患儿,女,43 d,生后气促发绀、呻吟,呼吸困难43 d。体检可见口唇发绀,明显三凹征,多次肺部影像学提示双肺弥漫性磨玻璃影,予以抗感染、持续机械通气治疗,症状无明显改善。基因检测证实患儿存在ABCA3基因复合杂合突变c.1890C>A(***630Ter)+c.3208G>A(***1070Thr),前者来自其父亲,后者来自其母亲。肺组织病理检查符合肺间质疾病。该患儿最终确诊为ABCA3基因突变所致婴儿弥漫性肺间质疾病。当足月新生儿出生后出现气促、呼吸困难等表现,肺部影像学提示弥漫性磨玻璃样变,常规治疗效果欠佳,呼吸机参数不能下调,需高度考虑先天性肺泡表面活性物质代谢缺陷。尽早完善基因检测,可为早期干预、预后判断及遗传咨询提供依据。

关键词：婴儿弥漫性肺间质疾病 ABCA3基因突变呼吸衰竭足月新生儿

川崎病患儿急性期外周血单个核细胞NLRP3炎症小体的表达及其临床意义

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中国当代儿科杂志 2019年第10期21卷 992-997页

作者：刘丽萍袁勇华何学华陈敏彭丹霞徐伟夏晓辉曹友德王胜朱潜力湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院儿童心血管科湖南长沙410005 湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院临床研究所湖南长沙410005 湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院超声科湖南长沙410005 湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院医学检验科湖南长沙410005

目的探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体与川崎病(KD)患儿急性期炎症反应以及冠状动脉损伤的关系。方法前瞻性纳入2017年1~10月住院的KD患儿42例为研究对象,其中伴冠状动脉损伤(CAL)9例,非冠状动脉损伤(NCAL)33例。另外选取性别、年龄... 详细信息

目的探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体与川崎病(KD)患儿急性期炎症反应以及冠状动脉损伤的关系。方法前瞻性纳入2017年1~10月住院的KD患儿42例为研究对象,其中伴冠状动脉损伤(CAL)9例,非冠状动脉损伤(NCAL)33例。另外选取性别、年龄相匹配的15例肺炎发热患儿作为发热对照组,15例健康儿童作为健康对照组。采用实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞NLPR3炎症小体(NLRP3、ASC和caspase-1)mRNA的表达。采用Spearman秩相关分析法评估NLRP3 mRNA表达与血清C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、降钙素原、白蛋白及前白蛋白水平的相关性。结果 KD组急性期外周血NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA表达明显高于发热对照组及健康对照组(P < 0.05);CAL组患儿NLRP3 mRNA表达明显高于NCAL组(P < 0.05)。KD患儿急性期NLRP3 mRNA表达与CRP、IL-6、IL-1β、前白蛋白水平存在相关性(rs分别为0.449、0.376、0.427、-0.416,均P < 0.05)。结论 NLRP3炎症小体可能参与了KD急性期炎症反应及CAL的发生。

关键词：川崎病 Nod样受体蛋白炎症小体冠状动脉损伤儿童

血栓弹力图评估慢性肾脏病患者凝血功能及其高凝状态的危险因素

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南方医科大学学报 2020年第4期40卷 556-561页

作者：吴思弦袁浩周毅峰龙贞亦彭亚梦彭芳湖南师范大学附属第一医院//湖南省人民医院检验科湖南长沙410005 湖南师范大学附属第一医院//湖南省人民医院手术室湖南长沙410005

目的应用血栓弹力图分析慢性肾脏病患者凝血变化特征及影响CKD患者高凝状态的危险因素。方法选取2018年8月~2019年5月本院收治的慢性肾脏病患者128例作为观察组,在本院体检的未患肾脏疾病的21名健康成年人作为对照组。比较不同阶段患者... 详细信息

目的应用血栓弹力图分析慢性肾脏病患者凝血变化特征及影响CKD患者高凝状态的危险因素。方法选取2018年8月~2019年5月本院收治的慢性肾脏病患者128例作为观察组,在本院体检的未患肾脏疾病的21名健康成年人作为对照组。比较不同阶段患者与对照组的常规凝血试验和血栓弹力图指标。根据血栓弹力图最大振幅(MA)将慢性肾脏病患者分为高凝组(MA>68 mm,n=66)和非高凝组(MA≤68 mm,n=62),比较两组间实验室指标,分析慢性肾脏病患者高凝状态影响因素。结果与对照组相比,慢性肾脏病不同阶段患者纤维蛋白原、D-二聚体水平明显增高(P<0.05),慢性肾脏病3~4期、慢性肾脏病5期未透析及慢性肾脏病5期血液透析患者反应时间、K-时间降低(P<0.05),而MA、α-角和凝血指数均升高(P<0.05)。高凝组与非高凝组在估算的肾小球滤过率、糖尿病比例、脑卒中史、中性粒细胞百分比、中性粒细胞淋巴细胞比值、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、血清肌酐、血清胱抑素-C、血清白蛋白、脂蛋白等方面差异均有统计学意义(P<0.05)。其中肾小球滤过率、血小板计数和血红蛋白水平是慢性肾脏病患者高凝状态的独立影响因素(P<0.05)。结论随着病程的进展,慢性肾脏病患者的高凝状态逐渐加剧。肾小球滤过率、血小板计数和血红蛋白是慢性肾脏病患者高凝状态的危险因素。

关键词：慢性肾脏病高凝状态血栓弹力图最大振幅危险因素

miR-889-3p调控vimentin乙酰化对妊娠糖尿病胎盘滋养层细胞侵袭功能的影响

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中国病理生理杂志 2022年第9期38卷 1625-1633页

作者：杨伟辉贺鑫丁丹妮湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)产科湖南长沙410000

目的:探讨微小RNA-889-3p(miR-889-3p)调节妊娠糖尿病(GDM)胎盘滋养层细胞侵袭功能的作用机制。方法:将2020年1~12月的30名GDM产妇和30名正常葡萄糖耐量产妇选入本研究。通过qRT-PCR检测miR-889-3p在产妇胎盘、人肿瘤细胞系、人滋养层HT... 详细信息

目的:探讨微小RNA-889-3p(miR-889-3p)调节妊娠糖尿病(GDM)胎盘滋养层细胞侵袭功能的作用机制。方法:将2020年1~12月的30名GDM产妇和30名正常葡萄糖耐量产妇选入本研究。通过qRT-PCR检测miR-889-3p在产妇胎盘、人肿瘤细胞系、人滋养层HTR-8/SVneo细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达水平。进行细胞培养、细胞转染、MTT测定、EdU检测、伤口划痕实验和Transwell实验,以确定miR-889-3p的沉默和过表达对HTR-8/SVneo细胞生物功能的影响。通过生物信息学分析确定miR-889-3p与波形蛋白(vimentin)的结合关系。分别使用双萤光素酶报告基因检测系统和蛋白质印迹分析miR-889-3p过表达对双萤光素酶活性和vimentin乙酰化的影响。结果:HTR-8/SVneo细胞的相对miR-889-3p表达水平高于其他肿瘤细胞和HUVEC,GDM产妇胎盘的相对miR-889-3p表达水平低于正常葡萄糖耐量产妇胎盘(P<0.05)。miR-889-3p过表达抑制HTR-8/SVneo细胞生长、迁移和侵袭(P<0.05),而miR-889-3p敲减促进细胞生长、迁移和侵袭(P<0.05)。通过生物信息学分析确定vimentin是miR-889-3p的直接靶点。在转染vimentin-WT的HTR-8/SVneo细胞中,miR-889-3p模拟物的施用抑制了萤光素酶活性(P<0.05),并显著提高vimentin乙酰化水平(P<0.05)。上调vimentin部分拮抗miR-889-3p过表达对细胞生长、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05),而下调vimentin减弱了由miR-889-3p敲减诱导的细胞生长、迁移和侵袭增强(P<0.05)。结论:胎盘组织中miR-889-3p的下调参与GDM病理过程。miR-889-3p通过促进vimentin乙酰化来减弱滋养层细胞的侵袭功能。

关键词：微小RNA-889-3p 波形蛋白妊娠糖尿病胎盘细胞侵袭

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门静脉高压出血急救流程专家共识(2022)

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中华内科杂志 2022年第5期61卷 496-506页

作者：中华医学会急诊分会中国医师协会介入医师分会中华医学会放射学分会介入学组中国研究型医院学会出血专业委员会中国出血中心联盟向华不详湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院) 长沙410005

本共识提出门静脉高压出血急诊救治流程,阐述门静脉高压出血的急救、内科治疗、介入治疗和外科治疗。对以上诊治手段治疗门静脉高压出血的适应证和禁忌证、操作规范及注意事项和并发症防治进行归纳说明,优化急救流程。

关键词：共识门静脉高压出血急救流程

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肝内胆管细胞癌多学科诊疗策略及发展现状

中国普通外科杂志 2023年第2期32卷 269-278页

作者：刘苏来刘培宋颖辉余张涛彭创湖南省人民医院/湖南师范大学第一附属医院肝胆外科湖南长沙410005

肝内胆管细胞癌(ICC)起源于二级及以上胆管上皮细胞,是一种具有高度侵袭性的恶性肿瘤,其早期常无特异性的临床表现,诊断时常处于晚期,失去根治性手术切除的机会。随着ICC多学科诊疗模式的提出和广泛应用,其疾病控制效果和患者的生存期... 详细信息

肝内胆管细胞癌(ICC)起源于二级及以上胆管上皮细胞,是一种具有高度侵袭性的恶性肿瘤,其早期常无特异性的临床表现,诊断时常处于晚期,失去根治性手术切除的机会。随着ICC多学科诊疗模式的提出和广泛应用,其疾病控制效果和患者的生存期得到了提升,但是其预后仍差。在目前以外科手术为核心的多学科诊疗模式中,应该关注患者的中长期获益,并将其作为最终目标贯穿治疗全过程。鉴于ICC治疗选择的多样性及疾病复杂性,任何治疗策略均建议通过多学科讨论得出个体化的诊疗方案,并建议在高度专业化的肝胆胰中心进行诊疗或者由其指导进行诊疗。此文中,笔者重点阐述ICC的多学科诊疗的发展现状及策略。

关键词：胆管肿瘤胆管,肝内肝切除术多学科合作综述

峰流速仪在测定哮喘患儿呼气峰流速中的临床价值

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中国当代儿科杂志 2011年第4期13卷 348-350页

作者：王娟梅李云郭纯方亦兵湖南师范大学第一附属医院湖南省人民医院儿科湖南长沙410005

支气管哮喘是一种常见的慢性气道可逆性阻塞性疾病,肺功能检查和峰流速仪监测是哮喘管理中重要的监测方法,在《全球哮喘防治创议》和《儿童支气管哮喘诊断及防治指南》中都占重要位置。

关键词：哮喘患儿峰流速仪呼气峰流速临床价值《全球哮喘防治创议》儿童支气管哮喘测定监测方法

环状RNA KIF4A在结直肠癌中表达与功能及其作用机制

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中国普通外科杂志 2023年第4期32卷 538-547页

作者：吴明浩夏绿洲张渝湖南省人民医院/湖南师范大学第一附属医院消化内科湖南长沙410005

背景与目的:环状RNA KIF4A(circKIF4A)被发现在多种肿瘤的恶性进展中起到重要作用,然而,circKIF4A在结直肠癌中的生物学作用尚未见报道。因此,本研究探讨circKIF4A对结直肠癌生物学行为的影响及机制。方法:用qRT-PCR检测不同结直肠癌细... 详细信息

背景与目的:环状RNA KIF4A(circKIF4A)被发现在多种肿瘤的恶性进展中起到重要作用,然而,circKIF4A在结直肠癌中的生物学作用尚未见报道。因此,本研究探讨circKIF4A对结直肠癌生物学行为的影响及机制。方法:用qRT-PCR检测不同结直肠癌细胞系与结肠黏膜上皮细胞以及结直肠癌组织与癌旁正常组织中circKIF4A的表达;用siRNA敲低结直肠癌SW620细胞中circKIF4A的表达后,分别检测细胞生长、克隆形成及侵袭能力以及细胞内总谷胱甘肽(T-GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG)比例与铁死亡抑制蛋白SLC7A11表达的变化;通过生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验预测和分析circKIF4A的目标microRNA(miRNA)以及下游的靶基因并验证。结果:与正常结直肠上皮细胞及癌旁组织比较,circKIF4A在不同直肠癌细胞系及癌组织中的表达均明显上调(均P<0.05);敲低circKIF4A后,SW620细胞的生长、克隆形成、侵袭能力、细胞内T-GSH/GSSG比例及SLC7A11蛋白表达均明显降低(均P<0.05);预测与分析结果显示,circKIF4A序列上存在miR-515-5p结合位点,SLC7A11是miR-515-5p的下游靶基因;验证结果显示,在不同处理中,过表达miR-515-5p同时抑制circKIF4A对SW620细胞SLC7A11蛋白的表达的抑制最为明显(P<0.05)。结论:circKIF4A在结直肠癌细胞中表达升高,circKIF4A能促进结直肠癌细胞的生长与侵袭,其机制可能与circKIF4A-miR-515-5p-SLC7A11轴介导的铁死亡有关。

关键词：结直肠肿瘤 RNA,环状铁死亡肿瘤浸润