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METTL3通过IGF2BP2依赖性方式参与m6A修饰调控HBV复制的机制

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陆军军医大学学报 2024年第5期46卷 442-449页

作者：余玲张自力曾蓉张节王鹏潘万龙川北医学院基础医学与法医学院四川南充637100 川北医学院附属医院老年科四川南充637100

目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 2,IGF2BP2)协助甲基转移酶样3(methytransferase like 3,METTL3)通过N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰调控HBV复制的分子机制。方法以HBV稳定复制细胞系HepG2.2.15及其亲本细胞HepG2为模型,斑点杂交分析m6A修饰水平,RT-qPCR和Western blot检测METTL3、IGF2BP2表达。生物信息学及免疫共沉淀分析METTL3与m6A阅读蛋白及其相互作用。将METTL3质粒、METTL3 siRNA和(或)IGF2BP2 siRNA转染至HepG2.2.15细胞,分别记为OE-METTL3、si-METTL3、si-IGF2BP2、OE-METTL3+si-IGF2BP2、si-METTL3+si-IGF2BP2、Control组;qPCR检测HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA拷贝数,RT-qPCR或Western blot检测HBV pgRNA、METTL3、IGF2BP2表达。结果与HepG2细胞相比,在HepG2.2.15细胞中m6A修饰富集,METTL3、IGF2BP2表达水平升高(P<0.05)。与Control组相比,在OE-METTL3组中m6A修饰富集增强,IGF2BP2表达水平升高(P<0.05),HBV复制相关指标(HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA、HBV pgRNA)升高(P<0.01);在si-METTL3组中则相反。生物信息学分析及免疫共沉淀显示METTL3与IGF2BP2为互作蛋白。与Control组相比,在si-IGF2BP2组中m6A修饰富集减弱,METTL3表达水平降低(P<0.01),HBV复制相关指标降低(P<0.01)。在OE-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较OE-METTL3组降低(P<0.001)。在si-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较si-METTL3组、si-IGF2BP2组降低(P<0.05)。结论METTL3依赖IGF2BP2富集m6A通过增强HBV rcDNA转化为cccDNA,进而增强pgRNA逆转录复制病毒。

关键词：甲基转移酶样3 胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2 N6-甲基腺苷乙型肝炎病毒

转录因子HNF1α基因c.493T>C位点突变对其蛋白质水平的影响

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遗传 2024年第3期46卷 256-262页

作者：梁淑杰彭乙华雷佳红贾艾敏蒋红蔡燕川北医学院附属医院遗传与产前诊断中心南充637000 川北医学院附属医院内分泌科南充637000 川北医学院附属医院风湿免疫研究所南充637000 川北医学院检验医学院南充637000 川北医学院转化医学研究中心南充637000

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)... 详细信息

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)3型的致病原因,目前已报道的该基因的突变位点众多,如P291fsinsC、P112L等常见的突变位点,但其具体的分子机制尚不清楚。本研究对前期工作中发现的1例携带有HNF1α基因c.493T>C位点突变的MODY3患者,通过应用Mutation Surveyor软件分析突变位点的致病性,构建HNF1α野生型和突变型真核表达质粒,采用Western blot检测两种质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性变化,结果发现Mutation Surveyor软件分析提示c.493T>C位点突变可能为致病性变异基因,Western blot显示突变型真核质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性均明显降低,差异均具有统计学意义(PC(***165Arg)变异显著影响HNF1α的表达量及稳定性,可能为其导致疾病发生的原因,为后续深入探究MODY3的分子致病机制提供了新的方向。

关键词： MODY HNF1α 基因突变

超声造影定量评估微波消融兔肝后凝固坏死范围：与病理所见对照

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中国医学影像技术 2024年

作者：何萍罗霞杨鑫唐小清杨友张菊英甘媛琳余进洪川北医学院附属医院超声科

目的与病理所见相对照，观察超声造影（CEUS）显示微波消融（MWA）兔肝后消融灶凝固坏死范围。方法将25只健康雄性实验兔随机平均分为L0、M0、H0、M7及M14共5组，以不同功率、时间行MWA，之后通过CEUS及病理检查观察消融灶。L0组 20W... 详细信息

目的与病理所见相对照，观察超声造影（CEUS）显示微波消融（MWA）兔肝后消融灶凝固坏死范围。方法将25只健康雄性实验兔随机平均分为L0、M0、H0、M7及M14共5组，以不同功率、时间行MWA，之后通过CEUS及病理检查观察消融灶。L0组 20W、1min，M0组：30W、1min，H0组 30W、3min，于每只兔肝消融4个靶区，均于消融当日观察消融灶；M7组及M14组均为30W、1min，于每只兔肝消融2个靶区，分别于第7及第14日观察消融灶。比较各组CEUS及病理所见消融灶或消融灶+水肿带（IRB）范围，观察其测值差异及随时间延长的变化。结果消融后第7日，CEUS显示M7组消融灶面积略高于病理所见（校正P=0.045），但2种方法所测消融灶长径及短径差异均无统计学意义（校正P均＞0.05）；消融后第14日，2种方法所测M14组消融灶长径、短径及面积差异均无统计学意义（校正P均＞0.05）。CEUS或病理所见M0组消融灶长径、短径及面积均小于M7组及M14组（校正P均＜0.05），而M7组和M14组间差异均无统计学意义（校正P均＞0.05）。结论以不同功率及时间消融兔肝当日，CEUS显示消融灶、消融灶+IRB范围及IRB面积均大于病理所见；消融后第7日CEUS与病理所见消融灶范围基本相符，提示于消融后第7日复查CUES可准确判断消融灶实际凝固坏死范围。

关键词：兔肝消融技术超声检查

单孔+13D腹腔镜胰十二指肠切除术的临床疗效

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中华消化外科杂志 2024年第5期23卷 739-745页

作者：武国徐建杨刚李伟男张立鑫赵开烽英保李敬东川北医学院附属医院肝胆外一科川北医学院肝胆胰肠疾病研究所南充637000

目的探讨单孔+13D腹腔镜胰十二指肠切除术(SILPD+1)的临床疗效。方法采用回顾性队列研究方法。收集2023年1—10月川北医学院附属医院收治的40例行3D腹腔镜胰十二指肠切除术患者的临床病理资料;男24例,女16例;年龄为(63±10)岁。40例患者... 详细信息

目的探讨单孔+13D腹腔镜胰十二指肠切除术(SILPD+1)的临床疗效。方法采用回顾性队列研究方法。收集2023年1—10月川北医学院附属医院收治的40例行3D腹腔镜胰十二指肠切除术患者的临床病理资料;男24例,女16例;年龄为(63±10)岁。40例患者中,18例行SILPD+1,设为SILPD+1组;22例行传统5孔法3D腹腔镜胰十二指肠切除术(CLPD),设为CLPD组。观察指标:(1)手术情况。(2)术后及并发症情况。正态分布的计量资料以x±s表示,组间比较采用独立样本t检验;偏态分布的计量资料以M(Q1,Q3)表示,组间比较采用Mann⁃Whitney U检验。计数资料以绝对数表示,组间比较采用χ^(2)检验或Fisher确切概率法。等级资料比较采用Mann⁃Whitney秩和检验。结果(1)手术情况。SILPD+1组患者中,17例顺利施行手术,1例为胰头炎性肿块,与肠系膜血管分界不清晰,周围组织粘连严重,中转开腹;CLPD组患者均顺利施行手术,无中转开腹;两组患者中转开腹比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者术中出血量、术中输血、手术时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)术后及并发症情况。两组患者肿瘤长径、术中清扫淋巴结数目、阳性淋巴结数目、R0切除、肿瘤病理学类型、术后首次肛门排气时间、术后首次进食流质食物时间、术后首次下床活动时间、术后引流管拔除时间、术后住院时间、术后出血、胰瘘、乳糜漏、胃排空延迟、腹腔积液、切口感染、并发症分级比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。SILPD+1组和CLPD组患者术后疼痛评分分别为5.0(4.5,6.0)分和6.5(6.0,7.0)分,两组比较,差异有统计学意义(Z=-3.61,P<0.05)。两组患者术后均无胆瘘、腹腔感染发生;均无术后30 d内再入院、术后90 d内死亡。结论与CLPD比较,SILPD+1安全、可行,术后疼痛更轻,保证肿瘤学疗效的情况下,并未增加手术时间、术后住院时间及术后并发症发生率。

关键词：胰十二指肠切除术单孔+1 3D 腹腔镜检查疗效

放疗前诱导免疫治疗在不可切除Ⅲ期非小细胞肺癌中的研究进展

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中国肿瘤临床 2024年第5期51卷 264-268页

作者：曾丽张洪攀(综述) 马代远(审校) 川北医学院川北医学院附属医院肿瘤科四川省南充市637000

肺癌是全世界癌症相关死亡的主要原因,其中以非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)最为常见。临床中超过1/3的NSCLC患者在初诊时已处于Ⅲ期,且其中大部分不可切除。放化疗(chemoradiotherapy,CRT)为不可切除Ⅲ期NSCLC的标准... 详细信息

肺癌是全世界癌症相关死亡的主要原因,其中以非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)最为常见。临床中超过1/3的NSCLC患者在初诊时已处于Ⅲ期,且其中大部分不可切除。放化疗(chemoradiotherapy,CRT)为不可切除Ⅲ期NSCLC的标准治疗方案,然而疗效较差。随着免疫检查点抑制剂的出现,CRT后的巩固免疫治疗使得不可切除Ⅲ期NSCLC患者的生存率较单纯CRT显著提升,但仍有部分患者未能从巩固免疫治疗中获益。目前,基于诱导免疫治疗在可切除Ⅲ期NSCLC中取得的显著效果,探索诱导免疫治疗在不可切除Ⅲ期NSCLC的研究已展开。本文就放疗前的诱导免疫治疗在不可切除Ⅲ期NSCLC的作用机制、最新临床研究进展和诱导免疫治疗周期进行综述,以期为不可切除Ⅲ期NSCLC的临床治疗提供参考依据。

关键词：诱导免疫治疗非小细胞肺癌研究进展

腔镜辅助经耳后发际内入路在颌下腺切除中的临床应用

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第9期 862-865+871页

作者：明华伟袁宗毅张兴安贾佳欣王华东陈方园谭小尧何芸川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院口腔颌面外科川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院口腔科

目的:探讨腔镜辅助下经耳后发际内入路在颌下腺切除术的临床效果。方法:选择2022年9月至2023年9月治疗的颌下腺良性肿瘤患者18例，在耳后发际内设计长约5 cm切口，先直视下翻瓣至胸锁乳突肌前缘附近，通过腔镜翻瓣建腔，在腔镜辅助下完... 详细信息

目的:探讨腔镜辅助下经耳后发际内入路在颌下腺切除术的临床效果。方法:选择2022年9月至2023年9月治疗的颌下腺良性肿瘤患者18例，在耳后发际内设计长约5 cm切口，先直视下翻瓣至胸锁乳突肌前缘附近，通过腔镜翻瓣建腔，在腔镜辅助下完成颌下腺切除术。术后经发际内放置负压引流，皮内连续缝合关闭创口。术后随访3～6个月，评价其临床效果。结果:所有患者均按计划经腔镜辅助下完成颌下腺切除术，术中无一例中转为颌下切口。手术时间65～97 min,平均75 min;术中出血10～20 mL,平均14 mL;术后无舌体麻木、创口感染、肿瘤复发等情况出现，但有10例患者术后出现耳廓麻木不适，经随访6～9个月逐渐恢复；2例患者术后发生口角歪斜，经随访后症状逐渐缓解；切口均Ⅰ期愈合，且部位隐蔽。结论:腔镜辅助经耳后发际内入路在颌下腺切除术的美容效果好、创伤小、并发症少，是颌下腺切除的一种手术入路选择。

关键词：颌下腺腔镜超声刀微创切口

基于超声影像组学预测早期与中晚期子宫内膜癌

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中国医学影像技术 2024年

作者：彭小莉王雪莹赵露王诗淳罗梦琳任玲张茂春川北医学院附属医院超声科川北医学院附属医院健康管理中心

目的观察超声影像组学鉴别早期与中晚期子宫内膜癌（EC）的价值。方法回顾性分析294例女性EC患者，包括早期196例、中晚期98例；按7:3随机将其分为训练集（n=206）与验证集（n=88）。比较早期与中晚期患者临床资料并构建临床模型；基... 详细信息

目的观察超声影像组学鉴别早期与中晚期子宫内膜癌（EC）的价值。方法回顾性分析294例女性EC患者，包括早期196例、中晚期98例；按7:3随机将其分为训练集（n=206）与验证集（n=88）。比较早期与中晚期患者临床资料并构建临床模型；基于超声资料提取并筛选影像组学特征，分别采用逻辑回归（LR）、随机森林（RF）、支持向量机（SVM）、高斯朴素贝叶斯（GNB）及极限梯度提升（XGBoost）构建影像组学模型；最后构建临床-影像组学联合模型。观察各模型鉴别早期与中晚期EC的效能。结果早期与中晚期EC患者就诊年龄、月经紊乱、腹痛及绝经占比在训练集和验证集差异均有统计学意义（P均＜0.05）。5个影像组学模型中，RF模型鉴别早期与中晚期EC的曲线下面积（AUC）最大。临床模型、RF影像组学模型及临床-RF影像组学模型两两比较AUC差异均有统计学意义（P均＜0.05），尤以临床-RF影像组学模型的AUC最高。结论基于RF的超声影像组学有助于鉴别早期与中晚期EC，进一步联合临床资料可提高诊断效能。

关键词：子宫内膜肿瘤肿瘤分期超声检查机器学习影像组学

声触诊弹性成像联合脉冲多普勒超声成像参数与早期慢性肾脏病分期的相关性及临床价值

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中华医学超声杂志（电子版） 2024年第5期21卷 491-499页

作者：唐小清何萍杨友罗霞张菊英杨鑫余进洪川北医学院附属医院超声科 637000

目的分析声触诊弹性成像(STE)联合脉冲多普勒(PW)超声成像参数与早期慢性肾病(CKD)改变及其分期的相关性,探讨2种超声成像参数对CKD早期预测、发现及分期诊断的临床意义。方法收集2022年9月至2023年4月川北医学院附属医院收治的按肾小... 详细信息

目的分析声触诊弹性成像(STE)联合脉冲多普勒(PW)超声成像参数与早期慢性肾病(CKD)改变及其分期的相关性,探讨2种超声成像参数对CKD早期预测、发现及分期诊断的临床意义。方法收集2022年9月至2023年4月川北医学院附属医院收治的按肾小球滤过率分期为1~3期的CKD患者共82例作为病例组,将病例组分成CKD 1期、CKD 2期、CKD 3期3组,另选择同期健康体检者35名作为对照组,病例组和对照组分别进行PW、STE检查并记录相关参数,PW参数包括肾门处肾动脉(MRA)、肾窦部段动脉(SRA)、肾锥体叶间动脉(IRA)的收缩期血液峰值流速(PSV)、舒张末期流速(EDV)以及血流阻力指数(RI),STE参数包括肾皮质杨氏模量值的最大值(Emax)、平均值(Emean)、最小值(Emin)。比较病例组与对照组之间超声参数的差异,通过二元Logistic回归分析诊断早期CKD的影响因素,绘制受试者操作特征(ROC)曲线,评估发现早期CKD改变有统计学意义的参数指标以及这些参数对早期CKD联合诊断的价值;分析4组间各个超声参数指标的差异,运用多分类Logistic回归分析,计算各组超声参数的异常检出率,评估对早期CKD分期的诊断价值。结果Logistic回归分析显示,MRA-PSV、MRA-EDV、Emean、Emax对预测早期CKD差异具有统计学意义(OR=0.952、0.893、1.687、1.416,P=0.001、=0.002、=0.001、<0.001),其中Emax是诊断早期CKD的独立影响因素,截断值为11.01 kPa。在单因素诊断中,Emax对早期CKD诊断的ROC曲线下面积(AUC)最大(AUC=0.740);上述4项指标联合诊断的AUC=0.792,高于各个单项参数。4组间对比提示,MRA-PSV、MRA-EDV对CKD 2期检出率最高,且MRA-EDV检出率高于MRA-PSV(55.6%vs 51.9%);SRA-PSV、SRA-EDV、Emax对CKD 3期检出率最高(60.9%vs 52.2%vs 43.5%),其中SRA-PSV检出率最高;Emean对CKD 1期检出率最高(37.5%);联合诊断方式在早期CKD分期中显著提高了CKD 1期的检出率(50.0%)。结论MRA-PSV、MRA-EDV、Emean、Emax可作为预测可能发生早期CKD的超声诊断参数,且对早期CKD初步分期具有一定的诊断价值,PW联合STE提高了早期CKD检出及分期的诊断效能,PW联合STE有望成为早期CKD发现、分期、评估及随访的有效影像学检查方式。

关键词：慢性肾病脉冲多普勒声触诊弹性成像

基于NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路探讨双硫仑改善HFpEF大鼠心功能的机制

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中国病理生理杂志 2024年第10期40卷 1891-1897页

作者：沈玄洋李卫东蒋晓路张美琪谭文涛沈媛文红福川北医学院附属医院急诊科四川南充637000

目的:探讨双硫仑(DSF)在高脂饮食(HFD)和一氧化氮阻滞剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME诱导的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)大鼠模型中的作用及可能的机制。方法:通过HFD+L-NAME构建HFpEF大鼠模型;将SD大鼠随机分为三组:control组(给予... 详细信息

目的:探讨双硫仑(DSF)在高脂饮食(HFD)和一氧化氮阻滞剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME诱导的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)大鼠模型中的作用及可能的机制。方法:通过HFD+L-NAME构建HFpEF大鼠模型;将SD大鼠随机分为三组:control组(给予正常饮食和水喂养)、HFpEF组(给予HFD和含0.5 g/L L-NAME的饮用水喂养)和DSF+HFpEF组(在HFD+L-NAME的基础上给予DSF治疗)。5周后,使用超声心动图和运动力竭实验检测心功能;苏木素-伊红和麦胚凝集素染色检测心肌病理改变;Masson染色检测心肌纤维化程度;TUNEL染色观察细胞凋亡水平;Western blot检测心肌中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、cleaved caspase-1和消皮素D的N端片段(GSDMD-N)蛋白水平;ELISA检测血清N末端脑利尿钠肽前体(NT-proBNP)水平及心肌中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18含量。结果:与control组相比,HFpEF组大鼠体重、收缩压、舒张压、E/E'比值、舒张期左心室前壁厚度(LVAWd)和血清NT-proBNP水平均显著升高(P0.05)。与control组相比,HFpEF组大鼠心肌纤维化面积、心肌细胞横截面积和凋亡率均显著升高(P<0.05),DSF+HFpEF组大鼠上述指标均显著下降(P<0.05)。Western blot和ELISA结果显示,与control组相比,HFpEF组大鼠心肌中NLRP3、cleaved caspase-1和GSDMD-N蛋白水平及炎症因子IL-1β和IL-18含量均显著升高(P<0.05);与HFpEF组相比,DSF+HFpEF组大鼠上述指标均显著下降(P<0.05)。结论:DSF可改善HFpEF大鼠心功能,抑制心肌重构,其机制可能与抑制NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路、减轻心肌炎症反应有关。

关键词：双硫仑射血分数保留的心力衰竭 NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路