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病毒感染性检测方法研究进展

病毒学报 2025年

作者：叶永丽李梓暄刘丽娟孙秀兰纪剑江南大学食品学院中国检验检疫科学研究院

病毒感染性分析是病毒类生物医药、环境监测、食品安全监管等领域的重要内容，明确病毒感染性对于病毒污染水平与传播能力分析、污染预警、降低危害和损失至关重要。近年来，除传统的空斑形成单位法、终点稀释法和病灶形成单位测定法外... 详细信息

病毒感染性分析是病毒类生物医药、环境监测、食品安全监管等领域的重要内容，明确病毒感染性对于病毒污染水平与传播能力分析、污染预警、降低危害和损失至关重要。近年来，除传统的空斑形成单位法、终点稀释法和病灶形成单位测定法外，结合计算机和生物信息学等学科知识及技术开发了系列高性能的感染性病毒检测新方法，包括激光力细胞学法、细胞生物传感法、间接聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction, PCR）法、无细胞荧光原位杂交法以及基于传统方法的改良技术等。这些新方法新技术在缩短试验周期、提高检测灵敏度、准确度和特异性、可实现自动化等方面具有显著的优势。本文对病毒感染宿主细胞系的选择以及感染性病毒分析方法的原理、应用、性能等方面进行综述，以期为病毒污染防控特别是食源性病毒的监管策略制定提供参考依据。

关键词：病毒感染能力空斑形成单位终点稀释法滴度

基于MaxEnt模型的暗色粉蚧Pseudococcus viburni全球潜在分布区预测

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环境昆虫学报 2025年

作者：黄芳孙双艳付海滨詹国平潘绪斌王聪李惠萍湖州检验检疫综合技术服务中心海关总署国际检验检疫标准与技术法规研究中心沈阳海关技术中心中国检验检疫科学研究院太原海关技术中心

暗色粉蚧Pseudococcus viburni是落叶果树的重要多食性害虫，对苹果、梨、葡萄等重要水果的潜在危害风险高。暗色粉蚧在全球多个国家内发生，造成严重的经济损失，目前对我国云南少数地区已有入侵报道。本研究目的旨在对暗色粉蚧的潜在... 详细信息

暗色粉蚧Pseudococcus viburni是落叶果树的重要多食性害虫，对苹果、梨、葡萄等重要水果的潜在危害风险高。暗色粉蚧在全球多个国家内发生，造成严重的经济损失，目前对我国云南少数地区已有入侵报道。本研究目的旨在对暗色粉蚧的潜在地理分布区进行识别，为该有害生物的风险评估及管理提供数据支持。基于暗色粉蚧的46个有效分布记录和19个生物环境因子，利用MaxEnt模型和ArcGIS软件对暗色粉蚧在全球以及我国在目前及20年后的潜在地理分布区进行识别，同时利用综合环境变量贡献率和刀切法检验评估影响其地理分布的主要环境因子。研究结果显示影响暗色粉蚧地理分布的主要环境因子有最冷月最低温（bio6）、最热季平均温度（bio10）、温度年较差（bio7）。暗色粉蚧在全球的潜在分布区主要包括北美洲太平洋沿岸、南美洲南部、欧洲西部及地中海沿岸、非洲南部、澳洲东南及以我国南部为主的亚洲南部。在我国的潜在分布区主要集中在江淮流域、长江中下游地区、华南及西南等地。未来20年，暗色粉蚧在全球的适生区范围在原有的基础上大幅增加，在我国的适生面积由目前占陆地总面积的23.46%增长到28.44%。暗色粉蚧在我国云南等少数地区已有入侵记录，在我国存在定殖、扩散风险，对我国现有的防疫管理有潜在威胁。建议农林、口岸等疫情管理部门加强调查、检疫和监控，严防暗色粉蚧对我国农林产业造成危害。

关键词：暗色粉蚧生物入侵潜在地理分布生物环境因子 MaxEnt模型

芝麻过敏原Ses i 2核酸适体的筛选与鉴定研究

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核农学报 2025年第1期39卷 59-67页

作者：李洋于宁康文瀚张九凯杜欣军陈颖天津科技大学食品科学与工程学院天津300457 中国检验检疫科学研究院北京100176

芝麻是八大类食物过敏原之一,快速准确识别芝麻过敏原对预防其过敏有重要意义。核酸适配体可以高效识别靶标过敏原,在过敏原检测中有良好的应用前景。为了获得芝麻主要过敏原Ses i 2的特异性核酸适体,本研究以Ses i 2为靶标,通过磁珠筛... 详细信息

芝麻是八大类食物过敏原之一,快速准确识别芝麻过敏原对预防其过敏有重要意义。核酸适配体可以高效识别靶标过敏原,在过敏原检测中有良好的应用前景。为了获得芝麻主要过敏原Ses i 2的特异性核酸适体,本研究以Ses i 2为靶标,通过磁珠筛选法(磁珠-SELEX)开展10轮筛选,经由高通量测序获得6条候补序列(S1~S6),并进行家族性、同源性分析及二级结构预测。结果表明,6条候选核酸适体的重复率可达46.38%,其自由能在-9.02到-2.47 kcal·moL^(-1)之间,根据自由能能量稳定原则,S1和S5吉布斯自由能最低最稳定,分别为-6.70和-9.02 kcal·moL^(-1)。利用ELISA试验进行亲和力测试,结果表明核酸适体S1和S2的亲和能力较强,S1:KD=67.02 nmol·L^(-1),R2=0.925 8,S2:KD=97.65 nmol·L^(-1),R2=0.795 1。核酸适体S1与过敏原Ses i 2的结合力和其他过敏原蛋白相比有显著差异,可视为具有特异性。本研究最终获得一条兼具良好亲和力和特异性的核酸适体S1,为芝麻过敏原快速检测提供了技术支撑。

关键词：芝麻过敏原 Ses i 2 核酸适体亲和力

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配方乳粉中6种致病菌双重酶促等温扩增快速检测方法的建立

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微生物学报 2025年

作者：苗雅倩杨艳歌赵健淞魏莹王秀娟袁飞王正亮张峰中国计量大学生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室中国检验检疫科学研究院国家市场监督管理总局重点实验室(食品质量与安全)

【目的】建立一种双重快速检测方法，旨在快速筛查配方乳粉中克罗诺杆菌、大肠埃希氏菌O157:H7、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和单核增生李斯特氏菌等6种常见食源性致病菌。【方法】酶促等温扩增（enzymatic recombinase amp... 详细信息

【目的】建立一种双重快速检测方法，旨在快速筛查配方乳粉中克罗诺杆菌、大肠埃希氏菌O157:H7、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和单核增生李斯特氏菌等6种常见食源性致病菌。【方法】酶促等温扩增（enzymatic recombinase amplification， ERA）技术是新型等温扩增技术，在25-42 ℃的条件下，仅需10-30 min即可完成对微量DNA或RNA的指数级扩增。基于该技术，本研究设计了克罗诺杆菌ERA检测引物探针，同时筛选适用于ERA检测体系的大肠埃希氏菌O157:H7、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和单核增生李斯特氏菌的引物探针，从而确定了每种单一菌种ERA检测的引物探针。进一步通过引物探针的两两组合分析及方法优化，建立双重ERA检测方法。通过人工模拟污染试验和实际样品检测，确定双重ERA检测方法的检出限和准确性。【结果】本研究建立了三组双重ERA法，可快速检测6种食源性致病菌，检测时间仅需16 min 10 s。灵敏度检测结果显示克罗诺杆菌和大肠埃希氏菌O157:H7、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌两种组合对DNA检测的灵敏度均为1 ng/μL，而沙门氏菌和单核增生李斯特氏菌对DNA检测的灵敏度为10-1ng/μL。人工模拟污染试验结果显示，该方法最低可检出菌浓度为1 CFU/mL。在37份临期市售配方乳粉检测中，蜡样芽孢杆菌和单核增生李斯特氏菌的检出率分别为37.84%和21.62%。本研究建立的双重ERA检测方法与行业标准实时荧光PCR法的检测结果一致，证实了该方法的准确性。【结论】本研究建立的双重ERA方法具有较高的特异性和灵敏度，该方法从DNA提取到最终获得检测结果仅需约20 min，可同时检测6种致病菌，显著提高了检测效率，对食源性致病菌的快速筛查具有重要意义。

关键词：配方乳粉酶促等温扩增食源性致病菌快速检测

国有资产改革对自然资源资产“两权”分离的启示与借鉴

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生态经济 2025年第1期41卷 195-200页

作者：林霖黄志豪康琴陈丹张敏王珂虞舟鲁中国计量大学人文与外语学院浙江杭州310018 浙江数治空间规划设计有限公司浙江杭州310030 浙江省测绘科学技术研究院浙江杭州310007 浙江大学环境与资源学院浙江杭州310058

我国国有资产管理体制经过了从统一到分散再到统一的改革历程。在此过程中,国务院设立国有资产监督管理委员会,并逐步推动国有资产管理方式从以管企业为主向以管资本为主转变,探索了国有资产所有权与监管权“两权”分离的路径。鉴于自... 详细信息

我国国有资产管理体制经过了从统一到分散再到统一的改革历程。在此过程中,国务院设立国有资产监督管理委员会,并逐步推动国有资产管理方式从以管企业为主向以管资本为主转变,探索了国有资产所有权与监管权“两权”分离的路径。鉴于自然资源资产管理与国有资产管理存在较强相似性,国有资产投资运营公司在促进国有资产“两权”分离中的关键作用,为自然资源资产所有权与监管权的分离提供了重要启示和借鉴。自然资源资产管理在完成委托代理机制试点后,建议管理方式由“资源管理”逐步转向“资产管理”,授权设立自然资源投资运营公司,以实现自然资源资产“两权”的有效分离,从“自然资源部门—自然资源资产”的二级管理体制转变为“自然资源部门—自然资源投资运营公司—自然资源资产”的三级管理体制,以期为推进自然资源资产的有效监管和资产增值提供改革思路与参考。

关键词：国有资产改革自然资源资产 “两权”分离投资运营公司

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三重real-time PCR同步检测黄牛、水牛和牦牛成分

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食品科学 2021年第20期42卷 280-285页

作者：吴姗张明哲方云陈哲张荃孙超沈旭芳虞惠贞尹文秀张晓峰浙江省检验检疫科学技术研究院浙江杭州310016

为准确快速地鉴定黄牛、水牛和牦牛的成分,研发具有这3种牛特异性的引物和探针,并建立单重、双重和三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法,同步检测上述3种牛的成分。单重real-time PCR检测... 详细信息

为准确快速地鉴定黄牛、水牛和牦牛的成分,研发具有这3种牛特异性的引物和探针,并建立单重、双重和三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法,同步检测上述3种牛的成分。单重real-time PCR检测时,3种牛的检测灵敏度均为0.025 ng/μL;双重real-time PCR检测时,两两组合的引物探针含量比例为1∶1时,黄牛的检测灵敏度降低至0.1 ng/μL,而水牛和牦牛仍为0.025 ng/μL;对三重real-time PCR检测体系进行优化,当黄牛、水牛和牦牛3组引物探针的含量比例为3∶3∶2时,检测灵敏度最佳,黄牛和水牛的检测灵敏度可达到0.1 ng/μL,而牦牛的灵敏度仍可达到0.025 ng/μL。但上述双重和三重real-time PCR检测的灵敏度,是建立在3种牛的含量比例为1∶1∶1的情况下,若3种牛的比例差异较大,特别是黄牛和牦牛的含量比例差异较大时,如比例为9∶1时,含量低的成分会存在漏检。因此,在对整块肉的样品进行检测时,可采用三重real-time PCR的方法同步检测3种牛的成分;若样品可能为上述3种肉的为混合物,如肉糜、肉松等,则建议采用单重real-time PCR检测。

关键词：黄牛水牛牦牛三重real-time PCR

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食品罐内壁涂料中双酚-二缩水甘油醚的快速检测和迁移规律

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分析化学 2014年第3期42卷 403-408页

作者：曹国洲陈少鸿肖道清朱晓艳马明刘在美宁波检验检疫科学技术研究院

建立了快速、简便的超高效液相色谱法同时测定食品模拟物中双酚A-二缩水甘油醚(BADGE)、双酚F-二缩水甘油醚(BFDGE)及其衍生物特定迁移量的方法。采用水、3%乙酸、10%乙醇和葵花籽油4种食品模拟物在60℃、10 d的条件下模拟了食品罐内壁... 详细信息

建立了快速、简便的超高效液相色谱法同时测定食品模拟物中双酚A-二缩水甘油醚(BADGE)、双酚F-二缩水甘油醚(BFDGE)及其衍生物特定迁移量的方法。采用水、3%乙酸、10%乙醇和葵花籽油4种食品模拟物在60℃、10 d的条件下模拟了食品罐内壁涂料中双酚-二缩水甘油醚的迁移。水性食品模拟物直接进样,葵花籽油模拟物采用乙腈提取,提取液经固相萃取净化后进样。迁移到水性食品模拟物中的BADGE、双酚A-(3-氯-2-羟丙基)甘油醚(BADGE·HCl)发生水解,分别转化成双酚A-二(2,3-二羟丙基)醚(BADGE·2H2O)和双酚A-(3-氯-2-羟丙基)(2,3-二羟丙基)醚(BADGE·H2O·HCl);迁移到油性模拟物中的BADGE和BADGE·HCl则没有发生水解。9种双酚-二缩水甘油醚在0.05~10 mg/L范围内线性关系良好,水性食品模拟物和油性食品模拟物中方法的检出限分别为5μg/L和20μg/kg。应用本方法对10种未接触过食品的空罐进行了检测,有5种样品中检出了BADGE及其衍生物,其中1种样品中BADGE·2H2O(或BADGE)和BADGE·H2O·HCl(或BADGE·HCl)在4种食品模拟物中的迁移量均超过了欧盟EC/1895/2005规定的限量。

关键词：食品罐双酚-二缩水甘油醚特定迁移量超高效液相色谱

1种高特异性的酶连接探针杂交芯片及其在转基因检测中的应用

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中国食品学报 2014年第10期14卷 223-227页

作者：张明哲张晓峰陈笑梅陈曦吴姗陈吴健浙江省检验检疫科学技术研究院杭州310016

酶连接探针杂交芯片是1种基于连接酶催化的探针杂交芯片技术,其原理是采用硫代引物保护法,利用lambda DNA外切酶将多重PCR产物切割成单链。在氨基修饰的芯片上固定5′-端探针,并与制备的产物单链进行杂交,加入荧光修饰的第2个探针与之... 详细信息

酶连接探针杂交芯片是1种基于连接酶催化的探针杂交芯片技术,其原理是采用硫代引物保护法,利用lambda DNA外切酶将多重PCR产物切割成单链。在氨基修饰的芯片上固定5′-端探针,并与制备的产物单链进行杂交,加入荧光修饰的第2个探针与之前的探针进行酶连接反应,从而实现高度特异性、高通量检测。特异性和灵敏度试验表明,酶连接探针杂交芯片能有效消除假阳性信号,转基因检测的灵敏度达到0.1%,可应用于进出口检验检疫、食品安全监测等领域。

关键词：酶连接探针杂交芯片转基因检测品系鉴定

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非农就业对农业技术效率的影响研究——基于中国粮食主产区的实证证据

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农业技术经济 2025年

作者：郁文静方露王耀璟卫龙宝宁波大学科学技术学院浙江大学新农村发展研究院北京大学经济学院浙江大学公共管理学院中国农村发展研究院

基于粮食安全战略和劳动力非农化的现实背景,本研究从劳动者和劳动资料优化组合的视角,探究了劳动力非农化与农业技术效率发展的相关性。研究发现,非农就业常态化不会对粮食安全造成威胁,且会促进农业技术效率的发展。机制分析表明,非... 详细信息

基于粮食安全战略和劳动力非农化的现实背景,本研究从劳动者和劳动资料优化组合的视角,探究了劳动力非农化与农业技术效率发展的相关性。研究发现,非农就业常态化不会对粮食安全造成威胁,且会促进农业技术效率的发展。机制分析表明,非农化可带动要素配置的优化和生产方式的跃升。一方面,加快农地资源向具有生产优势的农户转移,可促进资源的优化配置;另一方面,刺激农户的生产性设备投资,可提升作业的机械化水平。此外,劳动力非农化对农业技术效率的提升作用在具有规模经营优势的北方地区更为显著。本文为解释农户的种粮韧性和粮食安全的可持续性提供了新视角,也为鼓励非农化转型和推动农业技术效率提升的政策提供了新证据。

关键词：非农化粮食安全农业技术效率粮食主产区