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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：曾孟晖杜珊谭年花彭杰陈斌湖南中医药大学第一附属医院长沙县人民医院(湖南省人民医院星沙院区) 湖南中医药大学

目的：研究茵陈蒿汤与茵陈术附汤合方(清温并用法)对乙肝相关性慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者体外培养的调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)表达的调控作用。方法：采集HBV-ACLF患者新鲜外周血并分离单个核细胞(PBMC)，通过免疫磁... 详细信息

目的：研究茵陈蒿汤与茵陈术附汤合方(清温并用法)对乙肝相关性慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者体外培养的调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)表达的调控作用。方法：采集HBV-ACLF患者新鲜外周血并分离单个核细胞(PBMC)，通过免疫磁珠法分离原代Treg及Naive CD4+T细胞，体外扩增后诱导Naive CD4+T分化为Th17细胞，制备清法(茵陈蒿汤)、温法(茵陈术附汤)、清温并用法(茵陈蒿汤与茵陈术附汤合方，即温阳解毒化瘀方)含药血浆及空白大鼠血浆(生理盐水)，设置空白组、清法组(5.04 g·kg-1)、温法组(6.21 g·kg-1)、清温并用法组(17.1 g·kg-1)，各组细胞分别给予相应血浆处理。采用流式细胞术检测Treg/Th17细胞频数，采用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测转化生长因子-β(TGF-β)表达水平，流式细胞微球芯片捕获技术(CBA)检测白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素17A(IL-17A)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-23(IL-23)表达水平，实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测叉状头(或)翅膀状螺旋转录因子(FoxP3)、维甲酸相关孤核受体γt(ROR-γt)的mRNA表达，蛋白质印迹法(Western Blot)检测FoxP3、ROR-γt的蛋白质表达。结果：经过清法、温法、清温并用法含药血浆干预后，与空白组相比，清温并用法组Treg、Th17细胞频率下降，Treg细胞因子TGF-β、IL-10及Th17细胞因子TNF-α、IL-17A、IL-23下降，FoxP3、ROR-γt mRNA表达和蛋白表达下降，差异均具有统计学意义(P＜0.01)；与清法组相比，清温并用法组Treg细胞频率、FoxP3 mRNA表达和蛋白表达下降，但差异均无统计学意义(P＞0.05)，Th17细胞频率、Treg细胞因子TGF-β、IL-10、及Th17细胞因子TNF-α、IL-17A、IL-23下降，ROR-γt mRNA表达和蛋白表达下降，差异均具有统计学意义(P＜0.05， P＜0.01)；与温法组相比，清温并用法组Treg细胞频率、FoxP3 mRNA表达和蛋白表达下降，但差异均无统计学意义，Th17细胞频率、Treg细胞因子TGF-β、IL-10、及Th17细胞因子TNF-α、IL-17A、IL-23下降，ROR-γt mRNA表达和蛋白表达下降，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论：清温并用法可下调Treg、Th17细胞特异性转录因子表达，抑制Treg、Th17细胞过度活化，减少细胞因子TGF-β、IL-10、TNF-α、IL-17A、IL-23分泌，从而起到减轻肝衰竭炎症反应，改善患者预后的作用。

关键词：乙肝相关性慢加急性肝衰竭 Treg细胞 Th17细胞炎症反应清温并用法

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：杜珊曾孟晖谭年花彭杰陈斌湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学长沙县人民医院(湖南省人民医院星沙院区)

目的：研究乙肝相关性慢加急性肝衰竭（hepatitis B virus related acute-on-chronic liver failure，HBV-ACLF）五种中医证型患者外周血调节性T细胞（Regulatory T cell，Treg）和辅助性T细胞17（T helper 17 cells，Th17）表达差异。方法：纳入144例HBV-ACLF患者，分为五种中医证型即毒热蕴结证34例，湿热蕴结证44例，气虚瘀黄证27例，脾肾阳虚证21例，肝肾阴虚证18例。同时纳入30例健康志愿者作为对照。流式细胞仪检测各组受试者外周血Treg、Th17细胞频率并计算Treg/Th17比值，流式细胞微球芯片捕获技术（Cytometric Bead Array，CBA）检测细胞因子白细胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）、转化生长因子-β（Transforming Growth Factor-β，TGF-β）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素17A（Interleukin 17A，IL-17A）、白细胞介素-23（Interleukin-23，IL-23）水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测叉状头（或）翅膀状螺旋转录因子（Forkhead box P3，FoxP3）、维甲酸相关孤核受体γt（Retinoic acid-related orphan receptor gamma t，ROR-γt）的mRNA表达。结果：（1）与健康对照组比较，HBV-ACLF各中医证型组患者Treg、Th17细胞频率升高（P＜0.05）；与毒热蕴结证组比较，湿热蕴结证组Treg、Th17细胞频率下降（P＜0.05），气虚瘀黄证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证组Treg、Th17细胞频率升高（P＜0.05）；与湿热蕴结证组比较，气虚瘀黄证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证组Treg、Th17细胞频率升高（P＜0.05）；与气虚瘀黄证比较，脾肾阳虚证组Treg、Th17细胞频率升高（P＜0.05），肝肾阴虚组Treg、Th17细胞频率下降（P＜0.05）；与脾肾阳虚证组比较，肝肾阴虚证组Treg、Th17细胞频率升高（P＜0.05）。（2）与健康对照组比较，HBV-ACLF各中医证型组患者Treg/Th17细胞比值降低（P＜0.05）；与毒热蕴结证组比较，湿热蕴结证组Treg/Th17细胞比值升高（P＜0.05），气虚瘀黄证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证Treg/Th17细胞比值下降（P＜0.05）；与湿热蕴结证组比较，气虚瘀黄证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证组Treg/Th17细胞比值下降（P＜0.05）；与气虚瘀黄证组比较，脾肾阳虚证、肝肾阴虚证组Treg/Th17细胞比值升高（P＞0.05，P＜0.05）；与脾肾阳虚证比较，肝肾阴虚证组Treg/Th17细胞比值升高（P＜0.05）。（3）与健康对照组比较，HBV-ACLF各中医证型组患者Treg相关细胞因子IL-10、TGF-β及Th17相关细胞因子TNF-α、IL-17A、IL-23水平升高（P＜0.05）；TNF-α各中医证型组间比较无明显差异（P＞0.05）；与毒热蕴结证组比较，湿热蕴结证、气虚瘀黄证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证组IL-10、TGF-β、IL-17A、IL-23水平升高（P＜0.05）；与湿热蕴结证比较，气虚瘀黄证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证组IL-10、TGF-β、IL-17A、IL-23水平升高（P＜0.05）；与气虚瘀黄证比较，脾肾阳虚证IL-10、TGF-β、IL-17A、IL-23水平升高（P＜0.05），肝肾阴虚证组IL-10、TGF-β、IL-17A、IL-23水平降低（P＜0.05）；与脾肾阳虚证比较，肝肾阴虚证组IL-10、TGF-β、IL-17A、IL-23水平降低（P＜0.05）。（4）与健康对照组比较，HBV-ACLF各中医证型组患者Treg/Th17细胞特异性转录因子FoxP3、ROR-γt mRNA升高（P＜0.05）；与毒热蕴结证组比较，气虚瘀黄证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证FoxP3、ROR-γt mRNA升高（P＜0.05）；与湿热蕴结证组比较，气虚瘀黄证、脾肾阳虚证、肝肾阴虚证组FoxP3、ROR-γt mRNA升高（P＜0.05）；与气虚瘀黄证比较，脾肾阳虚证FoxP3、ROR-γt mRNA升高（P＜0.05），肝肾阴虚证组FoxP3、ROR-γt mRNA水平降低（P＜0.05）；与脾肾阳虚证比较，肝肾阴虚证组FoxP3、ROR-γt mRNA降低（P＜0.05）。结论：HBV-ACLF五种中医证型患者外周血Treg/Th17细胞频率、Treg/Th17细胞比值、相关细胞

关键词：肝衰竭中医证型 Treg细胞 Th17细胞炎症反应

四神丸对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠MCT、c-fos表达的影响

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中成药 2024年第5期46卷 1658-1661页

作者：蔺晓源邓娜夏旭婷刘富林刘杰民湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208 贵州省人民医院贵州贵阳550002

目的观察四神丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠结肠MCT、c-fos表达的影响。方法将40只大鼠随机分为正常组、模型组、匹维溴铵组(15.23 mg/kg)和四神丸组(7.32 mg/kg),每组10只,采用番泻叶灌胃联合避水应激法造模,灌胃给药14 d后,... 详细信息

目的观察四神丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠结肠MCT、c-fos表达的影响。方法将40只大鼠随机分为正常组、模型组、匹维溴铵组(15.23 mg/kg)和四神丸组(7.32 mg/kg),每组10只,采用番泻叶灌胃联合避水应激法造模,灌胃给药14 d后,观察一般状态,测定体质量、粪便含水量和AWR评分,ELISA法检测血清MCT、c-fos水平,免疫组织化学法、Western blot法分别检测结肠组织MCT、c-fos蛋白定位及表达,RT-qPCR法检测结肠组织MCT、c-fos mRNA表达。结果与模型组比较,四神丸组和匹维溴铵组大鼠一般状态明显好转,体质量升高(P<0.01),粪便含水量、AWR评分以及血清中MCT、c-fos水平均降低(P<0.05,P<0.01),结肠组织MCT、c-fos蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05,P<0.01);四神丸组结肠组织MCT蛋白表达及c-fos蛋白表达均低于匹维溴铵组(P<0.05)。结论四神丸对IBS-D大鼠内脏敏感的保护机制可能与调节结肠肥大细胞活化指标MCT、c-fos的表达有关。

关键词：四神丸腹泻型肠易激综合征内脏敏感性 MCT c-fos

基于自噬探讨健脾益肠散对溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜保护的作用机制

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中药新药与临床药理 2024年第6期35卷 814-821页

作者：刘琴周赛男刘杰民蔺晓源湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 贵州省人民医院贵州贵阳550002

目的通过观察健脾益肠散对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠自噬相关分子表达的影响,探讨其肠黏膜保护的作用机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、健脾益肠散组和柳氮磺吡啶组。采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇溶液复合法建立溃疡性... 详细信息

目的通过观察健脾益肠散对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠自噬相关分子表达的影响,探讨其肠黏膜保护的作用机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、健脾益肠散组和柳氮磺吡啶组。采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇溶液复合法建立溃疡性结肠炎大鼠模型;模型复制成功后灌胃给药,每日1次,持续14 d。观察大鼠一般状况,计算疾病活动指数(DAI)评分;苏木素-伊红(HE)染色法观察结肠组织病理形态;透射电镜观察结肠上皮细胞自噬情况;免疫荧光染色法、蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测结肠组织肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测自噬蛋白5(Atg5)、自噬蛋白7(Atg7)、泛素结合蛋白62(p62)mRNA表达。结果与正常组比较,模型组一般情况较差,DAI评分明显升高(P<0.0001);结肠组织出现明显的上皮细胞损伤,电镜下自噬体的数量明显减少;结肠组织Beclin1、LC3-II/LC3-I蛋白及Atg5、Atg7 mRNA表达明显降低(P<0.0001),p62 mRNA表达明显升高(P<0.0001)。与模型组比较,健脾益肠散组大鼠一般情况明显恢复,DAI评分明显降低(P<0.0001);结肠组织病理损伤有不同程度的改善,电镜下自噬体的数量明显增多;结肠组织Beclin1、LC3-II/LC3-I蛋白及Atg5、Atg7 mRNA表达明显升高(P<0.01,P<0.001,P<0.0001),p62 mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论健脾益肠散可通过上调自噬相关分子Beclin1、LC3、Atg5及Atg7的表达,下调p62的表达,增强自噬以达到保护溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜损伤的作用。

关键词：健脾益肠散溃疡性结肠炎自噬 Beclin1 LC3 Atg5 Atg7 p62 大鼠

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用于经皮给药的脂质纳米给药系统研究进展

中国药学杂志 2024年第6期59卷 486-490页

作者：陆青彭程姜晓夏新华湖南中医药大学药学院长沙410208 湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院) 长沙410002

经皮给药是临床常用的给药方式之一,但存在皮肤渗透率低、药效持续时间短、生物利用率低等局限性。为提高临床疗效,增加患者依从性,应用于经皮给药的脂质纳米给药系统开发受到研究者们的青睐。笔者对用于经皮给药系统的脂质纳米给药系... 详细信息

经皮给药是临床常用的给药方式之一,但存在皮肤渗透率低、药效持续时间短、生物利用率低等局限性。为提高临床疗效,增加患者依从性,应用于经皮给药的脂质纳米给药系统开发受到研究者们的青睐。笔者对用于经皮给药系统的脂质纳米给药系统进行归纳总结,以期为经皮给药制剂的临床应用与脂质纳米给药系统的进一步研究提供参考。

关键词：经皮给药脂质纳米给药系统脂质体固体脂质纳米粒

温阳生肌膏及其有效成分改善线粒体功能减轻高糖诱导的血管内皮细胞损伤

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时珍国医国药 2024年第9期 2053-2057页

作者：陆欣怡周忠志王君白雁瑜金哲羽任花梅谢晨磊丁雅容王巍黄新宇黄新灵邹梅林陈丽湖南中医药大学中医学院湖南中医药大学第一附属医院海南省人民医院湖南中医药大学中西医结合学院湖南中医药大学医学院湖南中医药大学第一中医临床学院

目的探讨温阳生肌膏及其有效成分(肉桂醛、没食子酸)对高糖状态下血管内皮细胞线粒体损伤的保护作用。方法 CCK-8法确定温阳生肌膏有效成分(肉桂醛、没食子酸)干预浓度，将人脐静脉血管内皮细胞(EA-hy926)分为对照组(Con)、高糖组(HG)... 详细信息

目的探讨温阳生肌膏及其有效成分(肉桂醛、没食子酸)对高糖状态下血管内皮细胞线粒体损伤的保护作用。方法 CCK-8法确定温阳生肌膏有效成分(肉桂醛、没食子酸)干预浓度，将人脐静脉血管内皮细胞(EA-hy926)分为对照组(Con)、高糖组(HG)、温阳生肌膏组(WYSJ)、肉桂醛组(CA)、没食子酸组(GA)。以CCK-8法检测细胞增殖活性，成管实验检测细胞成管能力，透射电镜观察细胞线粒体超微结构，DCFH-DA荧光探针检测细胞活性氧(ROS)含量，比色法检测细胞ATP含量。结果 CA组浓度选用10μM,GA组浓度选用5μM。与Con组相比，HG组细胞增殖活性下降(P<0.05);成管能力下降(P<0.05);线粒体肿胀、破裂、数量减少；ROS含量增多(P<0.05);ATP含量减少(P<0.05)。与HG组相比，WYSJ组、CA组、GA组细胞增殖活性加强(P<0.05);成管能力加强(P<0.05);线粒体超微结构损伤改善、数量增加，线粒体自噬增加；ROS含量减少(P<0.05);ATP含量增加(P<0.05)。与CA组和GA组相比，WYSJ组细胞增殖活性较强(P<0.05);成管能力较CA组弱(P<0.05);ROS含量较CA组和GA组多；ATP含量多(P<0.05)。结论温阳生肌膏及其有效成分可能通过清除细胞ROS,改善线粒体功能，增加ATP生成，从而减轻高糖诱导的血管内皮细胞损伤。

关键词：温阳生肌膏肉桂醛没食子酸线粒体血管内皮细胞高糖损伤

人工智能大模型对中医目诊智能化研究的启示（英文）

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Digital Chinese Medicine 2024年第02期 101-107页

作者：高远伍紫炫盛博洋张富程勇晏峻峰彭清华湖南中医药大学中医学院福建中医药大学附属人民医院治未病科湖南中医药大学信息科学与工程学院

目诊是通过观察目来判断全身病证的诊断方法，随着中医（TCM）诊断智能化发展，人工智能（AI）可以提高目诊的准确率和效率。但是，目诊智能化研究还面临着诸多挑战，如缺乏规范化且带有严格标签的数据、多模态信息分析及辨证模型。人... 详细信息

目诊是通过观察目来判断全身病证的诊断方法，随着中医（TCM）诊断智能化发展，人工智能（AI）可以提高目诊的准确率和效率。但是，目诊智能化研究还面临着诸多挑战，如缺乏规范化且带有严格标签的数据、多模态信息分析及辨证模型。人工智能大模型在医学当中的广泛应用为目诊智能化研究提供了新的启示并且带来新的机遇。本研究通过阐述人工智能大模型在中医目诊智能化应用当中的三个关键技术，探讨对目诊智能化研究的启示。首先，基于自监督学习构建目诊数据库以解决缺乏规范化且带有严格标签的数据问题。其次，采用深度神经网络模型的跨模态理解与生成以解决缺乏多模态信息分析的问题。最后，结合知识与数据驱动的诊断模型以解决缺乏辨证模型的问题。总之，目诊智能化研究在大模型的发展浪潮下具有巨大的发展潜力。

关键词：中医目诊人工智能大模型自监督学习深度神经网络

胰源性门静脉高压胃静脉破裂出血危险因素分析及列线图预测模型构建

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中国普通外科杂志 2024年第3期33卷 400-407页

作者：刘鹏向兴华李文斌李国光朱朝庚湖南中医药大学第一附属医院肝胆胰与疝外科湖南长沙410007 湖南省人民医院/湖南师范大学第一附属医院胰脾外科湖南长沙410005

背景与目的:由于近年来胰腺相关疾病的发病率和诊断率逐渐增加,胰源性门静脉高压(PPH)及其并发症的发病率及诊断率也随之增加。PPH可出现腹痛、脾功能亢进、消化道出血等临床表现,胃静脉破裂出血是PPH最严重的并发症,可导致失血性休克,... 详细信息

背景与目的:由于近年来胰腺相关疾病的发病率和诊断率逐渐增加,胰源性门静脉高压(PPH)及其并发症的发病率及诊断率也随之增加。PPH可出现腹痛、脾功能亢进、消化道出血等临床表现,胃静脉破裂出血是PPH最严重的并发症,可导致失血性休克,甚至死亡。而目前尚无公认的标准来预测PPH并发胃静脉破裂出血的风险。因此,本研究探讨PPH胃静脉破裂出血的相关危险因素并建立风险预测模型,为临床该病的防治提供参考。方法:以湖南中医药大学第一附属医院和湖南省人民医院自2012年1月—2022年1月收治的176例PPH患者为研究对象,根据是否并发胃静脉破裂出血分为出血组(24例)和未出血组(152例)。收集两组患者的一般资料:性别、年龄、病因、高血压、糖尿病,实验室结果:脾功能亢进、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、活化部分凝血酶原时间(APTT)与影像学指标:胃左静脉(LGV)内径、胃网膜静脉(GEV)内径、GEV内径/LGV内径比值。采用单因素与多因素Logistic回归分析筛选出PPH并发胃静脉破裂出血的影响因素,建立列线图风险预测模型,并通过受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线和决策曲线评估模型的预测效能、一致性和临床价值。结果:单因素分析显示,糖尿病、脾功能亢进、PT、FIB、LGV内径、GEV内径/LGV内径比值与PPH并发胃静脉破裂出血有关(均P<0.05);多因素Logistic回归显示,糖尿病(OR=0.144,95%CI=0.031~0.675,P=0.014)、LGV内径(OR=3.129,95%CI=1.608~6.090,P=0.001)是PPH并发胃静脉破裂出血的独立危险因素;而FIB(OR=0.580,95%CI=0.348~0.966,P=0.037)、GEV内径/LGV内径比值(OR=0.024,95%CI=0.001~0.696,P=0.030)是PPH并发胃静脉破裂出血的独立保护性因素。纳入以上因素与有临床意义的GEV内径构建PPH胃静脉破裂出血的列线图模型,该模型的ROC曲线下面积为0.954,校准曲线与标准曲线具有很高的拟合度,决策曲线分析显示,当风险阈值在2%~85%之间时,能得到很好的净获益值。结论:糖尿病、LGV内径,FIB、GEV内径/LGV内径比值与PPH并发胃静脉破裂出血密切相关,所建立的列线图风险预测模型可有效识别PPH并发胃静脉破裂出血的高风险患者,可为临床决策提供参考。

关键词：胰腺疾病高血压,门静脉/并发症危险因素列线图

加味补阳还五汤对卒中后抑郁大鼠小胶质细胞极化及突触可塑性的影响

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时珍国医国药 2024年

作者：罗琳黄娟陈博威刘坤湖南中医药大学湖南省第二人民医院

目的探讨加味补阳还五汤改善卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)模型大鼠神经功能和小胶质细胞极化及海马神经元突触可塑性的相关机制。方法使用线栓法构建大鼠大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion model,MCAO)模型... 详细信息

目的探讨加味补阳还五汤改善卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)模型大鼠神经功能和小胶质细胞极化及海马神经元突触可塑性的相关机制。方法使用线栓法构建大鼠大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion model,MCAO)模型,采用孤养和慢性不可预知的温和应激法(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)构建PSD大鼠模型,将PSD模型大鼠分为假手术组(Sham组),模型组(PSD组),盐酸氟西汀组(FLU组),加味补阳还五汤低(BYHD-L)、中(BYHD-M)、高(BYHD-H)剂量组。治疗结束后进行糖水偏好实验、强迫游泳实验,透射电镜观察海马神经突触超微结构;免疫荧光和qPCR检测小胶质细胞M1型(iNOS、TNF-α、IL-1β和IL-6)和M2型(Arg-1、CD206、IL-10、TGF-β)极化指标,免疫组织化学法和蛋白印迹法检测突触前膜蛋白突触素I(Synaptophysin 1,SYN1)、突触后致密蛋白95(postsynaptic density-95,PSD-95)表达水平。结果与假手术组相比,PSD大鼠糖水偏好率降低(P<0.05)、强迫游泳禁止时间延长(P<0.05),小胶质细胞M1型极化增多,SYN1和PSD-95表达降低(P<0.05),海马神经突触数目减少;与模型组比较,加味补阳还五汤高剂量组上述指标均改善,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论加味补阳还五汤可以改善PSD大鼠卒中后抑郁相关行为学变化和神经功能,其机制可能与抑制小胶质细胞过度活化从而改善突触数目和可塑性有关。

关键词：卒中后抑郁小胶质细胞突触可塑性加味补阳还五汤