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刺葡萄VdERD6L15基因克隆及功能分析

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果树学报 2024年第9期41卷 1770-1780页

作者：刘洁杨盛迪曾雅婷白描杨国顺李双江湖南农业大学园艺学院·湖南省葡萄工程技术研究中心长沙410128

【目的】探究VdERD6L15在刺葡萄果实生长发育中的功能,从湘刺1号中克隆VdERD6L15基因及其启动子,进行基因功能研究和启动子活性分析。【方法】克隆VdERD6L15基因CDS序列,并对CDS进行生物信息学分析;构建VdERD6L15表达载体,并通过瞬时转... 详细信息

【目的】探究VdERD6L15在刺葡萄果实生长发育中的功能,从湘刺1号中克隆VdERD6L15基因及其启动子,进行基因功能研究和启动子活性分析。【方法】克隆VdERD6L15基因CDS序列,并对CDS进行生物信息学分析;构建VdERD6L15表达载体,并通过瞬时转化烟草确定VdERD6L15基因编码蛋白的亚细胞定位;同时,通过在己糖缺陷型酵母菌株***4000中异源表达VdERD6L15探究其功能;此外,通过启动子截短试验确定VdERD6L15启动子的核心区域。【结果】成功克隆刺葡萄VdERD6L15基因编码序列,该编码序列长1461 bp,可编码486个氨基酸,具有膜蛋白特征,属于单糖转运蛋白家族。亚细胞定位试验确认VdERD6L15蛋白主要定位于液泡膜上。通过在酵母菌株***4000中进行异源表达,验证了VdERD6L15具有转运葡萄糖的能力。利用PlantCARE数据库对VdERD6L15启动子顺式作用元件进行分析,发现其主要包含光响应元件、干旱胁迫和激素响应元件。通过GUS染色分析,进一步确定候选基因VdERD6L15启动子的关键调控区域位于-500 bp到-1000 bp之间。【结论】VdERD6L15是一个定位在液泡膜上的糖转运蛋白,具有转运葡萄糖的功能;VdERD6L15启动子的核心元件位于ATG上游500~1000 bp之间。

关键词：刺葡萄 VdERD6L15 单糖转运蛋白亚细胞定位启动子活性

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不同破眠处理对阳光玫瑰葡萄冬芽萌发的影响

果树学报 2024年第5期41卷 897-910页

作者：饶余倩黄亚倩夏龙腾杨国顺王美军刘昆玉许延帅湖南农业大学园艺学院·湖南省葡萄工程技术研究中心长沙410128 永州市柑橘科学研究所湖南永州425045

【目的】寻找阳光玫瑰葡萄理想安全的破眠方法以及探究其破眠机制。【方法】以阳光玫瑰葡萄冬芽为试材,通过研究类休眠阶段和生理休眠阶段不同破眠处理对葡萄萌芽率、成花率和花穗质量的影响,并通过转录组测序筛选可能影响葡萄冬芽萌发... 详细信息

【目的】寻找阳光玫瑰葡萄理想安全的破眠方法以及探究其破眠机制。【方法】以阳光玫瑰葡萄冬芽为试材,通过研究类休眠阶段和生理休眠阶段不同破眠处理对葡萄萌芽率、成花率和花穗质量的影响,并通过转录组测序筛选可能影响葡萄冬芽萌发的关键基因。【结果】在萌芽前1个月对阳光玫瑰葡萄冬芽进行单氰胺处理、石硫合剂+1-氨基环丙烷羧酸(ACC)处理,均能使萌芽提前,显著提高萌芽率,不影响成花率及花穗质量。通过分析转录组数据,筛选了PYL4、PP2C24、PP2C8、PP2C37、PP2C25、SAPK2等差异表达基因,这些基因可能通过参与激素信号传导、氧化应激等途径影响葡萄芽的萌发。【结论】5°Bé石硫合剂+0.25 mg·mL-1ACC是阳光玫瑰葡萄打破休眠的一种安全、有效的处理方法。

关键词：葡萄休眠萌芽转录组

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马铃薯DGK基因家族克隆及表达分析

农业生物技术学报 2024年

作者：王迪何双双单雅成黄彦曾相琴田周娥胡新喜秦玉芝林原湖南农业大学园艺学院/湖南省马铃薯工程技术研究中心/蔬菜生物学湖南省重点实验室

二酰基甘油激酶(diacylglycerol kinase, DGK)是脂质信号通路中的关键酶，在植物激素信号传导、生物和非生物胁迫中起着重要作用。本研究参考模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中AtDGKs蛋白序列以及DGK保守结构域信息，分析马铃薯(S... 详细信息

二酰基甘油激酶(diacylglycerol kinase, DGK)是脂质信号通路中的关键酶，在植物激素信号传导、生物和非生物胁迫中起着重要作用。本研究参考模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中AtDGKs蛋白序列以及DGK保守结构域信息，分析马铃薯(Solanum tuberosum)中StDGKs基因的序列特点，对此多基因家族进行序列克隆和分析，并对其在干旱和盐胁迫响应以及马铃薯块茎发育中的表达模式进行分析。结果表明，从马铃薯基因组数据库(S. tuberosum group Phureja DM1-3 v6.1)中检索出11个StDGKs，并成功克隆出其中6个基因StDGK1、StDGK2、StDGK5、StDGK6、StDGK7和StDGK8。序列分析结果显示，6个StDGKs基因全长为1 460～2 220 bp，序列比对相似性超过95%。实时荧光定量PCR结果显示，6个StDGKs的表达均受到干旱和盐胁迫诱导，StDGK2、StDGK8在干旱处理12 h、StDGK6在4 h的表达量达到峰值；StDGK1、StDGK5、StDGK7在盐胁迫处理下的表达量在4 h达到峰值，StDGK2、StDGK6在盐处理15 min达到峰值。此外，本研究发现，StDGKs可能在马铃薯块茎发育初期发挥重要作用，StDGK1、StDGK8在块茎发育早期至中期的表达量逐渐升高，在块茎膨大后期又缓慢下降。本研究为深入解析StDGK基因家族功能提供基础资料。

关键词：马铃薯二酰基甘油激酶(DGK) 非生物胁迫块茎发育表达模式

南方六个地区不同成熟期‘阳光玫瑰’葡萄果实品质评价

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分子植物育种 2024年

作者：王荣雷舒敏杜肇轩岳领齐张雪枫杨国顺王美军谭君许延帅湖南农业大学园艺学院湖南省葡萄工程技术研究中心永州市农业科学研究所

本研究旨在通过OAV值与综合评价比较南方各地区各成熟期‘阳光玫瑰’葡萄果实品质差异，为南方各地区‘阳光玫瑰’葡萄最优种植成熟期提供参考。以南方6个地区两个成熟期‘阳光玫瑰’果实为材料，进行常规品质检测，并采用HS-SPME-GC-M... 详细信息

本研究旨在通过OAV值与综合评价比较南方各地区各成熟期‘阳光玫瑰’葡萄果实品质差异，为南方各地区‘阳光玫瑰’葡萄最优种植成熟期提供参考。以南方6个地区两个成熟期‘阳光玫瑰’果实为材料，进行常规品质检测，并采用HS-SPME-GC-MS方法测定葡萄中香气物质的组分和含量，通过OAV值、主成分分析与聚类分析对各地区葡萄进行综合评价。结果表明，除建水地区外，其它地区二次果芳樟醇OAV值均高于一次果；通过主成分分析与综合评价排名可知果实综合品质由高到低依次为：韶山一次果>长沙一次果>南宁一次果>东莞一次果>建水一次果>澧县一次果>建水二次果>澧县二次果>南宁二次果>长沙二次果>东莞二次果>韶山二次果；通过聚类分析可知，韶山一次果、长沙一次果、东莞一次果、建水一次果和南宁一次果果实综合品质最佳，澧县一次果、建水二次果、澧县二次果和南宁二次果综合品质居中，长沙二次果、东莞二次果和韶山二次果综合品质最差。因此，除建水地区外，其它地区二次果果实香气比一次果浓郁；韶山地区、长沙地区、东莞地区、建水地区和南宁地区一次果果实品质最佳。

关键词：香味活性值顶空固相微萃取气相色谱-质谱联用主成分分析聚类分析

基于CiteSpace的蜂蜜安全性研究现状与热点分析

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食品工业科技 2024年第13期45卷 389-401页

作者：肖甜王燕杨帆许华灯钟晓红唐其陆英金秀娥王峻郑亚杰湖南农业大学国家植物功能成分利用工程技术研究中心湖南长沙410128 湖南农业大学园艺学院湖南长沙410128 湖南省土壤肥料工作站湖南长沙410006 湖南省岳阳县原种场湖南岳阳414000 湖北省兽药监察所湖北武汉430000

为了梳理蜂蜜安全性研究的现状及热点,本文基于中国知网(CNKI)数据库和Web of Science(WOS)核心数据库,运用CiteSpace软件对发文趋势、发表期刊、作者、机构、国家(地区)、关键词等内容进行分析及可视化展示。从上述数据库中得到169篇... 详细信息

为了梳理蜂蜜安全性研究的现状及热点,本文基于中国知网(CNKI)数据库和Web of Science(WOS)核心数据库,运用CiteSpace软件对发文趋势、发表期刊、作者、机构、国家(地区)、关键词等内容进行分析及可视化展示。从上述数据库中得到169篇中文文献和281篇英文文献。分析表明蜂蜜安全性研究方向中文文献的发文量自2011年起呈上升趋势,英文文献发文量自2007年起呈现出波动性上升趋势,近十五年来英文文献的发文量多于中文文献;张强和Gunduz A分别是发表中文和英文文献量最多的作者,中英文研究领域的学者之间有相对固定的研究合作关系,但各个团体之间的合作程度较低;《蜜蜂杂志》和《Food Chemistry》分别是发表蜂蜜安全性文献最多的中英文期刊,中英文发文期刊都以食品领域为主;云南省疾病预防控制中心和Karadeniz Technical University分别是发表中文和英文文献量最多的研究机构,国内研究机构间的合作较少;研究国家(地区)中土耳其是影响力最大的国家,其次是中国、波兰和新西兰;中文文献在研究初期以“肉毒杆菌”“粉源植物”“雷公藤”“蜂蜜中毒”等为研究热点;2000年之后,色谱、光谱、扫描电镜等技术日渐成熟,“蜂蜜孢粉学”“气相色谱”等关键词出现,气相色谱、液相色谱、液质联用、扫描电镜等检测手段成为蜂蜜安全性研究中的热门研究方法。英文文献在研究初期以“pyrrolizidine alkaloids”“mad honey”“grayanotoxin”“natural toxicants”等为研究热点,说明此阶段主要是研究毒蜂蜜以及吡咯里西啶生物碱、梫木毒素等蜂蜜中检测到的天然毒素;随着色谱等技术的发展,“mass spectrometry”等关键词开始出现。可以看出,中英文文献研究在热点领域基本一致,都是以有毒蜜、蜂蜜中毒、蜂蜜中毒性成分检测和溯源等为主;但在侧重点上略有不同,国内有毒蜜源植物以雷公藤、钩吻、博落回等为主,蜂蜜中毒性成分检测以雷公藤甲素、钩吻素子等成分为主,国外蜂蜜中毒事件多是因为梫木毒素、吡咯西啶生物碱或羟基马桑毒素等造成。本研究为分析蜂蜜安全性的研究内容和发展历程及判断研究热点提供参考。

关键词：蜂蜜安全性文献计量学 CiteSpace 现状与热点

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多成分含量测定结合网络药理学识别湘枳壳种质资源品质评价的质量标志物

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天然产物研究与开发 2024年

作者：杨莉唐其范明慧王燕张睿胤周铁陈鹏郑亚杰湖南农业大学园艺学院国家植物功能成分利用工程技术研究中心湖南省农业科学院园艺研究所

建立多指标成分的色谱定量分析方法，结合网络药理学、分子对接技术和多变量统计分析从“谱-效”关系找出用于湘枳壳种质资源品质评价的质量标志物（quality marker，Q-Marker）。采用高效液相色谱法、顶空固相微萃取-气相色谱法对湖南... 详细信息

建立多指标成分的色谱定量分析方法，结合网络药理学、分子对接技术和多变量统计分析从“谱-效”关系找出用于湘枳壳种质资源品质评价的质量标志物（quality marker，Q-Marker）。采用高效液相色谱法、顶空固相微萃取-气相色谱法对湖南多个县市枳壳种质资源样本进行含量测定；对多指标成分进行靶点搜集和网络药理学分析，构建“成分-靶点-通路”网络，并预测候选Q-Marker和核心作用靶点；通过分子对接技术对配体与受体结合活性进行理论模拟找出关键Q-Marker，借助主成分荷载因子分子和聚类分析挖掘出区分枳壳种质资源样本的Q-Marker。结果表明种质资源样本以柚皮苷、新橙皮苷和D-柠檬烯含量最高，各目标化合物的含量差异波动较大；橘皮素等7个候选Q-Marker通过PI3K/AKT和RAS/MAPK通路的PIK3CD等7个核心靶点发挥抗氧化、抗炎等作用，它们之间的分子对接活性良好；多变量统计分析表明柠檬苦素等5个Q-Marker可用于区分种质资源样本，它们有类群特异性，但样本间差异与地域无关。该方法可对湘枳壳种质资源进行品质评价，为品种选育提供参考。

关键词：湘枳壳种质资源质量标志物色谱法网络药理学分子对接技术多变量统计方法

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刺葡萄杂交后代真实性鉴定与果实品质分析

分子植物育种 2024年

作者：肖湘龙牟建莉杨梅杨国顺王美军石雪晖刘昆玉罗飞雄 1.湖南农业大学园艺学院 2.湖南省葡萄工程技术研究中心 3.湖南交通工程学院 4.黔南州农业科学研究院湖南农业大学园艺学院湖南省葡萄工程技术研究中心湖南交通工程学院黔南州农业科学研究院

刺葡萄是中国南方地区高抗种质资源，通过种间杂交结合刺葡萄和鲜食葡萄的优良性状以选育优质的新品种，成功高效地鉴定杂交后代真实性是实现育种计划的前提。本研究以刺葡萄‘紫秋’与‘玫瑰香’为主等鲜食葡萄的种间杂交后代112份和... 详细信息

刺葡萄是中国南方地区高抗种质资源，通过种间杂交结合刺葡萄和鲜食葡萄的优良性状以选育优质的新品种，成功高效地鉴定杂交后代真实性是实现育种计划的前提。本研究以刺葡萄‘紫秋’与‘玫瑰香’为主等鲜食葡萄的种间杂交后代112份和部分亲本品种为材料，采用9个SSR标记对群体进行了基因分型，同时调查了这些材料在两个年份的成熟果实品质性状。结果表明试验所用标记能成功鉴定出真杂种，验证并修正部分亲缘关系，分析标记的鉴别能力为刺葡萄杂交育种提供了早期辅助选择的有效方法。真杂种的果实大小、果穗重量和可溶性固形物均高于刺葡萄自交后代，不同杂交组合的果皮颜色、果形发生了性状分离，获得的真杂种为进一步选育出新品种奠定了材料基础。

关键词：刺葡萄分子标记种间杂交基因分型

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三种植物生长调节剂对月季离体再生的影响

分子植物育种 2024年第8期22卷 2709-2714页

作者：张家瑞李冰清刘宇鑫陈己任湖南农业大学园艺学院湖南省中亚热带优质花木繁育与利用工程技术研究中心长沙410128

为了提高月季遗传转化的体细胞胚胎的植株再生率,以月季B103 (Rosa spp.)无菌苗为材料,探究不同浓度的细胞分裂素6-BA、KT、TDZ对植株生长的影响,并以优化的培养基EB和ET对成熟的月季B103体胚进行再生诱导。结果表明:添加KT的培养基(RK... 详细信息

为了提高月季遗传转化的体细胞胚胎的植株再生率,以月季B103 (Rosa spp.)无菌苗为材料,探究不同浓度的细胞分裂素6-BA、KT、TDZ对植株生长的影响,并以优化的培养基EB和ET对成熟的月季B103体胚进行再生诱导。结果表明:添加KT的培养基(RK)上的无菌苗全部死亡,添加6-BA (RB)和TDZ(RT)的两组生长正常,最佳培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+GA33.0 mg/L+6-BA/TDZ 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂pH=5.7。成熟月季体胚在培养基MS+NAA 0.05 mg/L+GA33.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂p H=5.7上诱导分化,30 d内再生出数量最多的正常植株,再生率为20%。ET组分化出丛生状态的子叶,再生率高于20%。本研究表明ET2可诱导月季细胞分化出正常再生植株。

关键词：月季再生体细胞胚生长调节剂

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基于CiteSpace知识图谱及专利计量对黄精相关研究的可视化分析

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中草药 2024年第1期55卷 217-231页

作者：黄子豪彭斐刘婷杨德斌邹辉陈淼芬郑亚杰湖南农业大学园艺学院湖南长沙410128 国家植物功能成分利用工程技术研究中心湖南长沙410128 新化县颐朴源黄精科技有限公司湖南新化417628

目的探究黄精的研究发展趋势,为黄精栽培、临床研究及产业发展提供参考,为迅速把握其研究内涵和聚焦研究热点提供一定借鉴。方法从中国知网(CNKI)数据库和Web of Science核心合集数据库中检索黄精中、英文献,利用CiteSpace软件从发文量... 详细信息

目的探究黄精的研究发展趋势,为黄精栽培、临床研究及产业发展提供参考,为迅速把握其研究内涵和聚焦研究热点提供一定借鉴。方法从中国知网(CNKI)数据库和Web of Science核心合集数据库中检索黄精中、英文献,利用CiteSpace软件从发文量、发文作者、机构、国家和关键词等方面进行计量学分析;借助incopat数据库的自带分析软件和Excel从专利申请数量、地域、机构及发明人等方面对黄精专利进行分析。结果近20年黄精的中、英文发文量均呈现阶段性的变化,特别是近5年呈快速增长态势。合作网络共现分析发现中、英文文献发文量最多的作者分别是李友元和鲍锦库;发文量最多的研究机构分别为贵州大学农学院和四川大学,其中中心性最高的机构是中国科学院,在机构合作中影响力较大;中国是英文文献发文量最多的国家,且与其他国家间存在较为广泛的联系,在黄精的相关研究领域中占有重要地位。中、英文文献关键词分析发现黄精成分分析从简单的理化性质研究转向化合物分子结构研究;栽培技术从简单的套种、间作等发展为更适宜的林下种植模式;药理作用研究则集中在调节糖脂代谢、防治糖尿病、抗氧化、抗衰老及抗抑郁等方面。目前黄精专利的申请数量处于下行趋势,以中医药文化影响较大的中国等亚洲国家申请专利较多,专利保护内容侧重于黄精的组方配伍。结论黄精研究仍处于发展上升阶段,已经引起国内外学者的广泛关注。目前防治糖尿病、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤是黄精的研究重点,且未来仍是主要研究方向;其中,黄精活性成分对肠道菌群结构、机体免疫力的调节作用及其作用靶点和信号通路将成为研究热点;黄精产品深层次开发和创新也将是需要高度关注的发展领域。

关键词：黄精 CiteSpace 专利文献计量学知识图谱可视化分析防治糖尿病抗氧化抗衰老

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