三七总皂苷通过激活Nrf2/GCLC信号通路抑制槟榔碱诱导的HaCaT细胞氧化应激而缓解口腔黏膜下纤维化

作     者：邹红 祁硕 邓芳萍 张馨月 符舒欣 郭梦琪 肖雨锋 唐群 ZOU Hong;QI Shuo;DENG Fangping;ZHANG Xinyue;FU Shuxin;GUO Mengqi;XIAO Yufeng;TANG Qun

作者机构：湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 

出 版 物：《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期：2024年第40卷第5期

页      面：908-916页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1003[医学-口腔医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100302[医学-口腔临床医学] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：湖南省自然科学基金资助项目(No.2021JJ30506) 湖南省教育厅重点项目(No.21A0242) 湖南省大学生创新创业训练计划-省级项目(No.S202210541130) 湖南中医药大学2023年本科生科研创新基金(No.2023-67) 

主　　题：口腔黏膜下纤维化 Nrf2/GCLC信号通路 氧化应激 三七总皂苷 槟榔碱 

摘      要：目的:探讨三七总皂苷(PNS)在槟榔碱(ANE)诱导的口腔黏膜下纤维化中的抗纤维化作用,并分析PNS对核因子E2相关因子2(Nrf2)∕谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)信号通路的影响。方法:采用CCK-8法评估不同浓度的PNS和ANE对人永生化角质形成细胞系HaCaT活力的影响,根据CCK-8结果选择75 mg/L的ANE及25、50和100 mg/L的PNS作为后续实验浓度;细胞设为空白对照组、模型组和PNS低、中、高剂量(25、50和100 mg/L)组,采用Western blot和RT-qPCR法检测各组细胞中I型胶原(COL-I)、上皮钙黏素(E-cadherin)、Nrf2、GCLC和谷胱甘肽还原酶(GR)的蛋白及mRNA表达情况;采用免疫荧光法检测Nrf2入核情况;采用生化试剂盒检测各组细胞中谷胱甘肽(GSH)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量。结果:与空白对照组相比,模型组细胞中COL-I蛋白及mRNA表达上调,E-cadherin、Nrf2、GCLC、核Nrf2和GR的蛋白及mRNA表达下调,细胞中NADPH、MDA和ROS含量升高,GSH含量和SOD活性明显减弱;与模型组相比,PNS 50和100 mg/L组细胞中COL-I蛋白及mRNA表达下调,E-cadherin、Nrf2、GCLC、核Nrf2和GR的蛋白及mRNA表达上调,细胞中NADPH、MDA和ROS含量下降,GSH含量和SOD活性明显增强(P0.05,P0.01)。结论:PNS具有抗HaCaT细胞纤维化作用,其作用机制可能与激活Nrf2/GCLC信号通路,进而抗氧化应激改善口腔黏膜下纤维化有关。