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黄芪、川芎不同比例配伍对黄酮类成分提取动力学的影响

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中国现代应用药学 2024年第9期41卷 1192-1197页

作者：张昱张曼月毕赟赵雅丽宋精梅张宇燕浙江中医药大学附属金华中医院浙江中医药大学

目的研究黄芪和川芎不同比例配伍对黄酮类成分的提取动力学过程的影响。方法建立黄酮成分(以芦丁为对照品)的含量测定方法，分别动态测定2 h内黄芪与川芎不同比例配伍(1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1)的提取... 详细信息

目的研究黄芪和川芎不同比例配伍对黄酮类成分的提取动力学过程的影响。方法建立黄酮成分(以芦丁为对照品)的含量测定方法，分别动态测定2 h内黄芪与川芎不同比例配伍(1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1)的提取液中黄酮类成分的浓度，并根据菲克第一扩散定律，分别建立提取动力学模型，计算其提取速率常数，比较其溶出动力学差异性。结果黄芪与川芎不同比例配伍对黄酮类成分的提取速率和浓度均有显著影响，黄酮类成分的提取动力学模型均符合一级动力学方程特征，其中黄芪∶川芎为3∶1时提取速率最快，川芎∶黄芪2∶1时提取速率最慢，川芎∶黄芪为3∶1时黄酮类成分的平衡浓度最高，黄芪∶川芎比例为5∶1时最低。结论黄芪与川芎的不同比例配伍对黄酮类成分的提取速率和浓度有显著影响。

关键词：黄芪川芎配伍动力学过程数学模型

铁皮石斛SAPK基因家族鉴定及表达模式分析

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生物工程学报 2024年第4期40卷 1195-1210页

作者：姚馨怡赵佳莹胡素影李娴庞群群俞振明浙江中医药大学药学院浙江杭州311402

为研究铁皮石斛(Dendrobium officinale)应激活化蛋白激酶(stress-activated protein kinase,SAPK)基因家族的功能,综合多种生物信息学技术鉴定铁皮石斛SAPK(DoSAPK)家族成员,分析它们的理化特性、染色体定位、系统进化树、基因结构和... 详细信息

为研究铁皮石斛(Dendrobium officinale)应激活化蛋白激酶(stress-activated protein kinase,SAPK)基因家族的功能,综合多种生物信息学技术鉴定铁皮石斛SAPK(DoSAPK)家族成员,分析它们的理化特性、染色体定位、系统进化树、基因结构和启动子顺式作用元件等,并通过荧光定量PCR技术检测它们在不同组织、低温处理及盐胁迫处理后的表达量。结果表明,铁皮石斛有8个SAPK家族成员,分为group I、group II和group III亚家族,分布在7条染色体上,且2对基因间存在复制关系。在同一亚族中的家族成员具有类似的基因结构、保守基序和蛋白质二级结构。DoSAPK家族基因的启动子区域富含大量激素响应和胁迫应答相关的调控元件。不同DoSAPK成员在铁皮石斛各组织中均有不同程度的表达,具有组织表达特异性。在低温和盐胁迫处理下呈现差异化表达,可能受到低温和盐胁迫的调控,特别是DoSAPK1在铁皮石斛逆境应答过程中可能起着重要的作用。本研究为铁皮石斛DoSAPK家族基因及其功能的深入研究提供了参考。

关键词：铁皮石斛 SAPK家族基因表达非生物胁迫

基于线粒体形态特征与UPLC-Triple-TOF-MS整合分析的人参/三七心肌保护物质辨析研究

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2766-2775页

作者：史雪敬陈彦羽蔡思怡邵青赵筱萍浙江中医药大学基础医学院浙江杭州310053 浙江大学药学院浙江杭州310058 浙江中医药大学中医药科学院浙江杭州310053

人参为补气强身之要药,三七具有散血定痛之功,常用于治疗心脉瘀阻所致的心肌缺血性疾病。线粒体功能障碍常伴随线粒体形态的异常改变,其可塑性和动态性在心血管疾病中至关重要。该研究将原代乳鼠心肌细胞缺氧培养4 h再复氧2 h,构建心肌... 详细信息

人参为补气强身之要药,三七具有散血定痛之功,常用于治疗心脉瘀阻所致的心肌缺血性疾病。线粒体功能障碍常伴随线粒体形态的异常改变,其可塑性和动态性在心血管疾病中至关重要。该研究将原代乳鼠心肌细胞缺氧培养4 h再复氧2 h,构建心肌细胞缺氧复氧损伤模型。采用荧光探针MitoTracker Deep Red标记心肌细胞线粒体,Hoechst 33342标记细胞核,使用高内涵荧光成像系统采集心肌细胞荧光图像,运用ImagePro Plus软件对图像自动批量处理并提取线粒体形态特征的量化参数,选取代表性参数用于评价线粒体形态功能改变进而筛选人参、三七有效组分;进一步整合UPLC-Triple-TOF-MS技术,筛选人参、三七有效成分。结果显示组分RS-2、RS-4、SQ-1、SQ-4可以同时显著提高线粒体3个形态参数值,增加线粒体长度、分支程度和面积,有效改善缺氧复氧损伤引起的心肌细胞线粒体形态改变。对有效组分的主要成分筛选发现20(R)-人参皂苷Rg_(3)、人参皂苷Re、七叶胆苷ⅩⅦ对心肌细胞线粒体保护作用最佳,进一步研究表明20(R)-人参皂苷Rg_(3)可能通过上调视神经萎缩蛋白1(optic atrophy 1,OPA1)和线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,MFN2)表达,人参皂苷Re和七叶胆苷ⅩⅦ通过上调OPA1蛋白表达,促进线粒体膜融合,减轻线粒体损伤,从而发挥心肌细胞的保护作用。该研究为从人参、三七中发现创新药物提供了实验依据,也为中药心肌保护有效组分与有效成分的规模化筛选提供了新方法。

关键词：人参三七线粒体形态缺氧复氧活性成分心肌保护荧光成像

超声引导下针刀疗法辅助射频消融术治疗神经根型颈椎病的临床观察

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针刺研究 2024年第6期49卷 604-610,640页

作者：姚智渊樊舒瑶浙江中医药大学附属第一医院骨伤科杭州310006 浙江中医药大学附属第一医院乳腺科杭州310006

目的:观察超声引导下针刀疗法辅助治疗神经根型颈椎病低温等离子髓核射频消融术(PCDN)术后残留症状的疗效及安全性。方法:将70例神经根型颈椎病患者随机分为试验组和对照组,每组35例。对照组患者接受PCDN治疗。试验组患者在对照组基础上... 详细信息

目的:观察超声引导下针刀疗法辅助治疗神经根型颈椎病低温等离子髓核射频消融术(PCDN)术后残留症状的疗效及安全性。方法:将70例神经根型颈椎病患者随机分为试验组和对照组,每组35例。对照组患者接受PCDN治疗。试验组患者在对照组基础上在PCDN术后第2天行超声引导下针刀治疗,每隔5~7 d进行1次,共行4~6次。分别于PCDN术前和术后1 d(针刀治疗前)及1、3、6个月时采用疼痛视觉模拟量尺(VAS)评分评价患者疼痛程度,采用颈部功能障碍指数(NDI)评分、日本骨科学会颈椎病(JOA)评分、田中靖久20分法量表评估患者颈椎病的严重程度,评估两组患者的临床疗效并计算治疗有效率和优良率,记录术后不良反应及并发症。结果:与PCDN术前比较,术后1 d及1、3、6个月时两组患者的VAS评分和NDI评分均降低(P<0.05),JOA评分和田中靖久20分法评分均升高(P<0.05)。与术后1 d比较,试验组患者术后1、3、6个月时VAS评分和NDI评分均降低(P<0.05),JOA评分和田中靖久20分法评分均升高(P<0.05)。与同时点对照组比较,试验组术后1、3、6个月时VAS评分和NDI评分均降低(P<0.05),JOA评分和田中靖久20分法评分均升高(P<0.05)。试验组患者PCDN术后1、3、6个月时有效率和优良率均高于同时间点对照组(P<0.05)。随访至术后1年,两组患者均无明显术后不良反应及并发症。结论:超声引导下针刀疗法可显著改善神经根型颈椎病PCDN后的残留症状,疗效明显优于单纯行PCDN手术,且安全可靠。

关键词：神经根型颈椎病针刀疗法超声引导髓核射频消融术

胃底腺型胃癌14例患者的临床特征及内镜和病理表现分析

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中华内科杂志 2024年第1期63卷 59-65页

作者：孙橹张春丽蔡畅廖冰冰吕宾赵晶浙江中医药大学附属第一医院消化内科杭州310006 浙江中医药大学附属第一医院病理科杭州310006

目的胃底腺型胃癌(GA-FG)少见,常发生于幽门螺杆菌(H.pylori)未感染者。本文旨在分析、总结GA-FG患者的临床、内镜和病理特点,以提高诊断水平。方法病例系列研究。纳入2020年1月1日至2022年10月1日在浙江中医药大学附属第一医院消化科... 详细信息

目的胃底腺型胃癌(GA-FG)少见,常发生于幽门螺杆菌(H.pylori)未感染者。本文旨在分析、总结GA-FG患者的临床、内镜和病理特点,以提高诊断水平。方法病例系列研究。纳入2020年1月1日至2022年10月1日在浙江中医药大学附属第一医院消化科诊治并行内镜下黏膜剥离术(ESD)切除的GA-FG患者,分析其临床表现、内镜特征、病理学免疫组化等特点。结果共14例GA-FG患者,男性5例、女性9例,平均年龄为59(39~77)岁,多无明显的临床表现,12例为H.pylori阴性,所有患者均行ESD切除,并在(13±9)个月的随访期内均存活,11例有术后内镜随访记录,均未发现复发。病灶共有15处(1例存在2处病灶),12处位于胃上1/3,10处病灶直径≤1 cm,12处形态为0-Ⅱa型,8处可见褪色改变,12处表面可见血管扩张。放大内镜及窄带成像下12处病灶有隐窝边缘上皮(MCE)扩大,均未见明显微血管异常,未见明显边界线。切除后病理标本均无脉管浸润,病灶边缘黏膜均无萎缩,免疫组化显示MUC-2均阴性;11例MUC5AC呈阴性;MUC-6均阳性;12例Ki-67≤5%。结论GA-FG是一类低恶性程度、预后良好的新型胃癌,内镜下表现有特征性的褪色改变以及表面扩张血管,通过放大内镜及窄带成像常可见表面扩大的MCE且不可见明显的边界线。

关键词：胃肿瘤内窥镜病理学窄带成像

冠心宁片通过调节肠道微生态改善大鼠早期心衰

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中国现代应用药学 2024年第8期41卷 1056-1065页

作者：张燕黄宇马全鑫徐松涛沈利叶徐雁云陈民利戎亦骊嘉兴市中医医院浙江嘉兴314000 浙江中医药大学中医药科学院/比较医学研究所杭州310053 浙江中医药大学药学院杭州310053

目的观察冠心宁片(Guanxinning tablets,GXN)对早期心衰模型大鼠的影响,并从肠道菌群角度探讨GXN对心衰大鼠的保护机制。方法取6只SD大鼠行假手术,另取80只SD大鼠行主动脉弓狭窄术,建立心力衰竭大鼠模型,将存活的大鼠分为4组,即模型对... 详细信息

目的观察冠心宁片(Guanxinning tablets,GXN)对早期心衰模型大鼠的影响,并从肠道菌群角度探讨GXN对心衰大鼠的保护机制。方法取6只SD大鼠行假手术,另取80只SD大鼠行主动脉弓狭窄术,建立心力衰竭大鼠模型,将存活的大鼠分为4组,即模型对照组、阳性对照组(卡托普利片12.5 mg·kg^(-1))和GXN高、低剂量组(1200、600 mg·kg^(-1)),连续给药8周。每隔4周进行心动超声检查,检测血清NT-proBNP、hs-CRP、IL-6和TNF-α浓度及SOD与MDA水平;取大鼠结肠内容物,基于16S肠道微生物组高通量测序技术和生物信息学分析手段,观察GXN对肠道菌群结构和功能的影响。结果与模型对照组相比,给予不同剂量的GXN后大鼠存活率均有提高,心室壁厚度均有不同程度的下降,大鼠心脏质量及脏器系数均有改善。GXN还能降低炎症因子水平,抑制大鼠NT-proBNP水平升高,提高血清SOD活性。另外,GXN干预后能显著提高心衰模型大鼠的肠道菌群多样性,可能的作用菌属靶点为Akkermansia属、Phascolarctobacterium属和Oxalobacter属。GXN对心衰大鼠肠道菌群功能的影响可能集中在非同源末端连接、流感A、类胡萝卜素合成、吲哚生物碱、贝他林生物合成、肾素-紧张素系统等生物途径。结论GXN对早期心衰大鼠的保护作用可能与调节肠道菌群途径有关。

关键词：冠心宁片早期心衰肠道菌群

石菖蒲挥发油抑制NLRP3炎症体介导的小胶质细胞焦亡实验研究

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中国中药杂志 2024年

作者：徐志伟周小杰黄筠皓姬丽婷李昌煜浙江中医药大学第二临床医学院浙江中医药大学金华研究院浙江中医药大学中医药科学院浙江中医药大学药学院

探讨石菖蒲挥发油对小胶质细胞焦亡的影响及其作用机制。采用1 μg·mL-1脂多糖和10 μmol·L-1尼日利亚菌素钠盐制备BV-2细胞焦亡模型，给予不同剂量的石菖蒲挥发油干预，CCK-8法检测细胞存活率；流式细胞术检测细胞凋亡情况；ELISA法... 详细信息

探讨石菖蒲挥发油对小胶质细胞焦亡的影响及其作用机制。采用1 μg·mL-1脂多糖和10 μmol·L-1尼日利亚菌素钠盐制备BV-2细胞焦亡模型，给予不同剂量的石菖蒲挥发油干预，CCK-8法检测细胞存活率；流式细胞术检测细胞凋亡情况；ELISA法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-18（IL-18）含量；qRT-PCR检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和半胱氨酸蛋白酶-1（caspase-1）mRNA水平；免疫荧光法检测离子钙结合衔接分子1（Iba-1）、NLRP3蛋白表达；Western blot检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl2-相关X蛋白（Bax）、Iba-1、κB抑制因子激酶β（IKKβ）、p-IKKβ（Y188）、核转录因子-κB p65（NF-κB p65）、p-NF-κB（S536）、NLRP3、ASC、caspase-1、cleaved caspase-1、焦孔素D（GSDMD）和GSDMD-N蛋白表达。结果显示，8、16、32 μg·mL-1石菖蒲挥发油能明显提高脂多糖和尼日利亚菌素钠盐诱导的细胞存活率降低现象，增加Bcl-2/Bax比值，改善细胞凋亡情况；降低Iba-1蛋白表达；减少TNF-α、IL-1β和IL-18炎症因子含量；降低NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA水平以及NLRP3、ASC、caspase-1、p-IKKβ（Y188）/IKKβ、p-NF-κB （S536）/NF-κB p65、cleaved caspase-1和GSDMD-N蛋白表达。结果表明，石菖蒲挥发油能够抑制NLRP3炎症体介导的小胶质细胞焦亡。

关键词：石菖蒲挥发油小胶质细胞神经炎症细胞焦亡 NLRP3

基于液质联用技术结合化学计量法分析杜仲盐制前后差异性成分

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中草药 2024年第5期55卷 1518-1531页

作者：唐瑞吴杭莎李亚飞赵明方方可儿张海瑞葛卫红杜伟锋浙江中医药大学药学院浙江杭州311402 浙江中医药大学中药炮制技术研究中心浙江杭州311401 浙江中医药大学中药饮片有限公司浙江杭州311401

目的通过超高液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)对杜仲盐制前后成分进行鉴定,分析差异性成分。方法利用UPLC-Triple-TOF/MS检测杜仲中的化学成分,液相采用Waters HSS-T3色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%... 详细信息

目的通过超高液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)对杜仲盐制前后成分进行鉴定,分析差异性成分。方法利用UPLC-Triple-TOF/MS检测杜仲中的化学成分,液相采用Waters HSS-T3色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,柱温为50℃;检测波长254 nm;进样量3µL。质谱采用负离子扫描模式采集数据,根据一级准分子离子与二级碎片离子信息进行化合物的分析与鉴定。通过主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对杜仲盐制前后进行差异成分分析。结果共解析出杜仲中52种成分,结合OPLSDA筛选出14个影响杜仲盐制前后质量的潜在差异性成分,分别为京尼平苷、绿原酸、杜仲醇、桃叶珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸、京尼平、eucomoside B、异绿原酸C、teuhircoside硫酸脂、橄榄素二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、中脂素二葡萄糖苷和去氢二松柏醇葡萄糖苷。结论建立了杜仲盐制前后化学成分定性分析方法,筛选出盐制前后杜仲质量变化的潜在差异性成分,为杜仲盐制的增效物质基础的研究提供了科学依据,对杜仲质量控制提供更加全面的支撑。

关键词：杜仲盐制 UPLC-Triple-TOF/MS 主成分分析正交偏最小二乘法-判别分析差异性成分京尼平苷绿原酸杜仲醇桃叶珊瑚苷松脂醇二葡萄糖苷京尼平苷酸京尼平 eucomoside B 异绿原酸C teuhircoside硫酸脂橄榄素二葡萄糖苷丁香脂素二葡萄糖苷中脂素二葡萄糖苷去氢二松柏醇葡萄糖苷

杜仲盐制前后胶丝力度与色度值及特征成分含量的相关性研究

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中草药 2024年第10期55卷 3291-3299页

作者：竹炳吴杭莎葛卫红杜伟锋浙江中医药大学药学院浙江杭州311402 浙江中医药大学中药炮制技术研究中心浙江杭州311401 浙江中医药大学中药饮片有限公司浙江杭州311401

目的分析杜仲盐制前后杜仲胶胶丝力度与色度值及特征成分含量的相关性,为杜仲炮制过程质量控制提供理论依据。方法以盐制前后的杜仲饮片为研究对象,使用Instron3343型材料试验机测定杜仲胶丝力度,利用测色仪采集色度值L、a、b、Eab,采用... 详细信息

目的分析杜仲盐制前后杜仲胶胶丝力度与色度值及特征成分含量的相关性,为杜仲炮制过程质量控制提供理论依据。方法以盐制前后的杜仲饮片为研究对象,使用Instron3343型材料试验机测定杜仲胶丝力度,利用测色仪采集色度值L、a、b、Eab,采用HPLC法测定京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、京尼平、松脂醇二葡萄糖苷、金丝桃苷6个化学成分的含量,利用变量投影重要性分析(variable importance projection,VIP)与散点图(scatter plot,S-Plot)分析各成分的权重,结合SPSS 26.0与SIMCA 14.1软件分析样品胶丝力度与色度值、特征成分含量间的相关性。结果与生品相比,杜仲盐制后胶丝力度极显著降低,L、a、b、Eab均不同程度降低,金丝桃苷的含量、色度值L、a、b、Eab与胶丝力度均呈显著正相关,京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷的含量与胶丝力度均呈显著负相关,松脂醇二葡萄糖苷、京尼平的含量与胶丝力度无明显相关性。结论盐制后杜仲饮片的胶丝力度降低,杜仲饮片的色度值和金丝桃苷含量也一同降低,而京尼平苷酸、绿原酸与京尼平苷的含量反而增加。为盐杜仲饮片的定性判别提供了科学依据,同时为杜仲盐制的质量控制提供了一种新的研究思路和理论基础。

关键词：杜仲盐制杜仲胶色度值特征成分相关性京尼平苷酸绿原酸京尼平苷京尼平松脂醇二葡萄糖苷金丝桃苷