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桃叶珊瑚苷调控RhoA/ROCK信号通路对胃癌MGC803细胞上皮间质转化和血管生成拟态的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第4期31卷 365-370页

作者：宋鸣周昕刘俊胡伟张敏郑新武汉市第三医院外科湖北武汉442000

目的:探究桃叶珊瑚苷(AU)调控RhoA/ROCK信号通路对胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)进程和血管生成拟态(VM)形成的影响。方法:常规培养人胃癌MGC803细胞,将其随机分为对照组、AU-L组(20μmol/L AU)、AU-M组(40μmol/L AU)、AU-H组(80μm... 详细信息

目的:探究桃叶珊瑚苷(AU)调控RhoA/ROCK信号通路对胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)进程和血管生成拟态(VM)形成的影响。方法:常规培养人胃癌MGC803细胞,将其随机分为对照组、AU-L组(20μmol/L AU)、AU-M组(40μmol/L AU)、AU-H组(80μmol/L AU)、AU-H+RhoA激活剂水仙环素(Nar)组(AU-H+Nar组,80μmol/L AU+30μmol/L Nar)。采用CCK-8法、Transwell实验、细胞划痕实验分别检测不同浓度AU对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,三维细胞培养法观察不同浓度AU对细胞体外VM管腔结构形成的影响,WB法检测AU对各组细胞RhoA、ROCK、VM与EMT相关蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,AU-M组、AU-H组MGC803细胞增殖率(48、72 h时)、细胞迁移率、细胞侵袭数目、VM管腔结构数,以及RhoA、ROCK1、N-cadherin、vimentin、VE-cadherin的蛋白表达均显著降低(均P<0.05),E-cadherin表达显著升高(P<0.05);同时,使用Nar处理显著减弱了AU对MGC803细胞EMT和VM形成的抑制作用(均P<0.05)。结论:AU通过下调RhoA/ROCK信号通路抑制胃癌MGC803细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT和VM形成过程。

关键词：桃叶珊瑚苷 RhoA/ROCK信号通路胃癌 MGC803细胞上皮间质转化血管生成拟态

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青蒿琥酯改善哮喘幼鼠气道重塑的作用

中国临床药理学杂志 2024年第6期40卷 864-868页

作者：王丽艳鲍星星边俊梅武汉市第三医院儿科湖北武汉430074

目的探讨青蒿琥酯对卵清蛋白诱导的哮喘幼鼠气道重塑的影响及作用机制。方法将SD幼鼠随机分为正常组、模型组(卵清蛋白激发)、阳性对照组(在模型组基础上给予0.2 mg·kg^(-1)的地塞米松)、低剂量组(在模型组基础上给予10 mg·kg^(-1)的... 详细信息

目的探讨青蒿琥酯对卵清蛋白诱导的哮喘幼鼠气道重塑的影响及作用机制。方法将SD幼鼠随机分为正常组、模型组(卵清蛋白激发)、阳性对照组(在模型组基础上给予0.2 mg·kg^(-1)的地塞米松)、低剂量组(在模型组基础上给予10 mg·kg^(-1)的青蒿琥酯)、高剂量组(在模型组基础上给予20 mg·kg^(-1)的青蒿琥酯)、激动剂组(在模型组基础上给予20 mg·kg^(-1)的青蒿琥酯和100 mg·kg^(-1)的尼日利亚菌素钠盐),每组10只。处理结束后检测幼鼠气道重塑相关指标,使用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应法检测NOD样受体蛋白3炎症小体(NLRP3)通路相关蛋白和mRNA表达水平,用酶联免疫吸附测定法检测炎性因子表达水平,用瑞氏-吉姆萨染色法检测肺泡灌洗液中炎性细胞分类和计数。结果正常组、模型组、阳性对照组、高剂量组和激动剂组的NLRP3 mRNA表达水平分别为1.00±0.10、2.36±0.26、1.08±0.11、1.33±0.12和2.14±0.26,胱天蛋白酶1(caspase-1)mRNA表达量分别为1.00±0.13、1.92±0.22、1.22±0.12、1.44±0.10和1.82±0.14,白细胞介素-17(IL-17)分别为(22.41±1.15)、(56.74±6.54)、(28.72±2.75)、(32.69±3.73)和(58.40±4.46)pg·mL^(-1),中性粒细胞数分别为(4.04±0.32)×10^(6)、(12.70±1.05)×10^(6)、(4.53±0.30)×10^(6)、(4.67±0.18)×10^(6)和(10.19±0.58)×10^(6) cell·mL^(-1)。上述指标,模型组与正常组相比,阳性对照组、高剂量组与模型组相比,激动剂组与高剂量组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论青蒿琥酯可显著改善卵清蛋白诱导的哮喘幼鼠的气道重塑,这可能是通过抑制NLRP3/caspase-1/白细胞介素1β(IL-1β)炎性通路实现的。

关键词：青蒿琥酯哮喘幼鼠气道重塑 NOD样受体蛋白3炎症小体/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1/白细胞介素-1β通路

芸香苷改善椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的研究

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中国临床药理学杂志 2024年第7期40卷 1029-1033页

作者：汪平范明宇周少怀俞诗威王欣武汉市第三医院骨科湖北武汉430000

目的从细胞水平探究芸香苷对椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的影响及作用机制。方法将大鼠椎间盘髓核细胞随机分为对照组、模型组[白细胞介素-1β(IL-1β)诱导]、低剂量实验组(25μmol·L^(-1)芸香苷+10ng·mL^(-1)IL-1β)、中剂量实验组(5... 详细信息

目的从细胞水平探究芸香苷对椎间盘退变大鼠髓核细胞焦亡的影响及作用机制。方法将大鼠椎间盘髓核细胞随机分为对照组、模型组[白细胞介素-1β(IL-1β)诱导]、低剂量实验组(25μmol·L^(-1)芸香苷+10ng·mL^(-1)IL-1β)、中剂量实验组(50μmol·L^(-1)芸香苷+10ng·mL^(-1)IL-1β)、高剂量实验组(100μmol·L^(-1)芸香苷+10ng·mL^(-1)IL-1β)、高剂量+SIRT1激动药组[100μmol·L^(-1)芸香苷+10ng·mL^(-1)IL-1β+1μmol·L^(-1)沉默信息调节因子1(SIRT1)激动药SRT1720]。用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验、蛋白质印迹法检测相关基因和蛋白的表达水平,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞活力,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测炎性因子的表达水平。结果对照组、模型组、高剂量实验组、高剂量+SIRT1激动药组的细胞活力分别为(100.00±3.56)%、(47.30±2.58)%、(76.78±2.83)%和(85.84±4.84)%,SIRT1mRNA表达水平分别为1.00±0.12、0.25±0.02、0.67±0.08和0.83±0.09,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平分别为(15.03±1.21)、(126.50±8.84)、(53.88±3.43)和(28.19±4.02)pg·mL^(-1),PTEN诱导激酶1(PINK1)蛋白相对表达水平分别为0.30±0.03、0.26±0.04、0.89±0.12和1.28±0.08,N端-消皮素D(GSDMD-N)蛋白相对表达水平分别为0.38±0.02、1.20±0.08、0.53±0.05和0.40±0.03;高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05);高剂量+SIRT1激动药组的上述指标与高剂量实验组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论芸香苷可通过激活SIRT1诱导线粒体自噬,抑制髓核细胞焦亡缓解大鼠椎间盘退变。

关键词：芸香苷椎间盘退变髓核细胞细胞焦亡线粒体自噬沉默信息调节因子1

表观弥散系数定量评估兔肢体高压电烧伤早期肌肉进行性损伤

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中国医学影像技术 2024年第9期40卷 1303-1308页

作者：阮鹏葛映红熊梦烨谭一清陈曦孙斯琴武汉市第三医院武汉大学附属同仁医院放射科湖北武汉430060

目的观察表观弥散系数(ADC)定量评价兔肢体高压电烧伤早期肌肉进行性损伤的价值。方法选取20只健康成年兔建立兔肢体高压电烧伤模型,并将其随机分为0.5、24、48及72 h组,每组5只,分别于造模后各相应时间采集右后肢MR弥散加权成像(DWI),... 详细信息

目的观察表观弥散系数(ADC)定量评价兔肢体高压电烧伤早期肌肉进行性损伤的价值。方法选取20只健康成年兔建立兔肢体高压电烧伤模型,并将其随机分为0.5、24、48及72 h组,每组5只,分别于造模后各相应时间采集右后肢MR弥散加权成像(DWI),并于其后取双侧肢体肌肉行HE染色;对比各组电流入口及出口损伤核心肌肉与正常肌肉的ADC、肌纤维密度(MFD)及肌纤维短径(D)值,分析兔损伤核心肌肉ADC值与MFD及D值的相关性。结果各组内入口及出口损伤核心肌肉与正常肌肉ADC值、入口与出口损伤核心肌肉ADC值差异均有统计学意义(P均0.05)。入口及出口损伤核心肌肉MFD值随造模时间延长而降低(P均0.05)。损伤核心肌肉ADC与MFD值正相关(r_(s)=0.846,P<0.05)、与D值呈负相关(r=-0.507,P<0.05)。结论ADC可定量评价兔肢体高压电烧伤早期肌肉进行性损伤。

关键词：烧伤,电弥散磁共振成像肌,骨骼病理学兔

输卵管再通术后妊娠率影响因素分析及列线图模型验证

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介入放射学杂志 2024年第8期33卷 860-864页

作者：姜胜攀郑石林高小青谭一清武汉市第三医院介入医学科湖北武汉430074 武汉市第三医院检验科湖北武汉430074

目的探讨输卵管再通术(FTR)后妊娠率的影响因素,构建并验证列线图预测模型。方法回顾性分析2018年1月至2022年12月在武汉市第三医院接受FTR治疗的322患者临床资料。根据FTR后12个月患者是否自然受孕,分为妊娠组、不孕组。采用logistic... 详细信息

目的探讨输卵管再通术(FTR)后妊娠率的影响因素,构建并验证列线图预测模型。方法回顾性分析2018年1月至2022年12月在武汉市第三医院接受FTR治疗的322患者临床资料。根据FTR后12个月患者是否自然受孕,分为妊娠组、不孕组。采用logistic回归分析确定FTR后妊娠的独立影响因素。将患者以1:1比例随机分为训练组和验证组,在训练组构建列线图模型,验证组验证模型的预测效能。结果FTR后患者1年内自然妊娠率为45.34%(146/322)。年龄>35岁、原发性不孕、不孕年限>3年、输卵管远端堵塞以及输卵管中重度病变是影响FTR后妊娠率的独立危险因素(均P<0.05)。构建的列线图模型区分度和校准度良好,临床效用高。结论本研究构建的列线图模型可有效预测FTR后1年不孕风险,有助于制定个体化治疗方案。

关键词：输卵管再通术不孕症妊娠率预测模型列线图

miR-630靶向Slug信号通路影响人肾癌细胞株侵袭、迁移的作用

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中国老年学杂志 2024年第7期44卷 1725-1730页

作者：孙伟张炜付桥胡志徐律褚浩王潇武汉市第三医院泌尿外科湖北武汉430000

目的探讨微小核糖核酸(miR)-630靶向锌指转录因子Slug信号通路调节人肾癌细胞株ACHN侵袭、迁移的作用。方法取人肾癌细胞株ACHN培养传代,分为正常组(未转染)、阴性对照组(转染携带miR-630抑制剂阴性对照的慢病毒)、过表达组(转染携带m... 详细信息

目的探讨微小核糖核酸(miR)-630靶向锌指转录因子Slug信号通路调节人肾癌细胞株ACHN侵袭、迁移的作用。方法取人肾癌细胞株ACHN培养传代,分为正常组(未转染)、阴性对照组(转染携带miR-630抑制剂阴性对照的慢病毒)、过表达组(转染携带miR-630模拟物的慢病毒)、低表达组(转染携带miR-630抑制物的慢病毒)。培养48 h后,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭能力,划痕实验检测各组细胞迁移能力;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测量miR-630、E-钙黏蛋白(cadherin)、Slug、波形蛋白(Vimentin)和N-cadherin信使核糖核酸(mRNA)表达;Western印迹法检测各组Slug、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测验证miR-630是否靶向Slug信号通路。结果阴性对照组、过表达组和低表达组转染效率分别为(87.39±17.36)%、(86.11±17.01)%和(85.43±16.98)%,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组和阴性对照组比较,过表达组穿膜细胞数、miR-630 mRNA、Vimentin和N-cadherin mRNA和蛋白表达显著升高,划痕间距(48 h)显著减小,E-cadherin、Slug mRNA和蛋白表达显著减少(P<0.05)。与阴性对照组、正常组和过表达组比较,低表达组miR-630 mRNA、N-cadherin和Vimentin mRNA和蛋白表达及穿膜细胞数减少,Slug、E-cadherin mRNA和蛋白表达增加,划痕间距(48 h)增加,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-630靶向Slug。结论 miR-630可能通过靶向调节Slug信号通路,上调N-cadherin、Vimentin表达,下调E-cadherin表达,进而促进肾癌细胞侵袭和迁移。

关键词：微小核糖核酸-630 锌指转录因子肾癌侵袭迁移

BMSCs通过TLR4/NF-κB信号通路抑制胶质细胞的炎症反应和瘢痕形成

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中国老年学杂志 2024年第10期44卷 2467-2471页

作者：王侣珍刘志刚张照庆武汉市第三医院门诊部湖北武汉430000 武汉市第三医院疼痛康复科湖北武汉430000

目的通过构建体外脊髓损伤(SCI)细胞模型,利用骨髓间充质干细胞(BMSCs)处理损伤细胞,探讨BMSCs促进SCI修复的作用及其机制。方法脂多糖处理U251细胞构建体外SCI模型。实验分为正常对照组、损伤对照组和HBMSCs组,损伤对照组加入1μg/ml... 详细信息

目的通过构建体外脊髓损伤(SCI)细胞模型,利用骨髓间充质干细胞(BMSCs)处理损伤细胞,探讨BMSCs促进SCI修复的作用及其机制。方法脂多糖处理U251细胞构建体外SCI模型。实验分为正常对照组、损伤对照组和HBMSCs组,损伤对照组加入1μg/ml脂多糖(LPS)处理,HBMSCs组中将损伤U251细胞接种在下室,HBMSCs细胞接种在上室共培养。CCK-8检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测凋亡相关蛋白和炎症因子的表达水平,Western印迹检测Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB信号通路蛋白的表达水平。结果与损伤对照组相比,HBMSCs组的细胞增殖抑制率、凋亡率、GFAP的表达水平显著降低(P<0.01)。BMSCs处理后肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3 mRNA的表达水平显著降低(P<0.01),Bcl-2 mRNA的表达水平显著提高(P<0.01),TLR4和NF-κB的蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论BMSCs能有效抑制细胞凋亡和炎症因子的释放,通过调控TLR4/NF-κB信号通路从而抑制胶质细胞炎症反应和瘢痕形成,为临床用于治疗SCI提供新思路。

关键词：骨髓间充质干细胞脊髓损伤星形胶质细胞 Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB信号通路

鸡血藤提取物改善缺血性脑卒中大鼠免疫抑制的作用及对HMGB1/RAGE信号通路介导AQP-4和GAP-43表达的影响

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中国老年学杂志 2024年第5期44卷 1248-1252页

作者：刘芳吴茜武汉市第三医院神经内科湖北武汉430070

目的探究鸡血藤提取物通过高迁移率族蛋白(HMG)B1/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路介导水通道蛋白(AQP)-4、生长相关蛋白(GAP)-43表达改善缺血性脑卒中大鼠免疫抑制的机制。方法通过栓线法构建缺血性脑卒中大鼠模型,45只模型大... 详细信息

目的探究鸡血藤提取物通过高迁移率族蛋白(HMG)B1/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路介导水通道蛋白(AQP)-4、生长相关蛋白(GAP)-43表达改善缺血性脑卒中大鼠免疫抑制的机制。方法通过栓线法构建缺血性脑卒中大鼠模型,45只模型大鼠分为模型组、鸡血藤1.5和鸡血藤3.0组(n=15)。另取15只假手术大鼠作为对照组。鸡血藤提取物灌胃剂量为1.5和3.0 g/kg。2 w后比较各组改良大鼠神经功能评分(mNSS)、脑组织损伤、神经元凋亡、HMGB1/RAGE信号通路、AQP-4、GAP-43水平及T细胞亚群水平。结果模型组mNSS、凋亡率、HMGB1、RAGE、AQP-4、GAP-43 mRNA及蛋白水平明显优于对照组,而CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)比值均显著低于对照组(P<0.05)。鸡血藤1.5组的mNSS评分、凋亡率、HMGB1、RAGE、AQP-4、GAP-43 mRNA和蛋白水平显著低于模型组,CD3^(+)、CD4^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)比值均显著高于模型组(P<0.05)。鸡血藤3.0组mNSS评分、凋亡率、HMGB1、RAGE、AQP-4、GAP-43 mRNA和蛋白水平显著低于鸡血藤1.5组,CD3^(+)、CD4^(+)和CD4^(+)/CD8^(+)比值均显著高于鸡血藤1.5组(P<0.05)。结论鸡血藤提取物具有抑制HMGB1/RAGE通路、保护缺血性脑卒中大鼠神经元、解除免疫抑制的作用。

关键词：缺血性脑卒中鸡血藤提取物高迁移率族蛋白(HMG)B1/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)通路免疫抑制

鞘磷脂合成酶2通过Wnt/β-catenin通路调控卵巢癌TOV-21G细胞的恶性生物学行为

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第1期31卷 32-39页

作者：靖芳靖超金冬梅武汉市第三医院妇科湖北武汉430061 新洲区仓埠中心卫生院口腔科湖北武汉430413 武汉市第三医院病理科湖北武汉430061

目的:探讨鞘磷脂合成酶2(SMS2)是否通过Wnt/β-catenin信号通路调控卵巢癌(OC)TOV-21G细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及其机制。方法:收集武汉市第三医院2022年7月至2023年5月间确诊的21例OC患者的癌及癌旁组织标本,免疫组化法检测OC组织S... 详细信息

目的:探讨鞘磷脂合成酶2(SMS2)是否通过Wnt/β-catenin信号通路调控卵巢癌(OC)TOV-21G细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及其机制。方法:收集武汉市第三医院2022年7月至2023年5月间确诊的21例OC患者的癌及癌旁组织标本,免疫组化法检测OC组织SMS2表达水平。体外培养TOV-21G细胞,将细胞分为对照组、shRNA慢病毒阴性对照组(sh-NC组)、SMS2 shRNA慢病毒组(sh-SMS2组)、Wnt/β-catenin通路激活剂组LiCl(LiCl组)和sh-SMS2+LiCl组。Edu染色法、Transwell法、流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力及凋亡水平,WB法检测细胞中SMS2、Ki67、cyclin D1、BAX、c-caspase3、Bcl-2及Wnt/β-catenin通路蛋白(β-catenin、c-Myc、MMP-9)的表达。构建TOV-21G细胞裸鼠移植瘤模型,观察敲低SMS2对移植瘤生长和SMS2、β-catenin表达的影响。结果:与癌旁组织比较,OC组织中SMS2呈高表达(P<0.01)。转染sh-SMS2后,TOV-21G细胞中SMS2表达水平显著降低(P<0.05),细胞的增殖、迁移和侵袭能力及Bcl-2、β-catenin、c-Myc、MMP-9蛋白表达均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率、BAX、c-caspase3蛋白表达均显著升高(均P<0.05);LiCl处理能逆转敲低SMS2对TOV-21G细胞增殖、迁移和侵袭及Wnt/β-catenin通路的抑制作用(均P<0.05)。体内成瘤实验显示,敲低SMS2抑制裸鼠移植瘤的生长及SMS2、β-catenin蛋白的表达(均P<0.05)。结论:敲低SMS2表达通过Wnt/β-catenin信号通路抑制OC TOV-21G细胞的增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡,同时LiCl处理则能逆转敲低SMS2对TOV-21G细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。

关键词：鞘磷脂合成酶2 卵巢癌 TOV-21G细胞增殖迁移侵袭凋亡 Wnt/β-catenin信号通路