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基于网络药理学探讨复方鲜石斛颗粒防治酒精性肝病的作用机制及实验验证

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南京中医药大学学报 2023年第9期39卷 895-909页

作者：赵勉邱雨轩胡杨刘子涵王培丽陈伟伟潘安程建明南京中医药大学江苏省经典名方工程研究中心江苏南京210023 南京中医药大学药学院江苏南京210023 南京中医药大学附属医院江苏南京210029

目的结合网络药理学方法和实验验证探讨复方鲜石斛颗粒防治酒精性肝病(ALD)的作用靶点及潜在机制。方法借助TCMSP、ETCM、BATMAN-TCM数据库及文献报道检索复方鲜石斛颗粒的化学成分,利用Swiss ADME数据库筛选优效目标化合物,并通过Swiss... 详细信息

目的结合网络药理学方法和实验验证探讨复方鲜石斛颗粒防治酒精性肝病(ALD)的作用靶点及潜在机制。方法借助TCMSP、ETCM、BATMAN-TCM数据库及文献报道检索复方鲜石斛颗粒的化学成分,利用Swiss ADME数据库筛选优效目标化合物,并通过Swiss Target Prediction数据库对活性成分靶点进行预测。通过GeneCards、OMIM、DrugBank、DisGeNET数据库获取ALD相关疾病靶点,采用String数据库和Cytoscape软件构建靶点相互作用网络图(PPI)及“中药-活性成分-靶点-疾病”网络图,将预测的潜在作用靶点通过DAVID数据库进行GO/KEGG功能富集分析预测作用机制。构建酒精性肝损伤小鼠模型,通过病理染色、ELISA检测、qPCR及Western blot来验证网络药理学富集分析结果。结果通过数据库及文献报道共筛选获得73个关键活性成分,与ALD交集靶点有720个,根据P实验表明,与对照组相比,模型组小鼠肝细胞索排列紊乱,肝小叶界限不清,肝细胞出现明显炎性细胞浸润和脂肪空泡,血清中ALT、AST活力,肝组织TG、TCHO含量及IL-1β、CXCL10、Srebp-1c的基因表达水平显著升高,CPT1基因表达水平显著降低,炎症通路蛋白p-AKT、p-mTOR、p-p65蛋白表达水平升高。复方鲜石斛颗粒治疗后,小鼠肝细胞炎性细胞浸润和脂肪空泡数量减少,肝脏恢复正常细胞结构,血清中ALT、AST活力,肝组织TG、TCHO含量及IL-1β、CXCL10、Srebp-1c的基因表达水平显著降低,CPT1基因表达水平显著升高,同时p-AKT、p-mTOR、p-p65蛋白表达水平也显著降低。结论复方鲜石斛颗粒能有效改善酒精性肝损伤小鼠的肝脏炎症和脂质代谢,并可能通过调节PI3K/Akt信号通路抑制组织炎症。该研究初步揭示了复方鲜石斛颗粒防治ALD的作用机制,为临床用药和后续研究提供参考依据。

关键词：药食同源网络药理学复方鲜石斛颗粒酒精性肝病分子机制

胃肠外营养相关胆汁淤积症患儿预后不良的相关因素分析

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中华危重病急救医学 2021年第6期33卷 731-735页

作者：易巍于雪余雷熊小丽江治霞周俪姗丘燕燕鄢素琪湖北中医药大学中医临床学院武汉430065 江汉大学湖北武汉430058 华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院中西医结合科湖北武汉430016 湖北中医药大学武汉430065

目的探讨影响胃肠外营养相关胆汁淤积症(PNAC)患儿预后的相关因素。方法采用回顾性研究方法,选择华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院2014年1月至2020年12月收治的20例PNAC患儿作为研究对象。将患儿按预后分为预后良好组(15例)和预... 详细信息

目的探讨影响胃肠外营养相关胆汁淤积症(PNAC)患儿预后的相关因素。方法采用回顾性研究方法,选择华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院2014年1月至2020年12月收治的20例PNAC患儿作为研究对象。将患儿按预后分为预后良好组(15例)和预后不良组(5例)。收集两组患儿一般情况、静脉营养时间、相关生化检查指标、主要治疗方法等临床资料;采用Spearman相关性分析法量化丙氨酸转氨酶(ALT)与预后不良的相关性;采用单因素分析影响PNAC患儿预后的危险因素,并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),评价ALT对患儿预后的预测价值。结果两组患儿性别、体质量、胎龄、年龄、喂养方式、静脉营养持续时间、直接胆红素(DBil)、丙氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、总蛋白(TP)、血清白蛋白(Alb)、球蛋白(GLB)、碱性磷酸酶(ALP)、血小板计数(PLT)、白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、淋巴细胞计数(LYM)、尿培养、AST/PLT比值(APRI)及主要治疗方法比较差异均无统计学意义。预后良好组总胆红素(TBil)、ALT、中性粒细胞计数(NEU)、单核细胞计数(MONO)均明显低于预后不良组〔TBil(μmol/L):120.00±48.63比175.26±29.14,ALT(U/L):73.25±44.29比145.30±74.33,NEU(×10^(9)/L):2.55±1.29比5.08±4.10,MONO(×10^(9)/L):1.23±0.87比2.13±0.60,均P<0.05〕。二分类Logistic回归分析显示,ALT是影响PNAC患儿预后的危险因素,ALT每升高1 U/L,预后不良发生的概率就升高3.6%〔优势比(OR)=1.04,95%可信区间(95%CI)为1.00-1.07,P=0.04〕。Spearman相关性分析显示,预后不良发生率与ALT呈正相关(r=0.49,P=0.03)。ROC曲线分析显示,ALT对PNAC患儿预后有一定的预测价值〔ROC曲线下面积(AUC)=0.83,95%CI为0.00-1.00,P=0.03〕;当截断值为121.50 U/L时,其敏感度为80%,特异度为93%,提示ALT可作为临床预测PNAC患儿预后不良的主要指标。结论ALT为影响PNAC患儿预后不良的独立危险因素,其他因素尚不能评价PNAC患儿的预后。

关键词：胃肠外营养相关胆汁淤积症预后不良丙氨酸转氨酶危险因素

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抗纤软肝颗粒通过调节肠道菌群防治肝纤维化

时珍国医国药 2022年第10期33卷 2389-2393页

作者：徐俊戚璐冉思燕周涛许杰程良斌张赤志湖北中医药大学湖北武汉430065 湖北省中医院肝病研究所湖北武汉430061 达州市中心医院四川达州635099

目的观察抗纤软肝颗粒(KXRG)对肠道菌群的影响,并探究其抗纤维化作用是否与肠道菌群结构变化相关。方法第一部分:药物干预实验。18只C57BL/6小鼠随机分为正常组(n=6)、模型组(n=6)、KXRG组(n=6),40%四氯化碳(CCl_(4))橄榄油溶液sc诱导... 详细信息

目的观察抗纤软肝颗粒(KXRG)对肠道菌群的影响,并探究其抗纤维化作用是否与肠道菌群结构变化相关。方法第一部分:药物干预实验。18只C57BL/6小鼠随机分为正常组(n=6)、模型组(n=6)、KXRG组(n=6),40%四氯化碳(CCl_(4))橄榄油溶液sc诱导肝纤维化模型,药物干预8周,无菌操作收集小鼠粪便,并采用16s rRNA测序技术检测小鼠肠道菌群;第二部分:粪菌移植(FMT)验证实验。40只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(n=30),造模成功后,将第一部分收集的正常组、模型组、KXRG组小鼠粪便,分别移植至新的肝纤维化小鼠模型体内,8周后,检测小鼠体重变化,肝脏指数,血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)水平和肝组织形态学改变。结果药物干预实验:与模型组相比,KXRG组肠道菌群在门、科、属等不同水平上均有变化。FMT验证实验:与正常组小鼠粪菌移植组相比,KXRG组小鼠粪菌移植组体重增加量上调,肝脏指数,血清HA、LN、PCⅢ、C-Ⅳ明显下调,肝纤维化病理情况有所改善。结论肠道菌群结构变化在KXRG发挥抗肝纤维化作用中发挥了重要作用。

关键词：抗纤软肝颗粒肝纤维化肠道菌群粪菌移植实验研究

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微RNA在自身免疫性肝炎中的研究进展

中国医药导报 2023年第28期20卷 58-61页

作者：叶雯徐建良杨妮湖北中医药大学中医临床学院湖北武汉430061 湖北中医药大学附属医院肝病科湖北武汉430061

微RNA(miRNA)可通过调控多个基因的表达,潜在调节细胞功能的各个方面,进而参与生物体内的免疫与炎症反应。自身免疫性肝炎(AIH)是免疫介导的慢性炎症性肝病。近年来,miRNA通过调控多种炎症信号通路,影响炎症因子的表达,从而在AIH的免疫... 详细信息

微RNA(miRNA)可通过调控多个基因的表达,潜在调节细胞功能的各个方面,进而参与生物体内的免疫与炎症反应。自身免疫性肝炎(AIH)是免疫介导的慢性炎症性肝病。近年来,miRNA通过调控多种炎症信号通路,影响炎症因子的表达,从而在AIH的免疫应答和疾病进展过程中发挥着重要的作用,一些mi RNA有望成为AIH诊断和治疗的新型无创性生物标志物。本文综述mi RNA在AIH中的研究进展,以期为临床诊治AIH提供新思路。

关键词：自身免疫性肝炎微RNA 研究进展生物标志物治疗

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肝癌的肝再生微环境的研究进展及展望

世界华人消化杂志 2018年第26期26卷 1529-1536页

作者：李瀚旻湖北省中医院(湖北中医药大学附属医院湖北省中医药研究院)肝病研究所中医基础理论研究所湖北省武汉市430061

提出肝癌(liver cancer, LC)的肝再生微环境的新概念有助于从整体上认识和把握肝再生微环境与炎症损伤微环境、免疫调控微环境及血管新生微环境等LC微环境对LC发生发展、复发转移影响的相关机制,探讨更为全面更加有效地通过改善LC的肝... 详细信息

提出肝癌(liver cancer, LC)的肝再生微环境的新概念有助于从整体上认识和把握肝再生微环境与炎症损伤微环境、免疫调控微环境及血管新生微环境等LC微环境对LC发生发展、复发转移影响的相关机制,探讨更为全面更加有效地通过改善LC的肝再生微环境防治LC发生发展、复发转移的措施与方案,提高LC防治能力和水平. LC的肝再生微环境影响LC的发生发展、复发转移,在消灭LC细胞或组织的基础上,结合维护正常的肝再生机制和改善LC的肝再生微环境是防治LC的重要策略之一,研究多成分、多靶点、多层次、多途径、多时限地改善肝再生微环境而延缓、阻止、甚或逆转LC的发生、发展和转移的网络式作用机制是防治LC的重要研究方向之一.近些年来,中医药改善肝再生微环境防治LC的发生发展及复发转移方面的研究与应用虽取得若干进展,但如何全面准确地揭示网络式的作用机制和如何提供高级别的循证医学证据两大关键科学问题亟待通过更加全面深入地研究,重点推进,加以解决.

关键词：肝癌肝再生微环境

不同阶段HBV相关ACLF患者外周血DC及T淋巴细胞免疫功能特点研究

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肝脏 2014年第12期19卷 924-929页

作者：张涛吉婧刘鹏纪恩茹陈斌黄裕红孙克伟湖南中医药大学第一附属医院传染科国家中医(肝病)临床研究基地长沙410007

目的比较不同阶段的HBV相关慢加急性(亚急性)肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血树突状细胞(DC)、T淋巴细胞(TC)相关细胞免疫功能,阐述DC-TC轴在HBV-ACLF发病过程中可能的细胞免疫学机制。方法 HBV-ACLF患者30例,分为早期组15例与中晚期组15例... 详细信息

目的比较不同阶段的HBV相关慢加急性(亚急性)肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血树突状细胞(DC)、T淋巴细胞(TC)相关细胞免疫功能,阐述DC-TC轴在HBV-ACLF发病过程中可能的细胞免疫学机制。方法 HBV-ACLF患者30例,分为早期组15例与中晚期组15例,另设健康对照组8例,以外周血来源的PBMC体外分离诱导培养DC与TC,应用流式细胞计数检测DC细胞表型HLA-DR、CD80、CD86、CD83、CD1α的表达率,及TC表面分子CD3+、CD4+T、CD8+T淋巴细胞百分比,并检测DC上清液中IFN-α、IL-4的分泌水平,比较不同阶段HBV-ACLF患者免疫细胞及炎性因子表达的差异。结果与健康人比较,HBV-CLF患者DC表型HLA-DR、CD1α、CD83、CD80、CD86表达率显著下降(t值分别为5.3356、13.269、10.8742、13.3685和23.021,均P分子CD3+、CD4+T、CD4+/CD8+细胞比值显著下降(t值分别为7.4441、12.5557、11.0771,均P细胞百分比显著上升(t=4.4359,P分子中晚期组CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+细胞比值显著下降(P值分别为:0.0268、0.0002),CD8+T细胞百分比显著上升(P=0.0001)。结论不同阶段HBV-ACLF患者的DC、TC功能状态均表现为细胞免疫功能低下,中晚期患者的细胞免疫功能更为低下;HBV-ACLF全病程存在促/抑炎性细胞因子功能紊乱,早期患者存在炎症因子过度释放,中晚期患者存在抗炎症细胞因子表达增强。

关键词： HBV 相关性 ACLF 树突状细胞 T 淋巴细胞细胞免疫功能

清温并用法对HBV-ACLF非阳黄证患者Treg/Th17型细胞因子表达的影响

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中华中医药杂志 2018年第12期33卷 5687-5691页

作者：宋征福彭杰陈斌孙克伟张涛柳州市中医医院脾胃病科柳州545001 湖南中医药大学第一附属医院肝病科长沙410007

目的:观察清温并用法对乙型肝炎慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)非阳黄证患者外周血清Treg/Th17型细胞因子表达的影响。方法:采用两中心、随机、对照设计方法,根据中央随机系统将36例非阳黄证的HBVACLF患者随机分为试验组和对照组,试验组20例... 详细信息

目的:观察清温并用法对乙型肝炎慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)非阳黄证患者外周血清Treg/Th17型细胞因子表达的影响。方法:采用两中心、随机、对照设计方法,根据中央随机系统将36例非阳黄证的HBVACLF患者随机分为试验组和对照组,试验组20例,对照组16例,试验组为西医内科综合治疗基础上联合清温并用法,对照组为西医内科综合治疗,两组均治疗8周,应用ELISA法检测两组患者第0周及第8周时外周血清标本转化生长因子(TGF-β)、白介素(IL-10、IL-17、IL-23)的表达水平。结果:(1)治疗后,试验组在8周累计生存率高于对照组,但差异无统计学意义,而黄疸总体有效率,两组差异有统计学意义(P学意义(P学意义(P学意义(P细胞因子减轻炎症反应有关。

关键词： HBV-ACLF 非阳黄证清温并用法 Treg/Th17型细胞因子

新风胶囊通过BTLA-HVEM诱导Treg免疫耐受改善膝骨关节炎大鼠心肺功能

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第11期28卷 1133-1137页

作者：程园园刘健冯云霞刘磊万磊安徽中医学院研究生部安徽合肥230031 第一附属医院风湿科安徽合肥230031 湖北中医药大学研究生部湖北武汉430065

目的:观察膝骨关节炎(KOA)大鼠心肺功能的变化及新风胶囊(XFC)对其影响,探讨可能的分子机制。方法:按随机数字表将40只大鼠随机分为正常对照(NC)组,模型对照(MC)组,氨基葡萄糖对照(GS)组,XFC组,每组10只。除NC组外,采用关节腔注射木瓜... 详细信息

目的:观察膝骨关节炎(KOA)大鼠心肺功能的变化及新风胶囊(XFC)对其影响,探讨可能的分子机制。方法:按随机数字表将40只大鼠随机分为正常对照(NC)组,模型对照(MC)组,氨基葡萄糖对照(GS)组,XFC组,每组10只。除NC组外,采用关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸方法复制成KOA大鼠模型,造模后第14天开始给药。NC组及MC组均给予生理盐水,剂量为0.01 g/kg,其余2组分别给予GS、XFC混悬液,剂量分别为0.098 g/kg、0.375 g/kg。采用超声诊断仪检测大鼠心功能,动物肺功能仪检测大鼠肺功能,ELISA法检测BTLA、HVEM、IL-17、IL-4、TGF-β1;流式细胞术检测大鼠外周血CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达。结果:与NC组比较,MC组体质量、E、E/A、FVC、FEV1、FEF25、FEF50、FEF75、MMF、PEF,BTLA、HVEM、IL-4、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg明显降低,TGF-β1、IL-17明显升高(P<0.01或P<0.05)。与MC组比较,各组大鼠体质量,心功能参数E峰、E/A,肺功能参数FEV1、FEF50、FEF75、PEF,BTLA、HVEM、IL-4、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg明显升高,关节软骨Mankin评分、心系数、肺系数、TGF-β1、IL-17明显降低(P<0.01或P<0.05);与GS组相比,XFC组体质量、Treg升高最为明显(P<0.01或P<0.05)。结论:新风胶囊改善KOA大鼠关节软骨Mankin评分,改善其心肺功能,其机制可能是促进BTLA-HVEM负调共刺激信号作用,诱导Treg免疫耐受,上调IL-4表达,下调IL-17、TGF-β1表达,抑制异常免疫炎症反应。

关键词：骨关节炎心肺功能 B T淋巴细胞弱化因子调节T细胞新风胶囊

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芍药甘草汤的古籍文献研究

中西医结合肝病杂志 2022年第5期32卷 432-435页

作者：惠晨阳李晓东李恒飞肖明中湖北中医药大学中医临床学院湖北武汉430065 湖北省中医院肝病科、中医肝肾研究及应用湖北省重点实验室湖北省中医药研究院

目的:为经典名方的临床应用及药物研发提供古代文献证据支持。方法:对芍药甘草汤的中医古籍文献进行文献计量学研究,统计其方剂组成、主治病证、中药剂量、炮制方法、制法服法等。结果:整理后共获得芍药甘草汤相关古代文献原文信息740条... 详细信息

目的:为经典名方的临床应用及药物研发提供古代文献证据支持。方法:对芍药甘草汤的中医古籍文献进行文献计量学研究,统计其方剂组成、主治病证、中药剂量、炮制方法、制法服法等。结果:整理后共获得芍药甘草汤相关古代文献原文信息740条,涉及中医古籍237本,分析发现芍药甘草汤最早见于东汉张仲景所著《伤寒论》,方剂组成为芍药、甘草2味药材,主治病证包括伤寒伤阴后的小便数、脚挛急,及腹痛、小肠咳、湿热脚气等。结论:后世医家对芍药甘草汤注解、应用及发挥诸多,所撰医籍上及西晋,下抵明清,不乏有加减应用者,扩展了其临床应用范围。

关键词：经典名方芍药甘草汤古籍文献剂量