Trim9调控视网膜Müller细胞向神经节细胞定向分化

作     者：李金香 曾琦 LI Jinxiang;ZENG Qi

作者机构：湖南师范大学第一附属医院(湖南省人民医院)眼科长沙410005 

出 版 物：《中南大学学报（医学版）》 (Journal of Central South University ：Medical Science)

年 卷 期：2023年第48卷第10期

页      面：1561-1571页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：湖南省卫生健康委员会科研计划项目(20200757) 湖南省自然科学基金(2021JJ30397) 湖南省科技厅重点研发项目(2020SK2119) 

主　　题：青光眼 Müller细胞 Trim9 视网膜干细胞 视网膜神经节细胞 

摘      要：目的:青光眼是不可逆性致盲性眼病的主要病因,目前尚无有效疗法逆转青光眼的视觉系统损害。最近发现干细胞疗法有望使受损的视网膜神经元修复和再生,但是在干细胞来源方面仍然存在较大挑战。本研究探寻一种将视网膜Müller细胞去分化为视网膜干细胞,进一步高效定向分化为视网膜神经节细胞的方案,以期为青光眼的干细胞治疗提供新的细胞获取途径。方法:用表皮细胞生长因子和成纤维细胞生长因子2诱导大鼠视网膜Müller细胞去分化为视网膜干细胞。构建Trim9过表达慢病毒(PGC-FU-Trim9-GFP),感染由Müller细胞诱导去分化而来的视网膜干细胞,通过荧光显微镜观察和流式细胞术评估病毒感染效率。用视黄酸和脑源性神经营养因子处理过表达或未过表达Trim9的视网膜干细胞以诱导其分化为神经元和神经胶质细胞。采用免疫荧光、PCR/real-time RT-PCR和蛋白质印迹法检测各细胞标志物(GLAST、GS、rhodopsin、PKC、HPC-1、Calbindin、Thy1.1、Brn-3b、Nestin、Pax6)的表达。结果:表皮细胞生长因子和成纤维细胞生长因子2处理后的大鼠视网膜Müller细胞表达视网膜干细胞标志物Nestin和Pax6。视黄酸和脑源性神经营养因子处理后的过表达Trim9的视网膜干细胞Thy1.1阳性细胞明显增多,表明其定向分化为视网膜神经节细胞。结论:本研究成功将大鼠视网膜Müller细胞去分化为视网膜干细胞,并发现Trim9可有效促进由视网膜Müller细胞去分化而来的视网膜干细胞定向分化为视网膜神经节细胞。