检索结果-南通市图书馆

同方期刊数据库

金刚烷胺抗人呼吸道合胞病毒感染的体内外研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国抗生素杂志 2025年

作者：陈芳张勇沈胡艳张平平林思宇侯长周张淋牟荣罗语思张科贵州医科大学基础医学院贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室/病毒研究所/现代病原生物学特色重点实验室/人体寄生虫学教研室贵州中医药大学药学院贵州医科大学附属医院急诊ICU 贵州医科大学附属医院六盘水医院急诊科

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HE... 详细信息

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HEp-2细胞上清，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验和免疫荧光实验评估金刚烷胺的体外抗病毒活性。将Balb/c小鼠分为Mock组、GZ08-18攻毒组、GZ08-18攻毒加10 mg/kg金刚烷胺治疗组、GZ08-18攻毒加20 mg/kg金刚烷胺治疗组和GZ08-18攻毒加50 mg/kg利巴韦林治疗组。通过小鼠体重变化、存活情况、肺指数、肺泡灌洗液病毒滴度、肺切片免疫荧光、肺组织病理损伤和炎症因子变化等评估金刚烷胺的体内抗病毒活性。结果体外实验qRT-PCR和免疫荧光结果显示不同浓度金刚烷胺处理后，病毒滴度与病毒融合蛋白表达均显著下降，且具量效依赖性。体内实验结果示，与GZ08-18攻毒组相比，金刚烷胺治疗后小鼠体重下降减缓，存活率显著提高，肺指数和病毒滴度在20 mg/kg金刚烷胺治疗组显著降低，肺组织切片病毒融合蛋白免疫荧光强度明显降低，相关炎症因子表达水平显著下调。肺组织病理切片的H&E染色结果示金刚烷胺明显抑制小鼠肺组织损伤。结论金刚烷胺在体内外均可显著抑制RSV感染。

关键词：人呼吸道合胞病毒金刚烷胺抗病毒离子通道

白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1促进Raw264.7细胞免疫应答及DENV-2的复制

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国热带医学 2025年

作者：旷晓元肖秋秋吴文诗牟小会吴家红贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室贵州省安顺市人民医院生殖医学科

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞（Raw264.7）的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒（Denguevirustype2，DENV-2）复制的影响。方法将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入到大肠埃希菌（***）BL21（DE3）... 详细信息

目的探讨白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34kDa-1对巨噬细胞（Raw264.7）的免疫调控作用及对Raw264.7细胞中2型登革病毒（Denguevirustype2，DENV-2）复制的影响。方法将原核表达质粒pET32a(+)-rAlb-34kDa-1转入到大肠埃希菌（***）BL21（DE3）后，按实验室前期建立的表达纯化条件获取唾液蛋白并通过SDS-PAGE及WesternBlot（WB）方法鉴定；以CCK8法分析rAlb-34kDa-1蛋白对Raw264.7细胞的毒性。将0.02 、0.20和2.0μg/mL浓度rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞6、12和24 h，采用实时荧光定量逆转录PCR（Real-timequantitativereversetranscriptionPCR，qRT-PCR）检测细胞中白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α(Tumornecrosisfactor-α，TNF-α)、趋化因子配体2（Chemokineligand2，CCL2）、干扰素-β（Interferon-β，IFN-β）、干扰素刺激基因15（InterferonStimulatedGene15，ISG15）的表达，运用酶联免疫吸附实验（Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）检测细胞培养上清IL-6和TNF-α的分泌；免疫荧光法观察rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞后p65进入细胞核的情况，分析rAlb-34kDa-1蛋白是否通过NF-κB信号通路实现对Raw264.7细胞的免疫调控；按分组（DENV-2作用组、唾液蛋白+DENV-2共孵育组）加不同的处理因素作用6、12和24 h后收集细胞，利用qRT-PCR检测细胞内DENV-2的mRNA表达量及运用流式细胞术（FCM）检测不同处理因素作用24h细胞内J2（dsRNA）的荧光强度。结果 SDS-PAGE及WB结果显示成功获得rAlb-34kDa-1蛋白且经CCK8法分析该蛋白对Raw264.7细胞无毒性；0.2μg/mL和2.0μg/mL的rAlb-34kDa-1均能诱导Raw264.7细胞中IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL2、IFN-β、ISG15的表达；rAlb-34kDa-1作用Raw264.7细胞1 h后显著增强Raw264.7细胞核内的p65的荧光强度；rAlb-34kDa-1与DENV-2作用于Raw264.7细胞12 h时，2 μg/mL的rAlb-34kDa-1显著增强细胞中DENV-2的mRNA表达量。作用24 h时，0.02μg/mL、0.2μg/mL、2μg/mL的rAlb-34kDa-1均能增强Raw264.7细胞中DENV-2的mRNA表达量，2μg/mL的rAlb-34kDa-1与DENV-2共孵育于Raw264.7细胞24h后细胞内J2的荧光信号显著增强；结论 rAlb-34kDa-1蛋白能调节小鼠Raw264.7细胞免疫应答，促进DENV-2在Raw264.7细胞中复制。

关键词：白纹伊蚊 rAlb-34kDa-1蛋白 2型登革病毒免疫调控

病原微生物宏基因组测序生物信息分析及报告质量控制专家共识

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中华检验医学杂志 2025年第1期48卷 28-37页

作者：中华医学会检验医学分会李莉王成彬王传新陈崴李少川韩东升不详上海交通大学医学院附属第一人民医院检验医学中心解放军总医院第一医学中心检验科山东大学第二医院检验医学中心西安交通大学医学院第一附属医院检验科广州市瑞因生命科学研究院浙江大学医学院附属第一医院检验科

病原微生物宏基因组测序(mNGS)对临床感染性疾病的诊断和治疗具有重要作用。近年,国内外多项关于mNGS技术标准化与临床实施的专家共识从不同的角度对该技术的临床实践起到了规范作用。但复杂的生物信息分析和非标准化的报告审核依然是m... 详细信息

病原微生物宏基因组测序(mNGS)对临床感染性疾病的诊断和治疗具有重要作用。近年,国内外多项关于mNGS技术标准化与临床实施的专家共识从不同的角度对该技术的临床实践起到了规范作用。但复杂的生物信息分析和非标准化的报告审核依然是mNGS在向临床转化过程中面临的重要挑战。为提高测序后生物信息分析方法的规范和质量以及报告的临床可靠性和诊断价值,中华医学会检验医学分会组织相关专家在系统性复习文献的基础上,结合临床实践需求,通过德尔菲专家函询及专家论证会,最终形成《病原微生物宏基因组测序生物信息分析及报告质量控制中国专家共识》(以下简称《共识》)。共识规定了临床疑似感染标本宏基因组测序后病原微生物生物信息分析的内容、方法和结果报告的规则与要求,为临床实验室规范使用该方法检测临床感染性病原微生物提供支持。

关键词：病原微生物宏基因组高通量测序质量控制生物信息

不同血清群问号钩端螺旋体mce基因序列分析及表达模式的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江大学学报（医学版） 2008年第6期37卷 564-571页

作者：张磊薛峰严杰毛亚飞李立伟浙江大学医学院病原生物学系浙江杭州310058 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室基础医学微生物学研究室浙江杭州310003

目的:确定问号钩端螺旋体(简称钩体)株携带侵袭相关mce基因情况,原核表达mce基因并制备其抗血清,了解问号钩体感染细胞前后mce基因转录水平的变化。方法:采用PCR扩增13株问号钩体和1株双曲钩体全长mce基因片段,T-A克隆后测序。采用基因... 详细信息

目的:确定问号钩端螺旋体(简称钩体)株携带侵袭相关mce基因情况,原核表达mce基因并制备其抗血清,了解问号钩体感染细胞前后mce基因转录水平的变化。方法:采用PCR扩增13株问号钩体和1株双曲钩体全长mce基因片段,T-A克隆后测序。采用基因工程技术构建mce基因原核表达系统,SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图象分析系统检查目的重组蛋白rMce表达情况,采用Western Blot对表达的rMce进行鉴定。采用皮内免疫法制备兔抗rMce血清,免疫双扩散试验测定其效价。采用实时荧光定量RT-PCR,检测问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染J774A.1细胞前后mce基因转录水平的变化。结果:我国13株问号钩体株均携带mce基因,双曲钩体三宝垄群patoc型Patoc株则否。与报道的序列(GenBank accession No.:NP_712236)比较,所克隆的mce基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.02%～100%和97.91%～100%。所构建的mce基因原核表达系统能表达rMce,其产量为细菌总蛋白的5%。问号钩体56601株全菌抗血清能有效识别rMce。问号钩体56601株感染细胞后mce基因转录水平明显上调。结论:mce基因仅存在于致病性的问号钩体中,且其转录水平呈细胞接触上调模式,表明该基因与问号钩体致病性密切相关。mce基因产物是序列保守的外膜蛋白。所构建的mce基因原核表达系统及所制备的rMce抗血清为深入研究该基因功能提供了有效的手段。

关键词：钩端螺旋体,问号基因表达序列分析,DNA mce基因克隆/表达实时荧光定量RT—PCR

问号钩端螺旋体属特异性外膜蛋白LipL41抗原表位预测及免疫学鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江大学学报（医学版） 2008年第6期37卷 585-591,621页

作者：姜久昆林旭瑷严杰薛峰浙江大学医学院病原生物学系浙江杭州310058 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室基础医学微生物学研究室浙江杭州310003

目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别。方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位。采用PCR扩增... 详细信息

目的:预测及筛选问号钩端螺旋体(简称钩体)属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞(T/B)联合表位,了解不同基因型LipL41s差异T/B联合表位的免疫反应性差别。方法:采用生物信息学方法预测LipL41/1和LipL41/2分子中T/B联合表位。采用PCR扩增候选T/B联合表位片段,采用噬菌体展示及SDS-PAGE等技术获得含不同T/B联合表位的重组P。分别以rLipL41/1和rLipL41/2抗血清、黄疸出血群赖型赖株全菌抗血清和钩体患者血清为一抗,采用Western Blot检测各抗血清与各重组P免疫杂交反应性。结果:根据预测结果选择了LipL41s中8个共有或差异T/B联合表位。经PCR扩增获得了上述T/B联合表位片段。各T/B联合表位片段均准确插入噬菌体P蛋白N端并有效表达。各抗血清均能识别上述8个T/B联合表位,但其WesternBlot杂交信号强度存在差异,其中共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233与不同抗血清的信号较强且稳定。结论:所选择的8个T/B联合表位均为LipL41的有效抗原表位。共有T/B联合表位LipL41/1-30和LipL41/1-233可作为钩体MAP疫苗的首选抗原表位。差异T/B联合表位LipL41s-89和LipL41s-299与不同抗血清有免疫交叉现象。

关键词：钩端螺旋体,问号/免疫学细菌外膜蛋白质类/生物合成细菌外膜蛋白质类/分离外膜脂蛋白/属特异性抗原 LipL41/1/LipL41/2 抗原表位/预测噬菌体展示免疫学鉴定

问号钩端螺旋体诱导J774A．1细胞凋亡及caspase-3、-6活化对凋亡的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江大学学报（医学版） 2008年第6期37卷 558-563页

作者：金丹丹董海艳严杰李立伟毛亚飞浙江大学医学院病原生物学系浙江杭州310058 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室基础医学微生物学研究室浙江杭州310003

目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋... 详细信息

目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况。分别采用荧光比色法和WesternBlot,检测感染细胞caspase-3、-6活性及其底物(PARA和LaminA/C)剪切情况。结果:多种不同浓度的问号钩体赖株感染均可使J774A.1细胞发生凋亡,其中以问号钩体∶细胞=100∶1的比例感染时凋亡率最高(48.81%±5.95%)。感染细胞caspase-3和-6最大活性分别为(1453.41±36.07)FU和(618.65±39.82)FU,是未感染细胞的16.38和9.98倍。感染细胞的PARP和Lamin A/C均被剪切。Caspase-3、-6抑制剂对问号钩体赖株诱导的J774A.1细胞凋亡有明显的阻断作用。结论:问号钩体可诱导J774A.1细胞凋亡,caspase-3和-6与该细胞凋亡密切相关。

关键词：半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶酶/代谢钩端螺旋体,问号/致病力流式细胞术细胞凋亡信号传导/caspase

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

慢加急性肝衰竭:定义、诊断与发病机制

中华肝脏病杂志 2022年第2期30卷 121-126页

作者：李佳琪李君浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003

慢加急性肝衰竭(ACLF)是一种在慢性肝病基础上出现的急性肝功能恶化,伴随肝脏和肝外器官衰竭的高病死率复杂综合征,内科综合治疗的短期病死率高达50%~90%。现对目前常见的ACLF定义和诊断标准、预警预测模型和发病机制等进行总结。

关键词：慢加急性肝衰竭乙型肝炎诊断预后发病机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

慢加急性肝衰竭诊断标准东西方差异再认识

临床肝胆病杂志 2019年第9期35卷 1903-1908页

作者：杨玲玲李君浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

慢加急性肝衰竭(ACLF)是危及全球公共健康的重大疾病,内科综合治疗病死率高达50%~90%,早期诊断和治疗对降低ACLF病死率至关重要。由于东西方国家ACLF主要病因不同,至今仍无统一的ACLF定义与诊断标准,有无肝硬化疾病基础是ACLF诊断标准... 详细信息

慢加急性肝衰竭(ACLF)是危及全球公共健康的重大疾病,内科综合治疗病死率高达50%~90%,早期诊断和治疗对降低ACLF病死率至关重要。由于东西方国家ACLF主要病因不同,至今仍无统一的ACLF定义与诊断标准,有无肝硬化疾病基础是ACLF诊断标准的争议焦点。综述了近年来有关ACLF定义与诊断标准、诱因及发病机制的最新研究结果,为制订新的治疗策略和国际指南提供理论依据。

关键词：慢加急性肝功能衰竭乙型肝炎肝硬化诊断亚洲欧洲美洲

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

JC病毒在肾移植受者中的感染状况

中华微生物学和免疫学杂志 2010年第7期30卷 670-673页

作者：胡建华赵宏张旋高海女杨美芳马亚丹李敏环黄雅萍范骏马伟杭浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003

目的探究多瘤JC病毒（JC virus,JCV）在肾移植受者中的感染情况及其感染对移植肾功能的影响,并初步探索JCV感染的影响因素.方法采用巢式PCR方法检测49例肾移植病人术后尿液标本中的JCV DNA,并以24例健康体检者为对照;定性PCR方法检测... 详细信息

目的探究多瘤JC病毒（JC virus,JCV）在肾移植受者中的感染情况及其感染对移植肾功能的影响,并初步探索JCV感染的影响因素.方法采用巢式PCR方法检测49例肾移植病人术后尿液标本中的JCV DNA,并以24例健康体检者为对照;定性PCR方法检测病人尿液标本中的巨细胞病毒（cytomegalovirus,CMV）DNA;Binary Logistic回归方法分析JCV感染的可能影响因素：病人的年龄、性别、免疫抑制方案、CMV感染;以肾小球滤过率（glomerular filtration rate,GFR）作为肾功能的指标,t检验方法比较JCV感染和非感染者GFR有无差别.结果 JCV在肾移植病人中的感染率为42.9%,健康体检者为4.2%.移植后CMV感染和强的松＋MMF＋环孢素三联免疫抑制方案是JCV感染的危险因素（OR=10.101,P=0.049;OR=6.286,P=0.008）.JCV感染者和非感染者的GFR分别为86.470±29.990和84.060±33.729,两者间的差异无统计学意义（t=0.259,P=0.797）.结论 JCV在肾移植病人中有很高的感染率,CMV感染和使用强的松＋MMF＋环孢素三联免疫抑制方案可明显增加JCV感染的危险性;JCV感染对移植肾功能无影响.

关键词： Jc病毒移植尿液感染