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基于固相萃取-高效液相色谱-串联质谱测定孕妇尿液中8种邻苯二甲酸酯代谢物及新生儿出生结局评价

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色谱 2025年第1期43卷 60-67页

作者：王梓皓徐梦菲李贝妮吴萍吴微湖北中医药大学检验学院湖北武汉430065

邻苯二甲酸酯(PAEs)是一种环境内分泌干扰物,广泛存在于日常生活中,并可通过多种途径进入机体。孕妇作为一类特殊人群,若暴露于PAEs,将会对子代的生长发育造成不良影响。研究建立了固相萃取-高效液相色谱-串联质谱(SPE-HPLC-MS/MS)同时... 详细信息

邻苯二甲酸酯(PAEs)是一种环境内分泌干扰物,广泛存在于日常生活中,并可通过多种途径进入机体。孕妇作为一类特殊人群,若暴露于PAEs,将会对子代的生长发育造成不良影响。研究建立了固相萃取-高效液相色谱-串联质谱(SPE-HPLC-MS/MS)同时检测孕妇尿液中8种PAEs代谢物(mPAEs)的分析方法。尿液样品经β-葡萄糖苷酶酶解后,采用Bond Elut Plexa固相萃取柱净化,样品经洗脱、浓缩、复溶后,进行HPLC-MS/MS分析。采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(100 mm×3 mm,3.5μm)进行分离,以0.1%乙酸水溶液和0.1%乙酸乙腈作为流动相进行梯度洗脱,在多反应监测(MRM)模式下检测,内标法定量。结果表明,8种mPAEs在0.1~200 ng/mL范围内线性关系良好,检出限为0.015~0.048 ng/mL,定量限为0.050~0.160 ng/mL。在低、中、高3个加标水平(1、10、50 ng/mL)下,8种mPAEs的加标回收率为80.2%~99.7%。采用此方法对鄂州市妇幼保健院497名孕妇尿液中的8种mPAEs水平进行检测,结果表明,497名孕妇广泛暴露于PAEs,其中邻苯二甲酸单丁酯(MBP)的含量最高,中位数水平为104.46 ng/mL;邻苯二甲酸单苄酯(MBzP)的含量最低,中位数水平为0.22 ng/mL。同时,研究还对新生儿的出生结局进行了评估,线性回归模型表明,孕妇尿液中的邻苯二甲酸单乙酯(MEP)每增加一个自然对数(ln)水平,孕周减少0.11周(95%置信区间(CI):-0.18~-0.03);孕妇尿液中的邻苯二甲酸(2-乙基-5-氧己基)酯(MEOHP)和邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MECPP)每增加一个ln水平,新生儿出生体重分别降低39.28 g(95%CI:-76.48~-2.09)和39.62 g(95%CI:-73.73~-5.52)。该方法操作简便,检出限低,具有较高的准确度和精密度,通过此方法测定了孕妇尿液中的8种mPAEs,并结合新生儿的出生结局发现,孕期PAEs暴露会影响新生儿的生长发育。

关键词：高效液相色谱-串联质谱邻苯二甲酸酯代谢物孕妇尿液出生结局

基于中西医临床病证特点的自身免疫性甲状腺炎动物模型分析

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：贾思锋张卓段昱宇颜克秋左新河李扬赵勇湖北中医药大学湖北中医药大学附属湖北省中医院湖北时珍实验室

目的：自身免疫性甲状腺炎（AIT）是一种复杂的免疫相关疾病，目前尚无明确的治疗方法，AIT的发病机理与治疗药物是中西医研究的重点，笔者基于AIT的中西医诊断和临床病证特点，立足于动物模型评价新方法，对现有AIT动物临床吻合度进行... 详细信息

目的：自身免疫性甲状腺炎（AIT）是一种复杂的免疫相关疾病，目前尚无明确的治疗方法，AIT的发病机理与治疗药物是中西医研究的重点，笔者基于AIT的中西医诊断和临床病证特点，立足于动物模型评价新方法，对现有AIT动物临床吻合度进行评价，并提出建议与展望。方法：通过数据库对现有AIT动物模型的相关文献进行检索，按照中西医诊断标准，对模型的核心症状及伴随症状进行赋值，综合评估其临床吻合度。结果：AIT模型实验动物的选择以鼠类居多，造模方法包括疫苗免疫法，单纯性碘剂诱导法，异源性甲状腺抗原免疫法和高碘水联合抗原免疫法，中西医临床病证的平均吻合度分别为40%、60%、54%、63%，高碘水联合抗原免疫法的西医吻合度最高。中医病理造模方法较少，仅有肝郁脾虚型大鼠模型，其与中西医临床吻合度较高。大多数模型基于西医理论设计，能满足西医的表面有效性和结构有效性标准，但在中医证候的细化与明确区分方面仍有所欠缺。结论：现有AIT病证结合动物模型的构建仍主要集中在西医的病理特征上，对中医证候的全面反映存在不足，今后可在西医病理特征的基础上融入中医的证候特征，构建多因素、动态的病证结合模型，更好地构建符合中医药理论的实验平台，为AIT的发病机制与治疗策略提供更加全面的支持和指导。

关键词：自身免疫性甲状腺炎动物模型中西医病证结合临床吻合度

生命历程视角下认知障碍的风险因素管理:来自柳叶刀痴呆症委员会和最新的循证证据

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中华老年医学杂志 2025年第1期44卷 1-9页

作者：艾亚婷王云翠胡慧湖北中医药大学武汉430065

2024年《柳叶刀》痴呆症委员会更新了自2020年报告以来的新研究成果,为痴呆症预防、干预和护理提供了新的令人鼓舞的证据。本文深入探讨了报告中关于风险管理的主要内容。目前,较明确的认知障碍风险因素包括受教育程度较低、听力下降、... 详细信息

2024年《柳叶刀》痴呆症委员会更新了自2020年报告以来的新研究成果,为痴呆症预防、干预和护理提供了新的令人鼓舞的证据。本文深入探讨了报告中关于风险管理的主要内容。目前,较明确的认知障碍风险因素包括受教育程度较低、听力下降、高血压、吸烟、肥胖、抑郁症、缺乏身体活动、糖尿病、过量饮酒、创伤性脑损伤、社会孤立和空气污染,此外,视力障碍和高浓度低密度脂蛋白胆固醇也被新增入风险因素之列。本文对这14个明确的风险因素的最新循证证据及其潜在机制进行了梳理,提炼了预防认知障碍的潜在机制和贯穿生命历程的风险管理模型。通过消除这14个风险因素,理论上可预防高达45%的痴呆症。最后,我们对未来认知障碍风险因素管理和研究方向提出了展望与建议。

关键词：认知障碍风险因素痴呆循证

中医药调控内质网应激治疗溃疡性结肠炎的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：颜克秋张晓雨孙光军林爱珍湖北中医药大学湖北省中医院湖北中医药大学附属医院湖北省中医药研究院

溃疡性结肠炎（UC）是一种慢性、复发性的炎症性肠病，主要累及直肠和结肠的黏膜层，其发病机制复杂且目前尚不完全明确。内质网应激（ERS）在细胞应对外界压力及维持稳态中发挥关键作用，其异常激活与多种炎症性疾病的发生密切相关，... 详细信息

溃疡性结肠炎（UC）是一种慢性、复发性的炎症性肠病，主要累及直肠和结肠的黏膜层，其发病机制复杂且目前尚不完全明确。内质网应激（ERS）在细胞应对外界压力及维持稳态中发挥关键作用，其异常激活与多种炎症性疾病的发生密切相关，尤其在UC的病理进程中扮演重要角色。ERS通过激活未折叠蛋白反应（UPR）维持细胞稳态，但当应激持续或过度时，UPR无法缓解应激，反而导致肠上皮细胞死亡，加重UC病理进程。调控ERS或许是防治UC的关键靶点，也是目前的研究热点之一。中医药在调控ERS方面具有显著疗效，通过多靶点、多途径作用，展示了独特的治疗优势。近几年的研究已证实，中医药可通过减轻ERS，抑制凋亡，调节自噬，减轻炎症反应，维持肠道屏障功能，以防治UC。该文对ERS与UC 的关系及中医药干预ERS治疗UC进行综述，以期为中医药治疗UC提供新的思路和方法。

关键词：中医药溃疡性结肠炎内质网应激凋亡自噬

生慧颗粒促进BDNF/TrkB信号通路改善阿尔茨海默病斑马鱼认知功能

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中国中西医结合杂志 2025年第1期45卷 83-89页

作者：陈雨萌鲁海菲王平湖北中医药大学中医学院武汉430061 湖北中医药大学老年医学研究所武汉430070 湖北中医药大学教育部老年脑健康中医药防护技术与新产品研发工程中心武汉430070

目的观察生慧颗粒对脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)信号通路的影响,探讨其改善阿尔茨海默病(AD)斑马鱼认知功能的机制。方法选取12月龄野生型AB系雄性斑马鱼75尾,随机分为空白组、模型组、多奈哌齐组、生慧颗粒低剂量... 详细信息

目的观察生慧颗粒对脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)信号通路的影响,探讨其改善阿尔茨海默病(AD)斑马鱼认知功能的机制。方法选取12月龄野生型AB系雄性斑马鱼75尾,随机分为空白组、模型组、多奈哌齐组、生慧颗粒低剂量组、生慧颗粒高剂量组,每组15尾。除空白组外,其余各组用三氯化铝(AlCl3)浸泡给药30日建立AD模型,造模结束后空白组和模型组给于常规水养鱼,多奈哌齐组和生慧颗粒组分别给予多奈哌齐药液(0.25 mg/mL)和生慧颗粒药液(1.48、2.95 mg/mL),采用浸泡法,连续给药14日。应用T迷宫检测斑马鱼学习记忆能力,透射电镜观察脑部超微结构的改变,实时荧光定量PCR检测脑组织BDNF、TrkB、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)mRNA表达,Western Bot检测斑马鱼脑BDNF、TrkB、CREB蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组斑马鱼进入营养富集(EC)区潜伏时间增加(P<0.01,P<0.05)。模型组神经元结构破坏,形态不规则,核膜破裂,线粒体肿胀或空泡化,嵴排列不规则或断裂。模型组BDNF、CREB、TrkB mRNA及蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,生慧颗粒组斑马鱼进入EC区潜伏时间缩短(P<0.01,P<0.05),BDNF、CREB、TrkB mRNA及蛋白表达增加(P<0.05),神经元结构改善。结论生慧颗粒促进BDNF/TrkB信号通路减轻AD斑马鱼的神经元损伤以改善认知功能。

关键词：生慧颗粒阿尔茨海默病斑马鱼 BDNF/TrkB信号通路中药复方中西医结合

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电针对帕金森病小鼠碱性成纤维细胞生长因子/糖原合成酶激酶-3β通路的调控作用

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针刺研究 2025年第2期50卷 167-173页

作者：李媛媛包小立汪瑶王彦春湖北中医药大学针灸骨伤学院武汉430060 湖北中医药大学中医临床学院武汉430060

目的:观察电针对帕金森病(PD)小鼠碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)通路的影响,探讨电针治疗PD的相关机制。方法:将C57/BL6雄性小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、电针组、抑制剂组、抑制剂+电针组,每组1... 详细信息

目的:观察电针对帕金森病(PD)小鼠碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)通路的影响,探讨电针治疗PD的相关机制。方法:将C57/BL6雄性小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、电针组、抑制剂组、抑制剂+电针组,每组10只。采用甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶腹腔注射建立PD小鼠模型。电针组电针“风府”“太冲”“足三里”干预,每次30 min,每日1次,治疗12 d。抑制剂组予成纤维细胞生长因子受体(FGFR)抑制剂AZD4547(12.5 mg·kg^(-1)·d^(-1))连续灌胃12 d。抑制剂+电针组在抑制剂组的基础上给予电针治疗。敞箱实验观察小鼠自主运动能力,免疫组织化学法检测小鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)表达量,TUNEL法检测小鼠黑质组织细胞凋亡率,Western blot法检测中脑黑质BFGF、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、p-GSK-3β、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,模型组敞箱实验自主运动总路程明显缩短(P<0.01),静止持续时间明显延长(P<0.01),中脑黑质TH阳性表达降低(P<0.01),中脑黑质细胞凋亡率升高(P<0.01),BFGF、p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β、Bcl-2蛋白相对表达量降低(P<0.01),Bax蛋白相对表达量升高(P<0.01)。与模型组和抑制剂+电针组相比,电针组敞箱实验自主运动总路程明显延长(P<0.01),静止持续时间明显缩短(P<0.01),中脑黑质TH阳性表达升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.01,P<0.05),BFGF、p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β、Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.01,P<0.05),Bax蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论:电针“风府”“太冲”“足三里”可缓解PD小鼠运动障碍,减轻细胞凋亡,其机制可能与调控BFGF/GSK-3β通路有关。

关键词：帕金森病电针碱性成纤维细胞生长因子糖原合成酶激酶-3β

5种中药浸膏体外美白活性及体内应用效果比较

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精细化工 2025年

作者：敖一村陈晋雨周磊胡俊杰郑国华孟燕湖北中医药大学药学院

为探究甘草、茯苓、红景天、黄芩、白术浸膏的抗氧化及美白活性，寻找具有应用于化妆品潜力的天然活性物质，以体积分数70%的乙醇水溶液为溶剂，将5种中草药进行了闪氏提取、除杂、浓缩，制得了相应浸膏；以1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（D... 详细信息

为探究甘草、茯苓、红景天、黄芩、白术浸膏的抗氧化及美白活性，寻找具有应用于化妆品潜力的天然活性物质，以体积分数70%的乙醇水溶液为溶剂，将5种中草药进行了闪氏提取、除杂、浓缩，制得了相应浸膏；以1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、·OH、2，2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐(ABTS+)自由基清除率和酪氨酸酶活性抑制率为评价指标，考察了5种中药浸膏的体外抗氧化及美白活性；通过UV照射豚鼠构建皮肤老化模型，涂抹上述5种中药浸膏后，考察了其皮肤亮度后取皮并切片、染色，观察其黑色素量及皮肤组织状态。结果表明，5种中药浸膏中，红景天对·OH、DPPH自由基和ABTS+自由基的半抑制质量浓度(IC50)分别为465.5、4.0和2.077 μg/mL，接近阳性对照品VC；对酪氨酸酶的IC50为0.039 μg/mL，展现出最优的抗氧化活性及酪氨酸酶抑制能力。甘草浸膏给药后皮肤亮度（L）为43.39；红景天、甘草、黄芩浸膏均有明显的皮肤修复功效，甘草组皮肤内黑色素沉积量最少。其中，红景天浸膏体外具有很强的应用潜力，而甘草浸膏实际应用效果更好。

关键词：中草药美白抗氧化酪氨酸酶抑制皮肤修复

神农香菊萜类合酶基因CiaTPS1和CiaTPS2的克隆与功能分析

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植物科学学报 2025年

作者：陈诗袁冲赵彬凯鹿昊辰何妍张景景刘义飞湖北中医药大学药学院

神农香菊（Chrysanthemum indicum var. aromaticum）为神农架特有的植物资源，其全株散发浓郁芳香。萜类化合物是其香气成分的重要来源，而萜类合酶（Terpene synthase，TPS）是形成萜类骨架多样性的关键驱动酶。本研究基于神农香菊基... 详细信息

神农香菊（Chrysanthemum indicum var. aromaticum）为神农架特有的植物资源，其全株散发浓郁芳香。萜类化合物是其香气成分的重要来源，而萜类合酶（Terpene synthase，TPS）是形成萜类骨架多样性的关键驱动酶。本研究基于神农香菊基因组数据，克隆到2个TPS基因并对其进行生物信息学分析、亚细胞定位分析和酶活性分析。研究结果表明：CiaTPS1基因开放阅读框（Open reading frame，ORF）全长1 722 bp，编码573氨基酸；CiaTPS2基因ORF全长1 725 bp，编码574个氨基酸。CiaTPS1和CiaTPS2均具有萜类合酶保守结构域和基序，属于TPS-a亚家族。CiaTPS1和CiaTPS2均定位于细胞质和细胞核。通过大肠杆菌外源表达并纯化获得CiaTPS1和CiaTPS2重组蛋白。CiaTPS1和CiaTPS2均能催化GPP生成以α-松油烯为主的8种单萜类产物；CiaTPS1催化FPP生成以1-甲基-4-(6-甲基庚-5-烯-2-基)环己-1，3-二烯为主的10种倍半萜类产物，而CiaTPS2催化FPP生成以姜烯为主的4种倍半萜类产物。研究结果为进一步阐明神农香菊挥发性萜类物质的生物合成机制奠定了重要的研究基础。

关键词：神农香菊萜类合酶基因克隆亚细胞定位酶活性分析

Makorin环指蛋白3参与儿童中枢性性早熟的分子作用机制

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中国生物化学与分子生物学报 2025年第1期41卷 99-104页

作者：陈子琴张雪荣湖北中医药大学中医学院武汉430065 湖北省中医院儿科武汉430061 湖北时珍实验室武汉430061 湖北中医药大学附属医院儿科武汉430061

中枢性性早熟(central precocious puberty,CPP)的发病机制是由于下丘脑-垂体-性腺轴功能的提前启动,而该轴由来自下丘脑的促性腺激素释放激素(gonadotrophin-releasing hormone,GnRH)调控,GnRH分泌增加会促进垂体分泌促性腺激素,从而... 详细信息

中枢性性早熟(central precocious puberty,CPP)的发病机制是由于下丘脑-垂体-性腺轴功能的提前启动,而该轴由来自下丘脑的促性腺激素释放激素(gonadotrophin-releasing hormone,GnRH)调控,GnRH分泌增加会促进垂体分泌促性腺激素,从而导致生殖器官的发育和性激素的分泌。青春期启动的时间受到营养、环境和社会经济因素之间相互作用的影响。在致病基因的研究中,Makorin环指蛋白3(makorin ring finger protein 3,MKRN3)、lin-28同系物A和Delta-like 1同源物等基因的功能缺失性突变,均可导致青春发育期启动时间提前,其中MKRN3的功能丧失突变是家族性CPP最常见的单基因病因之一。自2013年首次在5个CPP家族中鉴定出MKRN 3突变以来,MKRN3在青春期中的作用逐渐被发现。MKRN3属于E3泛素连接酶家族成员,在多种真核生物的中枢神经系统中表达。MKRN3可能作为E3泛素连接酶发挥作用来抑制GnRH活性。最近,越来越多的研究探讨了MKRN3在CPP中的分子作用机制,揭示了多种与MKRN3相互作用的基因及蛋白质,利如MKRN3能抑制KISS1和TAC3活性,从而影响kisspeptin和神经激肽B表达以调控GnRH分泌;MKRN3还能通过泛素化PABPC1抑制GNRH 1 mRNA翻译;另外,还有MBD3、IGF2BP1及NPTX1等靶点,它们均在MKRN3下游参与GnRH调控过程。在MKRN 3上游,miR-30能与MKRN 3基因3′-非翻译区的3个位点结合,从而阻断MKRN 3转录。本文综述了MKRN3在CPP发病过程中的作用及其分子机制方面的研究进展,有助于更好地理解CPP的发病机制,也为进一步深入研究MKRN3分子作用机制奠定了理论基础。

关键词：中枢性性早熟 Makorin环指蛋白3 促性腺激素释放激素儿童