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VX765对大鼠骨关节炎和软骨细胞炎症的作用

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中国修复重建外科杂志 2024年第1期38卷 74-81页

作者：黄婉然涂君雪乔爱卿何储君温州医科大学附属第二医院育英儿童医院药学部浙江温州325000

目的研究VX765对大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)和软骨细胞炎症的影响及其作用机制。方法分离4周龄SD大鼠膝关节软骨细胞,取第3代细胞采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测不同浓度(0、1、5、10、20、50、100μmol/L... 详细信息

目的研究VX765对大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)和软骨细胞炎症的影响及其作用机制。方法分离4周龄SD大鼠膝关节软骨细胞,取第3代细胞采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测不同浓度(0、1、5、10、20、50、100μmol/L)VX765对大鼠软骨细胞活性的影响;体外构建脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导细胞炎症模型,将细胞分为对照组、LPS组、无明显细胞毒性VX765浓度1组和VX765浓度2组,行Western blot、实时荧光定量PCR和ELISA检测炎症因子TGF-β1、IL-6和TNF-α表达水平,Western blot和免疫荧光染色检测核因子E2相关的转录因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素氧化酶1(heme oxygenase 1,HO-1)表达。将32只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、OA组(B组)、OA+VX765(50 mg/kg)组(C组)和OA+VX765(100 mg/kg)组(D组),每组8只。A组仅行膝关节前内侧切口,B~D组在A组基础上横切内侧副韧带和前交叉韧带,并切除内侧半月板;术后1周,C、D组分别灌胃给药50 mg/kg和100 mg/kg VX765,A、B组给予等量生理盐水灌胃。通过HE及番红固绿染色行组织病理学检查,并通过Mankin评分进行评估;采用免疫组织化学染色技术分析基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)和Ⅱ型胶原蛋白的表达。结果CCK-8法检测示VX765浓度高于10μmol/L后细胞活力显著降低(P<0.05),选择无明显细胞毒性的4μmol/L和8μmol/L VX765进行后续实验。LPS诱导后细胞中的TGF-β1、IL-6和TNF-α表达显著高于对照组(P<0.05),而在4μmol/L和8μmol/L VX765干预后表达较LPS组显著下降(P<0.05)。Western blot和免疫荧光染色检测示VX765显著上调Nrf2通路相关分子Nrf2和HO-1的蛋白表达(P<0.05),激活Nrf2通路。大鼠膝关节组织病理学检查和免疫组织化学染色示,与B组相比,C、D组VX765处理改善了大鼠OA中关节结构损伤,减轻了炎症反应,下调MMP-13表达,增加Ⅱ型胶原蛋白的表达。结论VX765可改善大鼠OA并减轻软骨细胞的炎症反应,其潜在机制可能是通过激活Nrf2通路。

关键词： VX765 核因子E2相关的转录因子2通路骨关节炎软骨细胞大鼠

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脂氧素A4不同给药时机对大鼠心肌缺血再灌注时缝隙连接蛋白43表达的影响

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中华麻醉学杂志 2013年第10期33卷 1266-1271页

作者：赵琦峰邵兰杜杰夏杰胡型锑连庆泉温州医科大学附属第二医院育英儿童医院省立育英医院胸心外科 325027 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院省立育英医院麻醉科 325027

目的评价脂氧素A4不同给药时机对大鼠心肌缺血再灌注时缝隙连接蛋白43（Cx43）表达的影响.方法健康雄性SD大鼠72只,体重200 ～ 250 g,采用随机数字表法分为6组（n=12）：假手术Ⅰ组和Ⅱ组（S12组）、心肌缺血再灌注Ⅰ组和Ⅱ组（I/R12... 详细信息

目的评价脂氧素A4不同给药时机对大鼠心肌缺血再灌注时缝隙连接蛋白43（Cx43）表达的影响.方法健康雄性SD大鼠72只,体重200 ～ 250 g,采用随机数字表法分为6组（n=12）：假手术Ⅰ组和Ⅱ组（S12组）、心肌缺血再灌注Ⅰ组和Ⅱ组（I/R12组）、开胸前和再灌注30 min时给予脂氧素A4组（LX112组）.采用结扎冠状动脉左前降支30 min恢复灌注的方法制备大鼠心肌缺血再灌注模型.LX1,2组分别于开胸前、再灌注30 min时股静脉注射脂氧素A4100μg/kg;余4组分别于相应时点股静脉注射生理盐水2 ml/kg;S1,2组仅穿线不结扎.于开胸前和再灌注120 min时股静脉取血样测定血清IL-8、TNF-α和cTnI浓度.再灌注120 min取血后处死大鼠取心脏,采用免疫组化SP法检测Cx43蛋白的表达,采用RT-qPCR法检测Cx43 mRNA的表达,测定SOD活性和MDA含量.观察结扎冠状动脉到再灌注120 min期间心律失常发生情况,记录室速持续时间和室颤持续时间,计算室性心律失常评分.结果 I/R1组、LX1组与S1组,I/R2组、LX2组与S2组比较,心肌Cx43蛋白及其mRNA表达下调;室性心律失常评分、室速持续时间,血清Ib8、TNF-α、cTn1浓度及心肌SOD、MDA水平升高（P＜0.05）.LX1组与I/R1组,LX2与I/R2组比较,心肌Cx43蛋白及其mRNA表达上调;SOD活性升高,室性心律失常评分、室速持续时间、室颤持续时间、血清IL-8、TNF-α、cTn1浓度及心肌MDA含量降低（P＜0.05）.与LX1组比较,LX2组心肌Cx43蛋白及其mRNA表达下调;室性心律失常评分、室速持续时间、SOD活性升高;血清IL-8、TNF-α、cTn1浓度及心肌MDA含量降低（P＜0.05）.结论缺血前和再灌注30 min时给予脂氧素A4均可通过上调Cx43表达,逆转Cx43重塑,减轻大鼠缺血再灌注性心律失常,且于缺血前给药效果更佳.

关键词：脂氧素类心肌再灌注损伤连接蛋白类

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儿童肾瘢痕临床评估方法的研究进展

中华小儿外科杂志 2021年第5期42卷 472-476页

作者：潘慰吾陈聪德温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院儿童泌尿外科 325000

肾瘢痕的特点是局灶性间质纤维化,是一种不可逆性的肾损伤,与高血压和慢性肾病等长期健康风险有关。对于儿童人群,肾瘢痕形成的主要危险因素是膀胱输尿管反流和泌尿系感染,其检测方法包括影像学检查及无创生物标志物,目前临床上主要的... 详细信息

肾瘢痕的特点是局灶性间质纤维化,是一种不可逆性的肾损伤,与高血压和慢性肾病等长期健康风险有关。对于儿童人群,肾瘢痕形成的主要危险因素是膀胱输尿管反流和泌尿系感染,其检测方法包括影像学检查及无创生物标志物,目前临床上主要的评价标准是99mTc-DMSA肾静态显像。期待对肾瘢痕无创性生物学标记物的探索,能为临床提高早期肾瘢痕形成的预测和检出提供更多方便快捷的方式,从而减少肾瘢痕的形成与进展。

关键词：儿童肾瘢痕危险因素检测方法

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Ⅲ型先天性食管闭锁术后患儿近中期预后分析

中华胸心血管外科杂志 2021年第8期37卷 487-490页

作者：俞丽君黄玉梅陈尚勤吴国伟胡伟国浙江省温州医科大学附属育英儿童医院新生儿科 325027 温州医科大学附属育英儿童医院心胸外科 325027 温州医科大学附属育英儿童医院儿童消化内科 325027

目的总结先天性食管闭锁术后患儿的近中期生存质量,为先天性食管闭锁患儿的临床多学科管理提供参考。方法回顾性分析我院2007年11月至2018年11月手术治疗的Ⅲ型先天性食管闭锁患儿临床资料,分析近中期生存质量。结果62例患儿中,16例自... 详细信息

目的总结先天性食管闭锁术后患儿的近中期生存质量,为先天性食管闭锁患儿的临床多学科管理提供参考。方法回顾性分析我院2007年11月至2018年11月手术治疗的Ⅲ型先天性食管闭锁患儿临床资料,分析近中期生存质量。结果62例患儿中,16例自动出院,1例死亡,45例纳入近期随访。Gross分型Ⅲa 35例,Ⅲb 10例,长段型5例,44例一期手术治愈,1例延期手术治愈,二次手术9例。术后近期并发症:吻合口瘘8例(17.8%),吻合口狭窄11例(24.4%),气管食管瘘复发2例(4.4%),血流感染14例(31.1%),手术切口感染4例(8.9%)。38例纳入术后中期随访:2例因误吸死亡,食管狭窄行食管扩张29例(76.3%),1.5岁有吞咽功能障碍5例(13.2%),胃食管反流3例(7.9%),营养不良6例(15.8%)。多学科协作后的生存率升高(57.1%对85.3%,P=0.013),吻合口瘘的发生率下降(46.4%对20.6%,P=0.03)。结论进行多学科合作,规范先天性食管闭锁患儿的术后随访,可提高其生存质量。

关键词：食管闭锁手术后并发症生存质量

中国创伤性脊髓损伤流行病学和疾病经济负担的系统评价

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中国循证医学杂志 2018年第2期18卷 143-150页

作者：陈星月陈栋陈春慧王凯唐笠李宇哲吴爱悯温州医科大学附属第二医院育英儿童医院骨科-脊柱外科浙江温州325027 温州医科大学第二临床医学院浙江温州325027

目的系统评价创伤性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)在中国的流行病学特征和疾病经济负担。方法计算机检索PubMed、EMbase、WanFang Data、VIP和CNKI数据库,搜集有关中国SCI流行病学和疾病经济负担的研究,检索时限均从1978年1月1日至2... 详细信息

目的系统评价创伤性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)在中国的流行病学特征和疾病经济负担。方法计算机检索PubMed、EMbase、WanFang Data、VIP和CNKI数据库,搜集有关中国SCI流行病学和疾病经济负担的研究,检索时限均从1978年1月1日至2017年8月30日。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Stata 12.0软件进行合并分析。结果共纳入32篇文献。Meta分析结果显示:我国SCI年患病率为37人次/100万[95%CI(21,53)],平均年龄范围34.7~54.4岁,男性高于女性。汽车碰撞和高空坠落是SCI的主要原因。SCI严重程度从A^E级(ASIA分级)不等,以A级为主,E级比例最低。结论当前证据显示,我国SCI发病率较高,具有较高的社会和医疗负担,SCI主要由汽车碰撞和高空坠落引起。受纳入研究数量和质量的限制,上述结论尚待更多高质量研究予以验证。

关键词：脊髓损伤流行病学经济负担系统评价

大鼠肠黏膜上皮occludin蛋白在发育过程中的变化

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中华小儿外科杂志 2019年第1期40卷 64-68页

作者：林丰张鹏杰杨然栋陈声翔唐文锋李仲荣温州医科大学附属第二医院育英儿童医院小儿外科 325027

目的研究在不同发育阶段大鼠的肠黏膜上皮中紧密连接蛋白occludin的变化情况,探索其与肠黏膜屏障相关疾病的潜在关系。方法于SD大鼠孕18d(E18)、生后1d(P1)、生后7d(P7)、生后21d(P21)、生后28d(P28)时取出末端回肠,HE染色观察其绒毛长... 详细信息

目的研究在不同发育阶段大鼠的肠黏膜上皮中紧密连接蛋白occludin的变化情况,探索其与肠黏膜屏障相关疾病的潜在关系。方法于SD大鼠孕18d(E18)、生后1d(P1)、生后7d(P7)、生后21d(P21)、生后28d(P28)时取出末端回肠,HE染色观察其绒毛长度;免疫印迹(Western blot)检测occludin蛋白的表达水平;免疫荧光(Immunofluorescence)观察occludin蛋白的分布以及荧光强度。结果HE染色结果显示肠绒毛长度随着发育而增长,生后21d以后则趋于稳定;免疫印迹结果显示occludin蛋白的表达水平在出生后有一过性下降,从E18的0.34±0.02降至P1的0.16±0.02,而后随年龄增长,并在P7(0.52±0.06)时超过E18水平(P<0.05);免疫荧光结果显示occludin蛋白在回肠末端主要分布于黏膜层,与E18组相比,其荧光强度在出生后(P1组)有一过性下降,之后随年龄而逐渐增加。结论大鼠末端回肠黏膜绒毛的形态和紧密连接蛋白occludin随年龄增长而逐渐发育,但在出生后短期出现一过性下降过程,可能与此期易发坏死性小肠结肠炎有关。

关键词：紧密连接蛋白肠黏膜小肠结肠炎,坏死性

围手术期多日低剂量氯胺酮输注对预防乳房切除术后疼痛综合征的影响

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中华医学杂志 2017年第46期97卷 3636-3641页

作者：楼群兵南克项芳芳陈晓贞朱伟生张旭彤李军温州医科大学附属第二医院育英儿童医院麻醉科浙江省温州325027

目的探讨嘲手术期多13低剂量氯胺酮输注对乳腺癌手术患者乳房切除术后疼痛综合征（PMPS）的影响。方法选取2015年6月至2016年5月温州医科大学附属义乌医院66例乳腺癌于术患者，采用随机数字表法分为对照组（C组，n=33）和氯胺酮组（K组... 详细信息

目的探讨嘲手术期多13低剂量氯胺酮输注对乳腺癌手术患者乳房切除术后疼痛综合征（PMPS）的影响。方法选取2015年6月至2016年5月温州医科大学附属义乌医院66例乳腺癌于术患者，采用随机数字表法分为对照组（C组，n=33）和氯胺酮组（K组，n=33）。K组患者术前1d开始每天接受氯眩酮0，5mg／kg稀释至250ml0．9％生理盐水输注1．0h，连续7d，C组患者给予同等剂量0．9％生理盐水。两组患者术中均采用相同的全凭静脉麻醉及气管插管管理（咪唑安定、舒芬太尼、丙泊酚和维库溴铵诱导，丙泊酚、瑞芬太尼维持麻醉）。麻醉苏醒后转至麻醉后恢复事（PACU），观察并给了患者自控静脉镇痛泵（PCIA）。记录人PACU时、术后4h、术后24h及术后2～5d患者疼痛视觉模拟评分（VAS）、镇痛药需求量及术后5d医院焦虑抑郁评分（HADS）。随i方患者6个月并评估患者术后3、6个月时PMPS发牛率、疼痛程度、疼痛部位及HADS。结果K组患者入PACU时、术后4h、术后24h及2～5d疼痛VAS评分分别为（2．5±0．8）、（2．4±0．5）、（2．4±0．5）、（2．0±O．4）、（1．5±0．5）、（1．0±0．4）、1（1）分，均低于C组的（2．9±1．0）、（2．9±0．6）、（2．6±0．5）、（2．3±0．5）、（1．8±0．6）、（1．5±0．5）、l（0）分，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；术后各时段所需镇痛药的消耗量亦均低于C组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。随访6个月，C组失访2例，K组失访1例，K组术后3、6个月时PMPS的发生率为25％、22％，均显著低于C组的52％、45％，差异均有统计学意义（X^2=4．729、3．842，均P〈0．05）；两组PMPS患者中，术后3、6个月时VAS〉3分的比例、疼痛部位方面比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）；两组患者术前、术后5dHADS评分差异均无统计学意义（均P〉0．05），K组患者术后3、6个月时HADS评分显著低于c组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论围手术期连续多E{低剂量氯胺酮输注能有效降低乳腺癌术后PMPS的发生率。

关键词：疼痛手术后氯胺酮剂量效应关系药物乳腺肿瘤外科手术

高迁移率族蛋白B1在大鼠心肌缺血再灌注损伤信号传导通路中的作用

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中华医学杂志 2018年第40期98卷 3268-3273页

作者：夏杰薛继阳陈凯林志勇吴威佳赵琦峰温州医科大学附属第二医院育英儿童医院心胸外科儿童心脏中心温州医科大学心脏发育与转化研究所 325027

目的探讨高迁移率族蛋白B1（HMGBl）在大鼠心肌缺血再灌注损伤信号传导通路中的作用。方法健康雄性sD大鼠40只，体重200-250g，采用随机数字表法分为4组：假手术组（Sham组）、心肌缺血再灌注组（IR-C组）、HMGBl特异性抗体处理组（IR-H... 详细信息

目的探讨高迁移率族蛋白B1（HMGBl）在大鼠心肌缺血再灌注损伤信号传导通路中的作用。方法健康雄性sD大鼠40只，体重200-250g，采用随机数字表法分为4组：假手术组（Sham组）、心肌缺血再灌注组（IR-C组）、HMGBl特异性抗体处理组（IR-H-Ig组）、对照抗体控制组（IR-Ig组），每组10只。采用结扎冠状动脉左前降支（LAD）30min，再灌注180min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。Sham组打开胸腔后仅穿线不结扎LAD；IR-C组不注射药物，IR-H-Ig组和IR-Ig组于再灌注30min时分别注射HMGBl特异性抗体和对照抗体IgG（均2mg／kg）。在再灌注180rain时取各组大鼠股静脉血检测血浆白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、HMGBl、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌钙蛋白（cTnI）浓度。取血后处死大鼠取心脏，HE染色观察心肌病理变化；分别采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）、Western印迹法检测心肌组织HMGBl、T0ll样受体4（TLR4）、核因子（NF）KBmRNA和蛋白的表达水平。结果与Sham组比较，IR-C组和IR-Ig组血浆IL-6、TNF-α、HMGBl浓度均升高，心肌组织HMGBl、TLtt4、NF-kB mRNA和蛋白表达均上调（均P〈0．05）；IR-C、IR-H-Ig、IR-Ig组血浆CK-MB和cTnI浓度均升高（均P〈0．05）。与IR-c组比较，IR-H-Ig组血浆IL45、TNF-α、HMGBl、CK-MB、cTnI浓度均下降，心肌组织HMGBl、TLR4、NF-kB mRNA和蛋白表达均下调（均P〈0．05）。心肌缺血再灌注损伤各组心肌炎性细胞浸润明显增多，而IR-H-Ig组心肌炎性细胞浸润明显减轻。结论阻断HMGBl与TLR4结合可有效减轻大鼠心肌缺血再灌注造成的组织损伤。

关键词：高迁移率族蛋白质类心肌再灌注损伤炎症大鼠

儿童嗜酸性实性和囊性肾细胞癌1例并文献分析

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临床小儿外科杂志 2023年第3期22卷 283-287页

作者：邵佳文周平江周玲玲李仲荣温州医科大学附属第二医院育英儿童医院小儿外科温州325000 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院病理科温州325000

目的探讨儿童嗜酸性实性和囊性肾细胞癌的临床特点、诊治及预后。方法回顾性分析温州医科大学附属第二医院收治的1例儿童嗜酸性实性和囊性肾细胞癌患儿临床资料。以"eosinophilic solid and cystic renal cell carcinoma"或"eosinophili... 详细信息

目的探讨儿童嗜酸性实性和囊性肾细胞癌的临床特点、诊治及预后。方法回顾性分析温州医科大学附属第二医院收治的1例儿童嗜酸性实性和囊性肾细胞癌患儿临床资料。以"eosinophilic solid and cystic renal cell carcinoma"或"eosinophilic solid and cystic renal cell cancer"为检索词,检索PubMed、Web of Science数据库相关文献;以"嗜酸性实性和囊性肾细胞癌"为检索词检索万方数据库及中国知网相关文献;检索时间2000年1月1日至2021年12月;排除重复文献后进行文献复习,总结该类肿瘤的临床、病理特征以及预后情况。结果患儿女,9岁,因"右侧腹部隆起3 d"入院,术前影像学检查提示右肾巨大占位;行右肾巨大肿瘤根治性切除术,病理诊断为儿童嗜酸性实性和囊性肾细胞癌;免疫组化提示:CK20(+)、PAX-8(+)、CD117(+)、CK7(-)。术后未行放化疗,截至目前已随访6个月,未见复发及转移。共获得3篇符合要求文献,共报道6例嗜酸性实性和囊性肾细胞癌患儿,其中男4例,女2例;平均年龄14岁(9~17岁),2例因腹痛、腹部肿块、双下肢疼痛就诊,均未表现出结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)相关临床症状;1例为双侧,其余为单侧(2例右侧,1例左侧,2例未注明侧别)。1例行部分肾切除术,其余行根治性肾肿瘤切除术,其中1例出现下腔静脉受累,合并肺栓塞,术后辅助化疗2年后出现肝转移。TSC基因突变5例,均为TSC2基因突变。中位随访时间18个月(6~132个月),无一例肿瘤复发。结论儿童嗜酸性实性和囊性肾细胞癌罕见,一般无特异度临床症状,辅助检查亦无明显特殊表现,但具有独特的病理学表现,部分病例存在TSC基因突变;行根治性手术治疗预后较好。

关键词：癌,肾细胞结节性硬化症嗜酸性细胞外科手术儿童