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不同实验条件对淋病奈瑟球菌体外转化效率的影响

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中华皮肤科杂志 2024年第3期57卷 240-245页

作者：李晓蝶朱琳洪毅勇黄影赖维龚子鉴中山大学附属第三医院皮肤性病科广州510630

目的探讨不同实验条件对淋病奈瑟球菌(淋球菌)体外转化效率的影响。方法以淋球菌D株DNA为模板扩增penA基因,采用重叠延伸PCR制备penAA501V(耐药突变)基因,购买淋球菌penAH041基因(耐药阳性对照)。制备含penA/penAA501V/penAH041基因的... 详细信息

目的探讨不同实验条件对淋病奈瑟球菌(淋球菌)体外转化效率的影响。方法以淋球菌D株DNA为模板扩增penA基因,采用重叠延伸PCR制备penAA501V(耐药突变)基因,购买淋球菌penAH041基因(耐药阳性对照)。制备含penA/penAA501V/penAH041基因的质粒转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,采用蓝白筛选培养基克隆扩增;分别采用日本TaKaRa公司质粒提取试剂盒和天根生化科技(北京)有限公司高纯度质粒小提试剂盒提取质粒。以penA质粒、penAA501V质粒、penAH041质粒、penAA501V基因、penAH041基因为底物采用直接孵育法转化淋球菌受体菌株A43、A49,测定转化率(CFU/μg)及头孢曲松(CRO)的最小抑菌浓度(MIC)。以penAA501V、penAH041基因为底物,采用脂质体法转化受体菌株A43、A49,观察转化效率及头孢曲松的MIC。结果以D株淋球菌DNA为模板,成功获得1749 bp的penA及penAA501V基因。提取质粒并电泳后,TaKaRa试剂盒提取的含淋球菌penA、penAA501V、penAH041基因的质粒主要集中在2500 bp处,迁移速度较快;天根试剂盒提取的质粒主要集中在5000 bp处,迁移速度较慢。直接孵育法转化时,含野生型penA的A43株的MIC为0.001μg/ml,转入penA质粒后MIC上升至0.002μg/ml,转入penAA501V质粒和penAA501V基因转化株MIC均为0.004μg/ml,转入阳性对照penAH041质粒和penAH041基因后MIC均升至0.512μg/ml;各底物孵育后CRO对A49株的MIC值与空白对照相同,均为0.016μg/ml。脂质体法转化时,含野生型penA的A43株对CRO的MIC是0.002μg/ml,A49株MIC为0.016μg/ml;penAA501V基因转化A43株后MIC升至0.004μg/ml,转化A49株后仍为0.016μg/ml;阳性对照penAH041基因转化A43和A49株后MIC均升至0.250μg/ml,较空白对照分别升高至125倍和15.6倍。结论选择质粒为底物采用直接孵育法对A43株淋球菌有较好转化效率,不同质粒提取方法可能影响转化效率,对于直接孵育法转化效率不高的A49株可采用脂质体法。

关键词：淋病奈瑟球菌转化,细菌质粒头孢曲松抗药性,细菌 penA基因最小抑菌浓度

可溶性共刺激分子在自身免疫性皮肤病中的研究进展

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中国麻风皮肤病杂志 2024年第1期40卷 71-76页

作者：陈璐张晓艳胡颖姚昱旭季江焦晴晴苏州大学附属第二医院皮肤性病科苏州215004 苏州大学附属第一医院皮肤性病科苏州215006

可溶性共刺激分子(soluble costimulatory molecules)是共刺激分子的可溶性形式,参与共刺激信号的传递并发挥重要的自我调控作用,其异常表达会影响机体免疫应答和免疫耐受的建立,与自身免疫性皮肤病的免疫调控和发生发展密切相关。本文... 详细信息

可溶性共刺激分子(soluble costimulatory molecules)是共刺激分子的可溶性形式,参与共刺激信号的传递并发挥重要的自我调控作用,其异常表达会影响机体免疫应答和免疫耐受的建立,与自身免疫性皮肤病的免疫调控和发生发展密切相关。本文就可溶性共刺激分子在自身免疫性皮肤病中的研究进展进行综述,旨在为临床医师和科研工作者明确该病的发病机制及有效治疗方案提供参考。

关键词：自身免疫性皮肤病可溶性共刺激分子共刺激分子

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遗传性光敏感性皮肤病

中华皮肤科杂志 2024年第3期57卷 279-282页

作者：陈玉沙汪盛四川大学华西医院皮肤性病科成都610041

遗传性光敏感性皮肤病包含一大类由于DNA核苷酸切除修复、DNA双链断裂修复或生化物质代谢等途径相关基因缺陷引起的疾病,皮肤光敏感常为首发症状。此类疾病往往合并严重的多器官系统受累,具有发病早、进展快、预后差的特点。作者综述遗... 详细信息

遗传性光敏感性皮肤病包含一大类由于DNA核苷酸切除修复、DNA双链断裂修复或生化物质代谢等途径相关基因缺陷引起的疾病,皮肤光敏感常为首发症状。此类疾病往往合并严重的多器官系统受累,具有发病早、进展快、预后差的特点。作者综述遗传性光敏感性皮肤病临床特征和研究现状,提高临床医生的认识,帮助早期诊断和及时干预。

关键词：遗传性疾病,先天性遗传性光敏感性皮肤病光暴露神经系统受累恶性肿瘤风险

前交叉韧带重建后Pro-kin平衡系统训练患膝本体感觉和平衡功能的评价

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中国组织工程研究 2024年第8期28卷 1259-1264页

作者：张熙辉李峥嵘李仕能邢增宇王蛟海南省中医院海南省海口市570203

背景:Pro-kin平衡系统指导对脑卒中患者的下肢本体感觉及躯干控制功能有较为优良的康复效果,但其对前交叉韧带重建术后患者患膝本体感觉和平衡功能影响的报道较少。目的:探讨基于Pro-kin平衡系统指导康复训练对膝关节前交叉韧带重建术... 详细信息

背景:Pro-kin平衡系统指导对脑卒中患者的下肢本体感觉及躯干控制功能有较为优良的康复效果,但其对前交叉韧带重建术后患者患膝本体感觉和平衡功能影响的报道较少。目的:探讨基于Pro-kin平衡系统指导康复训练对膝关节前交叉韧带重建术后患膝本体感觉和平衡功能的影响。方法:纳入2021年1月至2022年8月海南省中医院收治的84例前交叉韧带断裂重建术后患者,采用随机数字表法分为观察组与对照组,每组42例。对照组患者术后接受常规康复训练,观察组患者术后在接受常规康复训练的基础上给予基于Pro-kin平衡系统指导的康复训练,持续训练8周。训练前及训练结束后,采用Lysholm评分、国际膝关节文献委员会评分评估患者膝关节功能变化,平均负重力量差、轨迹误差、摆动数值及患肢膝关节30°,45°,60°被动成角误差评估患膝本体感觉变化,睁眼、闭眼状态下的运动轨迹面积及长度评估患者平衡功能变化,并调查两组患者对康复训练的满意度。结果与结论:①训练结束后,两组患者Lysholm评分、国际膝关节文献委员会评分均高于干预前(P<0.01),且观察组上述评分高于对照组(P<0.01);②训练结束后,两组患者平均负重力量差、轨迹误差、摆动数值均小于干预前(P<0.01),且观察组上述指标检测值均小于对照组(P<0.01);两组患者患肢膝关节30°,45°,60°被动成角误差均小于干预前(P<0.01),且观察组上述被动成角误差均小于对照组(P<0.05,P<0.01);③训练结束后,两组患者睁眼状态下的运动轨迹面积及长度均小于干预前(P<0.01),且观察组上述指标检测值均小于对照组(P<0.05,P<0.01);两组患者闭眼状态下的运动轨迹面积及长度均小于干预前(P<0.01),且观察组上述指标检测值均小于对照组(P<0.01);④观察组患者对干预康复效果的满意度高于对照组(95%,81%,P<0.05);⑤结果表明,与常规康复训练相比,基于Pro-kin平衡系统指导的康复训练对前交叉韧带断裂重建术后患者患侧膝关节功能、本体感觉和平衡功能的改善效果更为显著,患者满意度较高。

关键词：前交叉韧带断裂 Pro-kin平衡系统术后康复本体感觉平衡功能

接触海水感染创伤弧菌引发脓毒症患者救治成功病例1例分析

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中国热带医学 2024年第3期24卷 353-357页

作者：王婷林泽辉李泉张汉洪海南省中医院海南海口570203

创伤弧菌感染对人具有高致残率、致死率,本文总结1例创伤弧菌脓毒症患者的诊断、治疗情况,帮助临床工作者在早期识别创伤弧菌感染,优化治疗方案,为创伤弧菌感染相关研究提供临床依据。2022年9月,海南省中医院急诊科收治1例创伤弧菌感染... 详细信息

创伤弧菌感染对人具有高致残率、致死率,本文总结1例创伤弧菌脓毒症患者的诊断、治疗情况,帮助临床工作者在早期识别创伤弧菌感染,优化治疗方案,为创伤弧菌感染相关研究提供临床依据。2022年9月,海南省中医院急诊科收治1例创伤弧菌感染引发脓毒症患者,对其进行临床治疗与分析报告,同时查阅创伤弧菌文献,分析总结创伤弧菌脓毒症治疗方法。患者男,61岁,2022年9月23日—10月8日于急诊科治疗,经脓汁和创伤感染标本细菌学检查识别为创伤弧菌感染,于是针对性予美罗培南注射剂+左氧氟沙星注射液联合抗感染、早期行床边连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)消除炎症风暴方案控制脓毒症,并进行外科清创治疗。患者病情平稳后转入血管外科,于10月27日、11月19日2次进行清创术+左下肢植皮术,12月10日进行清创术+左下肢第3次植皮术+截趾术,术后病情好转出院。目前随访患者生活自理,患肢能自主活动。对创伤弧菌感染引发脓毒症的治疗应重视炎症级联反应,可早期进行CRRT消除炎症因子,敏感抗生素抗炎,外科清创介入治疗,启动多学科联动对患者进行治疗。

关键词：创伤弧菌脓毒症抗生素血液滤过外科

带状疱疹样皮疹的播散性隐球菌病合并艾滋病1例

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中华皮肤科杂志 2024年第3期57卷 266-268页

作者：李英胡荣欣卢斯汉杜健群李水凤王军雄广州医科大学附属市八医院皮肤性病科广州510060

患者男,38岁,因头痛、发热1周,加重3 d就诊。患者起病前1周着凉后出现头痛、头晕,无恶心呕吐,自觉发热(当时未测体温),当地医院治疗3 d,症状稍好转。3 d前头痛加重,呈搏动性;外院脑脊液涂片隐球菌阳性。

关键词：搏动性脑脊液涂片艾滋病隐球菌播散性隐球菌病测体温带状疱疹样自觉发热

右美托咪定复合收肌管隐神经阻滞在老年下肢手术患者中的应用效果

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中国老年学杂志 2024年第8期44卷 1855-1858页

作者：林锦雨王甜甜李双凤海南省中医院麻醉科海南海口570203

目的探讨右美托咪定复合收肌管神经阻滞在老年下肢手术中的应用效果。方法采用前瞻性随机对照研究,选取行下肢手术治疗的老年患者112例,用随机数字表法分为研究组与对照组,对照组采用罗哌卡因收肌管隐神经阻滞,研究组采用右美托咪定复... 详细信息

目的探讨右美托咪定复合收肌管神经阻滞在老年下肢手术中的应用效果。方法采用前瞻性随机对照研究,选取行下肢手术治疗的老年患者112例,用随机数字表法分为研究组与对照组,对照组采用罗哌卡因收肌管隐神经阻滞,研究组采用右美托咪定复合罗哌卡因收肌管隐神经阻滞。比较两组术前(T0),术后4 h(T1)、8 h(T2)、12 h(T3)、24 h(T4)静息状态下疼痛程度及T0、T1时氧化应激指标、认知功能。比较两组T0、完成阻滞时(T5)、手术30 min(T6)及手术结束时刻(T7)血流动力学指标及感觉、运动阻滞持续时间。结果研究组视觉模拟评分(VAS)下降幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。T1时研究组去甲肾上腺素(NE)、丙二醛(MDA)水平明显低于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)、简易智力状况检查(MMSE)量表评分明显高于对照组(P<0.05)。对照组平均动脉压、心率波动幅度明显大于研究组(P<0.001)。研究组感觉、运动阻滞持续时间明显长于对照组(P<0.001)。所有患者仅使用镇痛药物1次,其中研究组术后24 h内使用镇痛药物例数明显少于对照组(P<0.05)。结论右美托咪定复合收肌管隐神经阻滞能够有效减轻下肢手术治疗的老年患者术后疼痛、氧化应激反应,维持患者血流动力学稳定,在减少术后24 h内镇痛药使用及改善认知功能方面有良好效果。

关键词：收肌管隐神经阻滞右美托咪定罗哌卡因

基于JAK/STAT信号通路探讨槲皮素通过调控IL-6对结肠癌模型大鼠的保护机制

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中国老年学杂志 2024年第3期44卷 646-650页

作者：陈林金谢应玉陈丹林师雅姜靖雯海南省中医院海南海口571500

目的基于酪氨酸蛋白激酶/信号传导及转录激活蛋白(JAK/STAT)通路探讨槲皮素对白细胞介素(IL)-6的影响,并分析其对结肠癌大鼠的保护作用。方法 40只雄性C57BL/6小鼠,平均分为对照组、模型组、实验组(槲皮素低剂量组、槲皮素高剂量组)。... 详细信息

目的基于酪氨酸蛋白激酶/信号传导及转录激活蛋白(JAK/STAT)通路探讨槲皮素对白细胞介素(IL)-6的影响,并分析其对结肠癌大鼠的保护作用。方法 40只雄性C57BL/6小鼠,平均分为对照组、模型组、实验组(槲皮素低剂量组、槲皮素高剂量组)。除对照组外均构建结肠癌模型,建模成功后,实验组(槲皮素低、高剂量组)分别给予槲皮素(20、80 mg/kg)灌胃持续4 w。记录各组造模前、造模成功后及末次给药后小鼠的体质量变化情况;酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、干扰素(IFN)-γ水平;测量小鼠结肠长度及肿瘤数量;苏木素-伊红染色观察小鼠结肠组织病理结构;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测小鼠结肠组织细胞凋亡水平;Western印迹法检测小鼠结肠组织中p-JAK、p-STAT、Ki67、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-9蛋白表达情况。结果造模前,各组体质量比较无显著差异(P>0.05);造模成功后,与对照组相比,模型组、槲皮素低、高剂量组体质量明显降低(P<0.05);末次给药后,与模型组相比,槲皮素给药组体质量明显升高(P<0.05);与对照组相比,模型组、槲皮素低、高剂量组血清IL-6、TNF-α、IFN-γ、结肠肿瘤数量、JAK、STAT磷酸化水平、促癌蛋白Ki67表达均明显升高,结肠长度、细胞凋亡率、促凋亡蛋白Caspase-9表达明显减少(P<0.05),与模型组相比,槲皮素给药血清IL-6、TNF-α、IFN-γ、结肠肿瘤数量明显降低,结肠组织病理结果明显改善,结肠长度、细胞凋亡率明显减少,JAK、STAT磷酸化水平、促癌蛋白Ki67表达均逐渐减少,促凋亡蛋白Caspase-9表达逐渐升高(均P<0.05)。结论槲皮素能够通过抑制炎症反应、促进癌细胞凋亡来抑制结肠癌的发展进程,其作用机制可能通过抑制IL-6表达及JAK/STAT通路的磷酸化实现的。

关键词：槲皮素结肠癌白细胞介素-6 酪氨酸蛋白激酶信号传导及转录激活蛋白

氧化苦参碱调控CDK4/cyclinD1通路诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的细胞周期调控机制

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中国老年学杂志 2024年第2期44卷 490-493页

作者：陈林金谢应玉陈丹林师雅海南省中医院海南海口571500

目的研究氧化苦参碱对前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响及CDK4/cyclinD1通路调控方面的作用,探讨其对前列腺癌可能产生的作用机制。方法噻唑蓝(MTT)法观察前列腺癌PC-3细胞增殖情况;荧光染色观察前列腺癌PC-3细胞核形态改变... 详细信息

目的研究氧化苦参碱对前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响及CDK4/cyclinD1通路调控方面的作用,探讨其对前列腺癌可能产生的作用机制。方法噻唑蓝(MTT)法观察前列腺癌PC-3细胞增殖情况;荧光染色观察前列腺癌PC-3细胞核形态改变情况;流式细胞仪观察前列腺癌PC-3细胞凋亡率与细胞周期情况;实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)观察细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK4)、细胞周期蛋白(cyclin)D1基因表达情况;Western印迹观察CDK4、cyclinD1表达情况。结果与对照组相比,8μmol/L氧化苦参碱组作用72 h前列腺癌PC-3细胞的增殖活力最弱。荧光染色发现,氧化苦参碱使前列腺癌PC-3细胞核形态改变,且细胞核皱缩程度随氧化苦参碱浓度增加而加深。与对照组相比,氧化苦参碱组前列腺癌PC-3细胞的凋亡率显著上升且随浓度增加而显著上升(P<0.05);与对照组相比,2、4、8μmol/L氧化苦参碱组G1期比例明显增加,S期、G2的比例显著降低(P<0.05)。PCR法发现,与对照组相比,氧化苦参碱组CDK4和cyclinD1 mRNA的表达明显下降且随浓度增加而下降,8μmol/L组下降最明显。氧化苦参碱组CDK4和cyclinD1蛋白表达水平较对照组降低,4μmol/L组降低最为显著(P<0.05)。结论氧化苦参碱抑制前列腺癌PC-3细胞增殖活力,诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡并在细胞增殖周期G1期中阻滞,其中的作用机制可能与CDK4/cyclinD1通路密切相关。

关键词：氧化苦参碱 CDK4/cyclinD1通路前列腺癌PC-3细胞凋亡细胞周期调控机制