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胆管癌细胞外泌体对自然杀伤细胞功能影响

中华肿瘤防治杂志 2024年第11期31卷 670-676页

作者：王新月王蔚琛张帆曹璋任乐彬王楠胡凤爱刘乃国高洪莲周洁柏雪莲滨州医学院附属医院医学研究中心山东滨州256603 滨州医学院附属医院检验科山东滨州256603 滨州医学院附属医院肝胆外科山东滨州256603 滨州医学院附属医院病理科山东滨州256603 滨州医学院附属医院产前诊断中心山东滨州256603

目的探究胆管癌细胞来源的外泌体(RbE-Exos)对自然杀伤(NK)细胞功能的影响及其内在机制。方法采用免疫组化染色对比分析NK细胞在胆管癌组织和癌旁组织中的浸润数量;通过超速离心法从胆管癌细胞中分离出外泌体,透射电镜(TEM)观察RbE-Exo... 详细信息

目的探究胆管癌细胞来源的外泌体(RbE-Exos)对自然杀伤(NK)细胞功能的影响及其内在机制。方法采用免疫组化染色对比分析NK细胞在胆管癌组织和癌旁组织中的浸润数量;通过超速离心法从胆管癌细胞中分离出外泌体,透射电镜(TEM)观察RbE-Exos的形态特征,蛋白质印迹实验鉴定RbE-Exos的蛋白标志物;纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)检测RbE-Exos粒径分布。NK-92细胞与RbE-Exos共培养后,荧光染色示踪RbE-Exos进入细胞;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹实验检测黏附分子的表达水平。LDH法检测NK-92细胞的杀伤功能变化。结果免疫组化染色显示,与癌旁组织相比,表达CD56(t=2.977,P=0.008)和NKp46(t=4.530,PbE-Exos电镜下呈酒窝或杯状,特异性表达CD63和HSP70。NTA结果显示RbE-Exos平均直径为(102.90±7.00)nm。荧光染色显示,培养24 h后RbE-Exos进入NK-92细胞。RbE-Exos处理后,NK-92细胞失去了正常的聚团现象而呈现分散的状态。qRT-PCR结果显示,RbE-Exos处理组黏附分子CD11a(t=4.999,P=0.038)、CD18(t=9.225,P=0.012)和CD54(t=12.050,P=0.007)在转录水平上的表达较PbS组均降低。蛋白质印迹实验结果表明,RbE-Exos处理组较PbS组黏附分子CD11a(t=5.140,P=0.007)、CD18(t=7.177,P=0.002)和CD54(t=8.713,PbE-Exos减弱NK-92细胞对靶细胞的杀伤功能(20∶1,t=3.975,P=0.017;10∶1,t=5.776,P=0.005)。结论胆管癌可能通过释放外泌体抑制NK细胞黏附分子表达从而抑制其在肿瘤部位的浸润。

关键词：胆管癌外泌体自然杀伤细胞肿瘤微环境免疫逃逸黏附分子

^(18)氟-氟代脱氧葡萄糖正电子发射体层摄影/CT显像联合MRI高分辨成像在局灶性皮质发育不良合并难治性癫痫中的诊断价值

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中华神经科杂志 2024年第4期57卷 326-332页

作者：党娜孙英张谷青董有文艾慧芳济宁医学院附属医院医学影像科济宁272001 济宁医学院附属医院妇产科济宁272001

目的探讨^(18)氟-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)正电子发射体层摄影(PET)/CT与MRI高分辨成像在局灶性皮质发育不良(FCD)合并难治性癫痫患者中的诊断价值及显像特点。方法回顾性分析2017年1月至2022年12月于济宁医学院附属医院就诊的42例FC... 详细信息

目的探讨^(18)氟-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)正电子发射体层摄影(PET)/CT与MRI高分辨成像在局灶性皮质发育不良(FCD)合并难治性癫痫患者中的诊断价值及显像特点。方法回顾性分析2017年1月至2022年12月于济宁医学院附属医院就诊的42例FCD合并难治性癫痫患者的临床资料,所有患者术前均行头颅^(18)F-FDG PET/CT显像及MRI高分辨成像,并对图像进行PET/MRI异机融合。采用卡方检验、Kappa一致性检验比较PET/CT、MRI、PET/MRI异机融合对患者癫痫灶的定位效能;根据患者性别、病灶部位、癫痫灶病理类型、癫痫发作类型、疗效进行分组,采用独立样本t检验、方差分析比较不同亚组间FCD合并难治性癫痫患者的最大标准摄取值(SUVmax)、放射性分布不对称指数(AI)之间的差异。结果在42例患者中,MRI、PET/CT、PET/MRI异机融合检查的阳性率分别为85.7%(36/42)、95.2%(40/42)、100.0%(42/42),致痫灶定侧率分别为71.4%(30/42)、92.9%(39/42)、95.2%(40/42),定位率分别为57.1%(24/42)、81.0%(34/42)、88.1%(37/42)。MRI与PET/CT对致痫灶的定侧率及定位率差异(χ^(2)=6.574、5.570;P=0.010、0.018)及与PET/MRI异机融合的病灶阳性率、致痫灶定侧率及定位率差异(χ^(2)=6.385、8.571、10.118;P=0.012、0.003、0.001)均有统计学意义。MRI与PET/CT的病灶阳性率及PET/CT与PET/MRI异机融合的病灶阳性率、致痫灶定侧率及定位率差异均无统计学意义(χ^(2)=2.184、2.024、0.210、0.819;P=0.139、0.155、0.647、0.365)。将PET/CT、PET/MRI异机融合显像对致痫灶的定位情况行Kappa一致性检验,得出Kappa=0.721,提示两者在致痫灶定位上较为一致。颞叶型癫痫患者的SUVmax值低于、AI值高于颞叶外型患者(分别为7.4±1.3比9.6±1.6、15.5±2.6比12.9±2.4;t=5.154、6.083;P=0.001、0.001)。疗效良好组(根据Engel疗效分级系统,Ⅰ~Ⅱ级为疗效良好)患者的SUVmax值高于、AI值低于疗效不佳组(Engel疗效分级系统,Ⅲ~Ⅳ级为疗效不佳)患者(分别为9.5±1.9比7.9±2.1、13.5±3.3比14.8±3.0;t=2.789、3.722;P=0.042、0.029)。不同性别、病理类型、发作类型患者间的SUVmax值、AI值差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论不同类型FCD合并难治性癫痫患者的影像学显像特征存在差异,PET/MRI异机融合在FCD合并难治性癫痫患者中的诊断效能优于MRI,且与PET/CT在致痫灶定位上较为一致。

关键词：局灶性皮质发育不良癫痫,难治性正电子发射断层显像术葡萄糖磁共振成像

miR-515-5p靶向ITLN2对子宫内膜基质细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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中华生殖与避孕杂志 2024年第1期44卷 44-50页

作者：刘庄孙颖王钦张琳李泽武济宁医学院附属医院生殖医学科济宁272029 济宁医学院附属医院麻醉科济宁272029

目的探讨微小RNA-515-5p(miR-515-5p)是否可靶向内凝集素2(lectin 2,ITLN2)影响子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)的增殖、迁移和侵袭。方法收集2020年12月至2021年12月期间在济宁医学院附属医院生殖医学科就诊治疗的24例EMT患者的在位内膜和异位内膜组织及18例行腹腔镜手术的非EMT患者的正常内膜组织。RT-qPCR检测内膜组织miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting法检测内膜组织中ITLN2蛋白表达量。原代分离、培养EMT患者的ESCs,利用Lipofectamine 2000试剂转染ESCs,并将其分为空白组、miR-515-5p抑制剂组、miR-515-5p抑制剂阴性对照(negative control,NC)组,CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕愈合和Transwell实验分别评估细胞迁移、侵袭能力;双荧光素酶报告基因检测miR-515-5p和ITLN2的靶向关系;RT-qPCR技术检测各组细胞miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting技术检测ITLN2、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白相对表达量。结果EMT患者在位和异位子宫内膜组织miR-515-5p相对表达量显著高于正常子宫内膜组织(均P<0.001),ITLN2 mRNA相对表达量显著低于正常子宫内膜组织,异位子宫内膜组织ITLN2 mRNA相对表达量显著低于在位子宫内膜组织(均P<0.001),EMT患者异位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于EMT在位和正常子宫内膜组织(均P<0.001),EMT患者在位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于正常子宫内膜组织(P<0.001)。miR-515-5p抑制剂组细胞存活率[(54.71±2.78)%]、划痕愈合率[(38.31±3.78)%]及侵袭数[(286.67±25.15)个]、miR-515-5p相对表达量、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白相对表达量均显著低于空白组[(100.00±0.00)%,P<0.001;(84.08±5.14)%,P<0.001;(515.67±22.19)个,P<0.001;P<0.001;P=0.012;P=0.010;P<0.001],ITLN2 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于空白组(P<0.001;P<0.001)。经生物信息学分析和双荧光素酶报告基因检测,ITLN2为miR-515-5p的潜在靶基因。结论降低miR-515-5p水平可抑制EMT患者ESCs增殖、迁移和侵袭,这可能与靶向提高ITLN2表达进而降低炎症因子水平有关。

关键词：子宫内膜异位症微小RNA-515-5p 内凝集素2 子宫内膜基质细胞增殖迁移侵袭

基于超声图像的瘤内及瘤周影像组学特征构建乳腺癌新辅助化疗效果的列线图预测模型

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中华超声影像学杂志 2024年第4期33卷 307-314页

作者：杜瑶吴萌崔广和冯晓丹刘灿刘菲菲滨州医学院附属医院超声医学科滨州256603 滨州医学院烟台附属医院两腺外科烟台264100

目的探讨基于治疗前超声图像的乳腺癌原发灶瘤内及瘤周影像组学特征联合临床病理因素构建的列线图预测模型对乳腺癌新辅助化疗(NAC)疗效的预测价值。方法回顾性选取2018年9月至2023年6月于滨州医学院附属医院接受NAC的乳腺癌患者166例,... 详细信息

目的探讨基于治疗前超声图像的乳腺癌原发灶瘤内及瘤周影像组学特征联合临床病理因素构建的列线图预测模型对乳腺癌新辅助化疗(NAC)疗效的预测价值。方法回顾性选取2018年9月至2023年6月于滨州医学院附属医院接受NAC的乳腺癌患者166例,按照7∶3比例随机分为训练集和验证集,根据术后病理结果分为病理完全缓解组和非病理完全缓解组。使用3D Slicer软件手动勾画超声图像中的病灶作为瘤内区域,半自动分割外扩5 mm获得瘤周区域;使用Pyradiomics提取影像组学特征;采用最小冗余最大相关(mRMR)与最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归筛选最优影像组学特征;通过随机森林算法分别构建瘤内、瘤周、瘤内+瘤周3种影像组学模型并获得影像组学评分。通过单因素及多因素Logistic回归分析从临床病理指标中筛选NAC效果的独立预测因素并构建临床模型。选择效能最高的影像组学评分和临床独立预测因素构建联合模型并绘制列线图。采用ROC曲线下面积(AUC)评估各模型的预测效能。结果最终分别筛选出11、6、9个最优影像组学特征构建瘤内、瘤周、瘤内+瘤周影像组学模型,3种模型在训练集和验证集的AUC分别为0.820、0.754,0.778、0.701,0.852、0.804。将ER、HER-2、Ki-67作为独立预测因素构建临床模型,训练集和验证集的AUC分别为0.802、0.855。瘤内+瘤周影像组学评分联合ER、HER-2、Ki-67构建了列线图预测模型,训练集和验证集AUC分别提高至0.908、0.883。Delong检验显示,列线图模型AUC优于3种影像组学模型和临床模型(均P<0.05),预测效能最佳。结论基于治疗前超声图像的乳腺癌原发灶瘤内+瘤周影像组学评分联合ER、HER-2、Ki-67临床病理因素构建的列线图预测模型对乳腺癌NAC疗效具有较好的预测价值,有望指导临床决策。

关键词：超声检查乳腺癌新辅助化疗影像组学瘤周

转录因子HNF1α基因c.493T>C位点突变对其蛋白质水平的影响

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遗传 2024年第3期46卷 256-262页

作者：梁淑杰彭乙华雷佳红贾艾敏蒋红蔡燕川北医学院附属医院遗传与产前诊断中心南充637000 川北医学院附属医院内分泌科南充637000 川北医学院附属医院风湿免疫研究所南充637000 川北医学院检验医学院南充637000 川北医学院转化医学研究中心南充637000

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)... 详细信息

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)3型的致病原因,目前已报道的该基因的突变位点众多,如P291fsinsC、P112L等常见的突变位点,但其具体的分子机制尚不清楚。本研究对前期工作中发现的1例携带有HNF1α基因c.493T>C位点突变的MODY3患者,通过应用Mutation Surveyor软件分析突变位点的致病性,构建HNF1α野生型和突变型真核表达质粒,采用Western blot检测两种质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性变化,结果发现Mutation Surveyor软件分析提示c.493T>C位点突变可能为致病性变异基因,Western blot显示突变型真核质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性均明显降低,差异均具有统计学意义(PC(***165Arg)变异显著影响HNF1α的表达量及稳定性,可能为其导致疾病发生的原因,为后续深入探究MODY3的分子致病机制提供了新的方向。

关键词： MODY HNF1α 基因突变

再生障碍性贫血骨髓微环境脂肪化相关lncRNA的筛选与鉴定

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中国实验血液学杂志 2024年第2期32卷 610-616页

作者：刘磊张环环张现宁刘路路陈明台济宁医学院附属医院血液科山东济宁272000 济宁医学院附属医院手术室山东济宁272000 济宁医学院附属医院医学研究中心山东济宁272000

目的:系统筛选与鉴定再生障碍性贫血(再障,AA)骨髓微环境脂肪化相关的长非编码RNA(lncRNA)。方法:通过生物信息学分析ChIPbase中PPARγ和C/EbPα的ChIP-Seq数据,筛选PPARγ和C/EbPα共转录调控的候选lncRNA,并在骨髓间充质干细胞(bM-MSC... 详细信息

目的:系统筛选与鉴定再生障碍性贫血(再障,AA)骨髓微环境脂肪化相关的长非编码RNA(lncRNA)。方法:通过生物信息学分析ChIPbase中PPARγ和C/EbPα的ChIP-Seq数据,筛选PPARγ和C/EbPα共转录调控的候选lncRNA,并在骨髓间充质干细胞(bM-MSC)的体外成脂分化模型、敲低PPARγ和C/EbPα表达的bM-MSC以及临床再障bM-MSC样本中通过qRT-PCR验证候选lncRNA的表达。结果:qRT-PCR检测结果显示,成脂分化转录因子PPARγ和C/EbPα在再障来源bM-MSC中均显著高表达,敲低二者表达可以显著抑制再障bM-MSC的成脂分化能力;PPARγ和C/EbPα以结合位点依赖性的方式转录调控LINC01230启动子活性;与对照相比,LINC01230在再障bM-MSC中异常高表达。结论:PPARγ和C/EbPα在再障bM-MSC中异常表达,可能通过转录激活LINC01230促进再障bM-MSC成脂分化,并在一定程度上介导再障骨髓微环境脂肪化的发生。

关键词：再生障碍性贫血骨髓间充质干细胞 PPARγ C/EbPα 长非编码RNA

指南内中国专家Ⅰ级推荐行F-FDG PET/CT检查淋巴瘤代谢特点

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中国医学影像技术 2024年

作者：贾启琛白静张志华高宇吴丽迎王爱辉承德医学院附属医院核医学科承德医学院附属医院放射科承德医学院附属医院血液科承德医学院附属医院内分泌科

目的观察相关指南内中国专家Ⅰ级推荐行18F-FDG PET/CT检查淋巴瘤的PET/CT代谢特点。方法回顾性分析115例接受基线18F-FDG PET/CT检查的淋巴瘤患者，根据指南推荐级别分为Ⅰ级A组[n=69，国际专家Ⅰ级推荐淋巴瘤，包括霍奇金淋巴瘤（H... 详细信息

目的观察相关指南内中国专家Ⅰ级推荐行18F-FDG PET/CT检查淋巴瘤的PET/CT代谢特点。方法回顾性分析115例接受基线18F-FDG PET/CT检查的淋巴瘤患者，根据指南推荐级别分为Ⅰ级A组[n=69，国际专家Ⅰ级推荐淋巴瘤，包括霍奇金淋巴瘤（HL）及弥漫大b细胞淋巴瘤（DLbCL）]，Ⅰ级b组[n=26，中国专家Ⅰ级推荐淋巴瘤，包括外周T细胞淋巴瘤（PTCL）、纵隔大b细胞淋巴瘤（PMbL）、伯基特淋巴瘤（bL）、高级别滤泡性淋巴瘤（FL）及淋巴母细胞白血病/淋巴瘤]及Ⅱ级组[n=20，国际专家Ⅱ级推荐淋巴瘤，包括结边缘区淋巴瘤（MZL）、套细胞淋巴瘤（MCL）、低级别FL及非胃黏膜相关淋巴瘤（MALToma）]；比较3组及两两组间PET/CT参数。结果 3组肿瘤最大标准摄取值(SUVmax)、平均标准摄取值、峰值标准摄取值、最大瘦体质量标准摄取值、平均瘦体质量标准摄取值、峰值瘦体质量标准摄取值、病灶/肝脏SUVmax及病灶/纵隔SUVmax差异均有统计学意义（P均＜0.05）；其中，Ⅱ级组与其他2组上述参数差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论指南内中国专家Ⅰ级推荐行18F-FDG PET/CT检查淋巴瘤呈高摄取，与HL及DLbCL类似而高于MZL、MCL、低级别FL和非胃MALToma。

关键词：淋巴瘤正电子发射断层显像和计算机体层摄影术氟脱氧葡萄糖F18

全氟丁烷微球介导的超声空化对大鼠急性痛风性关节炎秋水仙碱治疗的增效作用

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中华超声影像学杂志 2024年第7期33卷 609-616页

作者：张继成苟博王天瑞李妍辉文雯党万太刘健成都医学院临床医学院第一附属医院超声医学科成都610500 成都医学院临床医学院第一附属医院风湿免疫科成都610500

目的探讨超声激励全氟丁烷微球产生的空化效应能否增强秋水仙碱对大鼠急性痛风性关节炎(AGA)的治疗效果,并减少其不良反应。方法通过注射尿酸盐(MSU)晶体构建大鼠AGA模型,根据是否进行空化辐照及是否给予不同剂量的秋水仙碱将其随机分为... 详细信息

目的探讨超声激励全氟丁烷微球产生的空化效应能否增强秋水仙碱对大鼠急性痛风性关节炎(AGA)的治疗效果,并减少其不良反应。方法通过注射尿酸盐(MSU)晶体构建大鼠AGA模型,根据是否进行空化辐照及是否给予不同剂量的秋水仙碱将其随机分为A~F共6组,A组为空白对照组,b组为模型对照组,C组为空化组,D组为标准浓度药物组,E组为低浓度药物空化组,F组为标准浓度药物空化组。注射MSU后第7 h与第8 h对踝关节进行超声造影(CEUS)后计算曲线下面积(AUC),对比空化效应对大鼠踝关节血流灌注的影响。根据24 h踝关节肿胀程度和步态评分评估AGA的症状。采用HE染色法检测中性粒细胞的浸润,通过检测血浆中白细胞介素1β(IL-1β)的水平分析各组炎症反应情况;通过检测内皮一氧化氮合酶(eNOS)的浓度分析血管扩张情况;通过胃肠道反应评分分析各组不良反应程度。结果进行空化的三组(C、E、F组)CEUS血流灌注和AUC值明显高于未空化组(A、b、D组)(均P0.05),但血浆eNOS浓度高于D组(P0.05)。结论超声激励全氟丁烷微球产生的空化作用可以增强AGA大鼠踝关节血流灌注,使局部秋水仙碱的治疗效果增强,有助于减少秋水仙碱的用量,降低其不良反应。

关键词：超声激励微泡全氟丁烷微球空化效应急性痛风性关节炎秋水仙碱

基于阴囊超声参数及机器学习的中重度生精功能障碍风险评分系统的构建与验证

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中华生殖与避孕杂志 2024年第7期44卷 723-727页

作者：吴萌李学峰李鑫焱刘菲菲杨洁崔广和滨州医学院附属医院超声医学科滨州256603 滨州医学院附属医院生殖医学科滨州256603

目的建立基于阴囊超声参数及机器学习的中重度生精功能障碍风险评分系统并探讨其价值。方法回顾性队列分析2021年6月至2022年12月期间在滨州医学院附属医院生殖医学科确诊无精子症、中重度少、弱精子症患者112例及同期在本院因不孕而就... 详细信息

目的建立基于阴囊超声参数及机器学习的中重度生精功能障碍风险评分系统并探讨其价值。方法回顾性队列分析2021年6月至2022年12月期间在滨州医学院附属医院生殖医学科确诊无精子症、中重度少、弱精子症患者112例及同期在本院因不孕而就诊的116例生精功能正常男性的阴囊超声参数。分别使用随机森林、支持向量机、逻辑回归、K-最近邻算法、XGboost构建模型。综合各模型各参数的平均沙普利可加性模型解释方法值构建风险评分系统。通过受试者工作特征曲线评估模型的预测效能,临床决策曲线评估模型的临床应用价值。结果评分系统包括双侧睾丸总体积、睾丸回声是否均匀,右侧精索静脉内径及精索静脉曲张血液反流时间。风险评分系统训练集的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.757,测试集AUC为0.718,决策曲线显示该评分系统具有较高的临床价值。结论基于阴囊超声参数及机器学习建立风险评分系统可有效预测中重度生精功能障碍,对此类患者的早发现有着积极意义。

关键词：生精功能障碍机器学习 SHAP 阴囊超声