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非小细胞肺癌A549细胞基因组不稳定性和MYC基因突变在吉西他滨耐药中的作用

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 355-363页

作者：陈宗军陈亚红黄丽云梁紫盈海南医学院第二附属医院药学部海南海口570311 海南医学院第二附属医院呼吸科海南海口570311 海南医学院第一附属医院药学部海南海口570216 海口市第四人民医院体检科海南海口571100

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞基因不稳定性和MYC基因突变在吉西他滨耐药中的作用,并阐明其作用机制。方法:采用2mg·L^(-1)吉西他滨持续作用A549细胞(A549组),构建耐药细胞株A549R(A549R组),并将si-NC和si-MYC转染至A549R细胞... 详细信息

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞基因不稳定性和MYC基因突变在吉西他滨耐药中的作用,并阐明其作用机制。方法:采用2mg·L^(-1)吉西他滨持续作用A549细胞(A549组),构建耐药细胞株A549R(A549R组),并将si-NC和si-MYC转染至A549R细胞,作为si-NC A549R组和si-MYC A549R组。采用CCK-8法检测不同浓度(0、1、2、4、8、16和32 mg·L^(-1))吉西他滨对各组细胞的抑制率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。转录组测序技术(RNA-seq)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析A549组及A549R组细胞中的差异表达基因,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测A549组和A549R组细胞中基因组不稳定性相关基因错配修复基因2(MSH2)、错配修复基因6(MSH6)和DNA修复蛋白RAD50(RAD50)的表达水平,Western blotting法检测基因组不稳定性相关蛋白MYC原癌基因(MYC)和磷酸化组蛋白(γH2AX)的表达水平,染色质免疫共沉淀(ChIP)法检测RNA polⅡ和γH2AX在MYC基因上的富集程度,PCR法扩增并检测A549R细胞MYC基因突变情况。结果:与A549组比较,2、4、8、16和32 mg·L^(-1)吉西他滨作用后A549R组细胞抑制率降低(P<0.05),8mg·L^(-1)吉西他滨作用后细胞凋亡率降低(P<0.05)。与A549组比较,A549R组细胞中有234个mRNAs表达水平升高,205个mRNAs表达水平降低,其中错配修复相关基因(MSH2和MSH6)、RAD50和MYC表达水平明显升高(P<0.05)。KEGG信号通路富集分析,表达水平升高基因主要参与非同源末端连接、mRNA监测途径和DNA复制等信号通路。与A549组比较,A549R组细胞中MYC和γH2AX蛋白表达水平升高(P<0.05)。ChIP法检测,RNA polⅡ和γH2AX在MYC转录起始位点及exon 2上富集程度增加,MYC exon 2上存在G254A基因突变。与si-NC A549R组比较,si-MYC A549R组细胞中MYC mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),2、4、8、16和32 mg·L^(-1)吉西他滨作用后si-MYC A549R组细胞抑制率升高(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05)。结论:对吉西他滨耐药的NSCLC细胞中A549R基因组不稳定性增加,MYC基因发生突变和扩增,而敲减MYC可以恢复A549R细胞对吉西他滨的敏感性。

关键词：吉西他滨癌,非小细胞肺基因组不稳定性 MYC扩增 MYC突变

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CD39在胶质母细胞瘤免疫微环境中的作用及治疗潜力

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海南医学院学报 2024年第20期30卷 1579-1587页

作者：刘运运钱牧祝毓帅冯基高张超才赵建农海南医学院海南海口571199 海南医学院第二附属医院海南海口570216 海南省人民医院海南海口570311

胶质母细胞瘤(Glioblastoma multiforme,GBM)是成人最常见的恶性脑肿瘤,异质性高、增长快速、侵袭性强,患者预后不佳。近年来,细胞表面酶CD39在GBM肿瘤微环境中的作用受到广泛关注。CD39通过高效分解胞外ATP和ADP,生成免疫抑制性分子腺... 详细信息

胶质母细胞瘤(Glioblastoma multiforme,GBM)是成人最常见的恶性脑肿瘤,异质性高、增长快速、侵袭性强,患者预后不佳。近年来,细胞表面酶CD39在GBM肿瘤微环境中的作用受到广泛关注。CD39通过高效分解胞外ATP和ADP,生成免疫抑制性分子腺苷,显著影响抗肿瘤免疫反应。本文综述了CD39在调节GBM中多种免疫细胞(如MDSCs、TAMs、TILs、NKs和DCs)功能中的作用,探讨了针对CD39的治疗策略,包括抑制剂和抗体治疗的潜力,为GBM治疗提供新思路。本研究为开发更有效的GBM治疗方法提供了新视角,有望改善患者的预后。

关键词：胶质母细胞瘤 CD39 免疫调节肿瘤微环境免疫细胞

m6A修饰的circRNA在肝细胞癌中的研究进展

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海南医学院学报 2024年第2期30卷 155-160页

作者：褚凤冉刘路政武金才海南医学院临床学院海南海口571199 海南医学院第二附属医院介入血管外科海南海口570216 海南医学院附属海南医院(海南省人民医院)肝胆胰外科海南海口570311

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)是一种可逆的表观遗传修饰,是真核细胞中最丰富的修饰物之一,在信使RNA和非编码RNA中被普遍报道。m6A修饰可调节RNA的转录、加工、剪接、降解和翻译等,在肿瘤生物学行为中发挥重要作用。缺乏5’帽... 详细信息

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)是一种可逆的表观遗传修饰,是真核细胞中最丰富的修饰物之一,在信使RNA和非编码RNA中被普遍报道。m6A修饰可调节RNA的转录、加工、剪接、降解和翻译等,在肿瘤生物学行为中发挥重要作用。缺乏5’帽子结构的circ RNA(circular RNA)一直被误认为是转录过程中偶然剪切生成的“垃圾序列”,然而研究发现,circ RNA可以通过micro RNA、结合蛋白、翻译多肽和m6A修饰等多种方式参与肿瘤侵袭和转移。本文就m6A修饰在circ RNA调控作用及其在肝细胞癌中的功能作一综述,并讨论其在该领域的潜在临床应用和可能的未来发展方向。

关键词： N6-甲基腺苷环状RNA 修饰肝细胞癌

基于标准化病人的翻转课堂教学方法在问诊训练中的应用

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中国高等医学教育 2024年第3期 127-128,131页

作者：陈喜丁梅梅林桃舅阮国竹马志健海南医学院技能中心海南医学院第一附院海南海口570102

目的:探讨基于SP的翻转课堂教学方法在问诊训练中的应用效果。方法:随机选取我院2017级临床专业本科2个班级,分为试验组和对照组,分别采用基于SP的翻转课堂教学法和传统教学法,通过国家水平测试技能考试病史采集成绩及学生满意度来评价... 详细信息

目的:探讨基于SP的翻转课堂教学方法在问诊训练中的应用效果。方法:随机选取我院2017级临床专业本科2个班级,分为试验组和对照组,分别采用基于SP的翻转课堂教学法和传统教学法,通过国家水平测试技能考试病史采集成绩及学生满意度来评价教学效果。结果:试验组学生的考官评分、SP评分及病史采集总分高于对照组;考官评分中,问诊内容、收集过程及技巧、交流能力得分均高于对照组;SP评分中,交流能力、人文素养得分均高于对照组。试验组学生对教学法的满意度更高。结论:在问诊训练中开展基于SP的翻转课堂教学方法,是互联网与医学教育融合的有益尝试,为培养具有扎实的医学基本理论知识、较强的实践能力、较高的综合素质的应用型医学人才探寻了一种新的方法,值得在其他临床技能训练中不断推广。

关键词：标准化病人翻转课堂问诊

小胶质细胞活化对脑缺血再灌注大鼠缺血区域神经元树突棘的影响

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中国老年学杂志 2024年第20期 5005-5009页

作者：黄钰婷周升黄佳丽何青龙海南医学院第二附属医院功能科海南医学院第二附属医院神经外科

目的探究小胶质细胞活化对脑缺血再灌注(CIR)大鼠缺血区域神经元树突棘的影响。方法 60只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、假手术+集落刺激因子1受体(CSF1R)抑制剂PLX5622组、模型组、模型+PLX5622组各15只。CIR模型构建前14 d,通过... 详细信息

目的探究小胶质细胞活化对脑缺血再灌注(CIR)大鼠缺血区域神经元树突棘的影响。方法 60只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、假手术+集落刺激因子1受体(CSF1R)抑制剂PLX5622组、模型组、模型+PLX5622组各15只。CIR模型构建前14 d,通过含PLX5622的鼠粮饮食敲低假手术+PLX5622组与模型+PLX5622组脑组织中小胶质细胞含量。采用线栓法阻塞中动脉血流，2 h后拔出线栓模拟患者CIR损伤过程，24 h后开展神经功能评分、Morris水迷宫测试。取大鼠脑组织分别进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)、高尔基、免疫荧光染色与Western印迹检测。结果与假手术组相比，假手术+PLX5622组脑组织中离子化钙结合适配分子(iba)1蛋白表达明显减少(P0.05);而模型组脑组织中iba1蛋白表达明显增加，神经功能评分明显增加，Morris水迷宫中首次到达平台时间明显延长、穿越平台次数明显减少、目标象限停留时间显著缩短(P<0.01,P<0.001);模型组脑组织中出现明显梗死区域，炎症信号通路相关蛋白Nod样受体蛋白(NLRP)3与p-核因子(NF)-κB蛋白表达明显增加，神经营养相关蛋白脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体(Trk)B蛋白表达明显减少，神经元树突棘密度明显降低(P<0.05,P<0.001);与模型组相比，模型+PLX5622组脑组织中iba1蛋白表达明显减少，神经功能评分明显降低，Morris水迷宫中首次到达平台时间明显缩短，穿越平台次数明显增加、目标象限停留时间明显延长，脑组织中白色梗死区域占比明显减少，NLRP3与p-NF-κB蛋白表达明显减少，BDNF、TrkB蛋白表达与神经元树突棘密度明显增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论 PLX5622敲低大鼠脑组织中小胶质细胞能够减少神经元树突棘丢失，避免BDNF和TrkB蛋白表达降低，发挥减轻CIR造成的神经功能损伤作用，提高记忆能力。

关键词：脑缺血再灌注小胶质细胞树突棘神经功能记忆功能

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椰子油纳米乳液制备工艺条件优化

中国油脂 2024年第1期49卷 67-70,78页

作者：赵钰航肖英琛冯棋琴郭朋坤胡锦文崔玮海南医学院公共卫生与全健康国际学院海口571199

为扩大椰子油的应用范围,以精制冷榨椰子油为油相,Tween 80为乳化剂,无水乙醇为助乳剂,采用超声乳化法制备椰子油纳米乳液。以椰子油纳米乳液平均粒径及多分散指数(PDI)为指标,通过单因素实验和正交实验对椰子油纳米乳液制备工艺条件进... 详细信息

为扩大椰子油的应用范围,以精制冷榨椰子油为油相,Tween 80为乳化剂,无水乙醇为助乳剂,采用超声乳化法制备椰子油纳米乳液。以椰子油纳米乳液平均粒径及多分散指数(PDI)为指标,通过单因素实验和正交实验对椰子油纳米乳液制备工艺条件进行优化,并对制备的椰子油纳米乳液的类型进行鉴定。结果表明:椰子油纳米乳液最佳制备工艺条件为超声功率500 W、超声时间20 min、油乳质量比1∶1.5、油乳混合物与水质量比2∶8,在此条件下制得的纳米乳液平均粒径和PDI分别为131.0 nm和0.27;制得的椰子油纳米乳液为水包油(O/W)型。该工艺条件下制得的椰子油纳米乳液粒径小且均匀,且O/W型的椰子油纳米乳液拓宽了椰子油的应用范围。

关键词：椰子油纳米乳液超声乳化法

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不同剂量瑞芬太尼复合七氟烷用于脊柱手术患者的临床研究

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中国临床药理学杂志 2024年第20期 2958-2962页

作者：谭海涛陈涛黎坚林友才海南医学院第一附属医院脊柱外科

目的观察不同剂量瑞芬太尼复合七氟烷用于脊柱手术患者的临床疗效及安全性。方法将脊柱手术患者分为低剂量组、中剂量组及高剂量组。低、中和高剂量组分别给予静脉泵注0.2、0.4和0.6μg·kg-1·min-1注射用盐酸瑞芬太尼。比较3组患者... 详细信息

目的观察不同剂量瑞芬太尼复合七氟烷用于脊柱手术患者的临床疗效及安全性。方法将脊柱手术患者分为低剂量组、中剂量组及高剂量组。低、中和高剂量组分别给予静脉泵注0.2、0.4和0.6μg·kg-1·min-1注射用盐酸瑞芬太尼。比较3组患者的疼痛情况[视觉模拟评分（VAS）]、镇痛药物使用情况、苏醒质量、不同时刻[术前（T0）、插管即刻（T1）、静脉泵注瑞芬太尼5 min（T2）、10 min（T3）、15 min（T4）]血流动力学指标，并进行安全性评价。结果低、中和高剂量组分别入组49、56和51例患者。低剂量组患者术后6、12和24 h VAS评分分别为（2.48±0.51）、（2.73±0.63）和（2.61±0.54）分，中剂量组VAS评分分别为（2.36±0.54）、（2.65±0.59）和（2.51±0.50）分，高剂量组VAS评分分别为（2.29±0.53）、（2.53±0.57）和（2.44±0.52）分，组间比较，在统计学上差异均无统计学意义（均P>0.05）。低、中和高剂量组自控镇痛泵按压次数分别为（3.27±0.96）、（3.02±0.90）和（2.89±0.71）次，补救镇痛例数分别为2例（4.08%）、2例（3.57%）和0例（0.00%）,在统计学上差异均无统计学意义（均P>0.05）。低、中和高剂量组苏醒时间分别为（7.05±1.65）、（8.24±2.17）和（9.03±2.48） min,意识恢复时间分别为（11.26±2.73）、（13.85±2.94）和（15.57±3.17） min,气管拔管时间分别为（16.34±3.05）、（18.72±3.29）和（20.34±3.58） min,组间比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P0.05）。3组患者发生药物不良反应主要有低血压、恶心呕吐、心动过缓等，高、中、低剂量组总药物不良反应发生率分别为11.76%（6例/51例）、7.14%（4例/56例）和8.16%（4例/49例）,组间比较，在统计学上差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论脊柱手术患者采用0.2μg·kg-1·min-1瑞芬太尼复合七氟烷的苏醒质量更佳，安全性较高。

关键词：瑞芬太尼七氟烷脊柱手术镇痛苏醒质量血流动力学

原发性失眠患者奖赏网络关键核团在静息态fMRI功能连接的改变

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海南医学院学报 2024年第16期30卷 1230-1235页

作者：孙曌冉彬艳阚丽娜黄禄宇吴琼王乙翔康晓娜李丹丹王晓彤王小龙靳丹阳沈巍海南医学院中医学院海南海口570100 海南医学院第一附属医院海南海口571199 中山市中医院广东中山528401

目的:利用功能性磁共振成像(fMRI)技术观察原发性患者奖赏网络区域中脑腹侧被盖(Ventral ttegmental area,VTA)以及伏隔核(Nucleus accumbens,NAcc)脑功能连接的改变。方法:28例原发性失眠比较26例健康对照组脑功能成像的改变,并分析中... 详细信息

目的:利用功能性磁共振成像(fMRI)技术观察原发性患者奖赏网络区域中脑腹侧被盖(Ventral ttegmental area,VTA)以及伏隔核(Nucleus accumbens,NAcc)脑功能连接的改变。方法:28例原发性失眠比较26例健康对照组脑功能成像的改变,并分析中脑腹侧被盖以及伏隔核功能连接的改变与失眠的情绪障碍障碍之间的关系。结果:比较原发性失眠患者对比健康对照组,VTA与NAcc全脑的功能连接均降低,与VTA-l功能连接增降低的脑区为双侧前扣带回、左侧眶额回,与VTA-r功能连接增降低的脑区为双侧前扣带回、左侧眶额回、右侧中央前回,与NAcc-l功能连接降低的脑区为双侧丘脑、辅助运动区,与NAcc-r功能连接降低的脑区为双侧丘脑、小脑。结论:睡眠障碍会显著降低奖赏网络中VTA与NAcc的功能连接,说明长期睡眠障碍可能影响在原发性失眠患者奖赏处理能力,导致失眠患者情感功能发生障碍。

关键词：功能性磁共振成像广泛性焦虑障碍脑功能前扣带回前额叶

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胰腺癌患者口腔菌群多样性组成谱的系统评价

肿瘤防治研究 2024年第2期51卷 104-109页

作者：殷智洪张郴燕黄海溶海南医学院公共卫生与全健康国际学院海口571199

目的系统评价胰腺癌患者口腔菌群多样性组成谱。方法通过PubMed、Web of science、EMbase、The Cochrane Library、CBM、中国知网、万方和维普数据库检索胰腺癌患者口腔菌群多样性组成谱的横断面研究,检索时限从建库至2023年7月15日。... 详细信息

目的系统评价胰腺癌患者口腔菌群多样性组成谱。方法通过PubMed、Web of science、EMbase、The Cochrane Library、CBM、中国知网、万方和维普数据库检索胰腺癌患者口腔菌群多样性组成谱的横断面研究,检索时限从建库至2023年7月15日。根据纳入排除标准筛选评价文献、提取数据和信息,采用定性系统评价和Review Manager 5.4进行Meta分析。结果最终纳入7个横断面研究,包括187例胰腺癌患者,440例健康对照者。Meta分析结果显示,与健康对照者相比,胰腺癌患者口腔菌群ɑ多样性Simpson指数降低。定性分析显示胰腺癌患者的厚壁菌门、普氏菌属、罗斯氏菌属、链球菌属的相对丰度高于健康者;胰腺癌患者的变形菌门、奈瑟菌属、嗜血杆菌属、卟啉单胞菌属、副流感嗜血杆菌的相对丰度低于健康者。结论胰腺癌患者口腔菌群具有一定的特异性,其中厚壁菌门、普氏菌属等在胰腺癌患者中相对丰度较高;而变形菌门、奈瑟菌属等在胰腺癌患者中的相对丰度较低。

关键词：胰腺癌口腔菌群系统评价 Meta分析

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