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环状RNA的成环策略及环状RNA疫苗的研究现状

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中国病理生理杂志 2024年第10期40卷 1950-1956页

作者：高子寒魏科湖南中医药大学医学院湖南长沙410208

环状RNA相比于线性mRNA具有合成简单、稳定性高、持续稳定表达等优点,在感染性微生物疫苗、肿瘤疫苗和蛋白替代疗法等领域具有巨大的应用潜力,近年来已经成为核酸药物领域研究的热点。RNA的环化技术是体外合成环状RNA的关键,成环策略对... 详细信息

环状RNA相比于线性mRNA具有合成简单、稳定性高、持续稳定表达等优点,在感染性微生物疫苗、肿瘤疫苗和蛋白替代疗法等领域具有巨大的应用潜力,近年来已经成为核酸药物领域研究的热点。RNA的环化技术是体外合成环状RNA的关键,成环策略对环化效率、免疫原性和蛋白表达量等产生重要影响,制约了环状RNA的基础研究和临床应用。本文系统综述了化学法、酶法和核酶法等几种成环策略,重点分析各成环技术的反应条件、成环工艺、环化效率和免疫原性等。目前,理想的环状RNA成环策略还面临诸多挑战,但是研究证实环状RNA在新型冠状病毒肺炎疫苗、抗肿瘤疫苗等领域比线性mRNA具有更好的稳定性和更强的免疫效应,成为一种极具潜力的新型核酸药物分子,为优化和拓展环状RNA的研究和临床应用提供参考。

关键词：环状RNA 核酸药物 RNA疫苗新型冠状病毒肺炎(2019冠状病毒病)

《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑损伤及血管新生的影响

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中国中药杂志 2024年第8期49卷 2178-2187页

作者：罗政李定祥蔡昱哲刘艺璇阳晶晶吴琴张亚男陈静邓奕辉湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208

旨在探讨《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑缺血性损伤及血管新生的影响。以SD大鼠为研究对象,随机分为6组:假手术组,模型组,续命汤低、中、高剂量组,丁苯酞组。大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型成... 详细信息

旨在探讨《古今录验》续命汤对急性脑梗死大鼠脑缺血性损伤及血管新生的影响。以SD大鼠为研究对象,随机分为6组:假手术组,模型组,续命汤低、中、高剂量组,丁苯酞组。大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型成功建立后,各组大鼠每天分别灌胃给予蒸馏水,续命汤5.13、10.26、20.52 g·kg~(-1)药液、丁苯酞混悬液(0.06 g·kg~(-1))。连续干预7 d后,进行末次神经功能评分,处死所有大鼠,采集脑组织样本。通过神经功能评分和2,3,5-氯化三苯基四氮染色评估脑缺血损伤程度;苏木素-伊红染色观察脑组织病理学形态改变;透射电子显微镜观察缺血半暗区皮层脑组织神经元和微血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)超微结构;免疫荧光检测缺血半暗区皮层脑组织血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)和造血祖细胞抗原CD34(hematopoietic progenitor cell antigen CD34,CD34)的蛋白表达情况;实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测缺血半暗区皮层脑组织Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)、血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)、VEGF受体2(VEGF receptor 2,VEGFR2)mRNA和蛋白的表达情况。结果表明,与假手术组相比,模型组大鼠神经功能评分、脑梗死面积显著升高(P<0.01);缺血半暗区皮层脑组织病理学形态结构、神经元与微血管ECs超微结构受损;RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 mRNA表达均显著升高(P<0.01);vWF、CD34、RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2蛋白表达均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,续命汤高剂量组、丁苯酞组神经功能缺损评分和脑梗死面积显著降低(P<0.01);缺血半暗区皮层脑组织病理学形态结构、神经元与微血管ECs超微结构损伤情况得到改善;RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2 mRNA表达显著升高(P<0.01);vWF、CD34、RUNX1、VEGF、Ang-1、Ang-2、VEGFR2蛋白表达也显著升高(P<0.01)。上述结果表明,《古今录验》续命汤可以促进MCAO大鼠缺血半暗区皮层脑组织的血管新生,加快侧支循环的建立,以减轻神经功能障碍,可能与RUNX1/VEGF途径有关。

关键词：急性脑梗死《古今录验》续命汤血管新生 RUNX1 VEGF

丹参通络解毒汤对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及自噬和血管生成因子的影响

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时珍国医国药 2024年第2期35卷 293-296页

作者：李彩云刘仕成李鑫辉湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005

目的探讨丹参通络解毒汤(DSTL)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及自噬和血管生成因子的影响。方法将雄性SD大鼠随机平均分成5组:假手术组(Sham组)、MIRI模型组(MIRI组)、MIRI模型+DSTL组(DSTL组)、MIRI模型+自噬抑制剂3-甲基... 详细信息

目的探讨丹参通络解毒汤(DSTL)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及自噬和血管生成因子的影响。方法将雄性SD大鼠随机平均分成5组:假手术组(Sham组)、MIRI模型组(MIRI组)、MIRI模型+DSTL组(DSTL组)、MIRI模型+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(3-MA组)以及MIRI模型+自噬激动剂雷帕霉素组(Rap组),每组10只。采用苏木精-伊红(HE)染色评估心肌的病理变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌细胞损伤标志物肌酸激酶MB同功酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(CTnI)的水平,免疫组织化学染色检测Beclin1的表达和分布,蛋白免疫印迹(WB)测定p62、内皮一氧化氮合成酶(eNOS)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。结果MIRI组大鼠在显微镜下显示严重的心肌细胞坏死和炎症浸润,CK-MB、CTnI和Beclin1的水平明显升高(P<0.01),p62、eNOS和VEGF的水平显著降低(P<0.01),而DSTL组的大鼠显示较轻微的病理变化,CK-MB、CTnI和Beclin1的水平下降(P<0.01),p62、eNOS和VEGF的水平升高(P<0.01);DSTL组的Beclin1和p62的水平介于3-MA组和Rap组(P<0.01),而eNOS和VEGF的水平最高(P<0.01)。结论DSTL能适度抑制自噬,促进血管生成因子的产生,从而减轻MIRI,保护大鼠心肌细胞。

关键词：丹参通络解毒汤心肌缺血再灌注损伤自噬血管新生因子

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315例冠心病患者舌象特征客观化研究

中医杂志 2024年第9期65卷 921-927页

作者：段梦遥王楚皓谈宇权廉坤寿鑫甜姜泱毛伯 胡志希湖南中医药大学中医学院湖南省长沙市410208 北京中医药大学中医学院北京中医药大学生命科学学院中国中医科学院西苑医院湖南省中西医结合医院

目的探究冠心病患者的舌象客观化特征。方法纳入冠心病患者315例设为冠心病组,健康体检受试者211例设为健康对照组。另根据315例冠心病患者常见合并病(原发性高血压、颈动脉粥样硬化、2型糖尿病、脂肪肝、高脂血症、心力衰竭、脑梗死)情... 详细信息

目的探究冠心病患者的舌象客观化特征。方法纳入冠心病患者315例设为冠心病组,健康体检受试者211例设为健康对照组。另根据315例冠心病患者常见合并病(原发性高血压、颈动脉粥样硬化、2型糖尿病、脂肪肝、高脂血症、心力衰竭、脑梗死)情况,按照其是否存在分为合并该疾病组和非合并该疾病组。采用TFDA-1型舌诊仪采集舌象图像,对舌质(TB)、舌苔(TC)特征进行描述,比较色度指标中RGB、HIS、Lab颜色空间(R,红色;G,绿色;B,蓝色;H,色度;I,亮度;S,饱和度;L,明度;a,红色-绿色轴;b,黄色-蓝色轴),舌苔厚薄指标(per-All),纹理指标中对比度(CON)、角度方向二阶矩(ASM)、熵值(ENT)、均值(MEAN)。结果与健康对照组比较,冠心病组舌质特征指标TB-R、TB-G、TB-B、TB-I、TB-L偏低,TB-H、TB-b偏高;舌苔特征指标TC-R、TC-B偏低,TC-CON、TC-MEAN、TC-H、TC-b偏高(P<0.05或P<0.01)。冠心病合并原发性高血压组较非合并原发性高血压组,per-All、TB-G、TB-L偏高,TB-a、TC-a偏低(P<0.05);合并颈动脉粥样硬化组较非合并颈动脉粥样硬化组,TB-CON、TB-ENT、TB-MEAN偏高,TB-ASM偏低(P<0.05或P<0.01);合并2型糖尿病组较非合并2型糖尿病组,per-All偏低,TB-H偏高(P<0.05或P<0.01);合并脂肪肝组较非合并脂肪肝组,TB-CON、TB-MEAN、TB-ENT偏高,TB-ASM、TC-S偏低(P<0.05或P<0.01);合并高脂血症组较非合并高脂血症组,TB-S、TB-a偏低(P<0.05);合并心力衰竭组较非合并心力衰竭组,TB-R、TB-G、TB-I、TB-L偏低,TB-a偏高(P<0.05或P<0.01);合并脑梗死组较非合并脑梗死组,TC-CON、TC-ENT、TC-MEAN偏高,TC-ASM偏低(P<0.05或P<0.01)。结论冠心病患者比健康人舌色更暗,舌苔纹理粗糙。相较冠心病非合并相关疾病者,冠心病合并原发性高血压者舌色更淡、舌苔更厚,合并颈动脉粥样硬化者舌质纹理更粗糙,合并2型糖尿病者舌苔更薄,合并脂肪肝者舌质纹理更粗糙、苔色更白,合并高脂血症时和心力衰竭者舌色更淡,合并脑梗死者舌苔纹理更粗糙。

关键词：冠心病舌象客观化舌诊

滋阴明目丸通过激活音猬因子信号通路对小鼠视网膜色素变性的改善作用

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中成药 2024年第8期46卷 2551-2561页

作者：曾梅艳熊萌宋厚盼欧晨符超君彭清华秦裕辉湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的探究滋阴明目丸对小鼠视网膜色素变性(RP)的改善作用及其可能机制。方法将RP转基因小鼠(rd10)随机分为模型组、乐盯组(0.15 g/kg)和滋阴明目丸低、高剂量组(4.50、9.00 g/kg),以C57BL/6小鼠为正常组,每组12只。HE染色检测小鼠视网... 详细信息

目的探究滋阴明目丸对小鼠视网膜色素变性(RP)的改善作用及其可能机制。方法将RP转基因小鼠(rd10)随机分为模型组、乐盯组(0.15 g/kg)和滋阴明目丸低、高剂量组(4.50、9.00 g/kg),以C57BL/6小鼠为正常组,每组12只。HE染色检测小鼠视网膜组织病理改变,视网膜电图(ERG)检测视功能,光学相干断层扫描(OCT)观察小鼠眼底表现并检测视网膜厚度,激光散斑血流技术检测小鼠视网膜血液灌注量,数字PCR检测Shh信号通路信号分子Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin mRNA表达,免疫荧光染色检测Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin蛋白表达。结果与正常组比较,模型小鼠眼底和视网膜组织均发生病理性改变,ERG a波和b波振幅降低(P<0.01),视网膜厚度减少(P<0.01),视网膜血液灌注量降低(P<0.01),视网膜Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin mRNA和蛋白表达均降低(P<0.01)。与模型组比较,滋阴明目丸各剂量组和乐盯组小鼠眼底和视网膜组织病理性改变均得到改善,视网膜厚度增加(P<0.01),视网膜血流量升高(P<0.01),ERG a波和b波振幅增加(P<0.01),视网膜Shh、Ptc、Smo、Gli1、N-myc、Cyclin mRNA和蛋白表达均升高(P<0.01)。结论滋阴明目丸可增加视网膜厚度和血流量,改善眼底病理改变和视功能,呈现出较好的延缓RP的作用,其机制可能与激活Shh信号通路有关。

关键词：滋阴明目丸视网膜色素变性 rd10 视功能 Shh信号通路

脑泰方对脑缺血再灌注损伤小胶质细胞极化及胶质瘢痕的影响

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 989-999页

作者：刘吉勇张文丽廖君胡立娟王国佐葛金文梅志刚湖南中医药大学中医学院中医诊断学湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005 湖南中医药大学中西医结合学院中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南长沙410208

探讨脑泰方(NTF)对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠小胶质细胞极化及胶质瘢痕相关蛋白的影响。用大脑中动脉阻塞/复灌注方法建立大鼠CIRI模型。将造模成功的48只大鼠随机分为脑缺血再灌注模型7 d组(mo... 详细信息

探讨脑泰方(NTF)对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠小胶质细胞极化及胶质瘢痕相关蛋白的影响。用大脑中动脉阻塞/复灌注方法建立大鼠CIRI模型。将造模成功的48只大鼠随机分为脑缺血再灌注模型7 d组(model 7 d)、脑缺血再灌注模型14 d组(model 14 d)、脑泰方+脑缺血再灌注模型7 d组(NTF 7 d)、脑泰方+脑缺血再灌注模型14 d组(NTF 14 d),每组12只,另设12只SD大鼠为假手术组(sham)。NTF治疗组给予NTF混悬液27 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,sham与model 7 d、model 14 d每天给予同体积生理盐水,连续灌胃7、14 d。干预结束,各组大鼠进行Longa评分;2,3,5-三苯四唑氯(TTC)染色法检测脑梗死面积;水迷宫实验、旷场实验评估大鼠空间学习记忆和认知功能以及焦虑程度;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脑组织形态结构及损伤情况;免疫荧光检测活化星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达和胶质瘢痕情况;免疫印迹法检测脑皮质瘢痕相关蛋白GFAP、神经蛋白聚糖(neurocan)、磷酸蛋白聚糖(phosphacan),小胶质细胞极化蛋白CD206、精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)及炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-4的表达情况。与sham比较,model 7 d及model 14 d大鼠均出现不同程度的脑梗死,脑皮质及神经元海马组织病理损伤严重,神经功能缺损,空间学习记忆及认知功能障碍及焦虑严重,星形胶质细胞增生及半暗带胶质瘢痕厚度均增加,IL-1β、IL-6表达升高,脑皮质GFAP、neurocan、phosphacan、CD206、Arg-1蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,NTF 7 d及NTF 14 d大鼠空间学习记忆和认知功能改善,焦虑减轻,神经功能改善,脑梗死体积减少,星形胶质细胞增生及半暗带胶质瘢痕厚度均减少,脑皮质组织GFAP、neurocan、phosphacan、IL-6、IL-1β表达降低,IL-4、CD206、Arg-1表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。NTF对CIRI具有神经保护作用,能诱导小胶质细胞向M2型极化,抑制炎症反应,减轻胶质瘢痕的形成。

关键词：中风脑缺血再灌注胶质瘢痕小胶质细胞脑泰方

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掌法七十二格之手诊九宫八卦学术思想探微

中华中医药杂志 2024年第4期39卷 1650-1656页

作者：王若冲孙一珂高冉秦雨筱贾博涵张亚雯马淑然刘雷蕾北京中医药大学中医学院北京102488

手诊九宫八卦学说是将掌部按九宫八卦分区后,观察色泽、形态、纹路等信息的特色诊法,是手诊的主流学说之一。掌法七十二格是唐代后期流传的一系列手图,是手诊九宫八卦学说的重要理论渊源。然而,目前对掌法七十二格与手诊九宫八卦学说的... 详细信息

手诊九宫八卦学说是将掌部按九宫八卦分区后,观察色泽、形态、纹路等信息的特色诊法,是手诊的主流学说之一。掌法七十二格是唐代后期流传的一系列手图,是手诊九宫八卦学说的重要理论渊源。然而,目前对掌法七十二格与手诊九宫八卦学说的研究尚不充分。文章基于掌法七十二格的发展渊源、诊断原则及诊断内容三个维度,以九宫八卦为核心,着重论述相关生理、病理掌图,并将部分掌图的社会表象与人体生理、病理状态相结合,从而探析掌法七十二格中所蕴含着的手诊九宫八卦学术思想,以期为手诊法的溯流与诊断研究提供参考。

关键词：手诊掌法七十二格九宫八卦手相望诊

复原活血汤影响TGF-β1/Smad3及TGF-β1/p38通路抗小鼠肝纤维化的作用及机制

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中华中医药杂志 2024年第2期39卷 750-755页

作者：安志强柏妤全王清兰上海中医药大学中医学院上海201203

目的:探讨复原活血汤通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad3及TGF-β1/p38通路抗小鼠肝纤维化的作用及机制。方法:24只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组、复原活血汤组、模型组、CCl4+复原活血汤组。模型组和CCl4+复原活血汤组小鼠腹腔注射... 详细信息

目的:探讨复原活血汤通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad3及TGF-β1/p38通路抗小鼠肝纤维化的作用及机制。方法:24只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组、复原活血汤组、模型组、CCl4+复原活血汤组。模型组和CCl4+复原活血汤组小鼠腹腔注射含25%CCl4的玉米油溶液,每周2次,连续6周。空白组、复原活血汤组腹腔注射等量玉米油。从造模第3周开始,复原活血汤组、CCl4+复原活血汤组每天以复原活血汤灌胃,共4周。后进行HE染色、天狼猩红染色,羟脯氨酸(Hyp)含量检测,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平检测,以评价肝组织炎症损伤和胶原沉积变化;Western Blot及免疫组化法检测α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ)蛋白表达;Western Blot检测TGF-β1、p38、p-p38、JNK、p-JNK、Smad3、p-Smad3蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组纤维沉积加重,血清中ALT、AST含量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,CCl4+复原活血汤组小鼠肝细胞变性、坏死及纤维化组织增生程度均明显减轻,血清ALT、AST、Hyp含量显著降低(P<0.05),肝组织中α-SMA、Collagen-Ⅰ、TGF-β1、p-p38、p-Smad3、p-JNK蛋白水平均显著降低(P<0.01)。结论:复原活血汤具有较好的抗CCl4诱导小鼠肝纤维化的作用,其作用机制可能与下调TGF-β1/Smad3及TGF-β1/p38通路抑制肝星状细胞活化相关。

关键词：复原活血汤肝星状细胞肝纤维化 TGF-β1/Smad3通路 TGF-β1/p38通路机制四氯化碳胶原沉积

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基于文献计量学的完带汤研究进展及热点探析

中华养生保健 2024年第12期 74-80页

作者：马扬王子朋吕佳涛李霄文乐兮曾梅艳湖南中医药大学中医学院

目的探索近30年完带汤相关研究领域的发展趋势、研究热点，围绕完带汤进行文献计量学和可视化分析。方法以1993年1月—2023年9月中国知网(CNKI)数据库收录的全部相关文献为对象，进行文献计量学分析。利用CiteSpace6.2.R4软件对文献进... 详细信息

目的探索近30年完带汤相关研究领域的发展趋势、研究热点，围绕完带汤进行文献计量学和可视化分析。方法以1993年1月—2023年9月中国知网(CNKI)数据库收录的全部相关文献为对象，进行文献计量学分析。利用CiteSpace6.2.R4软件对文献进行机构、作者和关键词的共现分析，并绘制出相关的图谱。结果共获得331篇相关文献，通过计量分析得到高产作者及高产研究机构。可视化分析结果表明，湖南中医药大学与广州中医药大学是发文最多的机构，尤昭玲是发表最多文献的作者。由关键词分析可知，目前围绕完带汤的研究热点是复发性外阴阴道假丝酵母菌病、文献研究、阴道微生态等。结论本研究利用CiteSpace软件分析了完带汤研究领域的现状和发展趋势，为完带汤的临床应用及进一步开发提供了新的思路和参考。

关键词：完带汤文献计量学 CiteSpace 带下病研究热点