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原代成骨细胞来源胞外囊泡促进破骨细胞分化

浙江大学学报（医学版） 2024年第4期53卷 434-442页

作者：张岚谭静怡浙江医院口腔科浙江杭州310030 浙江大学医学院附属第二医院口腔内科浙江杭州310009

目的:观察原代成骨细胞来源胞外囊泡(OB-EV)对破骨细胞增殖、分化的作用,探究胞外囊泡参与成骨细胞和破骨细胞之间通信的可能分子机制。方法:采用酶消化法分离原代成骨细胞,并以β-甘油磷酸钠、抗坏血酸、地塞米松成骨诱导液诱导培养,... 详细信息

目的:观察原代成骨细胞来源胞外囊泡(OB-EV)对破骨细胞增殖、分化的作用,探究胞外囊泡参与成骨细胞和破骨细胞之间通信的可能分子机制。方法:采用酶消化法分离原代成骨细胞,并以β-甘油磷酸钠、抗坏血酸、地塞米松成骨诱导液诱导培养,通过碱性磷酸酶染色及茜素红S染色鉴定成骨细胞分化及矿化功能。收集成骨细胞培养上清液,采用超速离心法提取囊泡分泌物,并通过透射电镜观察囊泡形态,蛋白质印迹法鉴定胞外囊泡表面特征性标志物肿瘤易感基因101(TSG101)、ALG-2相互作用蛋白X(Alix)和分化抗原9(CD9)。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测OB-EV对RAW264.7的增殖作用。进一步通过蛋白质印迹法检测OB-EV与核因子κB受体活化因子配体(RANKL)联合作用后RAW264.7破骨分化标志物的表达水平。将OB-EV处理的小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察并比较破骨细胞数,明确OB-EV对破骨细胞分化的影响。结果:透射电镜观察提取的OB-EV呈直径为30~150 nm的双层杯状结构,且TSG101、Alix、CD9呈阳性表达。CCK-8实验结果显示高浓度(20μg/mL以上)OB-EV抑制RAW264.7增殖(P<0.05)。蛋白质印迹法检测发现RAW264.7中c-Fos、活化T细胞核因子(NFATc1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)等破骨细胞分化标志蛋白表达明显增加,且随OB-EV浓度增加而增加(P<0.05)。此外,将OB-EV与RANKL联合作用于BMM,结果显示TRAP阳性细胞较RANKL对照组显著增多(P<0.05)。结论:OB-EV可促进破骨前体细胞向破骨细胞分化,但高浓度OB-EV会抑制细胞增殖。

关键词：成骨细胞胞外囊泡破骨细胞分化小鼠

脊柱转移瘤分离术后发生胸腔积液的危险因素分析

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中华骨科杂志 2024年第3期44卷 169-176页

作者：王柯懿曲昊王文姚招浓周晓维姚玉红李恒元林鹏李秀茅严晓波柳萌黄鑫林秾叶招明浙江大学医学院附属第二医院骨科

目的探讨脊柱转移瘤分离术后胸腔积液的危险因素。方法回顾性分析2014年1月至2022年1月于浙江大学医学院附属第二医院骨肿瘤科就诊的脊柱转移瘤患者427例, 男252例、女175例, 年龄(59±12)岁(范围15～87岁)。所有患者均接受脊柱转移瘤... 详细信息

目的探讨脊柱转移瘤分离术后胸腔积液的危险因素。方法回顾性分析2014年1月至2022年1月于浙江大学医学院附属第二医院骨肿瘤科就诊的脊柱转移瘤患者427例, 男252例、女175例, 年龄(59±12)岁(范围15～87岁)。所有患者均接受脊柱转移瘤分离手术。基于术后1个月内的胸部CT, 采用重建软件个性化测量胸腔积液量。将胸腔积液在0～500 ml定义为少量、500～1 000 ml为中等量、1 000 ml以上定义为大量。比较各组患者的基线资料和围手术期临床结果, 将差异有统计学意义的指标纳入二分类logistic回归分析, 确定脊柱转移瘤分离术后发生胸腔积液的独立危险因素。绘制受试者工作特性曲线, 计算各独立危险因素的曲线下面积。结果所有患者均顺利完成手术。427例患者中大量胸腔积液35例、中等量胸腔积液42例、少量胸腔积液350例。大量胸腔积液组与少量及中等量胸腔积液组的肿瘤占位(χ2=9.485, P=0.013)、术中失血量(Z=-2.503, P=0.011)、输血量(Z=-2.983, P=0.003)、术前总蛋白(Z=2.681, P=0.007)、术前白蛋白(Z=1.720, P=0.085)、术后血红蛋白(t=2.950, P=0.008)、术后总蛋白(Z=4.192, P二者联合预测具有更好的预测效能。

关键词：脊柱肿瘤转移外科手术危险因素

托法替布通过JAK/STAT3通路抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化

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北京大学学报（医学版） 2024年第3期56卷 505-511页

作者：何珊陈炘程琦朱灵江张培玉童淑婷薛静杜燕浙江大学医学院附属第二医院风湿免疫科杭州310009 浙江大学医学院附属金华医院风湿免疫科浙江金华321000

目的:研究泛Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂托法替布(tofacitinib)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的作用及机制,为临床治疗结缔组织病相关的间质性肺疾病提... 详细信息

目的:研究泛Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂托法替布(tofacitinib)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的作用及机制,为临床治疗结缔组织病相关的间质性肺疾病提供理论依据。方法:(1)体外培养人胚胎肺成纤维细胞(human fetal lung fibroblast 1,HFL-1),设立6个组,分别为DMSO空白对照组、TGF-β1诱导组、TGF-β1联合不同浓度托法替布(0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L)药物干预实验组。采用CCK-8法检测细胞活力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力。(2)采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)、蛋白免疫印迹实验(Western blotting)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL1)基因及蛋白的表达水平。应用RT-PCR和酶联免疫吸附试验检测各组白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的基因和细胞培养上清液中的蛋白水平。(3)在不同组的细胞培养基中加入DMSO载体对照,以1.0μmol/L和5.0μmol/L的托法替布预培养30 min,然后加入TGF-β1处理1 h、6 h和24 h。以Western blotting检测Smad2/3、信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白磷酸化水平。结果:(1)托法替布抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞活力及迁移能力。(2)与空白对照组相比,TGF-β1诱导组HFL-1的α-SMA、COL1A1和FN1基因表达显著上调(P<0.05)。5.0μmol/L托法替布干预组的α-SMA基因表达与TGF-β1诱导组相比显著下调(P<0.05)。0.5~5.0μmol/L托法替布各干预组与TGF-β1诱导组相比均可抑制FN1基因表达(P<0.05)。各干预组与TGF-β1诱导组相比,COL1A1基因的表达无明显变化。(3)Western blotting结果提示,TGF-β1诱导组细胞α-SMA、FN1蛋白水平较对照组显著增加(P<0.05),COL1A1表达未见明显差异。托法替布不同浓度干预组与TGF-β1诱导组相比,α-SMA蛋白表达均有下降,其中2.0μmol/L和5.0μmol/L干预组与诱导组间的差异有统计学意义(P<0.05)。托法替布不同浓度干预组的FN1蛋白水平均有下降,但与TGF-β1诱导组相比差异无统计学意义。各干预组的COL1A1蛋白表达与TGF-β1诱导组相比差异无统计学意义。(4)TGF-β1诱导48 h,HFL-1细胞中IL-6基因及培养上清液中IL-6的表达水平较对照组显著升高,各浓度托法替布干预组与TGF-β1诱导组相比均有所降低。TGF-β1诱导1 h、6 h和24 h,STAT3蛋白磷酸化水平增加,托法替布预刺激抑制了6 h时Smad2/3的磷酸化水平,在1 h、6 h和24 h时均抑制了STAT3的磷酸化水平。结论:托法替布能抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞向肌成纤维细胞方向转化,其机制可能是通过抑制Smad2/3经典通路以及抑制TGF-β1所诱导的STAT3磷酸化,从而对肺纤维化疾病进展发挥保护作用。

关键词：托法替布肺纤维化成纤维细胞肌成纤维细胞 STAT3转录因子

数字化技术在酸蚀症伴重度磨耗患者功能美学缺陷修复中的应用1例

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华西口腔医学杂志 2024年第1期42卷 111-120页

作者：侯玮玮郑绪红陈晓玲蔡蔚靓王朝阳苏智伟赵鹃浙江大学医学院附属口腔医院口腔修复科·浙江大学口腔医学院·浙江省口腔疾病临床医学研究中心·浙江省口腔生物医学研究重点实验室·浙江大学癌症研究院·口腔生物材料与器械浙江省工程研究中心杭州310000 浙江大学医学院附属口腔医院口腔工艺科·浙江大学口腔医学院杭州310000 浙江大学医学院附属口腔医院数字化中心·浙江大学口腔医学院杭州310000

牙磨耗、磨损、酸蚀症等多因素导致的非龋性牙体缺损在口腔临床中的发病率呈上升趋势,通常伴随着不同程度的口腔美学缺陷及功能障碍。对其进行全牙列固定修复咬合重建时,不仅要恢复牙列的形态和美观,更要实现咬合关系与整体口颌系统的... 详细信息

牙磨耗、磨损、酸蚀症等多因素导致的非龋性牙体缺损在口腔临床中的发病率呈上升趋势,通常伴随着不同程度的口腔美学缺陷及功能障碍。对其进行全牙列固定修复咬合重建时,不仅要恢复牙列的形态和美观,更要实现咬合关系与整体口颌系统的协调。本文报道1例酸蚀症伴重度磨耗的病例,利用多模态数字化数据(口内扫描、面部扫描、电子面弓、下颌运动轨迹描记等)构建4D虚拟患者,制定全面的修复方案,进行不同牙齿的个性化微创修复,采用唇贴面、颊贴面、贴面、高嵌体、嵌体、全冠等多种修复体,完成数字化全牙列咬合重建治疗,为该疾病的诊治提供可视化、可全程质控的全局观诊疗策略。

关键词：数字化技术酸蚀症磨牙症咬合重建

不同代谢分期下重症烧伤患者静息能量消耗值的计算公式选择与分析

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第7期40卷 634-642页

作者：邹文韩春茂金荣华沈涛浙江大学医学院附属第二医院烧伤与创面修复科杭州310009

目的探究不同代谢分期下重症烧伤患者静息能量消耗(REE)值的变化及其最佳计算公式的选择。方法该研究为回顾性观察性研究。2020年4月—2023年12月,浙江大学医学院附属第二医院收治40例符合入选标准的重症烧伤患者,其中男32例、女8例,年... 详细信息

目的探究不同代谢分期下重症烧伤患者静息能量消耗(REE)值的变化及其最佳计算公式的选择。方法该研究为回顾性观察性研究。2020年4月—2023年12月,浙江大学医学院附属第二医院收治40例符合入选标准的重症烧伤患者,其中男32例、女8例,年龄(54±17)岁。入院后,对患者实施镇静镇痛、清创、植皮等临床常规治疗。于伤后3、5、7、9、11、14 d及此后每7天,对符合测量条件的患者采用间接测热法测量REE值(即REE测量值),直到患者康复或死亡。在测量患者REE的当日,分别采用Milner公式、Hangang公式、第三军医大学公式、Carlson公式、彭曦团队线性公式计算REE值(即REE公式计算值)。统计测量患者REE的伤后时间,并对患者在急性抑制期、代谢高涨期、代谢平衡期、代谢重塑期的临床特征进行比较。统计患者在4个不同代谢分期下REE测量值以及其与REE公式计算值的差值的变化。相对于REE测量值,计算REE公式计算值的10%准确率及20%准确率以评估其准确性,计算REE公式计算值的绝对百分比误差(APE)以评估其偏离情况,筛选4个不同代谢分期中最接近REE测量值的代谢公式(即最佳计算公式),进一步地探索影响不同代谢分期下最佳计算公式准确性的关键因子。结果测量重症烧伤患者REE的时间为伤后(40±19)d。在4个不同代谢分期中,患者在代谢重塑期的年龄最大、身高最高、体重最重、体重指数最大、体表总面积最大。患者代谢重塑期的年龄显著大于急性抑制期和代谢高涨期(t值分别为-3.02、-4.20,P值均0.05);除彭曦团队线性公式(P>0.05)外,在不同代谢分期中REE的Milner公式、Hangang公式、第三军医大学公式、Carlson公式计算值分别与REE测量值的差值总体比较,差异均具有统计学意义(H值分别为14.50、27.15、37.26,F=11.80,P大学公式、Carlson公式(t值分别为9.00、-2.10、5.95、6.68,P值均大学公式、Carlson公式、彭曦团队线性公式(t值分别为10.20、10.33、10.65,5.87,P值均大学公式、Carlson公式(t值分别为7.11、8.52、8.60,P值均大学公式计算值最接近REE测量值,且REE的第三军医大学公式计算值的APE显著低于Milner公式、Hangang公式、Carlson公式(t值分别5.12、2.45、6.26,P值均0.05);在代谢高涨期,烧伤总面积是影响Hangang公式计算准确性的关键因子(比值比为1.00,95%置信区间为1.00~1.10,P大学公式计算准确性的关键因子(P>0.05)。结论推荐在急性抑制期使用彭曦团队线性公式、代谢高涨期和代谢平衡期使用Hangang公式、代谢重塑期使用第三军医大学公式对重症烧伤患者REE值进行估算,并且要保障代谢高涨期和代谢平衡期影响最佳计算公式关键因子的准确性。

关键词：烧伤量热法,间接营养支持能量代谢静息能量消耗重症烧伤患者代谢分期

帕金森病脑深部电刺激术后颅内积气对电极位置的影响

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中华神经外科杂志 2024年第7期40卷 702-707页

作者：郑喆蒋鸿杰吴承瀚朱周乐罗巍田均朱君明浙江大学医学院附属第二医院神经外科杭州310009 浙江大学医学院附属第二医院神经内科杭州310009

目的探讨帕金森病脑深部电刺激(DBS)术后颅内积气对电极位置的影响规律。方法回顾性研究2021年5月至2022年10月于浙江大学医学院附属第二医院神经外科行双侧丘脑底核DBS的帕金森病患者的临床资料,共78例。患者均于术后早期(24 h内)和晚... 详细信息

目的探讨帕金森病脑深部电刺激(DBS)术后颅内积气对电极位置的影响规律。方法回顾性研究2021年5月至2022年10月于浙江大学医学院附属第二医院神经外科行双侧丘脑底核DBS的帕金森病患者的临床资料,共78例。患者均于术后早期(24 h内)和晚期(1个月)行头颅螺旋CT薄层扫描,通过图像的融合分析,计算颅内积气的体积、电极偏差(电极实际位置与计划靶点间的偏差值);并于前、后连合(AC-PC)下4 mm的轴位层面上计算术后早期与晚期的坐标差[X代表AC-PC旁开距离(外侧为正,内侧为负);Y代表AC-PC方向(前方为正,后方为负)],评估术后1个月内因颅内积气的吸收导致电极位置的偏移量,并分析颅内积气与坐标差间的相关性。结果78例患者术后早期整体颅内积气体积[M(Q1,Q3)]为1.08(0.22,3.02)cm^(3),其中左、右侧分别为0.24(0.00,0.94)cm^(3)、0.48(0.06,1.62)cm^(3);至术后晚期所有患者的颅内积气均完全吸收。术后早期左、右侧的电极偏差分别为(1.40±0.61)mm、(1.08±0.52)mm,术后晚期分别为(1.30±0.55)mm、(1.19±0.57)mm;术后早期与晚期同侧别比较,电极偏差的差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后早期与晚期比较,电极位置的偏移量,左侧:ΔX=(0.41±0.52)mm,ΔY=1.00(0.70,1.50)mm;右侧:ΔX=(0.43±0.50)mm,ΔY=1.00(0.70,1.30)mm。相关性分析显示,左侧颅内积气与左侧X轴向(r=0.17,P=0.039)和Y轴向电极偏移量(r=0.24,P=0.003)均相关;右侧颅内积气与右侧X轴向电极偏移量(r=0.10,P=0.388)无关,但与Y轴向电极偏移量(r=0.44,P<0.001)相关。结论帕金森病患者DBS术后的颅内积气可能对电极位置产生影响,随着颅内积气的吸收和脑组织的回位,电极位置会向前和向外移位。

关键词：帕金森病深部脑刺激法颅内积气电极偏差

3D打印金属垫块或胫骨假体重建全膝关节置换和翻修术中的巨大骨缺损

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中华骨科杂志 2024年第4期44卷 243-249页

作者：胡鹏飞吴浩波冉季升包家鹏蒋利锋陈炜平赵翔严世贵吴立东浙江大学医学院附属第二医院骨科杭州310009

目的探讨3D打印金属垫块或胫骨假体重建全膝关节置换(total knee arthroplasty,TKA)和膝关节翻修术中巨大骨缺损的临床疗效。方法回顾性分析2018年7月至2023年12月就诊于浙江大学医学院附属第二医院骨科的存在巨大骨缺损的TKA或膝关节... 详细信息

目的探讨3D打印金属垫块或胫骨假体重建全膝关节置换(total knee arthroplasty,TKA)和膝关节翻修术中巨大骨缺损的临床疗效。方法回顾性分析2018年7月至2023年12月就诊于浙江大学医学院附属第二医院骨科的存在巨大骨缺损的TKA或膝关节翻修患者7例(7膝),其中TKA 4例、膝关节翻修术3例。男3例、女4例,年龄(58.7±7.6)岁(范围54~68岁),左膝3例、右膝4例。患者膝关节均存在骨缺损,均为AORIⅢ型,2例仅股骨存在骨缺损,4例仅胫骨存在骨缺损,1例胫骨和股骨均存在缺损,采用3D打印个性化重建治疗。比较手术前后的髋膝踝角、美国膝关节协会评分(Keen Society score,KSS),观察术后并发症情况。结果所有患者均顺利完成手术,手术时间为(189.3±35.5)min(范围125~240 min)。复杂TKA 4例,手术时间分别175、195、210、240 min,翻修术3例,手术时间分别125、180、200 min。术中出血量为(114±24.4)ml(范围100~150 ml)。5例使用3D打印金属垫块,2例使用3D打印一体式胫骨部件。所有患者均获得随访,随访时间分别为2、2、5、6、7、20、57个月。术后3个月5例患者的KSS膝评分分别为56、61、66、56、56分,大于术前的35、44、36、27、41分。术后3个月5例患者的KSS功能评分分别为45、45、45、30、45分,大于术前的30、30、15、20、20分。末次随访时髋膝踝角为181.8°±3.4°(范围177.9°~188.0°),术前为175.8°±12.4°(范围153.3°~192.1°),差异无统计学意义(t=-1.230,P=0.242)。末次随访时3D打印部件与骨面结合良好,假体位置稳固,下肢力线均正常。两组术后无一例出现切口愈合不良、感染、脂肪液化、神经损伤、下肢深静脉血栓形成、膝关节僵硬、假体周围感染及松动等并发症。结论采用3D打印金属垫块或胫骨假体重建全膝关节置换和翻修术中巨大骨缺损早期临床疗效满意,可获得比较满意的关节功能,手术安全性较好。

关键词：关节成形术,置换,膝假体失效打印,三维治疗结果

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数字化平台在医学影像学中的应用及展望

中华放射学杂志 2024年第4期58卷 361-364页

作者：林斌余日胜浙江大学医学院附属第二医院放射科杭州310009

随着互联网、云平台和人工智能技术的快速发展,数字医学影像也步入快车道。依托于数字影像,区域影像中心优质资源可以通过远程会诊、培训等形式,实现共建共享,从而改善区域影像质控和安全管理,弥补医学影像医疗资源在城市与县域之间的... 详细信息

随着互联网、云平台和人工智能技术的快速发展,数字医学影像也步入快车道。依托于数字影像,区域影像中心优质资源可以通过远程会诊、培训等形式,实现共建共享,从而改善区域影像质控和安全管理,弥补医学影像医疗资源在城市与县域之间的不均衡,为实现优质医疗资源共享贡献力量。

关键词：数字化医学影像远程医疗

遗传性血管性水肿诊治的“院内多学科会诊协作网联动线上线下全程管理”模式的初探

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中华预防医学杂志 2024年第3期58卷 406-413页

作者：姚我吴定钱沈颖沈磊李燕葛柳雅张松照陈炯汪慧英浙江大学医学院附属第二医院变态反应科杭州310009 浙江大学医学院附属第二医院急诊科杭州310009 浙江大学医学院附属第二医院皮肤科杭州310009 浙江大学医学院附属第二医院耳鼻咽喉科杭州310009 浙江大学医学院附属第二医院消化内科杭州310009 浙江大学医学院附属第二医院门诊护理部杭州310009 浙江大学医学院附属第二医院检验科杭州310009 宁波大学农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室宁波315211

遗传性血管性水肿(hereditary angioedema,HAE)是一种常染色体显性遗传的罕见病,患病率约为50 000分之一,以反复发作、不可预测的皮肤或黏膜下水肿为临床特征,累及咽喉部可导致潜在的致命风险。其疾病的罕见性、临床表现的多样性,造成... 详细信息

遗传性血管性水肿(hereditary angioedema,HAE)是一种常染色体显性遗传的罕见病,患病率约为50 000分之一,以反复发作、不可预测的皮肤或黏膜下水肿为临床特征,累及咽喉部可导致潜在的致命风险。其疾病的罕见性、临床表现的多样性,造成医务人员认识不足,导致临床的误诊误治。因此,提高医务人员对HAE的认识非常重要。本院建立以院内多学科会诊(multi-disciplinary treatment,MDT)团队、省内协作网联动、线上线下患者管理和媒体宣教交互的管理模式(“院内MDT协作网联动线上线下全程管理”),通过这种模式的推广,显著提高了浙江省HAE患者的精准诊断,缩短了诊断时间,显著降低了患者的严重喉头水肿发作急救,同时为HAE的临床诊治提供参考。

关键词：遗传性血管性水肿管理模式临床路径 C1酯酶抑制物