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基于网络药理学研究滋阴明目汤对高脂饮食小鼠肠道黏膜菌群的影响

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中国微生态学杂志 2024年第9期 993-999+1008页

作者：邓娜易鑫陈美丽湖南中医药大学中医学院长沙市中医医院

目的通过网络药理学和16S rRNA基因测序探究滋阴明目汤干预高脂饮食诱导肥胖小鼠体重和肠道黏膜菌群的影响。方法采用网络药理学预测滋阴明目汤-黄斑变性的潜在功能，将25只4周龄18～22 g的SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组(CN组，... 详细信息

目的通过网络药理学和16S rRNA基因测序探究滋阴明目汤干预高脂饮食诱导肥胖小鼠体重和肠道黏膜菌群的影响。方法采用网络药理学预测滋阴明目汤-黄斑变性的潜在功能，将25只4周龄18～22 g的SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组(CN组，5只)和造模组(20只)，造模组小鼠予高脂饲料喂养12周。造模结束后，选取造模成功小鼠随机分为模型组(HF组，5只)和滋阴明目汤组(ZYMM组，5只)，ZYMM组小鼠以滋阴明目汤干预4周，其余两组灌胃等量无菌水。收集各组小鼠肠道黏膜，高通量测序分析菌群。结果网络药理学分析得到滋阴明目汤-黄斑变性存在糖尿病心肌病、胰岛素抵抗、流体切应力和动脉粥样硬化以及糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等与降脂作用相关的通路。滋阴明目汤干预后，高脂饮食小鼠体重下降。HF组小鼠肠道黏膜菌群中OTU数和alpha多样性均较高。相较于HF组，ZYMM组和CN组小鼠肠道黏膜菌群beta多样性距离较近。Escherichia-Shigella和Lachnospiraceae NK4A136group差异显著，结合LEfSe分析，HF组富集Escherichia-Shigella,ZYMM组富集uncultured bacterium f Lachnospiraceae和Lachnospiraceae NK4A136 group。相关性分析表明，滋阴明目汤给药后小鼠体重与uncultured bacterium f Muribaculaceae和Desulfovibrio丰度呈负相关，同时与uncultured bacterium c subgroup 6丰度呈正相关。结论滋阴明目汤干预后高脂饮食小鼠的肠道致病菌数量下降，有益菌数量增加，其机制主要通过影响Escherichia-Shigella、Desulfovibrio、uncultured bacterium f Muribaculaceae和Lachnospiraceae NK4A136 group改善高脂饮食小鼠肠道微生态，降低体重。

关键词：滋阴明目汤高脂饮食肠道菌群肠道黏膜网络药理学

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基于文献计量学的完带汤研究进展及热点探析

中华养生保健 2024年第12期 74-80页

作者：马扬王子朋吕佳涛李霄文乐兮曾梅艳湖南中医药大学中医学院

目的探索近30年完带汤相关研究领域的发展趋势、研究热点，围绕完带汤进行文献计量学和可视化分析。方法以1993年1月—2023年9月中国知网(CNKI)数据库收录的全部相关文献为对象，进行文献计量学分析。利用CiteSpace6.2.R4软件对文献进... 详细信息

目的探索近30年完带汤相关研究领域的发展趋势、研究热点，围绕完带汤进行文献计量学和可视化分析。方法以1993年1月—2023年9月中国知网(CNKI)数据库收录的全部相关文献为对象，进行文献计量学分析。利用CiteSpace6.2.R4软件对文献进行机构、作者和关键词的共现分析，并绘制出相关的图谱。结果共获得331篇相关文献，通过计量分析得到高产作者及高产研究机构。可视化分析结果表明，湖南中医药大学与广州中医药大学是发文最多的机构，尤昭玲是发表最多文献的作者。由关键词分析可知，目前围绕完带汤的研究热点是复发性外阴阴道假丝酵母菌病、文献研究、阴道微生态等。结论本研究利用CiteSpace软件分析了完带汤研究领域的现状和发展趋势，为完带汤的临床应用及进一步开发提供了新的思路和参考。

关键词：完带汤文献计量学 CiteSpace 带下病研究热点

我国糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证研究的可视化分析

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中国医药导报 2024年第23期21卷 14-21页

作者：谭曦吴吉龙刘婷邓奕辉湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208

目的探索糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证的研究现状和前沿热点,为该病的临床治疗和机制研究提供参考。方法检索中国知网、万方数据知识服务平台及维普网,收集2000年1月至2024年5月有关糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证的相关文献。运用EndNote 2... 详细信息

目的探索糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证的研究现状和前沿热点,为该病的临床治疗和机制研究提供参考。方法检索中国知网、万方数据知识服务平台及维普网,收集2000年1月至2024年5月有关糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证的相关文献。运用EndNote 21对检索结果进行去重和筛选,纳入符合标准的文献。利用CiteSpace 6.3.R2可视化分析软件,对作者合作网络、机构合作网络及高频、高中心性关键词进行知识图谱绘制和科学计量学分析。结果共纳入376篇相关文献,年发文量呈现波动上升的总体趋势。李平为该领域最高产作者,发文量为4篇,已初步形成核心作者群。长春中医药大学与辽宁中医药大学为发文量最多的研究机构。形成临床观察、早期糖尿病肾病等高中心性关键词。研究热点集中在临床研究、中医证型与证候、作用机制及数据挖掘等方向。突现强度最大的3个关键词为益气养阴活血汤、中医药疗法、数据挖掘。结论糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证的相关研究尚需完善;未来应加强合作,开展循证医学水准的大样本量、多中心临床研究,完善糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证的治疗研究体系,为中医药现代化发展提供高质量临床证据支持。

关键词：可视化糖尿病肾病 CiteSpace 气阴两虚兼血瘀证中医药

基于NF-κB炎性通路探讨纤维连接蛋白在冠心病血瘀证的作用

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中国中医基础医学杂志 2024年第9期30卷 1545-1553页

作者：罗晓欣肖隋熙马至言胡伊蕾高翎薇简维雄湖南中医药大学中医学院长沙410208

目的利用蛋白质组学寻找抑制冠心病血瘀证的关键蛋白,并基于核因子(nuclear factoer,NF)-κB炎性信号通路和内皮细胞活化模型验证关键蛋白纤维连接蛋白(fibronectin 1,Fn)对冠心病血瘀证的作用。方法将冠心病血瘀证组患者和健康组受试... 详细信息

目的利用蛋白质组学寻找抑制冠心病血瘀证的关键蛋白,并基于核因子(nuclear factoer,NF)-κB炎性信号通路和内皮细胞活化模型验证关键蛋白纤维连接蛋白(fibronectin 1,Fn)对冠心病血瘀证的作用。方法将冠心病血瘀证组患者和健康组受试者的血清进行相对定量和绝对定量的等比标记(isobaic tag for relative and absolute quantitation,ITRAQ)蛋白质组学分析,将差异蛋白进行GO和KEGG功能富集,从与冠心病密切相关的富集通路中筛选出关键蛋白Fn。利用60μg/mL的氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)构建内皮细胞活化模型,在内皮细胞活化模型中加入5μg/cm 2、10μg/cm 2、20μg/cm 23个浓度的血浆Fn或敲减内皮细胞来源Fn的方法进行干预。分组为空白组、模型组、对照组、Fn EC-KD组、Fn5组、Fn10组、Fn20组。细胞免疫荧光法和免疫印迹法检测各组NF-κB核位移和NF-κB蛋白表达水平,ELISA检测培养上清的细胞间黏附分子(intercellular cell adhesion molecule,ICAM)-1、血管细胞黏附分子(vascular cell adhesion molecule,VCAM)-1、前列环素I-2(Proataglandin-I-2,PGI2)、内皮素的蛋白含量。结果血清蛋白质组学结果显示健康组和冠心病血瘀证组存在121种差异蛋白,51种血瘀证组下调蛋白集中在补体与凝血级联、肌动蛋白细胞骨架的调节、细胞外基质-受体相互作用途径,70种血瘀证组上调蛋白集中在补体与凝血级联、肌动蛋白细胞骨架的调节、血小板活化、吞噬体途径。Fn与冠心病密切相关且在血瘀证患者中下调。细胞实验发现各组NF-κB总蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与空白组比较模型组NF-κB核位移增强,ICAM-1、VCAM-1、内皮素表达上调,PGI2分泌下调(P<0.05);与模型组比较,Fn5组、Fn10组、Fn20组NF-κB核位移减弱,VCAM-1、ICAM-1、内皮素分泌下调(P<0.05),PGI2分泌显著上调(P<0.05);与模型组比较,Fn EC-KD组NF-κB核位移减弱,VCAM-1、ICAM-1、内皮素表达含量明显降低(P<0.05),PGI2表达明显增加(P<0.05)。结论血浆Fn抑制内皮细胞活化和功能障碍,内皮细胞来源的Fn促进内皮细胞活化和功能障碍。

关键词：血浆蛋白质组学冠心病血瘀证血浆纤维连接蛋白内皮细胞活化

基于代谢组学的中药治疗冠心病血瘀证生物标志物分析

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辽宁中医杂志 2024年第2期51卷 17-24,I0003页

作者：周曼丽俞赟丰张宜帆赵彦禛简维雄湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学国家重点学科中医诊断学湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的基于代谢组学探讨中药(复方/单味)治疗不同物种冠心病血瘀证所筛选到的差异代谢物,总结中药干预冠心病血瘀证后的生物标志物及相关代谢通路。方法从中国知网、万方数据库、维普数据库、Embase、PubMed、the Cochrane Library、Web o... 详细信息

目的基于代谢组学探讨中药(复方/单味)治疗不同物种冠心病血瘀证所筛选到的差异代谢物,总结中药干预冠心病血瘀证后的生物标志物及相关代谢通路。方法从中国知网、万方数据库、维普数据库、Embase、PubMed、the Cochrane Library、Web of Science数据库中检索中药(复方/单味)治疗冠心病血瘀证的代谢组学研究。对纳入研究的差异代谢物进行汇总,采用HMDB、PubChem-Subs、KEGG对代谢物进行分子注释,对代谢产物路径可视化采用metPA网络软件进行分析。结果共有8篇文献纳入本研究,计算两个物种中重复出现的代谢物后共统计89个差异代谢物主要参与了132条代谢路径。通过通路拓扑分析并对重复出现的代谢通路进行统计后选出了16条P值小于0.05的代谢通路作为中药(复方/单味)治疗不同物种冠心病血瘀证的代谢通路。对于富集于各条差异性代谢通路上的代谢物,在不同研究中重复筛选到的代谢物包括:苯丙氨酸,谷氨酰胺,甘氨酸,柠檬酸盐,胆碱,肌酸,乳酸,葡萄糖,花生四烯酸。结论各项研究中用于冠心病血瘀证治疗的中药(复方/单味)以血府逐瘀汤、桃红四物汤、养心通脉方、苏合香为代表。基于代谢组学的中药(复方/单味)治疗冠心病血瘀证的生物信息学分析显示其作用机制涉及糖代谢、氨基酸代谢、能量代谢、胆碱代谢、脂肪酸代谢等多个方面,基本的三羧酸循环参与其中。总结了包括乳酸、葡萄糖、柠檬酸、花生四烯酸、肌酸、苯丙氨酸、胆碱、谷氨酰胺以及甘氨酸在内的与冠心病血瘀证证候相关的差异代谢物。

关键词：代谢组学中药冠心病血瘀证生物标志物作用机制

二氧化硅所致急性肺损伤大鼠肺部菌群的特征及相关性分析

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中国病理生理杂志 2024年第1期40卷 81-88页

作者：刘畅芦俊肖荣李迎秋胡珏田玥张家祥卢芳国湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南省中西医结合医院湖南长沙410006

目的:探讨二氧化硅所致急性肺损伤大鼠模型的潜在生物学机制。方法:采用随机数字表法,将SD雄性大鼠划分为正常组和二氧化硅模型组。正常组经气管灌注1 mL生理盐水,模型组经气管灌注等体积50 g/L二氧化硅混悬液。7 d后收集大鼠肺组织和血... 详细信息

目的:探讨二氧化硅所致急性肺损伤大鼠模型的潜在生物学机制。方法:采用随机数字表法,将SD雄性大鼠划分为正常组和二氧化硅模型组。正常组经气管灌注1 mL生理盐水,模型组经气管灌注等体积50 g/L二氧化硅混悬液。7 d后收集大鼠肺组织和血清,HE染色观察肺组织病理学特征,免疫组化检测肺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)和消皮素D(GSDMD)蛋白表达,ELISA法检测血清炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;从肺组织中提取细菌DNA,经16S核糖体RNA基因测序描述肺部菌群组成变化,通过生物信息学分析比较正常组与模型组菌群结构差异。结果:与正常组相比,模型组大鼠体重增长率和肺指数有显著差异;模型组大鼠肺组织HE染色可见肺泡结构破坏,炎性细胞增多;模型组大鼠肺组织NLRP3和GSDMD蛋白表达水平均显著升高,血清IL-1β、IL-18和TNF-α水平均显著升高。与正常组相比,模型组丰度增加的肺部菌群为双歧杆菌(Bifidobacterium)、Clostridium sensu stricto 1和副萨特氏菌(Parasutterella)。Spearman相关性分析显示,肺组织NLRP3/GSDMD和血清IL-1β/TNF-α水平与Parasutterella丰度呈正相关。结论:二氧化硅所致急性肺损伤的病理机制可能与肺部菌群结构差异和炎症水平升高有关。因此,调节肺部菌群可能为防治二氧化硅引起的急性肺损伤提供新的思路。

关键词：矽肺二氧化硅急性肺损伤肺部菌群

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基于FAK/Src/ERK通路探讨西黄丸对前列腺癌血管生成、侵袭和转移的影响

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中国中药杂志 2024年

作者：龙衍罗新筠邹博戴新军符方智王彪吴丽通吴泳蓉周青田雪飞湖南中医药大学第一附属医院男科湖南中医药大学中医方证与转化湖南省重点实验室湖南中医药大学中医药防治肿瘤机理重点研究室湖南中医药大学附属浏阳市中医医院湖南中医药大学湖南省高校中医肿瘤重点实验室湖南中医药大学中医学院湖南中医药大学中西医结合学院

基于局部黏着斑激酶（FAK)/类固醇受体共激活因子(Src）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）通路，探讨西黄丸对前列腺癌血管生成、侵袭、转移的影响。利用液相色谱串联质谱技术对西黄丸的活性成分进行分析与鉴定。利用R语言和Perl语言程序等生... 详细信息

基于局部黏着斑激酶（FAK)/类固醇受体共激活因子(Src）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）通路，探讨西黄丸对前列腺癌血管生成、侵袭、转移的影响。利用液相色谱串联质谱技术对西黄丸的活性成分进行分析与鉴定。利用R语言和Perl语言程序等生物信息学技术分析前列腺癌相关靶点与西黄丸潜在靶点之间的相互作用。利用PC3细胞制备裸小鼠前列腺癌皮下移植瘤模型，验证西黄丸的疗效和分子机制。体外细胞实验分别采用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)法、免疫组化、Transwell、划痕实验、实时定量逆转录PCR和蛋白免疫印记实验检测西黄丸萃取液对前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的以及FAK/Src/ERK通路相关靶点的影响。液相色谱串联质谱技术鉴定出没食子酸、龙胆酸、青蒿烯、柯里拉京、苯基丁酮-葡萄糖苷、青蒿烯、苏木酸、arecoic acid B等在内的西黄丸99种活性成分。基于西黄丸活性成分的网络药理学分析显示，FAK/Src/ERK信号通路为其抗前列腺癌的关键途径。体内外实验结果验证，西黄丸能够抑制PC3、LNCaP细胞的增殖、侵袭与迁移，并抑制PC3皮下移植瘤的生长，降低FAK/Src/ERK信号通路相关蛋白表达水平。综上，通过调节FAK/Src/ERK通路抑制血管生成、侵袭、迁移是西黄丸抗前列腺癌机制之一。

关键词：西黄丸前列腺癌 FAK/Src/ERK信号通路血管生成

原发性开角型青光眼发病机制的文献计量学研究

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国际眼科杂志 2024年第5期24卷 704-711页

作者：陈妍卓洪民张帆周璇袁承志喻昶彭清华曾梅艳宋厚盼湖南中医药大学中医学院湖南省长沙市410208 湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室湖南省长沙市410208 湖南中医药大学医学院湖南省长沙市410208 湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南省长沙市410208

目的:通过对近30 a原发性开角型青光眼(POAG)发病机制的相关文献进行计量学分析,了解该领域的发文情况、研究趋势及研究前沿和热点。方法:检索1993-09-01/2023-09-01在中国知网(CNKI)和Web of Science(WOS)核心数据库已发表的关于POAG... 详细信息

目的:通过对近30 a原发性开角型青光眼(POAG)发病机制的相关文献进行计量学分析,了解该领域的发文情况、研究趋势及研究前沿和热点。方法:检索1993-09-01/2023-09-01在中国知网(CNKI)和Web of Science(WOS)核心数据库已发表的关于POAG发病机制的相关文献986篇,运用CiteSpace(6.2.R.4)和VOSviewer(1.6.18)软件对检索到的文献进行知识图谱分析,分析内容包括发文量、作者、研究机构、国家/地区及关键词。结果:美国发文量最多(243篇),其次是中国(121篇)。发文量最多的国外研究机构是哈佛大学(37篇),国内研究机构中山医科大学中山眼科中心、首都医科大学宣武医院眼科、北京医科大学第一医院眼科发文量并列第一。Louis R. Pasquale(21篇)是最高产的英文作者,王宁利是该领域最活跃的中国研究者。该领域研究的关键词包括小梁网、眼压、房水、糖皮质激素、血液流变学等。结论:POAG发病机制的研究正处于蓬勃发展期,美国在该领域发文量最大,哈佛大学为该领域的领先研究机构。POAG研究领域的研究重点已经从结构方面转移到了基因层面,基因研究与中医治疗在该领域具有广泛的应用前景。

关键词：原发性开角型青光眼发病原因发病机制文献计量学可视化分析

纤维蛋白原过表达冠心病血瘀证大鼠的血小板代谢组学分析

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：周曼丽祝家乐王丽萍简维雄湖南中医药高等专科学校湖南中医药大学湖南医药学院

目的：通过分析纤维蛋白原（FIB）过表达冠心病（CHD）血瘀证（BSS）大鼠血小板的代谢组学特征，挖掘潜在生物标志物，探讨FIB过表达对CHD-BSS的影响机制。方法：将20只雄性SD大鼠随机分为BSS组和BSS+FIB过表达组（BSS+FIB组）各10只。B... 详细信息

目的：通过分析纤维蛋白原（FIB）过表达冠心病（CHD）血瘀证（BSS）大鼠血小板的代谢组学特征，挖掘潜在生物标志物，探讨FIB过表达对CHD-BSS的影响机制。方法：将20只雄性SD大鼠随机分为BSS组和BSS+FIB过表达组（BSS+FIB组）各10只。BSS+FIB组与BSS组均在高脂饮食喂养的基础上结合维生素D3灌胃及异丙肾上腺素皮下注射，BSS+FIB组大鼠在造模初期利用腺相关病毒（AAV）转染以过表达FIB。分别采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠肝脏和血浆样本中FIB的过表达水平；利用超高效液相-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS）研究大鼠血小板样本的代谢物特征，结合主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）筛选组间差异代谢物并进行通路富集分析，利用受试者工作特征曲线（ROC）对潜在生物标志物用于CHD-BSS诊断的准确性进行评价；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测血小板磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（p-AMPK）/腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、微管相关蛋白1轻链3（LC3）Ⅱ/Ⅰ和p62蛋白的水平。结果：ELISA结果显示，与BSS组比较，BSS+FIB组肝脏和血浆样品中FIB的表达水平均明显升高（P<0.05，P<0.01）；Real-time PCR结果也显示，与BSS组比较，BSS+FIB组肝脏FIB mRNA的表达水平显著升高（P<0.01）。血小板代谢组学结果显示，BSS+FIB组与BSS组的代谢轮廓存在差异，共筛选出25条显著富集的代谢通路，在通路富集的8个代谢物中，尿酸、鸟苷、核糖1-磷酸水平上调，二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）、二磷酸鸟苷（GDP）、腺苷酸琥珀酸、去甲肾上腺素水平下调；Western blot结果显示，与BSS组比较，BSS+FIB组大鼠血小板p-AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高，但差异均无统计学意义，而p-mTOR/mTOR和p62蛋白的表达水平显著降低（P<0.01）。结论：FIB过表达可改变CHD-BSS大鼠模型的代谢特征，涉及血管内皮损伤、血小板活化及心肌功能受损多个方面。其中，FIB的过表达可能会强化血小板自噬的发生，进而诱导血小板活化，促使血栓形成。

关键词：纤维蛋白原过表达冠心病血瘀证血小板代谢组学生物标志物自噬