刺葡萄VdERD6L15基因克隆及功能分析

作     者：刘洁 杨盛迪 曾雅婷 白描 杨国顺 李双江 

作者机构：湖南农业大学园艺学院.湖南省葡萄工程技术研究中心 

出 版 物：《果树学报》 (Journal of Fruit Science)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：国家重点研发计划项目(2023YFD1200100) 国家自然科学基金项目(32202531) 国家现代农业产业技术体系项目(CARS-29-Zp-9) 

主　　题：刺葡萄 VdERD6L15 单糖转运蛋白 亚细胞定位 启动子活性 

摘      要：【目的】为探究VdERD6L15在刺葡萄果实生长发育中的功能，从湘刺1号中克隆VdERD6L15基因及其启动子，进行基因功能研究和启动子活性分析。【方法】克隆VdERD6L15基因CDS序列，并对CDS进行生物信息学分析；构建VdERD6L15表达载体，并通过瞬时转化烟草确定VdERD6L15基因编码蛋白的亚细胞定位；同时，通过在己糖缺陷型酵母菌株***4000中异源表达VdERD6L15探究其功能；此外，通过启动子截短试验确定VdERD6L15启动子的核心区域。【结果】成功克隆刺葡萄VdERD6L15基因编码序列，该编码序列长1461 bp，可编码486个氨基酸，具有膜蛋白特征，属于单糖转运蛋白家族。亚细胞定位试验确认VdERD6L15蛋白主要定位于液泡膜上。通过在酵母菌株***4000中进行异源表达，验证了VdERD6L15具有转运葡萄糖的能力。利用PlantCARE数据库对VdERD6L15启动子顺式作用元件进行分析，发现其主要包含光响应元件、干旱胁迫和激素响应元件。通过GUS染色分析，进一步确定候选基因VdERD6L15启动子的关键调控区域位于-500 bp到-1000 bp之间。【结论】VdERD6L15是一个定位在液泡膜上的糖转运蛋白，具有转运葡萄糖的功能；VdERD6L15启动子的核心元件位于ATG上游500 bp到1000 bp之间。