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缺氧对胃癌生长及对5-氟尿嘧啶化学治疗效果的影响

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中南大学学报(医学版) 2024年

作者：周雅丽沈翌飞汪凯李一凡张静妍兰州大学第二医院/第二临床医学院萃英生物医学研究中心兰州大学第二医院/第二临床医学院?科兰州大学第二医院/第二临床医学院皮肤科

目的：研究缺氧对胃癌细胞生长规律的影响，探讨缺氧环境中胃癌细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的反应。方法：设置1%氧气缺氧及常规空气环境，将胃癌细胞MKN45分别置于上述环境中培养，同时设立加入化疗药物5-FU干预组... 详细信息

目的：研究缺氧对胃癌细胞生长规律的影响，探讨缺氧环境中胃癌细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的反应。方法：设置1%氧气缺氧及常规空气环境，将胃癌细胞MKN45分别置于上述环境中培养，同时设立加入化疗药物5-FU干预组，利用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法、JC-1线粒体膜电位法及Annexin-V/PI双染法检测不同氧含量环境中、不同干预组胃癌细胞的增殖及凋亡情况，利用流式细胞术检测细胞周期的改变，利用电镜检测细胞线粒体变化情况。结果：在不加5-FU干预的情况下，缺氧组与常氧组相比，JC-1线粒体膜电位法、Annexin-V/PI双染法及CCK-8检测结果显示胃癌细胞早凋、晚凋发生率更高，细胞死亡率更高，流式周期检测结果显示细胞周期被阻止在G0/G1期不进展，电镜结果表明线粒体破坏也更严重；而加入5-FU干预的情况下，缺氧组与常氧组相比上述实验结果表明反而凋亡发生率低，细胞周期更易进展，线粒体破坏更少。结论：缺氧环境促进胃癌细胞凋亡甚至死亡，但是缺氧环境对化疗药物5-FU的起效产生反作用，可能是造成5-FU化疗耐药的因素。

关键词：缺氧胃癌 5-FU

托法替布通过JAK/STAT3通路抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化

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北京大学学报（医学版） 2024年第3期56卷 505-511页

作者：何珊陈炘程琦朱灵江张培玉童淑婷薛静杜燕浙江大学医学院附属第二医院风湿免疫科杭州310009 浙江大学医学院附属金华医院风湿免疫科浙江金华321000

目的:研究泛Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂托法替布(tofacitinib)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的作用及机制,为临床治疗结缔组织病相关的间质性肺疾病提... 详细信息

目的:研究泛Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂托法替布(tofacitinib)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的作用及机制,为临床治疗结缔组织病相关的间质性肺疾病提供理论依据。方法:(1)体外培养人胚胎肺成纤维细胞(human fetal lung fibroblast 1,HFL-1),设立6个组,分别为DMSO空白对照组、TGF-β1诱导组、TGF-β1联合不同浓度托法替布(0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L)药物干预实验组。采用CCK-8法检测细胞活力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力。(2)采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)、蛋白免疫印迹实验(Western blotting)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL1)基因及蛋白的表达水平。应用RT-PCR和酶联免疫吸附试验检测各组白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的基因和细胞培养上清液中的蛋白水平。(3)在不同组的细胞培养基中加入DMSO载体对照,以1.0μmol/L和5.0μmol/L的托法替布预培养30 min,然后加入TGF-β1处理1 h、6 h和24 h。以Western blotting检测Smad2/3、信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白磷酸化水平。结果:(1)托法替布抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞活力及迁移能力。(2)与空白对照组相比,TGF-β1诱导组HFL-1的α-SMA、COL1A1和FN1基因表达显著上调(P<0.05)。5.0μmol/L托法替布干预组的α-SMA基因表达与TGF-β1诱导组相比显著下调(P<0.05)。0.5~5.0μmol/L托法替布各干预组与TGF-β1诱导组相比均可抑制FN1基因表达(P<0.05)。各干预组与TGF-β1诱导组相比,COL1A1基因的表达无明显变化。(3)Western blotting结果提示,TGF-β1诱导组细胞α-SMA、FN1蛋白水平较对照组显著增加(P<0.05),COL1A1表达未见明显差异。托法替布不同浓度干预组与TGF-β1诱导组相比,α-SMA蛋白表达均有下降,其中2.0μmol/L和5.0μmol/L干预组与诱导组间的差异有统计学意义(P<0.05)。托法替布不同浓度干预组的FN1蛋白水平均有下降,但与TGF-β1诱导组相比差异无统计学意义。各干预组的COL1A1蛋白表达与TGF-β1诱导组相比差异无统计学意义。(4)TGF-β1诱导48 h,HFL-1细胞中IL-6基因及培养上清液中IL-6的表达水平较对照组显著升高,各浓度托法替布干预组与TGF-β1诱导组相比均有所降低。TGF-β1诱导1 h、6 h和24 h,STAT3蛋白磷酸化水平增加,托法替布预刺激抑制了6 h时Smad2/3的磷酸化水平,在1 h、6 h和24 h时均抑制了STAT3的磷酸化水平。结论:托法替布能抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞向肌成纤维细胞方向转化,其机制可能是通过抑制Smad2/3经典通路以及抑制TGF-β1所诱导的STAT3磷酸化,从而对肺纤维化疾病进展发挥保护作用。

关键词：托法替布肺纤维化成纤维细胞肌成纤维细胞 STAT3转录因子

洛匹那韦利托那韦片在中国健康志愿者中的生物等效性和安全性研究

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中国新药杂志 2024年第20期 2143-2148页

作者：刘天美杜晓琳雍小兰川北医学院附属成都新华医院

目的:评价国产洛匹那韦利托那韦片（受试制剂）和进口洛匹那韦利托那韦片（参比制剂）在受试者空腹条件下的生物等效性和安全性。方法:采用单中心随机开放二序列交叉设计，受试者空腹口服洛匹那韦利托那韦受试制剂或参比制剂400 mg/100 ... 详细信息

目的:评价国产洛匹那韦利托那韦片（受试制剂）和进口洛匹那韦利托那韦片（参比制剂）在受试者空腹条件下的生物等效性和安全性。方法:采用单中心随机开放二序列交叉设计，受试者空腹口服洛匹那韦利托那韦受试制剂或参比制剂400 mg/100 mg,采用高效液相色谱-串联质谱法（high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS）测定人血浆中药物浓度。使用Phoenix WinNonlin 8.3.3软件计算主要药动学参数，并评价生物等效性。结果:受试制剂和参比制剂的洛匹那韦药动学参数Cmax,AUC0～t和AUC0～∞几何均数的比值及其90%置信区间分别为104.58%（101.24%,108.03%）,104.77%（100.08%,109.69%）,104.94%（100.54%,109.53%）,置信区间落在等效性界值（80%,125%）之间。参比制剂中利托那韦的Cmax,AUC0～t和AUC0～∞的个体内标准差（subject within-subject repeatability, SWR）分别为0.281 3,0.229 4和0.225 8,均<0.294（即个体内CV%<30%）,则采用平均生物等效性方法（average bioequivalence, ABE）对其进行评价。受试制剂和参比制剂的利托那韦药动学参数Cmax,AUC0～t和AUC0～∞几何均数的比值及其90%置信区间分别为105.79%（99.12%,112.91%）,104.03%（98.75%,109.58%）,103.62%（98.50%,109.01%）,置信区间落在等效性界值（80%,125%）之间。结论:受试制剂和参比制剂中洛匹那韦及利托那韦的Cmax,AUC0～t和AUC0～∞在受试者空腹状态下生物等效性成立，且安全性与耐受性较好。

关键词：洛匹那韦利托那韦中国健康受试者空腹药动学生物等效性

基于Web of Science的2013-2022年近视研究领域文献计量分析

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中华实验眼科杂志 2024年第7期42卷 647-655页

作者：钟维琪谷志明兰长骏廖萱川北医学院附属医院眼科南充637000 川北医学院眼视光医学院南充637000 成都市第一人民医院眼科成都610095

目的应用文献计量学方法分析近10年来近视研究领域的现状、热点和未来的发展方向。方法检索Web of Science核心数据库中2013年1月1日至2022年12月31日近视相关的研究类和综述类文献,使用VOSviewer软件对国家、研究机构、作者进行共现分... 详细信息

目的应用文献计量学方法分析近10年来近视研究领域的现状、热点和未来的发展方向。方法检索Web of Science核心数据库中2013年1月1日至2022年12月31日近视相关的研究类和综述类文献,使用VOSviewer软件对国家、研究机构、作者进行共现分析,使用CiteSpace软件对关键词和共被引参考文献进行聚类分析。结果最终纳入9745篇文献,涉及123个国家或地区,7150个机构和29343位作者。通过分析发现全球在近视领域的发文量整体呈增长趋势,中国是发文量最多的国家,来自美国的研究总被引用次数最多。关键词分析结果表明,早期近视研究热点主要集中于屈光手术、并发症的诊断与治疗、遗传学研究以及流行病学特征,而近年来研究重点已迅速转向近视的预防和控制。共被引文献聚类分析结果显示,近视领域包含多个聚类模块,如#0学龄儿童、#1小切口角膜基质透镜取出术、#2近视控制、#3屈光不正、#4接触镜等研究方向。研究前沿主要聚焦于近视管理技术、近视与视网膜和脉络膜血管、人工智能在近视领域的应用等方面。结论近十年近视研究领域涵盖眼科学、分子生物学、遗传学、眼视光学、流行病学等多个学科领域。未来需要进一步探索近视的病因和发病机制、早期识别和筛查、管理技术、人工智能辅助诊断等,以制定更加有效、安全的近视防控策略。

关键词：近视文献计量学数据可视化屈光手术近视防控 Web of Science VOSviewer CiteSpace

NECTIN1缺失在食管鳞癌发生和进展中的作用及其机制

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基因组学与应用生物学 2024年

作者：杨航潘英杰龙元凤张佳怡乔彦刘云杨思芸宋桂芹刘康川北医学院基础医学与法医学研究所川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院/北京安贞医院南充医院

本研究旨在探究粘连蛋白细胞粘附分子1（nectin cell adhesion molecule 1， NECTIN1）缺失对食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma， ESCC）细胞发生发展的影响及其分子作用机制，该基因编码的蛋白在上皮细胞和内皮细胞的粘... 详细信息

本研究旨在探究粘连蛋白细胞粘附分子1（nectin cell adhesion molecule 1， NECTIN1）缺失对食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma， ESCC）细胞发生发展的影响及其分子作用机制，该基因编码的蛋白在上皮细胞和内皮细胞的粘附连接以及紧密连接的组织中发挥作用。利用UCSC数据库分析食管癌中NECTIN1基因的线性拷贝数，通过Western blot和免疫组织化学染色分析NECTIN1在食管癌细胞、食管癌组织与癌旁组织中的蛋白水平。利用TISIDB数据库分析NECTIN1表达与食管癌临床特征的相关性。采用shRNA敲低NECTIN1在KYSE150和KYSE510细胞中的表达，利用CCK-8实验、克隆形成实验、细胞划痕和Transwell实验以及流式细胞术检测敲低NECTIN1对细胞功能的影响。对NECTIN1敲低的KYSE510细胞进行转录组测序，筛选差异基因，通过GO和KEGG富集分析，探讨NECTIN1可能影响的信号调控网络。结果发现NECTIN1 在部分食管癌患者中拷贝数减少，蛋白水平显著低于癌旁组织（P<0.000 1），NECTIN1低表达的食管鳞癌患者分化较差（P<0.000 1），与临床晚期分期呈负相关。敲低NECTIN1 基因后KYSE150和KYSE510细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强（均P<0.05），细胞S期增多，并使细胞凋亡减少（P<0.01）。在KYSE150 细胞中敲低NECTIN1，进行转录组测序分析后发现115个基因显著上调、209个基因显著下调。KEGG分析表明，差异基因富集于肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor， TNF）信号通路（P<0.01），通过GEPIA数据库分析该通路中的3个基因IL1B、TNFAIP3、CSF2的表达水平在ESCA患者中与NECTIN1 呈显著正相关（均P<0.05），与转录组测序结果相符。NECTIN1的缺失促进了ESCC细胞增殖、迁移与侵袭，其机制可能是通过TNF信号通路发挥抑癌作用，调控ESCC的发生与发展。

关键词：粘连蛋白细胞粘附分子1(NECTIN1) 食管鳞癌(ESCC) 增殖侵袭 TNF信号通路

肠道硝酸盐对肺炎克雷伯菌生长的影响及其调控机制

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南方医科大学学报 2024年第4期44卷 757-764页

作者：谢继臣马仁惠李默然李蓓熊莉娜湖北医药学院基础医学院湖北十堰442000 华中科技大学同济医学院附属梨园医院消化内科湖北武汉430077

目的探讨肠道硝酸盐环境对肺炎克雷伯菌生长的影响及具体调控机制。方法构建肺炎克雷伯菌硝酸还原酶narG、narZ单基因和双基因敲除株及硝酸盐二元调控系统NarXL基因敲除株;全自动细菌生长分析仪检测菌株在体外有氧硝酸盐环境下的生长曲... 详细信息

目的探讨肠道硝酸盐环境对肺炎克雷伯菌生长的影响及具体调控机制。方法构建肺炎克雷伯菌硝酸还原酶narG、narZ单基因和双基因敲除株及硝酸盐二元调控系统NarXL基因敲除株;全自动细菌生长分析仪检测菌株在体外有氧硝酸盐环境下的生长曲线;分光光度计法检测细菌厌氧硝酸盐环境下生长曲线;qRT-PCR检测二元调控系统NarXL在厌氧硝酸盐环境中对硝酸还原酶narG、narZ基因表达影响;EMSA和MST分析NarXL在感应利用硝酸盐环境中的具体调控机制;qRT-PCR检测厌氧硝酸盐环境对narG、narZ基因表达的影响;利用竞争实验检测narG、narZ基因在厌氧硝酸盐环境中的生长优势。结果相比于有氧环境,在厌氧条件下,硝酸盐能够明显促进肺炎克雷伯菌野生株的生长且促进生长的幅度高于narXL基因敲除株;qRT-PCR显示厌氧条件下narXL敲除株中硝酸还原酶相关基因narG、narZ表达显著降低(P二元调控系统NarXL可感应肠道硝酸盐浓度变化直接正调控硝酸还原酶基因narG、narZ表达从而促进细菌生长。

关键词：肺炎克雷伯菌 NarXL 硝酸还原酶厌氧生长肠道环境

腹腔镜与开腹根治性切除术治疗肝门部胆管癌疗效比较的Meta 分析

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中国普通外科杂志 2024年第8期33卷 1206-1219页

作者：吴建林王伦镔余峰李钊汪杰赵敬兵周国俊冷政伟川北医学院附属医院肝胆外二科四川南充637000 川北医学院附属医院肿瘤干细胞研究中心四川南充637000

背景与目的:肝门部胆管癌(HCCA)是临床中常见的胆道恶性肿瘤,其解剖位置特殊,侵袭性强,手术难度极大。近年来,随着腹腔镜技术和微创外科理念的发展,腹腔镜HCCA根治性切除术已在一些大型肝胆胰脾疾病医学中心开展,其较传统开腹HCCA根治... 详细信息

背景与目的:肝门部胆管癌(HCCA)是临床中常见的胆道恶性肿瘤,其解剖位置特殊,侵袭性强,手术难度极大。近年来,随着腹腔镜技术和微创外科理念的发展,腹腔镜HCCA根治性切除术已在一些大型肝胆胰脾疾病医学中心开展,其较传统开腹HCCA根治性切除术具有一定的优势,但两种手术方式的选择仍存在一定的争议。本研究通过Meta分析的方法比较腹腔镜与开腹HCCA根治性切除术的疗效与安全性,为临床实践提供循证医学参考。方法:检索国内外多个数据库,收集比较腹腔镜与开腹HCCA根治性切除术的临床研究,检索日期为建库至2023年8月31日。根据纳入、排除标准筛选文献,并对纳入研究的文献进行资料提取及质量评估后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:最终共纳入20篇文献,包含1036例患者,其中457例行腹腔镜HCCA根治性切除术(腹腔镜组),579例行开腹HCCA根治性切除术(开腹组)。Meta分析结果显示,主要结局指标方面,腹腔镜组较开腹组淋巴结清扫数目增加(MD=0.61,95%CI=0.11~1.12,P0.05);次要结局指标方面,腹腔镜组较开腹组手术时间延长(MD=51.39,95%CI=44.78~57.99,P<0.05)、术中出血量减少(MD=-75.29,95%CI=-92.46~-58.12,P<0.05)、切口长度缩小(MD=-10.25,95%CI=-19.12~-1.38,P<0.05),以及术后住院时间、术后进食时间、术后下床时间均缩短(均P<0.05)。结论:基于目前的证据表明,腹腔镜HCCA根治性切除术是安全有效的,能提高淋巴结清扫数目和R0切除率,且创伤更小。鉴于研究的局限性,上述结论尚需更多高质量研究予以验证。

关键词： Klatskin肿瘤肝切除术腹腔镜预后 Meta分析

四川省临床药师培训学员“沟通和接诊能力”评价量表的编制

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中国医院药学杂志 2024年

作者：何梅黄玲罗玉婷杜潇黎风杨明川北医学院附属医院药剂科川北医学院药学院成都医学院第一附属医院药学部射洪市人民医院药剂科

目的：编制临床药师培训学员“沟通和接诊能力”评分表新表，为提升临床药师接诊能力、规范床旁考核提供参考。方法：组建由1名医患沟通心理学专家，1名主管医患纠纷的医院人员，1名临床医生带教老师，4名临床药师带教老师，2名临床药... 详细信息

目的：编制临床药师培训学员“沟通和接诊能力”评分表新表，为提升临床药师接诊能力、规范床旁考核提供参考。方法：组建由1名医患沟通心理学专家，1名主管医患纠纷的医院人员，1名临床医生带教老师，4名临床药师带教老师，2名临床药师培训基地业务主任构成的专家咨询团队，运用专家咨询法构建新表初稿；然后运用电子问卷，调查四川省13家临床药师培训基地药学带教老师对新表初稿的意见，问卷结果经专家权威系数校正后，由专家咨询团队再次审查、讨论一致后形成新表。结果：经2轮专家咨询、问卷调查四川省42名主带教临床药师，形成由接诊准备、信息采集、信息给予、沟通技巧4部分组成，包含35个条目的新表；所有条目重要性得分均>3分，一级指标的协调指数w＝0.32，P＝0.000；二级指标的协调指数w=0.24，P＝0.000。结论：新表同质性良好，对沟通和接诊能力有更完善的评估，但还需开展大样本、以学员为研究对象的新旧表对照研究来验证其信效度。

关键词：临床药师培训沟通能力评价

基于网络药理学和分子对接的白藜芦醇治疗口腔鳞状细胞癌的机制研究

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口腔疾病防治 2024年第3期32卷 178-187页

作者：陈虹君雷奇王治林钟晓武邱亚李丽华川北医学院附属医院口腔科四川南充637000 川北医学院口腔医学系四川南充637000 川北医学院附属医院检验科四川南充637000 川北医学院附属医院医学研究中心四川南充637000

目的通过网络药理学及分子对接等生物学信息方法,探讨白藜芦醇治疗口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的分子机制,为白藜芦醇治疗OSCC的临床应用提供参考。方法利用Swiss Target Prediction(http://***)、SEA数据库(htt... 详细信息

目的通过网络药理学及分子对接等生物学信息方法,探讨白藜芦醇治疗口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的分子机制,为白藜芦醇治疗OSCC的临床应用提供参考。方法利用Swiss Target Prediction(http://***)、SEA数据库(http://***)、Pharm mapper数据库(http://***)检索获得白藜芦醇的相关靶点,以DISGENET(***)、OMIM(https://***)、GeneCards(https://***)数据库筛选OSCC疾病靶点,取药物与疾病靶点的交集,再采用Cytoscape 3.7.2软件构建“药物-疾病-靶点-通路”网络,String数据库构建靶蛋白相互作用网络,采用DAVID数据库对关键蛋白进行富集分析,最后通过AutoDock及PyMOL对关键蛋白进行分子对接验证,结合富集分析和分子对接结果预测白藜芦醇治疗OSCC可能的分子作用机制;细胞水平采用Western blot检测不同浓度(50、100μmol/L)白藜芦醇对OSCC细胞株HSC-3细胞Src酪氨酸激酶(Src tyro-sine kinase,SRC)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、雌激素受体基因1(estrogen receptor gene 1,ESR1)及磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3 kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路蛋白表达的影响。结果数据库得到白藜芦醇药物靶点243个,OSCC疾病靶点6094个,将药物与疾病的靶点进行交集获得116个潜在靶点,潜在靶点主要集中参与体内蛋白质自磷酸化、肽基酪氨酸磷酸化、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶信号通路、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控等生物过程,干预PI3K/AKT信号通路发挥抗OSCC的作用。分子对接结果表明白藜芦醇与EGFR、ESR1、SRC等OSCC关键靶点具有较好的结合活性。细胞实验结果表明,白藜芦醇药物干预以剂量依赖的方式抑制了HSC-3细胞中SRC、EGFR、ESR1及p-PI3K和p-AKT的蛋白表达。结论白藜芦醇对OSCC细胞SRC、EGFR、ESR1、p-PI3K、p-AKT靶点具有抑制作用。

关键词：白藜芦醇口腔鳞状细胞癌网络药理学分子对接 Src酪氨酸激酶表皮生长因子受体雌激素受体基因1 磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶B信号通路

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