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鸭坦布苏病毒单克隆抗体的制备和治疗效果分析

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中国兽医杂志 2024年第2期60卷 27-31页

作者：王丹娜乌兰李三兆丰华生物科技(南京)有限公司北京生物医药科技中心北京大兴102600

为了制备、筛选和评价治疗鸭坦布苏病毒(DTMUV)感染的中和抗体,本试验克隆DTMUV E基因,连接至原核表达载体pET-30a(+),转化至大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态,提取质粒,鉴定重组质粒pET30-E,转化E.coli BL21感受态,经异丙基-β-D-硫代半乳... 详细信息

为了制备、筛选和评价治疗鸭坦布苏病毒(DTMUV)感染的中和抗体,本试验克隆DTMUV E基因,连接至原核表达载体pET-30a(+),转化至大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态,提取质粒,鉴定重组质粒pET30-E,转化E.coli BL21感受态,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析E蛋白表达,使用镍柱亲和层析纯化E蛋白,将E蛋白与弗氏佐剂混合、乳化,免疫6周龄雌性BALB/c小鼠3次后,取小鼠脾脏,分离脾细胞,在聚乙二醇(PEG)的作用下,将脾细胞与SP2/0细胞融合,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)筛选分泌抗E蛋白抗体的杂交瘤细胞株,通过Western blot进行单克隆抗体鉴定,通过间接免疫荧光技术检测DTMUV,病毒中和试验评价单克隆抗体中和DTMUV感染的能力,并评价单克隆抗体治疗DTMUV感染小鼠的能力。结果显示,含质粒pET30-E的E.coli BL21经诱导后可在裂解的沉淀物中表达E蛋白;制备的E蛋白单克隆抗体4A1可以与E蛋白发生免疫反应,不与鸭A型肝炎病毒、呼肠孤病毒、新城疫病毒、细小病毒和H9亚型禽流感病毒发生交叉反应;4A1株杂交瘤细胞株分泌的抗体对DTMUV具有中和活性,且能够很好地识别DTMUV并与之发生中和反应,可完全清除感染小鼠血液中的DTMUV。结果表明,本试验制备的单克隆抗体4A1在应对DTMUV感染方面具有潜在治疗价值。

关键词：鸭坦布苏病毒单克隆抗体中和活性治疗效果

高果糖诱导2型糖尿病机制及中药多糖缓解2型糖尿病的靶点通路研究进展

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中草药 2024年第13期 4598-4607页

作者：张晶玉董墨思郭乃菲韩晓伟田金龙王松杨宇峰石岩辽宁中医药大学沈阳农业大学辽宁晟启昊天生物医药科技有限公司

果糖作为膳食中的主要糖，通常以蔗糖或高果糖玉米糖浆的形式添加到饮食中。流行病学研究表明，过量摄入果糖是2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）的一个风险因素，并且T2DM是在全球范围内流行的疾病。大量研究表明，中药具有... 详细信息

果糖作为膳食中的主要糖，通常以蔗糖或高果糖玉米糖浆的形式添加到饮食中。流行病学研究表明，过量摄入果糖是2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）的一个风险因素，并且T2DM是在全球范围内流行的疾病。大量研究表明，中药具有明显的降糖作用，其生物活性成分主要包含多糖、黄酮、皂苷等。通过阐明高果糖摄入可能影响肝脏胰岛素抵抗和糖代谢导致T2DM的发生，讨论中药多糖改善这2种糖尿病发生机制的靶点和通路，为开发含有中药多糖的降血糖药物和功能性食品提供参考。

关键词：中药多糖高果糖摄入 2型糖尿病胰岛素抵抗糖代谢

基于市场监管的企业财务内控管理制度建设研究

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质量与市场 2024年第4期 35-37页

作者：施春丽杭州圣域生物医药科技有限公司

财务内控管理制度是现代企业管理体系的重要组成部分。规范的财务内控管理制度能够有效防范企业资金被挪用、盗用或滥用,提高企业对资金流向的监控能力。因此,企业必须加强基于市场监管的财务内控管理制度建设,以确保财务内控管理制度... 详细信息

财务内控管理制度是现代企业管理体系的重要组成部分。规范的财务内控管理制度能够有效防范企业资金被挪用、盗用或滥用,提高企业对资金流向的监控能力。因此,企业必须加强基于市场监管的财务内控管理制度建设,以确保财务内控管理制度的执行效果。基于此,本文介绍了财务内控管理制度的建设要点及其对企业发展的重要性,分析了企业财务内控管理制度建设存在的问题,并提出了相应的优化措施,旨在提高企业财务内控制度建设水平。

关键词：市场监管财务内控管理财务风险制度建设

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不同海域野生海参体壁营养成分的比较分析

食品工业科技 2024年第5期45卷 341-348页

作者：王长伟冯晓梅刘楚怡付雪媛杜芬青岛海洋生物医药研究院山东青岛266071 三奇生物医药(山东)有限公司山东日照276800 中国海洋大学医药学院山东青岛266003

探究不同海域野生海参的营养功能成分,为野生海参的综合开发利用提供参考,本文对糙刺参、黄玉参、土耳其米刺参以及冰岛红参等四种海参体壁中基本营养成分、氨基酸组成、脂肪酸组成、矿物质含量等进行检测、分析和评价。结果表明,四种... 详细信息

探究不同海域野生海参的营养功能成分,为野生海参的综合开发利用提供参考,本文对糙刺参、黄玉参、土耳其米刺参以及冰岛红参等四种海参体壁中基本营养成分、氨基酸组成、脂肪酸组成、矿物质含量等进行检测、分析和评价。结果表明,四种海参的共同点为高蛋白、低脂肪。其中,土耳其米刺参蛋白含量最高,脂肪含量最低;黄玉参的海参多糖和灰分含量均最高;冰岛红参的海参皂苷含量最高。四种海参均含有17种氨基酸,且鲜味氨基酸与药效氨基酸含量丰富;必需氨基酸含量占比13.78%~20.27%,其中冰岛红参的必需氨基酸含量最高。根据氨基酸评分(AAS)和化学评分(CS),四种海参的第一限制性氨基酸均为赖氨酸。四种海参的SFA占总脂肪酸的质量分数在23.84%~36.24%之间,均以棕榈酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)为主;不饱和脂肪酸占比在56.39%~72.93%之间,其中冰岛红参含量最高。在四种海参的常量元素中,除土耳其米刺参以外,其余三种海参均以钙元素含量最高,微量元素中,含量最高的均是铁元素。通过比较分析表明:不同海域野生海参富含人体需要的多种营养,具有不同的食用价值和开发利用前景。

关键词：海参营养成分氨基酸脂肪酸矿物质不同海域

青钱柳降糖降尿酸活性部位色谱指纹图谱研究及主成分含量测定

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分析测试学报 2024年第7期43卷 955-962页

作者：杨杰董佳萍张露王委陈延春傅青金郁华东理工大学药学院上海200237 泰州医药城国科化物生物医药科技有限公司江苏泰州225300

该文开展了青钱柳降糖降尿酸活性部位的含量测定和指纹图谱研究,评价了不同产地青钱柳药材的质量。在活性筛选的指导下优化提取条件,以30%乙醇水溶液为提取溶剂,料液比1∶10,超声提取1 h可有效提取活性部位。采用高效液相色谱法测定绿... 详细信息

该文开展了青钱柳降糖降尿酸活性部位的含量测定和指纹图谱研究,评价了不同产地青钱柳药材的质量。在活性筛选的指导下优化提取条件,以30%乙醇水溶液为提取溶剂,料液比1∶10,超声提取1 h可有效提取活性部位。采用高效液相色谱法测定绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、槲皮苷、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸C和阿福豆苷的含量,从各成分含量随着产地的波动情况比较青钱柳药材的质量,其中江西药材S1的成分含量较低,与其它产地药材差异较大。同时建立了青钱柳活性部位的指纹图谱,10批药材的相似度均大于0.9,主成分分析(PCA)表明,江西药材S1、湖南药材S6和S8质量差异较大。10个产地药材的α-糖苷酶和黄嘌呤氧化酶活性抑制实验表明,湖南药材S5的降糖和降尿酸活性最佳,而江西药材S1表现较差,与质量评价结果基本一致。所建方法可为青钱柳的质量控制和质量标准建立提供科学依据。

关键词：青钱柳高效液相色谱(HPLC) 指纹图谱含量测定降糖降尿酸

股权融资对企业创新能力的影响及发展策略研究

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投资与合作 2024年第6期 13-15页

作者：李恩上海美分生物医药科技有限公司

在企业现代化发展的进程中，股权融资是重要的工作模块，其在提高企业创新能力方面发挥的作用较为突出。基于此，文章阐述了股权融资对企业创新能力的影响，提出了股权融资下提高企业创新能力的方法，包括融入创新思维、利用股权集中的... 详细信息

在企业现代化发展的进程中，股权融资是重要的工作模块，其在提高企业创新能力方面发挥的作用较为突出。基于此，文章阐述了股权融资对企业创新能力的影响，提出了股权融资下提高企业创新能力的方法，包括融入创新思维、利用股权集中的优势、发挥杠杆效应、兼顾市场定位、加强风险管理、健全信息披露制度、深入推进产学研合作、建设企业文化等。

关键词：股权融资企业创新能力杠杆效应

肠道菌群联合血清肿瘤相关物质在鉴别诊断近端结肠癌中的应用

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中华检验医学杂志 2024年第4期47卷 444-450页

作者：黄天臣韩晓东张勇李衎郭志朋李磊武亚超王雁军白东晓肖建安赵江曼周福有李维丽安阳市肿瘤医院普外科安阳455000 上海宝藤生物医药科技股份有限公司上海201204

目的探索不同部位结直肠癌肠道菌群的差异以及特征菌联合肿瘤标志物在近端结肠癌中的鉴别效能。方法病例对照研究。选取2019年5月至2022年7月在安阳市肿瘤医院普外科确诊的结直肠癌(CRC)85例和结直肠腺瘤(CRA)患者8例,根据原发部位CRC... 详细信息

目的探索不同部位结直肠癌肠道菌群的差异以及特征菌联合肿瘤标志物在近端结肠癌中的鉴别效能。方法病例对照研究。选取2019年5月至2022年7月在安阳市肿瘤医院普外科确诊的结直肠癌(CRC)85例和结直肠腺瘤(CRA)患者8例,根据原发部位CRC又分为近端结肠癌组(PC)22例、远端结肠癌组(DC)15例和直肠癌组(RC)48例。肠道准备前采集患者血液和粪便样本分别进行肿瘤标志物检测和16S rDNA基因测序。采用SPSS(27.0.1)软件进行单因素方差分析、Mann-WhitneyU检验、Kruskal-WallisH检验或χ^(2)检验比较组间差异,并利用SPSS对肿瘤标志物、特征菌分别进行单独和联合绘制鉴别PC的受试者工作特征(ROC)曲线。结果PC组、DC组、RC组和CRA组进行组间比较,糖类抗原125(CA125)、CA72-4以及血清肿瘤相关物质(TAM)差异有统计学意义(F=3.543,P<0.05;F=3.596,P<0.05;F=5.787,P<0.01)。其中PC组的CA125水平和CA72-4水平高于RC组[PC组比RC组,(36.84±6.30)kU/L比(12.73±4.21)kU/L,P<0.01;PC组比RC组,(45.56±10.86)kU/L比(3.30±7.63)kU/L,P<0.01],PC组的TAM水平高于RC组和CRA组[PC组比RC组,(124.84±5.19)U/ml比(102.44±3.63)U/ml,P<0.001;PC组比CRA组,(124.84±5.19)U/ml比(95.39±8.42)U/ml,P<0.01]。LEfSe分析显示PC组的特征菌包括拟杆菌科、奈瑟菌科、梭菌科和螺旋体科等。TAM联合拟杆菌科鉴别诊断PC的曲线下面积最大,为0.845(95%CI 0.747~0.944),敏感度为0.857,特异度为0.815。结论不同部位CRC以及CRA间的肠道菌群组成具有异质性,肠道菌群联合肿瘤标志物在区分近端结肠癌中具有良好的鉴别效能。

关键词：结直肠肿瘤肠道菌群敏感性与特异性肿瘤标记生物学

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人毛囊真皮鞘细胞移植治疗兔跟腱炎实验研究

陕西医学杂志 2024年第5期53卷 583-588页

作者：许青孙香香陈锦阳庄盼刘军权陆军第七十一集团军医院检验科江苏徐州221004 浙江卫未生物医药科技有限公司浙江杭州310053 杭州金域医学检验所有限公司浙江杭州310053

目的:探讨人毛囊真皮鞘细胞(hHF-DSCs)移植对兔跟腱炎的治疗效果。方法:采集人后枕部毛囊单位,并进行分离培养获得hHF-DSCs。选取30只雄性大白兔随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。模型组及治疗组于兔左侧跟腱止点上1 cm处多点... 详细信息

目的:探讨人毛囊真皮鞘细胞(hHF-DSCs)移植对兔跟腱炎的治疗效果。方法:采集人后枕部毛囊单位,并进行分离培养获得hHF-DSCs。选取30只雄性大白兔随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。模型组及治疗组于兔左侧跟腱止点上1 cm处多点注射Ⅰ型胶原酶建立跟腱炎兔模型。建立跟腱炎模型成功后于第0、3、6、13天,治疗组在兔跟腱患侧注射0.5 ml的hHF-DSCs,模型组与对照组在兔跟腱相同部位注射相同体积0.9%氯化钠溶液。观察各组兔跟腱外观以及组织病理学染色结果。采用ELISA法检测跟腱组织羟脯氨酸(HYP)含量以及肌腱蛋白C(TNC)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。采用免疫组化法检测跟腱组织Ⅰ、Ⅲ型胶原(collagenⅠ、Ⅲ)表达水平。采用牵拉法检测跟腱组织生物力学。结果:分离培养后的hHF-DSCs表面CD14、CD34、CD45和人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)几乎不表达,CD49d、CD90、CD73和CD105表达率接近100%。与对照组比较,模型组步态改变明显,跟腱红肿、无弹性、无光泽。HE染色结果显示,模型组胶原纤维排列疏松,原核细胞较少,分布紊乱不均匀,表明跟腱炎兔模型构建成功。治疗组跟腱组织弹性和光泽度好于模型组,且治疗组HE染色显示胶原纤维排列整齐,无明显纤维坏死,炎症细胞较少,胶原纤维原核细胞数量正常。模型组HYP含量低于对照组和治疗组,对照组高于治疗组(均P<0.05)。模型组MMP-9水平高于对照组和治疗组,治疗组高于对照组(均P<0.05)。模型组TNC水平低于对照组和治疗组,治疗组低于对照组(均P<0.05)。与对照组比较,治疗组和模型组兔跟腱组织IL-1β、IL-6、IL-10及TNF-α表达水平升高(均P<0.05)。与模型组比较,治疗组IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平降低(均P<0.05)。与模型组比较,治疗组collagenⅠ、Ⅲ升高(均P<0.05)。与对照组比较,模型组collagenⅠ、Ⅲ降低(均P<0.05)。模型组跟腱最大负荷低于对照组,治疗组高于模型组(均P<0.05)。结论:hHF-DSCs移植治疗兔跟腱炎,能够促进受损跟腱组织修复及胶原合成,降低胶原降解,减轻炎症反应。

关键词：跟腱炎人毛囊真皮鞘细胞移植胶原纤维炎症反应兔

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CD47胞外区蛋白多克隆抗体的制备

国际免疫学杂志 2024年第1期47卷 19-24页

作者：刘海静苏雨萌王芊艺北京亦庄国际生物医药科技有限公司北京100176

目的制备和鉴定抗CD47胞外区蛋白多克隆抗体。方法通过逆转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)扩增CD47分子胞外区基因序列,分别重组到原核表达载体pET32a(+)和pET31b(+)中,利用大肠杆菌表达CD47蛋白,并优化异丙基硫代半乳糖苷(is... 详细信息

目的制备和鉴定抗CD47胞外区蛋白多克隆抗体。方法通过逆转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)扩增CD47分子胞外区基因序列,分别重组到原核表达载体pET32a(+)和pET31b(+)中,利用大肠杆菌表达CD47蛋白,并优化异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导蛋白表达工艺,表达出CD47蛋白。用纯化的CD47蛋白免疫Balb/c小鼠,获得小鼠多克隆抗体,使用亲和层析法纯化CD47多抗,并对多抗进行酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)效价检测和Western blot特异性鉴定。结果成功构建pET32a(+)-CD47和pET31b(+)-CD47重组质粒。按照实验设置不同条件诱导表达蛋白后,选出最佳表达载体pET32a(+)-CD47。在大肠杆菌中获得表达最佳蛋白表达工艺。表达制备CD47蛋白,经过五次免疫后,得到CD47多抗。用ELISA法检测制备多抗的效价能达到1∶128000。Western blot检测结果显示,自制的CD47多抗能准确检测出小鼠心脏组织样品。结论成功制备了CD47胞外区蛋白多抗,为进一步研究CD47生物学功能奠定了基础。

关键词： CD47 胞外区蛋白多克隆抗体