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单细胞测序技术在肾细胞癌研究中的应用进展

安徽医学 2025年

作者：梁宁林春华山东第二医科大学临床医学院烟台毓璜顶医院泌尿外科

单细胞测序技术是一种具有革命性突破的工具，它能够在单个细胞水平，通过差异表达分析的方式研究肿瘤的个体发生机制和肿瘤微环境的变化。本文通过回顾单细胞测序技术的发展，及其在探索肾细胞癌的个体发生机制、肿瘤微环境、肿瘤诊断... 详细信息

单细胞测序技术是一种具有革命性突破的工具，它能够在单个细胞水平，通过差异表达分析的方式研究肿瘤的个体发生机制和肿瘤微环境的变化。本文通过回顾单细胞测序技术的发展，及其在探索肾细胞癌的个体发生机制、肿瘤微环境、肿瘤诊断治疗等方面应用的最新进展，进一步扩展对肾细胞癌的发生、进展、诊断和治疗的认识。

关键词：单细胞测序技术肾细胞癌肿瘤发生机制肿瘤异质性肿瘤微环境

PRC1靶向调控Hippo通路促进肾癌细胞增殖和迁移能力

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武汉大学学报(医学版) 2025年第1期 36-40页

作者：万梓宇王霞郑张节王豪阿尔斯·马旦也提彭建平武汉大学中南医院泌尿外科

目的：研究胞质分裂蛋白1(PRC1)对肾癌细胞的增殖和迁移能力的影响并探讨其在肾癌中的作用。方法：使用Gepia2数据库分析PRC1在肾癌中的差异表达和预后。在Caki-1细胞系中使用CRISPR/Cas9技术敲低PRC1的表达。设置对照组和PRC1敲低组（K... 详细信息

目的：研究胞质分裂蛋白1(PRC1)对肾癌细胞的增殖和迁移能力的影响并探讨其在肾癌中的作用。方法：使用Gepia2数据库分析PRC1在肾癌中的差异表达和预后。在Caki-1细胞系中使用CRISPR/Cas9技术敲低PRC1的表达。设置对照组和PRC1敲低组（KO1#、KO2#）,通过CCK-8增殖实验、平板克隆实验、Transwell实验分别观察PRC1对肾癌细胞增殖、迁移能力的影响。通过皮下荷瘤实验评估PRC1在体内的致瘤能力。对PRC1敲除的Caki-1细胞进行RNA-seq测序分析PRC1在肾癌中潜在的致癌机制。结果：PRC1在肾癌组织的表达明显高于癌旁组织（P<0.05）。PRC1高表达的肾癌患者预后更差(P<0.05)，在敲低PRC1后,CCK-8结果显示,PRC1敲低后肾癌细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。平板克隆形成实验结果显示,PRC1敲低后细胞集落形成能力显著下降(P<0.05)。Transwell实验显示，PRC1敲低后细胞迁移能力显著下降(P<0.05)。此外，敲低PRC1的表达抑制了体内荷瘤的致瘤能力。通过对敲除PRC1的Caki-1细胞进行RNA测序，我们发现了Hippo通路是PRC1在肾癌中潜在的作用靶点。结论：PRC1在肾癌组织中表达显著增加，显示出与肾癌不良预后的关联。PRC1通过调控Hippo通路来促进肾癌细胞的增殖和迁移。

关键词：肾癌 PRC1 Hippo通路

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基于风格迁移的柔性输尿管内窥镜图像深度估计

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天津大学学报（自然科学与工程技术版） 2025年第1期58卷 47-55页

作者：辛运帏尹晶晶赵煜代煜崔亮殷小涛南开大学网络空间安全学院天津300071 天津市网络与数据安全技术重点实验室天津300071 南开大学机器人与信息自动化研究所天津300350 民航总医院泌尿外科北京100123 解放军总医院第四医学中心泌尿外科北京100048

输尿管内窥镜手术是目前针对肾结石的主流治疗方案,其外形细长、镜体柔软,能够灵活穿越人体自然腔道的内径狭窄的尿道和输尿管,检查视野范围更广,使医生能够更好地观察到病变区域.但一般的输尿管内窥镜仅配备单目摄像头进行配合手术操作... 详细信息

输尿管内窥镜手术是目前针对肾结石的主流治疗方案,其外形细长、镜体柔软,能够灵活穿越人体自然腔道的内径狭窄的尿道和输尿管,检查视野范围更广,使医生能够更好地观察到病变区域.但一般的输尿管内窥镜仅配备单目摄像头进行配合手术操作,无法借助额外设备获取数据导致了其图像信息的匮乏;同时,相比于胃肠、鼻镜等手术场景,本研究的肾内场景在不具备公开数据集的同时,图像质量参差不齐,表面纹理细节不足,孔洞区域褶皱少,受模糊反光等干扰大,都易使深度估计受到影响针对以上问题,提出了一种基于改进风格迁移模型的深度估计方法.该方法首先根据术前CT图像重建肾脏内部腔道模型并提取中心路径,将虚拟内窥镜的摄像头设置在插值后的路径点上,构建了虚拟内窥镜漫游图像与深度估计图像一一对应的数据集,并基于此数据集训练了一个深度估计模型;随后,使用添加高效通道注意力(ECA)模块的改进风格迁移模型,将真实内窥镜图像域迁移至虚拟内窥镜图像域;最后,再将经由风格迁移产生的虚拟内窥镜图像送入上述训练得来的深度估计模型中,最终实现真实内窥镜图像的深度估计.所提方法的可行性及有效性在输尿管钬激光碎石术的图像中得到验证.

关键词：深度估计风格迁移注意力机制深度学习

人尿源性干细胞的分离培养及诱导分化为平滑肌细胞

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4076-4082页

作者：陈佳汇戴晓琪徐彦钢李远超黄妹詹一飞杜宇轩李鎏强郭耀川卞军赖德辉广州医科大学附属第五医院泌尿外科广东省广州市510000 广州市中西医结合医院泌尿外科广东省广州市510000 广州中医药大学临床针灸康复学院广东省广州市510000

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞... 详细信息

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞诱导方案效能的对比研究仍较为匮乏。目的:旨在分离、培养及鉴定人尿源性干细胞,并比较两种不同成平滑肌诱导方案的效果。方法:采用多次离心法从11份健康成人志愿者尿液中分离提取尿源性干细胞,使用流式细胞仪进行表面标志物的鉴定,通过成骨、成脂诱导分化来验证尿源性干细胞的多向分化潜能。尿源性干细胞分别在含转化生长因子β1以及转化生长因子β1联合血小板衍生生长因子的成平滑肌细胞诱导分化培养基中诱导分化14 d,采用免疫荧光染色和Western blot检测平滑肌特异性蛋白(α-SMA、SM22)的表达差异。结果与结论:①成功从8份健康人尿液中分离出尿源性干细胞,细胞呈“米粒”样,具有很好的分裂增殖能力;②尿源性干细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD73、CD90和CD44,极低表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45,不表达CD19、CD105和HLA-DR;③经成骨和成脂诱导分化后,可见明显的钙结节和脂滴形成,茜素红染色和油红O染色结果呈阳性;④成平滑肌诱导培养14 d,免疫荧光染色显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组尿源性干细胞成平滑肌诱导分化率显著高于转化生长因子β1组(P<0.005);⑤成平滑肌诱导培养14 d,Western blot检测显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组α-SMA和SM22蛋白表达量显著高于转化生长因子β1组(P<0.005)。结果表明:尿源性干细胞可以通过多次离心法无创分离获取;相较于单纯转化生长因子β1,转化生长因子β1/血小板衍生生长因子联合应用能显著提高尿源性干细胞诱导分化为平滑肌细胞的效率。

关键词：尿源性干细胞诱导分化平滑肌细胞转化生长因子β1 血小板衍生生长因子组织工程

机械敏感通道Piezo 1和Piezo 2促进幼鼠神经源性膀胱纤维化的初步研究

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现代泌尿外科杂志 2025年

作者：吕磊张艳平李琦王俊魁杨帅周钊凯李帅文一博刘亚凯司国威刘星辰文建国郑州大学第一附属医院泌尿外科河南省小儿尿动力国际联合实验室郑州大学第一附属医院小儿外科郑州大学第一附属医院超声科新乡医学院第一附属医院泌尿外科信阳市中心医院妇科

目的探究机械敏感通道Piezos(Piezo 1和Piezo 2)在神经源性膀胱(NB)幼鼠中的变化及其对膀胱纤维化的作用,为临床寻找治疗NB的新靶点提供参考。方法将30只雌性幼年SD大鼠按随机数表法分为5组:假手术组(Sham组)、神经离断2周组(NB-2W组... 详细信息

目的探究机械敏感通道Piezos(Piezo 1和Piezo 2)在神经源性膀胱(NB)幼鼠中的变化及其对膀胱纤维化的作用,为临床寻找治疗NB的新靶点提供参考。方法将30只雌性幼年SD大鼠按随机数表法分为5组:假手术组(Sham组)、神经离断2周组(NB-2W组)、神经离断6周组(NB-6W组)、神经离断+Piezos抑制剂2周组(NB-P-2W组)和神经离断+Piezos抑制剂6周组(NB-P-6W组),每组6只。通过离断幼鼠L6及S1脊神经构建NB动物模型,神经离断组造模后不进行干预,神经离断+Piezos抑制剂组则在造模后每2天腹腔注射Piezos抑制剂GsMTx4(10 mg/kg)。在离断后2周和6周进行幼鼠膀胱测压和超声检查,并取膀胱组织检测Piezos及纤维化相关指标Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的相对表达水平。结果膀胱测压显示,NB-2W组幼鼠基础膀胱压力明显升高,NB-6W组略有下降但仍高于Sham组(P<0.05)。NB-P-2W组的基础膀胱压力低于NB-2W组但较Sham组高,NB-P-6W组的基础膀胱压力低于NB-6W组但高于Sham组(P<0.05)。与Sham组比较,NB-2W组和NB-6W组最大膀胱测压容量(MCC)出现先升高后下降趋势(P<0.05)。与NB-2W组比较,NB-P-2W组的漏尿点压(BLPP)更低,MCC和膀胱顺应性(BC)更高(P<0.05);与NB-6W组比较,NB-P-6W组的BLPP更低,MCC和BC更高(P<0.05)。HE、MASSON染色及超声结果显示,随着神经离断时间延长,膀胱纤维化逐渐加重,膀胱壁粗糙增厚,内可见结石,肾脏逐渐出现肾盂扩张积水,而NB-P-2 W组和NB-P-6 W组纤维化程度轻于NB-2 W组和NB-6 W组,未见上尿路扩张积水。此外,Weston blot及免疫组化结果显示NB-2W组和NB-6W组的Piezos、CollagenⅠ及α-SMA的相对表达水平明显高于Sham组(P<0.01);NB-P-2W组和NB-P-6W组的Piezos、CollagenⅠ及α-SMA的相对表达水平则分别低于NB-2W组和NB-6W组(P<0.01)。结论机械敏感通道Piezos在NB幼鼠中表达升高,可能参与膀胱纤维化进展,但其机制有待进一步研究。

关键词： Piezo 1 Piezo 2 神经源性膀胱膀胱纤维化幼鼠机械敏感通道

雌激素对大鼠阴道平滑肌细胞兰尼碱受体1和L-型钙通道V1.3表达的影响

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中华男科学杂志 2009年第6期15卷 511-516页

作者：周秋根姜睿黄朝友泸州医学院附属医院泌尿外科四川泸州646000

目的:研究卵巢去势大鼠阴道平滑肌中兰尼碱受体1(RyR1)和L-型钙通道V1.3(Cav1.3)的表达,以探讨RyR1和Cav1.3与雌激素在女性性功能障碍中的相关性。方法:40只8周龄雌性SD大鼠随机均分成:假手术2周组(A组)、假手术4周组(B组)、去势2周组(C... 详细信息

目的:研究卵巢去势大鼠阴道平滑肌中兰尼碱受体1(RyR1)和L-型钙通道V1.3(Cav1.3)的表达,以探讨RyR1和Cav1.3与雌激素在女性性功能障碍中的相关性。方法:40只8周龄雌性SD大鼠随机均分成:假手术2周组(A组)、假手术4周组(B组)、去势2周组(C组)和去势4周组(D组)。术后2、4周运用全自动化学发光免疫法测定各组大鼠血清雌激素水平,RT-PCR和免疫组化法检测阴道平滑肌中RyR1和Cav1.3的mRNA及其蛋白表达。灰度比值表示RyR1和Cav1.3的mRNA表达量,积分光密度值表示RyR1和Cav1.3蛋白表达量。结果:血清雌激素水平C组[(0.210±0.026)nmol/L]较A组[(0.505±0.053)nmol/L]显著降低(P<0.01),D组[(0.130±0.031)nmol/L]较B组[(0.476±0.058)nmol/L]显著降低(P<0.01)。RyR1和Cav1.3在各组大鼠阴道平滑肌内均有表达。RyR1mRNA灰度比值C组(0.680±0.073)较A组(0.950±0.064)显著降低(P<0.01),D组(0.220±0.032)较B组(0.890±0.072)显著降低(P<0.01);Cav1.3mRNA灰度比值C组(0.580±0.043)较A组(0.870±0.019)显著降低(P<0.01),D组(0.190±0.020)较B组(0.820±0.021)显著降低(P<0.01)。RyR1蛋白表达积分光密度值C组(96.67±7.75)较A组(123.69±10.66)显著降低(P<0.01),D组(86.45±8.16)较B组(109.31±9.87)显著降低(P<0.01);Cav1.3蛋白表达积分光密度值C组(87.97±6.96)较A组(106.46±8.04)显著下降(P<0.01),D组(69.43±8.30)较B组(97.38±7.56)显著降低(P<0.01)。结论:RyR1和Cav1.3在大鼠阴道平滑肌内均有表达,雌激素可能通过影响大鼠阴道平滑肌中RyR1和Cav1.3的表达参与女性性反应调控。

关键词：兰尼碱受体1 L-型钙离子通道V1.3 雌激素阴道平滑肌女性性功能障碍

细胞外信号调节激酶和蛋白激酶B在去势大鼠阴茎海绵体的表达

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中华男科学杂志 2010年第2期16卷 112-117页

作者：许陈祥毛俊彪姜睿泸州医学院附属医院泌尿外科四川泸州646000

目的:研究细胞外信号调节激酶(Erk1/2)和蛋白激酶B(PKB/Akt)在去势大鼠阴茎海绵体中的表达及活性,探讨其在去势大鼠勃起功能障碍(ED)发生中的作用机制。方法:20只8周龄雄性SD大鼠随机分成假手术组(A组)和去势组(B组),术后4周检测两组大... 详细信息

目的:研究细胞外信号调节激酶(Erk1/2)和蛋白激酶B(PKB/Akt)在去势大鼠阴茎海绵体中的表达及活性,探讨其在去势大鼠勃起功能障碍(ED)发生中的作用机制。方法:20只8周龄雄性SD大鼠随机分成假手术组(A组)和去势组(B组),术后4周检测两组大鼠血清睾酮(T)水平,免疫组化及RT-PCR检测磷酸化Erk1/2和磷酸化PKB/Akt活性蛋白(累积光密度/面积,IA/Area)及Erk1/2、Akt mRNA(内参为GAPDH)在大鼠阴茎海绵体中的表达。结果:术后4周B组血清T水平[(1.339±0.642)nmol/L]较A组[(10.090±3.026)nmol/L]显著降低(P0.05)。结论:Erk1/2及PKB/Akt在去势组及假手术组大鼠阴茎中均有表达。去势大鼠阴茎海绵体磷酸化Erk1/2表达增强与ED发生有关。

关键词：细胞外信号调节激酶蛋白激酶 Erk1/2 PKB/Akt 去势阴茎海绵体勃起功能障碍 SD大鼠

雄激素对大鼠阴茎海绵体平滑肌中兰尼碱受体1和电压门控钙离子通道1.3表达的影响研究

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中华男科学杂志 2009年第10期15卷 895-900页

作者：骆华杨海帆姜睿泸州医学院附属医院泌尿外科四川泸州646000

目的:研究兰尼碱受体1(RyR1)和电压门控钙离子通道1.3(CaV1.3)在去势大鼠阴茎海绵体平滑肌的表达,探讨其在去势后勃起功能障碍发生中的作用。方法:40只8周龄雄性SD大鼠随机均分成:假手术2周组(A组),假手术4周组(B组),去势2周组(C组),去... 详细信息

目的:研究兰尼碱受体1(RyR1)和电压门控钙离子通道1.3(CaV1.3)在去势大鼠阴茎海绵体平滑肌的表达,探讨其在去势后勃起功能障碍发生中的作用。方法:40只8周龄雄性SD大鼠随机均分成:假手术2周组(A组),假手术4周组(B组),去势2周组(C组),去势4周组(D组)。术后实验各组检测血清睾酮(T)水平,免疫组化及RT-PCR技术检测RyR1和CaV1.3在大鼠阴茎海绵体平滑肌中的表达。结果:血清T水平C组[(15.97±5.67)nmol/L]和D组[(2.03±1.57)nmol/L]分别较A组[(90.54±20.13)nmol/L]和B组[(120.35±30.32)nmol/L]显著下降(P<0.05)。RyR1、CaV1.3在各组大鼠阴茎海绵体平滑肌中均有表达,RyR1 mRNA相对表达量灰度比值C组(0.51±0.24)和D组(0.33±0.15)分别较A组(1.53±0.25)和B组(1.37±0.23)显著降低(P<0.05);CaV1.3 mRNA相对表达量灰度比值C组(0.50±0.12)和D组(0.32±0.07)分别较A组(1.33±0.05)和B组(1.25±0.03)显著降低(P<0.05)。RyR1蛋白积分光密度值(IA)C组(120.36±25.78)和D组(67.39±30.54)分别较A组(300.96±135.12)和B组(330.38±128.59)显著降低(P<0.05);CaV1.3蛋白IA C组(103.37±39.52)和D组(67.56±20.15)分别较A组(298.68±126.35)和B组(327.35±117.37)显著降低(P<0.05)。雄激素水平与RyR1、CaV1.3在阴茎海绵体平滑肌中的表达水平具有正相关性。结论:雄激素可能通过RyR1、CaV1.3的表达调控阴茎勃起功能。

关键词：兰尼碱受体1 电压门控钙离子通道1.3 雄激素阴茎海绵体平滑肌

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水通道蛋白在去势大鼠精囊和前列腺的表达

中华男科学杂志 2015年第4期21卷 300-307页

作者：姜隽田锦成夏纪毅朱永生姜睿泸州医学院附属医院血管外科四川泸州646000 泸州医学院附属医院泌尿外科四川泸州646000 泸州医学院附属医院泸州医学院医学实验中心四川泸州646000

目的：探讨去势大鼠精囊和前列腺分泌液体积的变化与精囊、前列腺组织水通道蛋白（AQPs）表达的关系。方法：健康雄性SD大鼠（n=18）随机均分为对照组、去势组、雄激素替代组，建立去势大鼠模型后，测定大鼠血浆睾酮水平，分别测定精囊... 详细信息

目的：探讨去势大鼠精囊和前列腺分泌液体积的变化与精囊、前列腺组织水通道蛋白（AQPs）表达的关系。方法：健康雄性SD大鼠（n=18）随机均分为对照组、去势组、雄激素替代组，建立去势大鼠模型后，测定大鼠血浆睾酮水平，分别测定精囊和前列腺分泌液重量，Western印迹或／和免疫组化测定大鼠精囊、前列腺组织中AQP3、7、10～12的表达。结果：去势组大鼠睾酮水平[（30．98±28．84）ng／d1]较对照组[（700．78±123．8）n∥d1]和替代组[（688．08±132．47）ng/d1]显著减低（P〈0．05）；去势组前列腺液量／前列腺重量、精囊液量／精囊重量[（1．11±0．3）％，（4．78±1．97）％]较对照组[（2．32±0．61）％，（57．36±11．86）％]和替代组[（2．13±0．56）％，（55．74±7．21）％]显著降低（P〈0．05）。免疫组化发现AQP3、7分别表达于前列腺和精囊腺上皮胞膜和胞质，AQP11表达于前列腺和精囊腺血管内皮细胞胞膜和胞质；Western印迹显示AQP3、7、10—12在去势组大鼠前列腺、精囊组织中的表达分别较对照组和雄激素替代组显著降低（P〈0．05）。结论：去势大鼠前列腺液、精囊液分泌显著减少可能与前列腺、精囊组织AQP3、7、10～12的表达减少有关。

关键词：水通道精囊前列腺雄激素大鼠