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EB病毒vIL-10基因的表达与功能研究

中国病原生物学杂志 2025年第2期 131-135+140页

作者：刘瑞坪陈彦妤王俊颖孙德月辛宪云张栋薛庆节王晖济宁医学院临床医学院济宁医学院生物科学学院济宁学院附属高级中学临沂市荣军医院济宁医学院基础医学院

目的构建EB病毒vIL-10基因的原核表达载体并纯化vIL-10,进行小鼠实验探究其对MC38肿瘤细胞的作用，为进一步探究vIL-10的在机体内的作用及其机制奠定基础。方法根据vIL-10的DNA序列，设计引物并通过PCR扩增获得vIL-10基因；构建重组质... 详细信息

目的构建EB病毒vIL-10基因的原核表达载体并纯化vIL-10,进行小鼠实验探究其对MC38肿瘤细胞的作用，为进一步探究vIL-10的在机体内的作用及其机制奠定基础。方法根据vIL-10的DNA序列，设计引物并通过PCR扩增获得vIL-10基因；构建重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1,将重组质粒转化***5α;抗性平板筛选阳性菌落，提取质粒后做PCR、双酶切及测序鉴定；将鉴定正确的重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1转化***3并用氨苄西林筛选、IPTG诱导表达，超声波破碎菌体提取蛋白并做SDS-PAGE、Western blot鉴定；大量培养阳性菌株，破碎菌体后提取蛋白，利用GST标签纯化vIL-10,取少量纯化产物再次做SDS-PAGE、Western blot鉴定；凝血酶切掉GST标签，透析袋除盐、浓缩蛋白后测定蛋白含量，备用；收集MC38细胞，皮下注射6周龄体重相近的野生型、IL-10基因敲除型C57BL/6J小鼠，3周后取成功构建的肿瘤模型小鼠，按400μg/kg肿瘤周围浸润注射vIL-10,每7天注射1次，共注射2次。末次注射7 d后处死小鼠，剥离肿瘤称重并记录、分析。结果 PCR获得的vIL-10基因大小约为513 bp,重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1的PCR、双酶切结果均符合预期，基因测序结果与vIL-10模板序列相符；转化vIL-10-pGEX-4T-1的***3经IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳显示与对照组对比可见45 ku条带，Western blot显示该蛋白表达成功；阳性菌株经大量培养，提取蛋白后用GST标签进行纯化，Western blot结果显示该蛋白能被特异性纯化，经切割透析浓缩后测定蛋白含量为0.56 mg/mL;动物实验结果显示，野生型(C57BL/6J)小鼠注射vIL-10蛋白组比未注射组肿瘤重量明显增加(P<0.05);IL-10基因敲除(IL-10-KO)小鼠注射vIL-10组比未注射组肿瘤重量明显增加(P<0.001)。结论经Western blot鉴定含有重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1的***3能成功表达vIL-10,动物实验表明vIL-10能够促进肿瘤生长。为探究vIL-10对肿瘤的作用研究及其机制奠定了基础。

关键词： EB病毒 vIL-10 原核表达 GST标签纯化 MC38

3D打印技术在口腔医学、颌面外科修复重建中的作用与优势

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中国组织工程研究 2025年第22期29卷 4823-4831页

作者：宋雨菲程焕芝范海霞侯萌济宁医学院口腔医学院山东省济宁市272067

背景:3D打印技术独特的优势为口腔医学的发展开拓了新的思路。目的:总结3D打印技术在口腔医学中的应用进展。方法:利用计算机检索中国知网和PubMed数据库,以“3D打印,口腔科学”为中文检索词进行分类检索,以“Three-Dimensional printin... 详细信息

背景:3D打印技术独特的优势为口腔医学的发展开拓了新的思路。目的:总结3D打印技术在口腔医学中的应用进展。方法:利用计算机检索中国知网和PubMed数据库,以“3D打印,口腔科学”为中文检索词进行分类检索,以“Three-Dimensional printing,stomatology,Dentistry,prosthodontics,oral implant,orthodontics,oral and maxillofacial surgery,dental pulp disease,periodontitis”为英文检索词进行关键词检索,经阅读初步排除与文章主题不相符的文献,根据纳入标准和排除标准,最终纳入54篇文献进行汇总。结果与结论:在口腔医学领域,3D打印技术的应用范围正迅速拓展,逐步取代传统的临床诊断和治疗方式,通过结合数字化技术和先进的材料科学,3D打印可以精确地创建三维模型,为口腔疾病治疗提供了个性化解决方案,确保医师能够在手术前进行详尽的规划和预览,提高手术的安全性。3D打印技术在定制化义齿制作、个性化种植、无托槽隐形矫治等多方面呈现出了显著优势,基于此项技术,医师可以根据患者口腔结构和需求实行精准设计与制作,为患者带来良好的治疗体验和预后效果。3D打印技术在微创牙髓治疗及牙周组织再生方面也展现出了巨大潜力,3D打印的支架和植入物可为干细胞提供适宜环境,促进牙周组织的再生和修复,但目前3D打印在再生治疗仍处于发展阶段,还需更多的研究和实践来验证其临床应用的效果和安全性。

关键词： 3D打印技术口腔医学口腔临床口腔修复口腔种植口腔正畸口腔颌面外科牙体牙髓病学牙周组织再生术

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水凝胶:口腔颌面部组织缺损修复中的作用与问题

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中国组织工程研究 2025年第10期29卷 2178-2188页

作者：伍志鑫蒋雯雯詹健辉李杨书润任文燕王一宇济宁医学院口腔医学院山东省济宁市272067 济宁医学院临床医学院山东省济宁市272067

背景:水凝胶因优越的机械及生物性能在生物医学领域占据独特优势,已成为研究热点。目前水凝胶相关研究涉及组织工程和创口敷料等方面。目的:综述水凝胶的优势性能与在口腔颌面部缺损修复领域中的应用研究进展,探讨水凝胶目前在应用推广... 详细信息

背景:水凝胶因优越的机械及生物性能在生物医学领域占据独特优势,已成为研究热点。目前水凝胶相关研究涉及组织工程和创口敷料等方面。目的:综述水凝胶的优势性能与在口腔颌面部缺损修复领域中的应用研究进展,探讨水凝胶目前在应用推广中的局限以及在此领域所面临的挑战,为未来研究方向提供新思路。方法:利用计算机检索Pub Med、中国知网、万方数据库发表的相关文献,检索词为“水凝胶,口腔颌面部缺损,机械性能,组织工程,创口敷料”“hydrogel,oral and maxillofacial defects,mechanical properties,guided tissue regeneration,wound dressing”。通过阅读文题和摘要进行初步筛选,排除与文章主题不相关的文献,根据纳入标准和排除标准,最终纳入108篇文献进行结果分析。结果与结论:(1)水凝胶具有良好的生物学活性、机械可控性及刺激响应等优势性能。(2)聚合物、金属和陶瓷联合制备的水凝胶复合物具有适当的机械性能、生物降解性以及可控的释放速率,契合颌面骨组织工程的需求。(3)纤维蛋白基水凝胶可填充穿过神经缺损区域的中空神经导管并促进轴突再生和生长从而恢复颌面神经功能。(4)控制纳米材料和水凝胶的相互作用可以改善肌纤维定向结构的形成以促进颌面肌组织再生。(5)多糖水凝胶,因具有控制药物递送和携带生物活性分子等作用,并且与其他材料联合应用可以产生与细胞外基质相匹配的最佳支架,因此逐渐成为修复不规则牙周缺损的首选。(6)磷酸钙或碳酸钙基水凝胶中填充不规则形状或精细的组织缺损并使牙体硬组织再矿化,自组装水凝胶制备简便且生物活性优良。(7)唾液腺来源的细胞外基质样凝胶有望参与许多唾液腺疾病的治疗。(8)水凝胶可作为伤口敷料结合生物黏合剂、脱细胞生物材料、抗微生物和抗氧化剂或干细胞等而被广泛用于治疗各种伤口。(9)纤维蛋白基水凝胶在口腔颌面部缺损修复中最具潜力,其具有优良的生物相容性、柔韧性和可塑性,可与细胞、细胞外基质蛋白和各种生长因子结合,能够促进间充质干细胞的成骨分化、轴突的再生与生长、血管生成、肌管分化、唾液腺组织再生和牙周组织再生,在口腔颌面部缺损组织的修复中具有广泛前景。然而其治疗效果取决于所携带物质的功能,复杂的制备工艺、安全性和长期疗效以及口腔颌面特殊的解剖结构是阻碍推广的难题,这也为未来的研究提供了方向。

关键词：水凝胶口腔颌面部缺损骨组织工程生物材料创口敷料机械性能刺激响应综述

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椎体成形术联合微波消融治疗转移癌致椎体压缩性骨折

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中国介入影像与治疗学 2025年

作者：邱媛媛邢超袁倩倩张开贤张旭升济宁医学院附属滕州市中心人民医院肿瘤科

目的　观察椎体成形术（PVP）联合微波消融（MWA）治疗转移癌致椎体压缩性骨折（VCF）效果。方法　回顾性分析112例转移癌致VCF，其中77例共105节椎体接受MWA联合PVP（A组）、35例共68节椎体接受单纯PVP（B组）。记录技术成功率及并发... 详细信息

目的　观察椎体成形术（PVP）联合微波消融（MWA）治疗转移癌致椎体压缩性骨折（VCF）效果。方法　回顾性分析112例转移癌致VCF，其中77例共105节椎体接受MWA联合PVP（A组）、35例共68节椎体接受单纯PVP（B组）。记录技术成功率及并发症，对比治疗后患者疼痛视觉模拟（VAS）评分、每日吗啡消耗量（DMC）及Oswestry功能障碍指数（ODI），观察局部肿瘤复发率。结果　MWA及PVP技术成功率均为100%。A组12例（12/77，15.58%）、B组19例（19/35，54.29%）见骨水泥渗漏，A组低于B组（P＜0.001）；未见其他并发症。治疗后1周及1、3、6个月，2组VAS评分、DMC和ODI均较治疗前降低（P均＜0.001）；A组治疗后3及6个月VAS评分均低于B组（P＜0.01），A组治疗后6个月 DMC及ODI均低于B组（P均＜0.01），其余各时间点组间VAS评分、DMC及ODI差异均无统计学意义（P均＞0.05）。治疗后6个月，A组［17.14%（18/105）］病灶肿瘤复发率明显低于B组［32.35%（22/68）］，差异有统计学意义（P=0.020）。结论　PVP联合MWA治疗转移癌致VCF可减少并发症、延长疼痛缓解时间，且短期局部控制肿瘤效果更佳。

关键词：骨折,压缩性肿瘤转移椎体成形术微波消融

中性粒细胞在真菌性角膜炎固有免疫应答中的作用

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微生物学免疫学进展 2025年

作者：张洪虎朱国强济宁医学院临床医学院眼科济宁医学院附属医院眼科

真菌性角膜炎是由真菌感染引起的一种严重致盲性眼病。随着病情的进展，患者可能造成不同程度的角膜溃疡或角膜穿孔，严重时甚至引发眼内炎。固有免疫在机体抵抗真菌入侵的各个阶段发挥了重要作用。其中，中性粒细胞作为机体固有免疫系... 详细信息

真菌性角膜炎是由真菌感染引起的一种严重致盲性眼病。随着病情的进展，患者可能造成不同程度的角膜溃疡或角膜穿孔，严重时甚至引发眼内炎。固有免疫在机体抵抗真菌入侵的各个阶段发挥了重要作用。其中，中性粒细胞作为机体固有免疫系统的重要防御细胞，主要通过有氧依赖型、非氧依赖型以及中性粒细胞外诱捕网方式，激活角膜抗真菌感染的由固有免疫系统介导的炎症反应。现就中性粒细胞通过这3种方式清除入侵真菌，并介导角膜抗真菌固有免疫应答中的作用作一概述，为进一步明确真菌性角膜炎的致病机制及治疗提供理论依据。

关键词：真菌性角膜炎中性粒细胞固有免疫有氧依赖型细胞外陷阱

槲皮素通过调控TP53基因抑制肾透明细胞癌的增殖和迁移

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南方医科大学学报 2025年

作者：高俊杰叶开吴竞皖南医学院第二附属医院检验科

目的筛选槲皮素治疗肾透明细胞癌（ccRCC）的潜在分子靶点。方法运用网络药理学方法从多个数据库中筛选槲皮素的治疗靶点，运用孟德尔随机化方法从4907种血浆蛋白中筛选与ccRCC显著相关的靶点，构建药物-疾病网络模型，筛选出潜在的... 详细信息

目的筛选槲皮素治疗肾透明细胞癌（ccRCC）的潜在分子靶点。方法运用网络药理学方法从多个数据库中筛选槲皮素的治疗靶点，运用孟德尔随机化方法从4907种血浆蛋白中筛选与ccRCC显著相关的靶点，构建药物-疾病网络模型，筛选出潜在的关键靶点，运用生物信息学技术评估这些靶点的作用，并利用体外细胞实验对筛选靶点进行验证。结果网络药理学和孟德尔随机化综合分析筛选出了TP53(OR=3.325,95%CI:1.805-6.124,P=0.0001)、ARF4(OR=0.173,95%CI:0.065-0.456,P=0.0003)和DPP4(OR=0.463,95%CI:0.302-0.711,P=0.0004)3个槲皮素治疗ccRCC的核心靶点。生物信息学分析表明TP53在肾透明细胞癌中表达增高（P<0.001）；生存分析显示高表达TP53的肾癌患者预后更差（P<0.001）；分子对接显示槲皮素与TP53的结合能为-5.83 kcal/mol;CCK-8实验和创伤愈合实验显示槲皮素在体外抑制786-O细胞的增殖和迁移（P<0.05）;qPCR和Western blotting显示槲皮素在体外抑制TP53 mRNA和蛋白的表达（P<0.05）。结论 TP53可能是槲皮素治疗ccRCC的关键靶点，为槲皮素治疗肾透明细胞癌的分子机制研究奠定了基础。

关键词：槲皮素肾透明细胞癌网络药理学孟德尔随机化 TP53基因分子靶点

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自主神经调控神经病理性疼痛的研究进展

中国医学创新 2025年第1期22卷 184-188页

作者：蒋晓华刘亚彬陈国武济宁医学院临床医学院山东济宁272000 济宁医学院附属医院脊柱外科山东济宁272000

神经病理性疼痛是一种常见的以神经系统损伤或疾病为病理性基础的疼痛感受,其病因复杂,发病机制不明确,与神经损伤、炎症反应、免疫失调、代谢紊乱等密切相关。越来越多的研究发现,神经病理性疼痛的发生与自主神经系统的活动改变相关,... 详细信息

神经病理性疼痛是一种常见的以神经系统损伤或疾病为病理性基础的疼痛感受,其病因复杂,发病机制不明确,与神经损伤、炎症反应、免疫失调、代谢紊乱等密切相关。越来越多的研究发现,神经病理性疼痛的发生与自主神经系统的活动改变相关,在其临床症候群中往往伴随着各种各样自主神经功能紊乱的表现,探究自主神经系统参与神经病理性疼痛发病的作用机制有利于寻找新的治疗靶点。在本综述中,阐述了自主神经系统与疼痛传导通路之间的解剖学关联,总结了自主神经系统参与神经病理性疼痛的潜在的作用环节及其可能机制。

关键词：自主神经神经病理性疼痛疼痛传导

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瑞马唑仑调节ROS/RAGE/NF-κB信号通路对LPS诱导的小胶质细胞炎症的影响

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实用医学杂志 2025年

作者：吴兴卫王建营郭成晓刘紫仪孙超于飞滨州医学院附属医院麻醉科

目的探讨瑞马唑仑对小胶质细胞的炎症保护作用及潜在分子机制。方法采用不同浓度的瑞马唑仑预处理（2 h）小胶质细胞BV2细胞系，用脂多糖（LPS）处理24 h后，从形态学和炎症变化的角度评估瑞马唑仑的抗炎作用；CCK-8法检测细胞毒性；... 详细信息

目的探讨瑞马唑仑对小胶质细胞的炎症保护作用及潜在分子机制。方法采用不同浓度的瑞马唑仑预处理（2 h）小胶质细胞BV2细胞系，用脂多糖（LPS）处理24 h后，从形态学和炎症变化的角度评估瑞马唑仑的抗炎作用；CCK-8法检测细胞毒性；实时荧光定量PCR、ELISA法检测炎症因子的表达与分泌；荧光探针法检测细胞ROS活性；试剂盒检测细胞中的丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH）活性；Western blot法检测细胞中的Bax、Bcl-2、IL-1β、RAGE、NF-κB、P-NF-κB、IκBα、p-IκBα、INOS和Arg-1的蛋白表达。免疫荧光法观察NF-κB核转位以及细胞M1/M2极化情况。结果与对照组相比，LPS组BV2细胞活性降低，炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）基因表达与分泌增加，SOD和GSH活性下降，细胞内MDA及ROS含量增加，RAGE蛋白水平上升，IκBα和NF-κB蛋白磷酸化水平增加，NF-κB发生核转位，M1极化标志物INOS表达增加，M2极化标志物Arg-1表达减少。与LPS组相比，LPS+Rema组细胞活性增加，炎症因子基因表达与分泌减少，SOD和GSH活性升高，细胞内MDA及ROS含量减少，RAGE蛋白水平下降，IκBα和NF-κB蛋白磷酸化水平减少，抑制NF-κB核转位发生，M1极化标志物INOS表达减少，M2极化标志物Arg-1表达增加。结论瑞马唑仑通过调节NF-κB通路以及ROS的产生使小胶质细胞从M1表型转移到M2表型，从而减轻LPS诱导的炎症反应。

关键词：神经炎症瑞马唑仑 NF-κB 氧化应激小胶质细胞极化

关节镜下三种技术修复腕三角纤维软骨复合体比较

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中国矫形外科杂志 2025年第1期 19-24页

作者：魏本磊张玉赵铜林栗威济宁医学院附属医院济宁医学院

[目的]比较腕关节镜下关节囊缝合（capsule suture, CS），穿单骨道（single bone tunnel, SBT）及Y形双骨道（double bone tunnels, DBT）三种技术修复三角纤维软骨复合体（triangular fibrocartilage complex, TFCC） Palmer IB型损伤的临床疗效。[方法]回顾性分析2014年6月—2023年9月本院采用关节镜治疗的49例TFCC IB型损伤患者的临床资料。依据术前医患沟通结果，将患者分为三组，14例采用CS,19例采用SBT,16例采用DBT。比较三组围手术期、随访及影像结果。[结果]三组患者均顺利完成手术。CS组手术时间[(106.5±15.4) min vs (170.6±15.7) min vs (163.1±19.2) min, P<0.001]和术中失血量[(14.0±3.5) ml vs (50.1±15.8) ml vs (46.7±13.4) ml, P<0.001]显著优于SBT组及DBT组，但CS组后外固定时间显著长于SBT组及DBT组[(50.1±6.1) d vs (33.6±7.2) d vs (31.9±4.8) d, P<0.001]。随访（14.0±5.6）个月，CS组完全负重活动时间显著晚于SBT组和DBT组[(55.8±3.1) d vs (45.1±3.3) d vs (37.5±5.5) d, P<0.001]。与术前相比，末次随访时三组患者VAS评分、Mayo评分、伸-屈ROM、尺偏-桡偏ROM、旋前-旋后ROM均显著改善（P<0.05）。末次随访时，SBT组VAS评分、尺偏-桡偏ROM显著优于DBT组（P<0.05）,DBT组显著优于CS组（P<0.05）。DBT组Mayo评分、伸-屈ROM、旋前-旋后ROM显著优于SBT组（P<0.05）,SBT组显著优于CS组（P<0.05）。影像方面，与术前相比，末次随访时三组患者尺-桡间距、TFCC连续性和尺桡隐窝水肿均显著改善（P<0.05）。末次随访时，DBT组上述影像指标均显著优于SBT组（P<0.05）,SBT组显著优于CS组（P<0.05）。[结论]腕关节镜辅助双骨道固定修复TFCC损伤（IB型）安全有效，优于穿单骨道及关节囊修复技术。

关键词：三角纤维软骨复合体损伤腕关节镜经骨固定缝合