细胞因子信号转导抑制蛋白1过表达的树突状细胞对急性肝功能衰竭小鼠的治疗作用及机制研究

作     者：张盛果 李姗姗 唐新月 杨敏 卢明芹 Zhang Shengguo;Li Shanshan;Tang Xinyue;Yang Min;Lu Mingqin

作者机构：温州医科大学附属第一医院感染科温州市肝脏病学重点实验室温州医科大学肝病研究所325000 

出 版 物：《中华传染病杂志》 (Chinese Journal of Infectious Diseases)

年 卷 期：2017年第35卷第3期

页      面：151-156页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：温州市科技计划项目（Y20140669） 中国肝炎防治基金会天晴肝病研究基金（TQGB20150109） 

主　　题：肝功能衰竭 急性 细胞因子信号转导抑制蛋白1 树突细胞 

摘      要：目的研究细胞因子信号转导抑制蛋白1（SOCS1）过表达对DC功能的影响及对急性肝衰竭小鼠的治疗作用。方法利用SOCsl过表达的慢病毒或阴性对照病毒以感染复数（MOI）-50转染C57BL／6小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDC），96h后转染成功的DC分别标识为SOCS1过表达的DC（DC-SOCS1）和阴性对照慢病毒转染的DC（DC-VNG）。脂多糖（1rag／L）刺激成熟后收集DC做表面分子流式检测，混和淋巴实验、蛋白质印迹法检测JAK／STAT通路蛋白表达变化。90只6～7周龄健康雄性C57BL／6小鼠分成正常组12只，急性肝功能衰竭组26只，急性肝功能衰竭DC—SOCS1治疗组26只，急性肝功能衰竭DC-VNG治疗组26只，分别通过尾静脉注射0．9％氯化钠溶液、重悬于0．9％氯化钠溶液中的DC-VNG和DC-SOCS1，12h后利用腹腔注射脂多糖（10#g／kg）联合D-GaIN（600mg／kg）诱导小鼠急性肝功能衰竭模型建立。观察各组小鼠死亡率和各组肝脏病理表现，检测各组小鼠外周血ALT和AST水平，检测脾脏Treg比例。样本均数比较采用单因案方差分析，分类资料比较使用卡方检验。进行正态性检验和方差齐性分析，方差齐性采用LSD检验。结果混合淋巴实验结果显示，混合培养比为100：1的DC—SOCS1组刺激T淋巴细胞的增殖率为（25．87±0．38）％，低于lO：1的mDC组[（84．29±3．25）％]，差异有统计学意义（y。一49．821，P〈0．01）；IL-10细胞因子浓度高于10：1的mDC组，差异有统计学意义（F一20．112，P〈0．05）；IL-6细胞因子浓度明显低于10：1的mDC组，差异有统计学意义（F=47．718，P〈0．05）。与imDC比较，脂多糖刺激成熟后的mDC、DC—VNG、DC-SOCS1组的JAK2表达量（f值分别为0．525、0．523和0．489，均P〈0．01）、STAT1表达量（t值分别为0．442、0．400和0．402，均P〈o．01）、SOCS1表达量（￡值分别为0．322、0．363和1．090，均P〈0．01）都明显升高，差异均有统计学意义。其中DC—SOCS1细胞的磷酸化信号转导因子和转录激活因子1（p-STAT1）、磷酸化Janus激酶2（p—JAK2）的表达量与mDC相比明显降低，差异均有统计学意义（t值分别为-3．840和0．254，均P〈0．01）。肝脏病理切片显示，DC-SOCS1治疗组的肝细胞死亡和炎性细胞浸润少于急性肝功能衰竭组和DC-VNG治疗组，并伴有较高的Treg比例。急性肝功能衰竭DC—SOCS1治疗组生存率高于急性肝功能衰竭组，差异有统计学意义（Х^2=12．87，P〈0．05）。结论SOCS1基因通过负向调控JAK2／sTAT1通路的信号转导从而抑制DC的成熟过程，SOCS1过表达的DC生物功能表现与调节性树突状细胞相似，可以增加小鼠体内Treg的比例，抑制肝脏过强的免疫反应，调节免疫平衡，对急性肝功能衰竭小鼠有明显治疗效果。