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复方鳖甲软肝片联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎伴脾功能亢进患者的临床疗效

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中华传染病杂志 2016年第8期34卷 501-503页

作者：董佳佳陈永平王晓东许烂漫萧云蕾吴和黄思思杜珊洁陈瑞聪温州医科大学肝病研究所温州市肝病重点实验室温州医科大学附属第一医院感染科325000

CHB是全世界严重的公共卫生问题，每年约有65万人死于CHB引起的并发症。脾功能亢进是肝炎后肝硬化严重且常见的并发症，主要表现为脾脏肿大，一种或数种血细胞成分减少，骨髓呈造血细胞增生象。药理研究证实，中药主要通过保护肝细胞、... 详细信息

CHB是全世界严重的公共卫生问题，每年约有65万人死于CHB引起的并发症。脾功能亢进是肝炎后肝硬化严重且常见的并发症，主要表现为脾脏肿大，一种或数种血细胞成分减少，骨髓呈造血细胞增生象。药理研究证实，中药主要通过保护肝细胞、抑制纤维增生、缩小脾脏、改善脾脏循环等作用达到治疗脾功能亢进的效果。

关键词：脾功能亢进复方鳖甲软肝片慢性乙型肝炎临床疗效恩替卡韦治疗患者公共卫生问题

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临床肝胆病杂志 2023年第10期39卷 2336-2339页

作者：周晓东田娜郑明华温州医科大学附属第一医院心脏中心心血管内科浙江温州325000 温州医科大学附属第一医院感染内科浙江温州325000 温州医科大学肝病研究所浙江温州325000 浙江省慢性肝病重症化精准诊治与转化重点实验室浙江温州325000

代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)是全球范围内常见的慢性肝病,影响全球超过四分之一的成年人口。MAFLD特征是肝脏脂肪变性和代谢紊乱共存。作为一种代谢功能障碍性疾病,MAFLD与心血管疾病(CVD)有着相似的发病机制。这两种疾病都与肥胖、2型... 详细信息

代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)是全球范围内常见的慢性肝病,影响全球超过四分之一的成年人口。MAFLD特征是肝脏脂肪变性和代谢紊乱共存。作为一种代谢功能障碍性疾病,MAFLD与心血管疾病(CVD)有着相似的发病机制。这两种疾病都与肥胖、2型糖尿病和致动脉粥样硬化性血脂异常等公认的心血管危险因素密切相关。越来越多的证据支持MAFLD与CVD之间存在密切联系。然而,作为一种新兴的CVD危险因素,MAFLD与传统的CVD危险因素不同,仍待进一步研究。在这一背景下,本共识使用德尔菲法则,通过两轮调查就MAFLD和CVD风险之间的联系达成一致意见,并探讨了MAFLD与CVD流行病学及临床特征的相关性,以及病理生理机制、监测和管理等一系列问题。

关键词：代谢相关脂肪性肝病非酒精性脂肪性肝病心血管疾病共识

腺苷A2A受体激动剂联合骨髓间充质干细胞移植对急性肝功能衰竭小鼠负向免疫调节作用的研究

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中华传染病杂志 2017年第1期35卷 15-21页

作者：肖茜茜王永林陈泽萧云蕾许烂漫林镯王晓东陈永平温州医科大学附属第一医院感染科温州市肝脏病重点实验室温州医科大学肝病研究所浙江省温州市325000

目的探讨腺苷A2A受体激动剂（CGS21680）联合骨髓间充质干细胞（BMMSC）移植治疗急性肝功能衰竭（ALF）的疗效及可能机制。方法50只6～8周雄性C57BL/6小鼠普通饲养1周后，采用随机数字法将小鼠分为健康对照组6只，模型对照组11只，BMMSC... 详细信息

目的探讨腺苷A2A受体激动剂（CGS21680）联合骨髓间充质干细胞（BMMSC）移植治疗急性肝功能衰竭（ALF）的疗效及可能机制。方法50只6～8周雄性C57BL/6小鼠普通饲养1周后，采用随机数字法将小鼠分为健康对照组6只，模型对照组11只，BMMSC组11只，CGS21680/BMMSC组11只，CGS21680组11只。除健康对照组外，其余小鼠腹腔注射D-GalN和脂多糖建立ALF模型。10 h后，CGS21680/BMMSC组、CGS21680组腹腔注射腺苷A2A受体激动剂CGS21680（2.1 mg/kg）。另外，BMMSC组、CGS21680/BMMSC组尾静脉注射BMMSC 1×10^6/只。24 h后，苏木精-伊红染色观察肝脏组织病理变化，流式细胞仪检测各组小鼠脾脏Treg占CD4＋T淋巴细胞比例变化，ELISA试剂盒检测血清炎性因子IL-6、TNF-ɑ含量，实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测肝组织TLR4、核因子-κB表达水平。应用单因素方差分析（one-way ANOVA）和SNK-q检验。结果健康对照组血清IL-6为（23.67±2.97） pg/mL，模型对照组为（151.47±6.03） pg/mL，BMMSC组为（72.10±3.74） pg/mL，CGS21680/BMMSC组为（53.35±2.50） pg/mL，CGS21680组为（84.85±3.25） pg/mL，健康对照组与其他4组比较差异均有统计学意义（t值分别为46.02、25.51、19.58和34.03，均P〈0.01）。健康对照组血清TNF-ɑ水平为（24.62±3.19） pg/mL，模型对照组为（102.25±2.10） pg/mL、BMMSC组为（54.71±2.23） pg/mL，CGS21680/BMMSC组为（42.20±4.72） pg/mL，CGS21680组为（81.76±3.50） pg/mL，健康对照组与其他4组比较差异均有统计学意义（t值分别为46.49、19.97、7.72和29.57，均P〈0.01）。健康对照组脾脏Treg比例与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为51.67、12.22、5.91和18.21，均P〈0.01）。健康对照组肝组织TLR4 mRNA水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为26.31、21.33、13.24和27.14，均P〈0.01）；健康对照组肝组织核因子-κB mRNA水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为16.56、16.34、7.83和13.11，均P〈0.01）。健康对照组肝组织TLR4蛋白水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为35.60、10.38、6.05和18.02，均P〈0.05）；健康对照组肝组织NF-κB蛋白水平与模型对照组、BMMSC组、CGS21680/BMMSC组和CGS21680组比较差异均有统计学意义（t值分别为10.80、7.30、4.61和13.24，均P〈0.05）。结论腺苷A2A受体激动剂联合BMMSC移植可显著上调ALF小鼠体内Treg比例，抑制TLR4/核因子-κB通路的激活，两者协同调节作用，进而进一步抑制肝脏炎性反应。

关键词：间质干细胞肝功能衰竭,急性受体,腺苷A2A Toll样受体4/核因子-κB信号通路

秉持医者初心,以无创诊断造福MAFLD患者

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中华肝脏病杂志 2023年第12期31卷 1233-1234页

作者：张淮郑明华温州医科大学附属第一医院病案信息统计室医疗质量管理处温州325000 温州医科大学附属第一医院感染内科/肝病中心温州325000

准确诊断代谢相关脂肪性肝病及其严重程度可有效延缓疾病进展并对治疗有重要的指导价值。近年来,代谢相关脂肪性肝病的无创诊断研究取得了长足进展,提示我们肝病领域人员不仅要充分发挥自身专业优势,还需积极联合其他领域人员,探索不同... 详细信息

准确诊断代谢相关脂肪性肝病及其严重程度可有效延缓疾病进展并对治疗有重要的指导价值。近年来,代谢相关脂肪性肝病的无创诊断研究取得了长足进展,提示我们肝病领域人员不仅要充分发挥自身专业优势,还需积极联合其他领域人员,探索不同方式的高性能无创诊断方法,以便早发现、早诊断、早治疗代谢相关脂肪性肝病。

关键词：代谢相关脂肪性肝病无创诊断多学科研究

姜黄素衍生物C66对转化生长因子-β刺激的大鼠肝星状细胞增殖和活化的研究

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中华传染病杂志 2017年第8期35卷 492-497页

作者：陈泽陈达之萧云蕾肖茜茜王永林许烂漫陈永平温州医科大学附属第一医院感染科温州医科大学肝病研究所温州市肝病重点实验室 325025

目的观察姜黄素衍生物C66对TGF-β刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）增殖及α-平滑肌动蛋白（R-SMA）、Ⅰ型胶原表达的影响及其与大麻素受体（CB）1的关系。方法体外培养HSC-T6细胞，分为对照组、C66不同浓度组（1、2、5、10和20／,tool／L... 详细信息

目的观察姜黄素衍生物C66对TGF-β刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）增殖及α-平滑肌动蛋白（R-SMA）、Ⅰ型胶原表达的影响及其与大麻素受体（CB）1的关系。方法体外培养HSC-T6细胞，分为对照组、C66不同浓度组（1、2、5、10和20／,tool／L），细胞计数试剂盒一8检测其吸光度（A）值。选取最佳C66作用浓度及时间，分为对照组、TGF-β干预组、TGF＋β＋CB1拮抗剂组、TGF-β＋C66干预组、TGF-β＋CB1拮抗剂＋C66联合干预组，分别培养48h，以蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR检测CB1、α—SMA、I型胶原蛋白及mRNA的表达，以蛋白质印迹法检测磷酸化c—jun氨基末端激酶（p-JNK）、C—jun氨基末端激酶（JNK）表达水平。多样本均数方差齐性者采用LSD法进行两两比较，方差不齐者采用DunnettT3检验，组间比较采用单因素方差分析。结果C66能有效抑制HSCT6增殖，呈现浓度和时间依赖性，其中10μmol／LC66作用48h对HSC—T6的抑制效果最明显，抑制率为54％。与对照组相比，单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA蛋白表达明显升高，差异均有统计学意义（￡值分别为6．188、3．48和20．64，均P〈0．05）。与对照组相比，单独TGF-β1干预组CB1、I型胶原、Ⅰ-SMAmRNA相对表达显著升高，差异均有统计学意义（￡值分别为4．705、9．492和38．27，均P〈0．05）。与对照相组比，TGF—B1干预组p-JNK水平显著升高，差异有统计学意义（t=9．567，P〈0．05）。结论C66能有效抑制HSC—T6细胞的增殖及胶原合成，且联合使用CB1拮抗剂效果更明显，该过程可能涉及JNK磷酸化水平的调节，有助于理解肝纤维化发生、发展的机制及为治疗肝纤维化寻找新的靶点。

关键词：姜黄素衍生物肝星状细胞肝纤维化 c—jun氨基末端激酶

细胞因子信号转导抑制蛋白1过表达的树突状细胞对急性肝功能衰竭小鼠的治疗作用及机制研究

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中华传染病杂志 2017年第3期35卷 151-156页

作者：张盛果李姗姗唐新月杨敏卢明芹温州医科大学附属第一医院感染科温州市肝脏病学重点实验室温州医科大学肝病研究所 325000

目的研究细胞因子信号转导抑制蛋白1（SOCS1）过表达对DC功能的影响及对急性肝衰竭小鼠的治疗作用。方法利用SOCsl过表达的慢病毒或阴性对照病毒以感染复数（MOI）-50转染C57BL／6小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC），96h后转染成功的DC分... 详细信息

目的研究细胞因子信号转导抑制蛋白1（SOCS1）过表达对DC功能的影响及对急性肝衰竭小鼠的治疗作用。方法利用SOCsl过表达的慢病毒或阴性对照病毒以感染复数（MOI）-50转染C57BL／6小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC），96h后转染成功的DC分别标识为SOCS1过表达的DC（DC-SOCS1）和阴性对照慢病毒转染的DC（DC-VNG）。脂多糖（1rag／L）刺激成熟后收集DC做表面分子流式检测，混和淋巴实验、蛋白质印迹法检测JAK／STAT通路蛋白表达变化。90只6～7周龄健康雄性C57BL／6小鼠分成正常组12只，急性肝功能衰竭组26只，急性肝功能衰竭DC—SOCS1治疗组26只，急性肝功能衰竭DC-VNG治疗组26只，分别通过尾静脉注射0．9％氯化钠溶液、重悬于0．9％氯化钠溶液中的DC-VNG和DC-SOCS1，12h后利用腹腔注射脂多糖（10#g／kg）联合D-GaIN（600mg／kg）诱导小鼠急性肝功能衰竭模型建立。观察各组小鼠死亡率和各组肝脏病理表现，检测各组小鼠外周血ALT和AST水平，检测脾脏Treg比例。样本均数比较采用单因案方差分析，分类资料比较使用卡方检验。进行正态性检验和方差齐性分析，方差齐性采用LSD检验。结果混合淋巴实验结果显示，混合培养比为100：1的DC—SOCS1组刺激T淋巴细胞的增殖率为（25．87±0．38）％，低于lO：1的mDC组[（84．29±3．25）％]，差异有统计学意义（y。一49．821，P〈0．01）；IL-10细胞因子浓度高于10：1的mDC组，差异有统计学意义（F一20．112，P〈0．05）；IL-6细胞因子浓度明显低于10：1的mDC组，差异有统计学意义（F=47．718，P〈0．05）。与imDC比较，脂多糖刺激成熟后的mDC、DC—VNG、DC-SOCS1组的JAK2表达量（f值分别为0．525、0．523和0．489，均P〈0．01）、STAT1表达量（t值分别为0．442、0．400和0．402，均P〈o．01）、SOCS1表达量（￡值分别为0．322、0．363和1．090，均P〈0．01）都明显升高，差异均有统计学意义。其中DC—SOCS1细胞的磷酸化信号转导因子和转录激活因子1（p-STAT1）、磷酸化Janus激酶2（p—JAK2）的表达量与mDC相比明显降低，差异均有统计学意义（t值分别为-3．840和0．254，均P〈0．01）。肝脏病理切片显示，DC-SOCS1治疗组的肝细胞死亡和炎性细胞浸润少于急性肝功能衰竭组和DC-VNG治疗组，并伴有较高的Treg比例。急性肝功能衰竭DC—SOCS1治疗组生存率高于急性肝功能衰竭组，差异有统计学意义（Х^2=12．87，P〈0．05）。结论SOCS1基因通过负向调控JAK2／sTAT1通路的信号转导从而抑制DC的成熟过程，SOCS1过表达的DC生物功能表现与调节性树突状细胞相似，可以增加小鼠体内Treg的比例，抑制肝脏过强的免疫反应，调节免疫平衡，对急性肝功能衰竭小鼠有明显治疗效果。

关键词：肝功能衰竭急性细胞因子信号转导抑制蛋白1 树突细胞

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鼠李唐乳杆菌对酒精性肝损伤的免疫调节作用

中华传染病杂志 2015年第11期33卷 682-687页

作者：杜珊洁陈瑞聪黄思思吴和董佳佳王晓东许烂漫陈永平温州医科大学附属第一医院感染科温州医科大学肝病研究所温州市肝病重点实验室 325025

目的研究鼠李唐乳杆菌（LGG）对酒精性肝损伤Treg／Th17免疫调节作用及TLR通路的表达变化，为酒精性肝损伤早期治疗提供依据。方法10周龄雄性C57／BL6小鼠根据随机数字表均分为对照组、乙醇组和LGG＋乙醇组，每组6只。乙醇组小鼠用含有... 详细信息

目的研究鼠李唐乳杆菌（LGG）对酒精性肝损伤Treg／Th17免疫调节作用及TLR通路的表达变化，为酒精性肝损伤早期治疗提供依据。方法10周龄雄性C57／BL6小鼠根据随机数字表均分为对照组、乙醇组和LGG＋乙醇组，每组6只。乙醇组小鼠用含有5％乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养10d，第11天清晨按小鼠体质量5g／kg予40％乙醇灌胃9h后处死；对照组小鼠用不含乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养相同时间后予5％麦芽糖灌胃9h后处死；LGG＋乙醇组小鼠用LGG菌液（LGG〉1mL／d）加含5％乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养相同时间后，予40％乙醇灌胃9h后处死。收集各组小鼠肝组织行HE和油红O染色，观察组织病理改变。检测各组小鼠血清ALT、AST含量。RT—PCR检测各组小鼠肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin和claudin-1 mRNA表达。Western免疫印迹法检测各组小鼠肝脏TLR4、髓样分化因子88（MyD88）、IL-1受体相关激酶（IRAK-1）、核因子-κB和TNF-α蛋白表达。流式细胞仪分析LGG对小鼠脾脏Treg／Th17平衡的影响。各组间的统计分析用单因素方差分析和多重比较分析。结果HE染色和油红0染色示，经LGG干预后小鼠肝脏内脂滴数量和大小明显改善。乙醇组ALT为（147．0±42．1）U／L，AST为（373．5±169．7）U／L，对照组分别为（56．8±15．3）U／L和（211．5±57．8）U／L，LGG＋乙醇组分别为（75．3±150．2）U／L和（211．7±36．3）U／L，各组间相比差异均有统计学意义（F值分别为19．474和4．702，P值分别为0．000和0．026）。乙醇组肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin和claudin-1mRNA表达明显低于对照组，LGG＋乙醇组紧密连接蛋白表达增加（F值分别为149．219、145．561和154．237，均P=0．000）。乙醇组小鼠肝脏内大肠埃希菌蛋白表达高于对照组，LGG＋乙醇组其表达减少（F=130．317，P=0．000）。乙醇组小鼠肝脏内TLR4、MyD88、IRAK-1、核因子-κB和TNF-α蛋白表达明显高于对照组，LGG＋乙醇组TLR4通路中各蛋白表达明显抑制。乙醇组小鼠脾脏中Treg所占比例明显低于对照组，LGG＋乙醇组小鼠Treg所占比例升高。乙醇组小鼠脾脏中Th17所占比例明显高于对照组，LGG＋乙醇组小鼠Th17所占比例降低。结论LGG对酒精性肝损伤有保护作用，能够调节Treg／Th17平衡，抑制TLR4通路激活，为酒精性肝损伤早期治疗提供依据。

关键词：鼠李糖乳杆菌肝疾病酒精性 Toll样受体 T淋巴细胞调节性 Th17细胞

不同分期慢性乙型肝炎肝纤维化患者黑色素瘤缺乏因子2的表达

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中华传染病杂志 2019年第3期37卷 174-176页

作者：吴春央陈永平李骥林文雅王晓东林镯张友才温州医科大学附属第一医院感染科温州市肝脏病重点实验室温州医科大学肝病研究所325000

目的探讨不同分期CHB肝纤维化患者黑色素瘤缺乏因子2(absent in melanoma 2,AIM2)的表达水平及其临床意义。方法选择温州医科大学附属第一医院2017年12月至2018年3月的CHB患者48例,非酒精性脂肪性肝病(non alcohol fatty liver disease,... 详细信息

目的探讨不同分期CHB肝纤维化患者黑色素瘤缺乏因子2(absent in melanoma 2,AIM2)的表达水平及其临床意义。方法选择温州医科大学附属第一医院2017年12月至2018年3月的CHB患者48例,非酒精性脂肪性肝病(non alcohol fatty liver disease,NAFLD)患者12例。采用免疫组织化学法和实时PCR检测两组患者肝组织和血清中AIM2的表达水平,两组间比较采用t检验和χ^2检验,相关性分析采用Spearman等级相关分析。结果CHB患者肝组织中AIM2表达阳性33例,NAFLD患者AIM2表达阳性2例,差异有统计学意义(χ^2=8.68,P1×10^5 IU/mL患者的AIM2表达强度高于HBV DNA<1×10^5 IU/mL患者,两组比较差异有统计学意义(χ^2=6.22,P<0.05)。CHB患者AIM2的表达强度与HBV DNA载量有关(r=0.34, P<0.05)。CHB患者肝组织AIM2的表达与炎症程度和纤维化分期呈正相关(r值分别为0.59和0.72,均P<0.05),外周血白细胞中AIM2的表达与纤维化分期和炎症程度也呈正相关(r值分别为0.87和0.39,均P<0.05)。结论AIM2表达水平与肝脏的炎症程度和纤维化程度相关。

关键词：乙型肝炎肝纤维化黑色素瘤患者因子非酒精性脂肪性肝病免疫组织化学法纤维化分期慢性

重型/危重型新型冠状病毒肺炎关键治疗技术研究进展

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中国生物工程杂志 2020年第1期40卷 78-83页

作者：潘彤彤陈永平温州医科大学附属第一医院感染内科浙江省慢性肝病重症化精准诊治与转化重点实验室温州医科大学肝病研究所温州325035

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引发的肺炎疫情严重威胁广大人民群众身体健康和生命安全,对我国的经济发展和社会稳定产生重大影响。由于新型冠状病毒的传染性强、传播速度快、致死率较高,且尚无有效疫苗和药物来防治,少数患者迅速进展为重... 详细信息

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引发的肺炎疫情严重威胁广大人民群众身体健康和生命安全,对我国的经济发展和社会稳定产生重大影响。由于新型冠状病毒的传染性强、传播速度快、致死率较高,且尚无有效疫苗和药物来防治,少数患者迅速进展为重型、危重型甚至死亡。如何精准抗SARS-CoV-2、阻断新冠肺炎进展并改善患者预后是当下医药卫生界的研究热点。主要围绕重型、危重型新冠肺炎最新治疗手段研究进展进行综述。

关键词： SARS-CoV-2 抗病毒药人工肝治疗细胞免疫疗法肠道微生态