检索结果-南通市图书馆

细胞因子/趋化因子在单纯疱疹病毒脑炎小鼠表达及生物信息学分析

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中国热带医学 2022年第3期22卷 234-239页

作者：程易马粤婷吴日红徐瑜杨舒凌林英姿王永霞海南医学院热带医学院海南海口571199

目的探讨单纯疱疹病毒脑炎(herpes simplex encephalitis, HSE)中细胞因子/趋化因子谱的表达情况,确定差异表达的因子及其相关的生物信息学作用。方法单纯疱疹病毒1型(HSV-1)接种于Vero细胞,Reed-Muench法测定病毒滴度;实验组小鼠鼻... 详细信息

目的探讨单纯疱疹病毒脑炎(herpes simplex encephalitis, HSE)中细胞因子/趋化因子谱的表达情况,确定差异表达的因子及其相关的生物信息学作用。方法单纯疱疹病毒1型(HSV-1)接种于Vero细胞,Reed-Muench法测定病毒滴度;实验组小鼠鼻腔接种HSV-1,建立动物感染模型,观察至接种后第7天,处死小鼠,左半脑制备石蜡切片用于病理学检测,右半脑制备脑组织匀浆用于观察其致Vero细胞病变作用及高通量细胞因子/趋化因子表达谱芯片检测。GO、KEGG和PPI等分析技术用于差异表达蛋白的生物信息学研究。结果实验组小鼠接种HSV-1后几乎都出现了病毒性脑炎的症状(发病率为100%),7 d内15只小鼠中死亡3只(死亡率20%),而对照组小鼠均正常,但实验组动物的发病率和死亡率与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。脑组织病理学检测发现实验组小鼠脑组织轻度水肿伴大量炎性细胞浸润,见少量出血灶,对照组小鼠脑组织正常。实验组小鼠脑组织匀浆接种Vero细胞后发现大量细胞脱落、融合,出现明显的细胞病变效应,对照组细胞无明显改变。脑组织匀浆经PCR扩增出了病毒UL36的基因片段,而对照组未扩增出。细胞因子/趋化因子芯片于实验组筛选出了7个差异表达蛋白,GO富集分析发现其涉及多个生物学过程,与炎性细胞的活化和趋化有关;KEGG通路富集分析筛选出了7个有意义的信号通路,涉及TNF信号通路和NOD样受体信号通路等;PPI分析发现大多数差异表达蛋白组成了一个相互作用网络,其中IL-6、IL-1、IFN-γ和TNF-α是该网络的主要因子。结论单纯疱疹病毒脑炎小鼠模型中筛选出了7种差异表达的细胞因子/趋化因子,和与之相关的信号通路可能参与了HSE的病理生理机制。

关键词：单纯疱疹病毒Ⅰ型脑炎细胞因子/趋化因子生物信息学分析

类鼻疽伯克霍尔德菌AraC转录因子基因的原核表达及纯化

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中国病原生物学杂志 2022年第7期17卷 761-765页

作者：曾慧黄玮晨高洁江昱颖胡琪修皓海南医学院热带医学院海南海口571199

目的从海南类鼻疽伯克霍尔德菌菌株BPHN001中克隆得到AraC转录因子基因,构建类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)AraC转录因子基因原核表达质粒,对该转录因子基因进行原核表达,并对表达产物进行纯化。方法根据AraC转录因子... 详细信息

目的从海南类鼻疽伯克霍尔德菌菌株BPHN001中克隆得到AraC转录因子基因,构建类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)AraC转录因子基因原核表达质粒,对该转录因子基因进行原核表达,并对表达产物进行纯化。方法根据AraC转录因子基因设计特异性扩增引物,将PET-28a(+)质粒和扩增得到的AraC转录因子基因产物同时用BamHⅠ和HindⅢ双酶切,构建带His标签的重组质粒。经测序验证后,将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3),采用最佳浓度IPTG进行诱导,采用SDS-PAGE鉴定重组蛋白的表达情况。通过Ni^(2+)柱纯化目的蛋白,采用Western blot检测纯化蛋白的免疫反应性。结果特异性引物扩增得到的产物大小约为1000 bp,与目的基因片段1032 bp基本一致。将扩增产物与PET-28a(+)载体连接后测序,与预期完全一致。重组载体转化BL21(DE3)后用最适IPTG浓度(0.5 mmol/L)诱导过夜(约16 h),SDS-PAGE检测表达产物分子质量在40~55 ku之间,与预期相符。表达蛋白纯化后进行Western blot,能被相应抗体识别。结论成功克隆得到AraC转录因子基因,,构建的含AraC转录因子基因原核表达载体转化DE3后经IPTG诱导可表达出融合蛋白,经Ni^(2+)柱纯化得到具有免疫反应原性的AraC转录因子蛋白,为AraC转录因子的功能研究奠定了基础。

关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌 AraC转录因子原核表达

O-GlcNAc修饰对宿主细胞抵抗类鼻疽伯克霍尔德菌感染的影响

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中国病原生物学杂志 2023年第10期18卷 1127-1131,1136页

作者：许杏珍曾颖斐夏乾峰李雪霞海南医学院公共卫生与全健康国际学院海南海口571199 海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海南医学院热带医学院

目的探讨在不同浓度葡萄糖培养下人肺癌上皮A549细胞对类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,Bp)的抗感染能力的变化,探究O-GlcNAc糖基化修饰对宿主细胞抗感染能力的影响。方法分别用含0、1、5.5、20 mmol/L葡萄糖的DMEM培... 详细信息

目的探讨在不同浓度葡萄糖培养下人肺癌上皮A549细胞对类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,Bp)的抗感染能力的变化,探究O-GlcNAc糖基化修饰对宿主细胞抗感染能力的影响。方法分别用含0、1、5.5、20 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基培养A549细胞,并在此条件下用类鼻疽伯克霍尔德菌感染A549细胞,感染24 h后用Giemsa染色,显微镜下观察细胞的空斑形成面积和多核巨细胞(MNGCs)数量;CCK-8检测细胞存活率;Western blot检测O-GlcNAc糖基化修饰水平的变化。结果 A549细胞空斑形成面积、多核巨细胞数量随葡萄糖浓度的增高而减少(均P<0.01);细胞存活率随葡萄糖浓度增高呈递增趋势(P<0.01);细胞的O-GlcNAc修饰水平岁葡萄糖浓度增高呈递增趋势(P<0.05)。结论葡萄糖有助于增强A549细胞对类鼻疽伯克霍尔德菌的抗感染能力,推测O-GlcNAc糖基化修饰在其中起调控作用,但具体机制有待进一步研究。

关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌 O-GlcNAc糖基化修饰抗感染

海口市及周边地区白纹伊蚊幼蚊肠道微生物分离与鉴定

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中国媒介生物学及控制杂志 2022年第2期33卷 201-206页

作者：覃晓宁任欣悦谢雪颜陈彦桦夏乾峰康迅海南医学院热带医学与检验医学院海南海口571199 海南医学院热带转化医学教育部重点实验室海南海口571199 海南医学院热带生物医学技术实验室海南海口571199

目的通过对海口市及周边5个地点的白纹伊蚊幼蚊肠道微生物的分离与鉴定,研究白纹伊蚊肠道微生物菌群的种类和多样性。方法2019年在海口市及周边5个地点采集白纹伊蚊幼蚊;对幼蚊肠道微生物进行PCR扩增,产物测序,通过美国国立生物技术信... 详细信息

目的通过对海口市及周边5个地点的白纹伊蚊幼蚊肠道微生物的分离与鉴定,研究白纹伊蚊肠道微生物菌群的种类和多样性。方法2019年在海口市及周边5个地点采集白纹伊蚊幼蚊;对幼蚊肠道微生物进行PCR扩增,产物测序,通过美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库对幼蚊和肠道微生物序列进行核苷酸序列同源性比对分析。结果白纹伊蚊幼蚊肠道微生物共鉴定出8株细菌,2株真菌,隶属于2门4科4属,优势菌群为厚壁菌门。海口市溪宜下村、大顶村,文昌市抱罗镇高堆村这3个地点的幼蚊肠道均分离出蜡状芽孢杆菌,仅临高县昌拱村的幼蚊中分离出真菌。海口市溪宜下村白纹伊蚊幼蚊肠道分离出的细菌种类最多,包括贝莱斯芽孢杆菌、纺锤形赖氨酸芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌和鲍曼不动杆菌。结论海口市及周边5个地点白纹伊蚊幼蚊肠道细菌以厚壁菌门细菌为主;肠道微生物细菌丰富度高于真菌。

关键词：白纹伊蚊肠道微生物分离与鉴定菌落形态进化树

浅析生态文明视角下大学生绿色消费观念的构建

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科学咨询(科技·管理) 2022年第7期 206-208页

作者：于春伟张军季玉祥文少白温莹莹海南医学院热带医学与检验医学院

重大生态危机事件发生后，人们再次清醒地意识到生态环境安全是关系民生的重大社会发展问题，深入挖掘人与自然之间和谐发展蕴含的内在关系，可以更好地为建设美丽中国、实现中华民族的可持续发展提供生态价值支撑。大学生作为环境保护... 详细信息

重大生态危机事件发生后，人们再次清醒地意识到生态环境安全是关系民生的重大社会发展问题，深入挖掘人与自然之间和谐发展蕴含的内在关系，可以更好地为建设美丽中国、实现中华民族的可持续发展提供生态价值支撑。大学生作为环境保护和建设生态文明的主力军，是践行生态文明行为的先锋力量，引导他们在新时代形成绿色消费观，对于践行我国社会主义现代化发展中的国家“绿色”发展理念具有战略意义。高校作为新思想、新理念、新行为的前沿阵地，开展绿色消费教育是在国家生态文明建设中应该有的责任担当，也是生态文明建设在高等教育中工作的具体化。为使该项工作顺利实施，需要着重培养学生的生态意识、促进绿色消费观念的构建。

关键词：生态文明绿色消费高校大学生

氯霉素对序批式反应器生物脱氮及微生物群落的影响探究

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水处理技术 2022年第1期48卷 75-79,84页

作者：陈艳封鸿信吴琳海南国为亿科环境有限公司 570203 海南医学院热带医学与检验医学院海南海口570102

为探究新型污染物氯霉素类抗生素对活性污泥生物脱氮的影响,构建了批式生物反应器,在中温条件下研究不同浓度氯霉素(CAP)对生物脱氮的影响。结果表明,CAP的存在抑制了脱氮效率,且当CAP的质量浓度为5.0mg/L时,氨氮(NH;-N)和总氮(TN)的去... 详细信息

为探究新型污染物氯霉素类抗生素对活性污泥生物脱氮的影响,构建了批式生物反应器,在中温条件下研究不同浓度氯霉素(CAP)对生物脱氮的影响。结果表明,CAP的存在抑制了脱氮效率,且当CAP的质量浓度为5.0mg/L时,氨氮(NH;-N)和总氮(TN)的去除率分别为81.3%和61.2%,仅为空白组的88.1%和77.9%。CAP存在提高胞外聚合物(EPS)的含量,且CAP质量浓度越高,EPS的含量提高越明显。CAP显著降低硝化与反硝化过程,降低氨氧化菌和亚硝酸盐氧化菌的活性。此外,CAP的质量浓度影响脱氮关键酶的活性,CAP质量浓度越高,脱氮关键酶抑制越明显。微生物分析表明,CAP存在降低Proteobacteria,Bacteroidetes及Chloroflexi的相对丰度。

关键词：氯霉素生物脱氮硝化反硝化胞外聚合物

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人体蠕形螨标本制作方法探讨

中国媒介生物学及控制杂志 2022年第1期33卷 143-147页

作者：吴海钟赛凤赵秋宇权云帆海南医学院热带医学与检验医学院海南海口571199 海南医学院基础医学与生命科学学院海南海口571199

目的探索和研究安全、快速,且能长期保存人体蠕行螨标本的制作方法,以期满足人体寄生虫实验教学的需要。方法采用透明胶纸粘贴法和挤刮涂片法获取蠕形螨,使用多种方法对人体蠕形螨进行处理,对比中性树胶、无味型封片剂以及甘油明胶的封... 详细信息

目的探索和研究安全、快速,且能长期保存人体蠕行螨标本的制作方法,以期满足人体寄生虫实验教学的需要。方法采用透明胶纸粘贴法和挤刮涂片法获取蠕形螨,使用多种方法对人体蠕形螨进行处理,对比中性树胶、无味型封片剂以及甘油明胶的封片效果,在数码显微镜KoPa WiFi EDU软件系统下观察和拍摄。结果背景杂质少油脂少不影响观察的标本可直接采用无味型封片剂或者甘油明胶对透明胶封片保存。透明胶未粘贴好导致气泡多或者油脂、汗毛多影响观察的标本可采用2%洗洁精短时间清洁后,依次放入浓度为75%~100%的乙醇溶液中脱水后,采用无味型封片剂封片保存。对于透明胶上密度较大的标本,可采用2%洗洁精长时间浸泡后,离心沉淀,取沉渣放入75%乙醇溶液中固定后,采用甘油明胶封片保存。结论可采用无味型封片剂或者甘油明胶代替中性树胶作为蠕形螨标本制作的封片剂。采用2%洗洁精可清洗标本中存在的油脂且可达到从透明胶带中游离蠕形螨的效果。

关键词：毛囊蠕形螨皮脂蠕形螨形态标本制作

基于低场核磁共振横向弛豫谱的注水肉检测模型建立

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食品工业科技 2021年第11期42卷 226-232页

作者：许建梅杨芳林卿王佳慧艾竹君海南医学院现代教育技术中心海南海口571199 海南医学院生物医学信息与工程学院海南海口571199 海南医学院热带医学与检验学院海南海口571199

用直接注射的方式,将猪背最长肌制备成注水比例分别为0、2%、6%、10%和14%的肉样本。利用低场核磁共振(field nuclear magnetic resonance,LF-NMR)技术测量肉样本产生的NMR信号,并将反演后得到的横向弛豫谱参数作为自变量,通过判别分析(... 详细信息

用直接注射的方式,将猪背最长肌制备成注水比例分别为0、2%、6%、10%和14%的肉样本。利用低场核磁共振(field nuclear magnetic resonance,LF-NMR)技术测量肉样本产生的NMR信号,并将反演后得到的横向弛豫谱参数作为自变量,通过判别分析(Discriminant analysis,DA)和偏最小二乘回归(partial least square regression,PLSR)分析,分别建立注水肉检测模型,并尝试多种可能性的PLSR建模,评估分析模型对较低注水比例的注水肉的检测性能。结果表明,对DA模型进行回代验证和留一交叉验证,模型对注水肉分类的总正确率分别为89.4%和88.2%。采用将杠杆值和学生化残差相结合的方式判别和删除异常数据,用变量投影重要性分析法筛选出6个横向弛豫谱参数作为自变量建立的优化PLSR模型的检测性能最优,校准集决定系数(R_(c)^(2))和标准误差(SEV)分别为0.9603和1.0033%,交叉验证的决定系数(R_(cv)^(2))和标准误差(SECV)分别为0.9508和1.1169%,预测集决定系数(R_(p)^(2))和标准误差(SEP)分别为0.9518和1.1280%。在95%的置信概率下,优化PLSR模型能够预测未知样本中注水百分比的置信区间的最好估计值约为2.256%。表明基于LF-NMR横向弛豫谱建立的DA模型和PLSR模型可以对注水肉进行有效的定性和定量检测。

关键词：低场核磁共振判别分析偏最小二乘回归注水肉

LKB1基因在急性淋巴细胞白血病患者中的表达水平与病情的相关性

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中国实验血液学杂志 2020年第2期28卷 464-469页

作者：韩锋赖庭文李浩谭文敏吴洁海南医学院第一附属医院检验科海南海口570102 海南医学院第一附属医院血液内科海南海口570102 海南医学院热带医学与检验医学院临床血液学检验教研室海南海口571199

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者体内LKB1基因的表达水平,分析患者病情与LKB1基因表达水平的相关性。方法:选择本院住院治疗的白血病患者98例,根据诊断结果的不同分为:ALL组56例,ANLL组42例。选取同时期50例健康体检者作为对照组... 详细信息

目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者体内LKB1基因的表达水平,分析患者病情与LKB1基因表达水平的相关性。方法:选择本院住院治疗的白血病患者98例,根据诊断结果的不同分为:ALL组56例,ANLL组42例。选取同时期50例健康体检者作为对照组。3组患者的静脉血分离单个核细胞,应用RT-PCR检测并比较各组的LKB1基因表达水平。根据ALL患者LKB1基因表达水平分为2个亚组:低表达组(39例),高表达组(17例)。随访3年,应用Kaplan-Meier法绘制2组ALL患者的OS及DFS曲线。比较2组CR及复发比例的差异。应用多因素Logistic回归分析影响ALL患者生存相关的危险因素。结果:LKB1基因表达水平对照组为1.56(1.38-1.74)>ALL组1.32(1.22-1.40)>ANLL组0.89(0.78-1.02),3组比较具有统计学差异(P<0.05)。与低表达组比较,高表达组CR率显著较高,而复发比例较低(均P<0.05)。随访3年,LKB1高表达的ALL患者OS和DFS率均优于LKB1低表达的ALL患者(P<0.05)。LKB1基因表达水平与ALL患者危险分层存在负相关(r=-0.712,P=0.039),其中标危ALL,LKB1基因低表达组患者显著少于高表达组(P=0.014),而高危ALL,LKB1基因低表达组患者显著高于高表达组(P=0.002)。多元Logistic回归分析显示,年龄(OR=2.872,P=0.020)、外周血幼稚细胞数(OR=2.268,P=0.028)为ALL患者生存相关的危险因素,而LKB1表达水平(OR=0.426,P=0.016)为保护因素。结论:ALL患者体内LKB1基因呈低表达水平,且表达水平越低ALL病情越严重,预后越差。

关键词：急性淋巴细胞白血病 LKB1基因病情 Kaplan-Meier生存分析