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柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白Et RON2 L1-2特性与功能初步分析

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复旦学报（自然科学版） 2024年第3期63卷 389-397页

作者：陈烺刘曼玉赵其平朱顺海王丽慧郭慧琳韩红玉董辉郝力力西南民族大学畜牧兽医学院四川成都610041 中国农业科学院上海兽医研究所农业农村部动物寄生虫学重点实验室上海200241

为研究柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2(RON2)同源分子——Et RON2 L1-2的分子特性与功能,利用实时荧光定量PCR、Western blot、入侵抑制试验、间接免疫荧光试验以及双分子荧光互补实验(BiFC)等方法分析其生物学特征。结果发现Et RON2 L... 详细信息

为研究柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2(RON2)同源分子——Et RON2 L1-2的分子特性与功能,利用实时荧光定量PCR、Western blot、入侵抑制试验、间接免疫荧光试验以及双分子荧光互补实验(BiFC)等方法分析其生物学特征。结果发现Et RON2 L1-2蛋白序列与Et RON2仅有29.69%的同源性,转录水平和蛋白水平均在第二代裂殖子阶段最高。抗r Et RON2 L1-2抗体对子孢子入侵细胞有明显抑制作用。Et RON2 L1-2蛋白主要分布于经PBS孵育子孢子的胞质和表面,并分布于经完全培养基孵育或入侵DF-1细胞后2 h子孢子的顶端;其表达量在滋养体和未成熟裂殖体增加,且在带虫空泡膜也有分布;在第二代裂殖子中主要分布于整个胞质。Et RON2 L1-2与柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原4(AMA4)之间存在互作关系。

关键词：球虫柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2同源分子入侵

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没食子酸与氯硝柳胺联合灭螺作用研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第2期42卷 251-258页

作者：郑涛刘佳豪李彬李佳珊聂娟熊涛湖南中医药大学医学院病原生物学教研室长沙410006

目的本研究旨在探讨具有交替氧化酶(AOX)抑制活性的中药单体分子没食子酸和氯硝柳胺的联合灭螺效果及其灭螺机制。方法阴性钉螺采自湖北省公安县,随机分为7组,空白对照组(H_(2)O),实验组分别为氯硝柳胺(N1组:0.06 mg/L,N2组:0.1 mg/L)... 详细信息

目的本研究旨在探讨具有交替氧化酶(AOX)抑制活性的中药单体分子没食子酸和氯硝柳胺的联合灭螺效果及其灭螺机制。方法阴性钉螺采自湖北省公安县,随机分为7组,空白对照组(H_(2)O),实验组分别为氯硝柳胺(N1组:0.06 mg/L,N2组:0.1 mg/L)和没食子酸(G1组:0.8 g/L,G2组:1.6 g/L)单独使用,及联合使用(M1组:0.06 mg/L氯硝柳胺+0.8 g/L没食子酸,M2组:0.06 mg/L氯硝柳胺+1.6 g/L没食子酸)。检测各组钉螺经药物浸杀12、24和48 h后的存活率,液氮包埋后切片并染色,光学显微镜下观察并定量分析,检测钉螺软体切片中细胞色素C氧化酶(CCO)和乳酸脱氢酶(LDH)的相对酶活力值,以平均光密度值表示。钉螺匀浆后离心、取上清,DCFH-DA探针共孵育,用BCA蛋白定量试剂盒测定总蛋白含量,多功能酶标仪检测荧光强度,ROS值以样品测得的荧光强度(FI)除以蛋白质浓度(μg)的值表示,用总超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒测定SOD水平。钉螺死亡率的差异分析采用卡方检验;CCO活性和氧化应激水平的数据用Levene’s Test确定方差齐性后,用Tukey HSD的多重比较方法进行不同组间的两两比较。结果G1和G2组浸杀后未表现出显著的灭螺效应。M1组和M2组在浸杀48 h后的钉螺死亡率分别达到70.0%(56/80)和84.2%(101/120),均高于N1组(44.4%,32/72)(χ2=9.13、32.52,均P学意义(χ2=0.11、2.58,均P>0.05)。N1和N2组钉螺的LDH活性呈下降趋势;M1组和M2组钉螺体内CCO和LDH活性均降低(均P学意义(均P<0.05)。M1组在处理后24 h的SOD活性为(5.56±0.91)UI/g,高于空白对照组的(5.26±0.08)UI/g(P<0.05);M2组的SOD活性在处理后12、24和48 h呈现先升高后降低的趋势[(2.40±0.45)、(8.14±0.15)、(1.60±0.21)UI/g],与空白对照组在相应时间点的(3.54±0.94)、(5.26±0.08)、(5.10±0.87)UI/g相比,变化趋势显著(均P<0.05)。M1组在处理后24 h和48 h的ROS水平分别为(1619.00±168.25)FI/μg和(1866.65±211.79)FI/μg,M2组在48 h后的ROS水平达到(2451.29±195.91)FI/μg,均高于空白对照组在相应时间点的(802.37±114.69)、(1393.81±86.12)FI/μg(均P<0.05)。结论没食子酸显著增强了低浓度氯硝柳胺的灭螺效果,其灭螺机制为通过阻断AOX的代偿上调,进一步加重了钉螺能量代谢失衡和氧化应激压力。

关键词：湖北钉螺没食子酸氯硝柳胺灭螺效果葡萄糖代谢酶活性氧化应激水平

海南省铸牢中华民族共同体意识研讨会暨中国民族学学会2024年高层论坛综述

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民族研究 2024年第4期 131-133页

作者：孔敬(整理) 周子翔(整理) 蒋梅(整理) 中国社会科学院民族学与人类学研究所民族语言文化行为实验研究室北京市100081 中国社会科学院大学社会与民族学院北京市102488 云南大学民族学与社会学学院昆明市650091

2024年6月22-23日,海南省铸牢中华民族共同体意识研讨会暨中国民族学学会2024年高层论坛“铸牢中华民族共同体意识与中华民族现代文明建设”在海南省保亭黎族苗族自治县召开。会议由中共海南省委统战部、海南省民族事务委员会、中国民... 详细信息

2024年6月22-23日,海南省铸牢中华民族共同体意识研讨会暨中国民族学学会2024年高层论坛“铸牢中华民族共同体意识与中华民族现代文明建设”在海南省保亭黎族苗族自治县召开。会议由中共海南省委统战部、海南省民族事务委员会、中国民族学学会、海南大学共同主办,海南大学国家民委中华民族共同体研究基地、海南省铸牢中华民族共同体意识研究中心、海南省民族研究所、海南大学人文学院共同承办。来自中国社会科学院、中央民族大学、西南民族大学、中南民族大学、新疆大学、西藏大学、宁夏大学、云南省社会科学院、福建社会科学院等40余所高校与科研院所的近百位专家学者,来自湖北、广东、广西、云南、贵州等5省区民族事务部门及海南省委宣传部、统战部,省民委,省旅文厅,团省委以及海南省各市县民族事务部门的代表,共150余人参会。会议提交论文100多篇。

关键词：中国民族学学会海南大学西南民族大学中南民族大学国家民委福建社会科学院新疆大学宁夏大学

姜黄素通过调控p53/SLC7A11/GPX4通路抑制脂多糖诱导的RAW264.7源性破骨细胞分化

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中国病理生理杂志 2024年第7期40卷 1268-1275页

作者：李明陈宗海朱青颜丽君张宗星邹权陈龙菊风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室湖北民族大学医学部湖北恩施445000 川北医学院四川南充637000

目的:探讨姜黄素(Cur)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7源性破骨细胞的作用及其机制。方法:用LPS诱导RAW264.7细胞建立破骨细胞模型。CCK-8法检测RAW264.7细胞活力;TRAP染色鉴定破骨细胞形成;TRAP活性测定检测破骨细胞活力;生化检测细胞活性... 详细信息

目的:探讨姜黄素(Cur)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7源性破骨细胞的作用及其机制。方法:用LPS诱导RAW264.7细胞建立破骨细胞模型。CCK-8法检测RAW264.7细胞活力;TRAP染色鉴定破骨细胞形成;TRAP活性测定检测破骨细胞活力;生化检测细胞活性氧(ROS)、Fe^(2+)、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)水平;透射电镜观察细胞线粒体形态;RT-qPCR检测p53、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA水平;Western blot检测p53、SLC7A11及GPX4蛋白水平。结果:LPS成功诱导RAW264.7细胞为破骨细胞。TRAP染色及TRAP活性结果显示,与LPS组相比,Cur组破骨细胞数量及TRAP活性呈剂量依赖式下降(P<0.01);与Con组相比,LPS+Erastin组TRAP活性显著升高(P<0.01),经Cur处理后,TRAP活性呈剂量依赖式下降(P<0.01)。生化检测结果显示,与Con组比较,LPS+Erastin组ROS、Fe^(2+)及MDA水平显著升高,GSH水平显著降低(P<0.01);与LPS+Erastin组相比,Cur组ROS、Fe^(2+)及MDA水平呈剂量依赖式下降(P<0.01),GSH水平呈剂量依赖式上升(P<0.01)。电镜结果显示,与LPS组比较,LPS+Erastin组细胞线粒体嵴减少,膜密度增加;经Cur处理后,细胞线粒体嵴明显增加,膜密度减小。RT-qPCR和Western blot结果显示,与Con组比较,LPS+Erastin组p53的mRNA和蛋白水平显著升高,SLC7A11和GPX4的mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.01);经Cur处理后,p53的mRNA和蛋白水平显著降低,SLC7A11和GPX4的mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.01)。结论:Cur可抑制LPS诱导的RAW264.7源性破骨细胞分化,其机制可能与p53/SLC7A11/GPX4信号通路被抑制有关。

关键词：骨质疏松铁死亡破骨细胞 p53/SLC7A11/GPX4信号通路姜黄素

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竹节参总皂苷缓解CCl_(4)诱导的大鼠急性肝损伤:基于调控PI3K/Akt/NF-κB信号通路

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 244-251页

作者：吴广阳宋添力唐浪王一民刘绪黄胜湖北民族大学医学部湖北恩施445000 湖北恩施学院湖北恩施445000 湖北民族大学风湿性疾病发生与干预实验室湖北恩施445000

目的探讨土家族药用植物竹节参提取物总皂苷对CCl_(4)致急性肝损伤的保护作用及潜在的药理学机制。方法将6周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组(100 mg/kg)、竹节参总皂苷低、中、高(50、100、200 mg/kg)剂量组,各组... 详细信息

目的探讨土家族药用植物竹节参提取物总皂苷对CCl_(4)致急性肝损伤的保护作用及潜在的药理学机制。方法将6周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组(100 mg/kg)、竹节参总皂苷低、中、高(50、100、200 mg/kg)剂量组,各组8只,除空白组外,其余各组采用CCl_(4)诱导大鼠急性肝损伤模型,处理组于造模中给予药物灌胃干预。比较各组大鼠的血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)和碱性磷酸酶(ALP)水平;HE染色观察肝组织病理学改变;免疫组化检测肝脏组织PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关分子的表达;酶联免疫法测定肝脏组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;蛋白免疫印迹法检测肝脏组织PI3K-Akt和SIRT6-NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果网络药理学分析显示,竹节参总皂苷对急性肝损伤的有治疗作用,其关键的通路为PI3K/Akt等信号通路。血清学和酶联免疫学实验结果显示,与正常组相比,模型组大鼠血清和肝组织的AST、ALT、ALP、TBil和MDA明显增高(P<0.01),T-SOD和GSHPx水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,各治疗组ALT、AST、ALP、TBIL和MDA水平显著降低(P<0.01),T-SOD和GSH-Px水平显著升高(P<0.01)。免疫组化结果显示,正常组大鼠肝组织细胞内未见p-NF-κB表达阳性,与正常组相比,模型组中p-NF-κB阳性表达则明显增加,阳性细胞数增多(P<0.01);与模型组比较,各治疗组阳性表达明显减少(P<0.01)。免疫印迹结果显示,相对于正常组,模型组PI3K、p-Akt蛋白的表达水平下降,p-NF-κB、TNF-α和IL-6蛋白的表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,各治疗组PI3K、p-Akt和SIRT6蛋白的表达水平显著升高,p-NF-κB p65、TNF-α和IL-6的蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。结论竹节参总皂苷可以通过调节PI3K/Akt和NF-κB通路,有效减缓CCl_(4)诱导的大鼠急性肝损伤,发挥其抗炎、抗氧化应激和保护肝损伤的作用。

关键词：急性肝损伤竹节参总皂苷 PI3K/Akt/NF-κB 抗炎抗氧化

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尿石素A通过调控有氧糖酵解抑制肝癌细胞生长的机制

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中国现代应用药学 2024年第8期41卷 1047-1055页

作者：胡红柳何志龙王专蒋利和右江民族医学院基础医学院广西百色533000 湖北民族大学生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北恩施445000 广西大学轻工与食品工程学院南宁530004 厦门大学福建省药物新靶点研究重点实验室福建厦门361005

目的探讨尿石素抑制肝癌细胞生长的分子机制。方法不同浓度尿石素A(urolithin A,Uro-A)处理肝癌Huh-7细胞,CCK-8法检测细胞抑制率,并计算IC50,克隆形成试验检测细胞增殖能力,细胞划痕试验评估细胞迁移率,比色法检测细胞培养液中葡萄... 详细信息

目的探讨尿石素抑制肝癌细胞生长的分子机制。方法不同浓度尿石素A(urolithin A,Uro-A)处理肝癌Huh-7细胞,CCK-8法检测细胞抑制率,并计算IC50,克隆形成试验检测细胞增殖能力,细胞划痕试验评估细胞迁移率,比色法检测细胞培养液中葡萄糖摄取量和乳酸水平,化学发光法检测细胞内ATP含量;Western blotting检测各浓度Uro-A对葡萄糖转运载体GLUT1、糖酵解关键酶(HK2、PKM2、LDHA)、p53、p-p38和Bcl-2蛋白表达的影响,流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡率。结果 CCK-8检测结果显示,Uro-A能明显抑制Huh-7细胞的增殖,IC50为(48.54±1.21)μmol·L^(-1)。Uro-A处理后细胞克隆形成量减少,迁移率降低。不同浓度Uro-A作用后细胞葡萄糖摄取量、乳酸水平和ATP生成减少,糖酵解相关蛋白GLUT1、PKM2、LDHA和HK2表达量下降;Western blotting显示p53和pp38被激活,Bcl-2表达降低;流式细胞术和TUNEL法显示细胞凋亡率显著升高。结论 Uro-A可抑制Huh-7细胞增殖和迁移,其机制可能是通过p53、p-p38和Bcl-2抑制糖酵解,使细胞生长受阻,诱导细胞凋亡。

关键词：尿石素肝癌糖酵解细胞生长

细粒棘球蚴感染绵羊血清miRNA差异表达及诊断价值评价

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第3期42卷 295-302页

作者：吴易璇郭小腊陈轶霞西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

目的筛选细粒棘球蚴感染后绵羊血清中差异表达的miRNA,评价其在棘球蚴病诊断中的潜在价值。方法 10只绵羊分为感染组(5只)和对照组(5只),感染组每只绵羊灌胃2 000个细粒棘球绦虫虫卵,对照组绵羊给予生理盐水。感染后60 d,收集两组绵羊... 详细信息

目的筛选细粒棘球蚴感染后绵羊血清中差异表达的miRNA,评价其在棘球蚴病诊断中的潜在价值。方法 10只绵羊分为感染组(5只)和对照组(5只),感染组每只绵羊灌胃2 000个细粒棘球绦虫虫卵,对照组绵羊给予生理盐水。感染后60 d,收集两组绵羊外周血,提取血清总RNA,利用小RNA高通量测序鉴定并筛选差异表达的miRNA。选取5个差异表达miRNA进行实时荧光定量逆转录PCR (qRT-PCR)验证,并采用Medcale软件绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),筛选具有潜在诊断价值(AUC≥0.7)的miRNA。采用qRT-PCR检测15份细粒棘球蚴感染绵羊血清样品中具有潜在诊断价值的miRNA的转录水平,并计算曲线下面积(AUC)以及敏感性和特异性。采用miRanda和RNAhybrid软件对差异表达miRNA的靶基因进行预测,并进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)路径富集分析。结果测序结果显示,共鉴定出26个差异性表达的miRNAs,其中21个上调表达,5个下调表达。qRT-PCR结果显示,感染组oar-miR-191、oar-let-7a、oar-miR-150、oar-miR-26a、oar-miR-21等5个相对丰度较高的差异miRNA的相对表达水平分别为2.22±0.31、2.12±0.24、2.42±0.35、2.09±0.15、3.23±0.83,均高于对照组(1.00±0.11),其中oar-miR-191、oarlet-7a、oar-miR-150、oar-miR-26a的相对表达水平与对照组差异有统计学意义(t=3.960、4.766、4.096、9.126,均P <0.05)。ROC曲线分析发现,oar-let-7a、oar-miR-26a、oar-miR-21的AUC均小于0.7。oar-miR-191的AUC为0.858(95%CI为0.719~0.997,P <0.05),具有较高的诊断价值,其灵敏度为71.43%,特异性为85.71%;oar-miR-150的AUC为0.738 (95%CI为0.550~0.926,P <0.05),具有一定的诊断意义,其灵敏度为53.33%,特异性为86.67%。GO显著性富集分析结果显示,转录水平上升两倍以上的miRNA靶基因主要与应激反应、细胞表面分子、蛋白质结合等功能相关;KEGG通路富集分析结果表明,转录水平上升至少两倍的miRNA靶基因主要富集在炎症反应、细胞自噬和细胞凋亡等关键信号通路上。结论本研究筛选出oar-miR-191和oar-miR-150在细粒棘球蚴感染诊断中具有较好的灵敏度和特异性,有望成为细粒棘球病诊断的潜在生物标志物。

关键词：细粒棘球蚴微小RNA 血清高通量测序 ROC曲线

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微量分层离心法检查疟原虫的动物实验

临床检验杂志 2004年第3期22卷 218-218,220页

作者：李继红付绍玲崔茜湖北民族学院医学院寄生虫学教研室湖北恩施445000

为了寻求一种较为完善的疟原虫血液检查方法，我们根据被疟原虫寄生的红细胞可发生比重改变的原理，将被感染鼠血细胞进行分层、离心制片，瑞氏染色镜检观察，以期对人类疟疾的确诊提供理想的病原学检查方法。报告如下。

关键词：微量分层离心法检查疟原虫动物实验

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亚临界水体系中几种氨基酸的自降解反应

中国食品学报 2024年第4期24卷 151-158页

作者：冯亮杨艳谢雅婷刘双双余爱农湖北民族大学化学与环境工程学院湖北恩施445000 生物资源保护与利用湖北省重点实验室湖北民族大学湖北恩施445000

在亚临界水体系中对几种常见且具有代表性结构的氨基酸自降解行为进行研究,探讨pH对氨基酸自降解生成挥发性物质的影响及氨基酸降解机理。结果表明:由于甘氨酸(Gly)、L-丙氨酸(Ala)、L-精氨酸(Arg)、L-天冬氨酸(Asp)结构简单且热稳定性... 详细信息

在亚临界水体系中对几种常见且具有代表性结构的氨基酸自降解行为进行研究,探讨pH对氨基酸自降解生成挥发性物质的影响及氨基酸降解机理。结果表明:由于甘氨酸(Gly)、L-丙氨酸(Ala)、L-精氨酸(Arg)、L-天冬氨酸(Asp)结构简单且热稳定性较好,在亚临界水体系中不会发生降解反应;L-丝氨酸(Ser)和L-苏氨酸(Thr)在亚临界水体系中,可通过脱羧生成中间体氨基乙醛母体,继而生成各种吡嗪类衍生物,其中包括2,3,5-三甲基吡嗪、3,5-二甲基-2-(3-甲基丁基)吡嗪和3,6-二甲基-2-乙基吡嗪等;L-苯丙氨酸(Phe)在亚临界水体系中主要生成苯甲醛、苯乙醛、苯乙酮和7-乙基-1,3,5-环庚三烯等;L-半胱氨酸(Cys)自降解会生成关键中间体巯基乙醛,再通过与各种小分子醛相互作用生成噻吩、噻唑类化合物和多硫化物。根据各体系中挥发性物质生成情况,提出了各氨基酸在亚临界水体系中挥发性物质可能的生成机制。

关键词：氨基酸自降解挥发性物质亚临界水机理