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美国牛蛙蝌蚪约氏不动杆菌的分离、鉴定及耐药性分析

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水产学报 2024年第5期48卷 131-140页

作者：丁戈野李纯徐杨陈晓颖张秋实胡亮邓新兰刘小燕冯兴浪李军华湖南农业大学水产学院

为探明2023年3月初引起中国重庆市渝北区某牛蛙养殖场暴发疾病的原因，本实验从患病美国牛蛙蝌蚪肝脏和肠道中分离优势菌，采用形态学观察、生理生化实验、16S rDNA和rpoB基因序列测定、系统发育学分析进行鉴定。为确定该菌株的致病机... 详细信息

为探明2023年3月初引起中国重庆市渝北区某牛蛙养殖场暴发疾病的原因，本实验从患病美国牛蛙蝌蚪肝脏和肠道中分离优势菌，采用形态学观察、生理生化实验、16S rDNA和rpoB基因序列测定、系统发育学分析进行鉴定。为确定该菌株的致病机理，对该菌株进行了人工感染实验、组织病理学观察、毒力基因检测、生长特性研究及药物敏感性实验。结果显示，在患病濒死美国牛蛙蝌蚪的肝脏和肠道中分离得到的其中一株优势菌命名为LT202303，经鉴定为约氏不动杆菌。该菌株携带OmpA、Omp34和OmpTsx等3种毒力基因，具有较强的耐盐性和在广泛的pH范围内生存的能力，对美国牛蛙蝌蚪的半数致死浓度为6.8×10～6CFU/mL，发病临床症状为肝脏红肿并伴有大量白色结节，肠道透明发黄。组织病理学观察发现该菌株可引起美国牛蛙蝌蚪肝脏和肠道的明显炎症反应和病灶性坏死。药敏实验结果显示，分离菌LT202303是一种产β-内酰胺酶的多重耐药细菌。本研究表明，约氏不动杆菌对牛蛙蝌蚪具有高致病力，可引起肝脏和肠道等多器官组织的病理损伤最终引发机体的损伤甚至死亡。本研究首次报道约氏不动杆菌感染引起的美国牛蛙蝌蚪传染病的暴发，为该疾病的诊断和防控提供理论参考。

关键词：约氏不动杆菌美国牛蛙蝌蚪分离鉴定耐药性

过氧化氢在水稻镉耐受及吸收分配中的作用机理

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植物营养与肥料学报 2024年第4期30卷 677-688页

作者：余晓燚苗渝青吕魏张文祺张振华陈海飞湖南农业大学资源学院湖南长沙410000

[目的]研究镉(Cd)胁迫下不同浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))对水稻幼苗生长、根系发育及活性氧、Cd含量的影响,阐明H_(2)O_(2)在水稻Cd耐受和吸收分配中的作用机理。[方法]采用水培试验方法,供试材料为粳型水稻(Oryza sativaL.,ZH11)。在水... 详细信息

[目的]研究镉(Cd)胁迫下不同浓度过氧化氢(H_(2)O_(2))对水稻幼苗生长、根系发育及活性氧、Cd含量的影响,阐明H_(2)O_(2)在水稻Cd耐受和吸收分配中的作用机理。[方法]采用水培试验方法,供试材料为粳型水稻(Oryza sativaL.,ZH11)。在水稻营养液中添加10μmol/L CdCl_(2)进行Cd胁迫,同时分别添加0、20、80μmol/L H_(2)O_(2)溶液,以正常营养液培养为对照(CK)。处理1天后取根系鲜样测定水稻幼苗内源H_(2)O_(2)、超氧阴离子含量;处理30天后,测定水稻幼苗倒二叶的SPAD值、株高、根系形态、干物质重、Cd^(2+)含量,提取根表铁膜及亚细胞组份。为验证外源H_(2)O_(2)在Cd胁迫中的作用,设置了H_(2)O_(2)清除剂碘化钾(KI)添加试验,对水稻幼苗进行10μmol/L CdCl_(2)+20μmol/L KI和20μmol/L KI处理。处理20天时,测定水稻幼苗倒二叶的SPAD值和株高。从CK和10μmol/L CdCl_(2)、10μmol/L CdCl_(2)+20μmol/L H_(2)O_(2)处理1天的水稻根中提取总RNA。[结果]Cd胁迫下,水稻生长受到抑制,外源添加H_(2)O_(2)显著缓解了水稻Cd胁迫,且随着浓度增加缓解效果减弱,但添加KI加剧Cd胁迫造成的抑制作用。20μmol/L H_(2)O_(2)处理下,水稻株高较无H_(2)O_(2)处理增加了35.1%,倒二叶SPAD值提高了50.5%,地上部和根部干重分别显著提高227.1%和339.0%,根系形态参数(总根长、根表面积、根体积、根尖数)显著增加。Cd胁迫导致水稻幼苗根中超氧阴离子含量显著增加,外源添加H_(2)O_(2)可以显著降低超氧阴离子含量。外源H_(2)O_(2)通过下调OsNRAMP5的表达水平,降低水稻对Cd的吸收,根和地上部中Cd离子含量均显著下降。此外,H_(2)O_(2)处理促进水稻根表铁膜的形成,吸附较多的Cd离子在根表,抑制了Cd从根表向根内的转移。在根内,H_(2)O_(2)处理上调了果胶的合成和果胶甲酯酶基因表达水平,促进了细胞壁中Cd的区隔化,降低了细胞质中Cd含量,从而减轻Cd的细胞毒性。[结论]外源添加适宜水平的H_(2)O_(2)可降低O_(2)^(-)造成的氧化损伤,同时下调OsNRAMP5的表达水平,减少水稻对Cd的吸收。外源H_(2)O_(2)还可促进水稻根表形成铁膜,抑制Cd^(2+)从根表向根内的转移,促进细胞壁中Cd的区隔化,干扰细胞质中Cd的移动,从而减轻Cd的细胞毒性,提高水稻抗Cd胁迫能力。但外源高水平H_(2)O_(2)缓解水稻Cd胁迫的效果大幅减弱,这可能与其抑制根表铁膜的形成有关。

关键词：水稻活性氧过氧化氢镉吸收细胞壁修饰

湖南省柑橘园土壤pH值空间变异特征、成因及养分有效性

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植物营养与肥料学报 2024年第4期30卷 717-730页

作者：徐章倩周卫军崔浩杰周雨舟商贵铎李敏岳晴晴湖南农业大学资源学院湖南长沙410128

[目的]研究湖南省柑橘园土壤pH值的空间变异特征、影响因素及主要养分的有效性,为减缓柑橘园土壤酸化,提升土壤肥力提供科学依据。[方法]本研究以湖南省38个柑橘重点县的15722个柑橘园土壤为对象,利用地统计学、相关性分析、结构方程模... 详细信息

[目的]研究湖南省柑橘园土壤pH值的空间变异特征、影响因素及主要养分的有效性,为减缓柑橘园土壤酸化,提升土壤肥力提供科学依据。[方法]本研究以湖南省38个柑橘重点县的15722个柑橘园土壤为对象,利用地统计学、相关性分析、结构方程模型等方法,探究了湖南省柑橘园土壤pH值的空间变异特征,分析了土壤pH值对地理、气候、土壤性质等因子的响应,并研究了土壤pH值对土壤氮、磷、钾有效性的影响。[结果]湖南省柑橘园土壤pH值范围为3.00~8.50,均值为5.58,变异系数为18.06%,空间变异为中等程度。最适合柑橘生长的弱酸性土壤面积占44.35%,而酸性、强酸性、中性和碱性土壤分别占48.92%、1.69%、4.95%和0.08%。通过Pearson相关性分析发现,土壤pH值与降水量呈显著正相关(P湖南省柑橘园超过一半(50.61%)的土壤处于过酸状态(酸性和强酸性)。湖南省柑橘园土壤速效氮、磷、钾养分含量基本处于适宜水平,因此,应重视改善土壤酸性。

关键词：柑橘园土壤 pH值空间特征成土母质地理因素速效养分

发育不良和歪头病对变态末期棘胸蛙皮肤菌群的影响

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水生生物学报 2024年第5期48卷 839-848页

作者：徐杨江昀侯金亮李娟冯兴浪刘新华李德亮向建国李军华湖南农业大学水产学院长沙410128

实验基于高通量测序技术,以健康(CTL组)、发育不良(DD组)和患歪头病(TD组)的棘胸蛙(Quasipaa spinosa)为研究对象,系统地探索宿主健康状态与皮肤微生物菌群组成、多样性及功能之间的潜在关系。所有样本经测序、质控及聚类获得2997条扩... 详细信息

实验基于高通量测序技术,以健康(CTL组)、发育不良(DD组)和患歪头病(TD组)的棘胸蛙(Quasipaa spinosa)为研究对象,系统地探索宿主健康状态与皮肤微生物菌群组成、多样性及功能之间的潜在关系。所有样本经测序、质控及聚类获得2997条扩增子序列变体(ASVs),注释32个门,76个纲,167个目,259个科和402个属,其中变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidota)为棘胸蛙皮肤主要优势菌门(>1%),但丰度受宿主健康状态的影响。在属水平上筛选获得50个菌群标志物,其中23个(如乳杆菌(Lactobacillus)、德沃斯氏(Devosia)、希瓦氏菌(Shewanella)和Luteolibacter)在CTL组中相对丰度较高,提示棘胸蛙的健康状态;19个(如短稳杆菌(Empedobacter)、芽孢杆菌(Bacillus)和短螺旋体(Brevinema))在DD组中相对丰度较高,提示棘胸蛙发育不良的病症;8个(如伊丽莎白菌(Elizabethkingia)、柠檬酸杆菌(Citrobacter)和不动杆菌(Acinetobacter))在TD组中相对丰度较高,提示棘胸蛙歪头病的病症。多样性分析表明,TD组的多样性和均一度与CTL组和DD组相比显著降低,微生物菌群组成也表现出明显分离。功能预测表明,CTL组和TD组皮肤微生物菌群之间功能差异主要富集在新陈代谢相关通路。总之,该项研究揭示不同健康状态下棘胸蛙皮肤微生物菌群的组成和变化,突出共生微生物菌群在两栖动物健康养殖和疾病预防中的潜在应用。

关键词：变态末期发育不良歪头病皮肤微生物菌群棘胸蛙

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GCRV感染存活草鱼的血清蛋白表达特性

水生生物学报 2024年第2期48卷 304-314页

作者：阳鸿邓亚东丁春华许宝红吕钊肖调义湖南农业大学水产学院长沙410128

为挖掘草鱼关键抗性分子,研究利用4D label-free定量蛋白质组学技术系统分析了团队前期获得的GCRV感染存活草鱼(候选抗性草鱼)与对照草鱼的血清蛋白表达差异。共鉴定到858个草鱼血清蛋白,329个蛋白在两类草鱼中差异表达,其中163个蛋白... 详细信息

为挖掘草鱼关键抗性分子,研究利用4D label-free定量蛋白质组学技术系统分析了团队前期获得的GCRV感染存活草鱼(候选抗性草鱼)与对照草鱼的血清蛋白表达差异。共鉴定到858个草鱼血清蛋白,329个蛋白在两类草鱼中差异表达,其中163个蛋白在候选抗性草鱼血清中显著高表达,166个蛋白显著低表达。差异表达蛋白的功能主要注释为体液免疫反应调节相关蛋白,显著富集到补体凝血级联、细胞黏附和铁死亡等信号通路。对差异表达的免疫相关蛋白进行分析发现,候选抗性草鱼血清中体液免疫分子MASP2、C4a、C4b、C7b、C8b、C8g、C9、CFI、C3a.1、C3a.2、C3a.3和C3a.6等补体和抗原提呈相关免疫分子MHC1UBA和IGL4V8等蛋白表达水平显著高于对照草鱼,而T细胞免疫相关分子TRAV、IGHV1-1、IGHV2-1、IGHV6-1、IGHV3-2和IGHV11-2等蛋白表达水平显著低于对照草鱼。免疫印迹检测进一步证实,以C3和IgM为代表的体液免疫分子在候选抗性草鱼血清中显著高表达,可能与草鱼抗病能力关联。研究将为高抗性草鱼的选育提供可参考的分子资源。

关键词：蛋白质组血清抗性分子体液免疫草鱼

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厌氧环境下黏土矿物结构Fe(Ⅲ)还原对Cd(Ⅱ)固持特性的影响

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农业环境科学学报 2024年第5期43卷 1045-1055页

作者：范小妹董易坤吴聪王帅廖文娟周卫军崔浩杰湖南农业大学资源学院长沙410128

黏土矿物结构Fe(Ⅲ)是土壤铁元素主要赋存形态之一,稻田淹水环境下矿物结构Fe(Ⅲ)易发生还原反应,改变矿物晶体微结构和表面化学性质,为研究这种变化对矿物固持Cd(Ⅱ)特性的影响,以合成含铁黏土矿物绿脱石为研究对象,通过化学还原,探讨... 详细信息

黏土矿物结构Fe(Ⅲ)是土壤铁元素主要赋存形态之一,稻田淹水环境下矿物结构Fe(Ⅲ)易发生还原反应,改变矿物晶体微结构和表面化学性质,为研究这种变化对矿物固持Cd(Ⅱ)特性的影响,以合成含铁黏土矿物绿脱石为研究对象,通过化学还原,探讨了厌氧条件下绿脱石结构态Fe(Ⅲ)还原对Cd(Ⅱ)吸附性能的影响及作用机制。结果表明:合成绿脱石中总铁含量为31.3%,结构态Fe(Ⅱ)和Fe(Ⅲ)的含量占总铁的98.6%。还原处理后,矿物结构中Fe(Ⅱ)含量由还原前的3.9%显著提高至67.4%。XRD、SEM、BET和XPS分析表明,还原后绿脱石矿物层间距增大,分散程度更高,比表面积由151.6 m^(2)·g^(-1)增加至184.0 m^(2)·g^(-1),矿物表面的羟基基团数量增加。结构Fe(Ⅲ)还原降低了矿物对Cd(Ⅱ)的吸附和固持性能,Langmuir模型拟合还原后矿物对Cd(Ⅱ)的最大吸附量为23.5 mg·g-1,明显低于还原前矿物对Cd(Ⅱ)的吸附量(33.4 mg·g-1)。还原前后矿物对Cd(Ⅱ)的吸附性能均随着离子强度增大而降低,但还原矿物吸附Cd(Ⅱ)的降幅明显低于未还原矿物。黏土矿物结构Fe(Ⅲ)还原后吸附Cd(Ⅱ)的性能降低主要是由于还原过程中结构Fe(Ⅱ)迁移进入层间,抑制了吸附过程中Cd(Ⅱ)进入矿物层间。研究表明,厌氧环境中黏土矿物结构Fe(Ⅲ)显著降低了矿物对Cd(Ⅱ)的固持特性。

关键词：黏土矿物结构态铁还原镉吸附

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地理学视角下中国农业功能研究进展与展望

热带地理 2024年第1期44卷 56-67页

作者：谭雪兰李印齐安悦周舟刘悦朱晶晶湖南农业大学资源学院长沙410128

伴随中国城镇化、工业化、市场化的快速推进及乡村振兴战略的深入实施,中国农业发展迈入转型升级的新时期。国内学者高度重视农业发展及农业产业为全社会所提供的服务,地理学者充分发挥学科优势,逐步融合多学科理论与方法针对农业功能... 详细信息

伴随中国城镇化、工业化、市场化的快速推进及乡村振兴战略的深入实施,中国农业发展迈入转型升级的新时期。国内学者高度重视农业发展及农业产业为全社会所提供的服务,地理学者充分发挥学科优势,逐步融合多学科理论与方法针对农业功能的概念内涵、理论基础、分类体系、测度评价、时空过程、影响因素及优化路径等开展了诸多研究。文章通过梳理中国知网平台上近10年核心期刊中关于农业功能的学术论文,选取了151篇高质量文献进行研究,得到以下几点结果:1)地理学者聚焦于农业的生产功能、经济功能、及生态功能等方面研究,更加关注农业功能空间分布、地理特征及其与环境的关系;2)人地关系地域系统理论、农业多功能理论、农业区位理论和农业功能阶段论等是农业功能研究的基础,地理学者正不断完善和丰富农业功能相关理论;3)基于GIS和RS技术以及地理数学模型,地理学者进一步研究了农业功能的空间变化与地域特征;4)地理学者科学诊断了不同地理环境下各因子的作用方式、方向与强度,并针对地区地理环境与影响因子进行功能区划与优化;5)未来地理学视角下的农业功能研究需要进一步完善理论框架体系,推动多要素、多尺度、多目标的体系研究;聚焦农业功能转型,强化多学科、大数据、新技术手段的集成研究。

关键词：地理学农业功能农业可持续发展乡村振兴中国

基于RBL-2H3细胞脱颗粒抑制作用的体外抗过敏活性益生菌的筛选及鉴定

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食品科学 2024年第6期45卷 55-63页

作者：马丁秦双霞郝慧超邓放明赵玲艳湖南农业大学食品科学技术学院湖南长沙410128 湖南农业大学长沙现代食品创新研究院湖南长沙410128

为探究乳酸菌的抗过敏活性,本研究采用传统分离技术从发酵蔬菜中获得乳酸菌,并进行益生菌体外评价,结合RBL-2H3细胞脱颗粒抑制实验筛选具有抗过敏活性的益生菌。结果表明,从发酵蔬菜中分离的4株菌株表现出良好的益生特性和安全性;所选4... 详细信息

为探究乳酸菌的抗过敏活性,本研究采用传统分离技术从发酵蔬菜中获得乳酸菌,并进行益生菌体外评价,结合RBL-2H3细胞脱颗粒抑制实验筛选具有抗过敏活性的益生菌。结果表明,从发酵蔬菜中分离的4株菌株表现出良好的益生特性和安全性;所选4株乳酸菌对RBL-2H3细胞脱颗粒释放β-己糖胺酶均具有较高的抑制作用,并对RBL-2H3细胞脱颗粒释放组胺、肿瘤坏死因子-α和白介素-4均有明显的下调作用,具有作为抗过敏活性益生菌的可能性。4株菌株经16S rDNA测序鉴定为植物乳杆菌2株、发酵乳杆菌和副干酪乳杆菌各1株。

关键词：乳酸菌 RBL-2H3细胞益生特性脱颗粒抗过敏活性

低鱼粉高脂饲料添加大豆卵磷脂对黄鳝生长、血清生化指标及肠道菌群的影响

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水生生物学报 2024年第3期48卷 361-371页

作者：汤哲林东晓蔡明浪张俊智朱波石勇钟蕾胡毅湖南农业大学水产学院长沙410128

试验旨在研究低鱼粉高脂饲料中添加大豆卵磷脂对黄鳝(Monopterusalbus)生长、血清生化指标及肠道菌群的影响,为降低黄鳝鱼粉使用量提供依据。以初始体重(20.03±0.01)g黄鳝为研究对象,以含有42%鱼粉、22%豆粕、6%粗脂肪的饲料为正常鱼粉... 详细信息

试验旨在研究低鱼粉高脂饲料中添加大豆卵磷脂对黄鳝(Monopterusalbus)生长、血清生化指标及肠道菌群的影响,为降低黄鳝鱼粉使用量提供依据。以初始体重(20.03±0.01)g黄鳝为研究对象,以含有42%鱼粉、22%豆粕、6%粗脂肪的饲料为正常鱼粉组,另以含有22%鱼粉、52%豆粕和9%粗脂肪的饲料为低鱼粉高脂组,分别在低鱼粉高脂组中添加1%和2%的大豆卵磷脂,进行为期56d的养殖试验,于室外池塘进行网箱养殖,日投喂1次,喂量为黄鳝体重3%—5%。结果表明:(1)与对照组相比,低鱼粉高脂组黄鳝增重率显著降低(P<0.05),饵料系数与肝体比均显著增加(P<0.05),但添加2%大豆卵磷脂后黄鳝增重率显著提高(P<0.05),而饵料系数与肝体比显著降低(P<0.05);(2)对比正常鱼粉组,低鱼粉高脂饲料组黄鳝血清甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、血氨、尿素氮、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、酸性磷酸酶与免疫球蛋白M含量显著增加(P<0.05),且碱性磷酸酶活性显著降低(P<0.05),而添加2%大豆卵磷脂使黄鳝血清的高密度脂蛋白含量与碱性磷酸酶活性显著增加(P<0.05),低密度脂蛋白、血氨、尿素氮、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、酸性磷酸酶与免疫球蛋白M水平显著下降(P<0.05);(3)与对照组相比,低鱼粉高脂组黄鳝后肠绒毛高度与杯状细胞显著降低(P<0.05),而添加2%大豆卵磷脂后黄鳝后肠绒毛高度与杯状细胞数目上升;(4)与对照组相比,低鱼粉高脂组不动杆菌属与考克氏菌属相对丰度上升,而与低鱼粉高脂组相比,添加2%大豆磷脂后黄鳝肠道群落的丰富度与多样性显著增加(P<0.05),且显著提高了肠道红杆菌属的相对丰度,并显著减少不动杆菌属与考克氏菌属的丰度(P<0.05)。由此得出,在试验条件下,2%大豆卵磷脂可促进脂肪代谢和提高机体免疫性能,并修复肠道组织结构与维持菌群稳态,进而缓解低鱼粉高脂饲料对黄鳝生长的负面影响。

关键词：低鱼粉高脂饲料大豆卵磷脂血清生化指标肠道菌群黄鳝