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梓醇对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞损伤的影响及机制

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中国药房 2024年第10期35卷 1220-1225页

作者：段波陈丽川马志毅喻昭刘静王进军武汉市中医医院风湿病科武汉430050

目的探究梓醇对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞损伤的影响及机制。方法将小鼠成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、模型组、空载组(转染空载质粒)、梓醇组(100μmol/L)、梓醇+叉头框蛋白O3(FoxO3)过表达组(100μmol/L梓醇+转染FoxO3过表达质粒),经梓... 详细信息

目的探究梓醇对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞损伤的影响及机制。方法将小鼠成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、模型组、空载组(转染空载质粒)、梓醇组(100μmol/L)、梓醇+叉头框蛋白O3(FoxO3)过表达组(100μmol/L梓醇+转染FoxO3过表达质粒),经梓醇和转染处理后,除对照组细胞不作处理外,其余各组细胞以H_(2)O_(2)诱导建立成骨细胞氧化应激模型。检测各组细胞活力、凋亡率、碱性磷酸酶(ALP)活性、钙结节光密度(OD)值、活性氧(ROS)的平均荧光强度(MFI)、抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]活性、炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、IL-1β]水平、FoxO3/Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组细胞活力、ALP活性、钙结节OD值、抗氧化酶活性和Wnt、β-catenin蛋白表达水平均显著降低,凋亡率、ROS的MFI、炎症因子水平和FoxO3蛋白表达水平均显著升高(P0.05),梓醇组细胞上述指标均显著逆转(P<0.05);与梓醇组比较,梓醇+FoxO3过表达组细胞上述指标的逆转效果均被显著削弱(P<0.05)。结论梓醇可通过下调FoxO3激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制H_(2)O_(2)诱导的MC3T3-E1细胞氧化应激和炎症反应,提高细胞活力与成骨分化能力,抑制细胞凋亡。

关键词：梓醇 FoxO3/Wnt/β-catenin信号通路成骨分化氧化应激炎症因子

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圣草素促进成骨细胞自噬减轻糖皮质激素诱导的细胞凋亡

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中国组织工程研究 2024年第28期28卷 4498-4504页

作者：马运锋韩小飞河南中医药大学第二附属医院(河南省中医院)骨病一科河南省郑州市450002 河南中医药大学第二附属医院(河南省中医院)风湿病科河南省郑州市450002

背景:糖皮质激素诱导的骨质疏松症是系统性糖皮质激素治疗的常见并发症,主要表现为对成骨细胞的抑制作用。圣草素可抑制破骨细胞分化和卵巢切除术引起的骨质疏松,然而,圣草素是否调节糖皮质激素诱导的成骨细胞凋亡尚不清楚。目的:探究... 详细信息

背景:糖皮质激素诱导的骨质疏松症是系统性糖皮质激素治疗的常见并发症,主要表现为对成骨细胞的抑制作用。圣草素可抑制破骨细胞分化和卵巢切除术引起的骨质疏松,然而,圣草素是否调节糖皮质激素诱导的成骨细胞凋亡尚不清楚。目的:探究圣草素是否在地塞米松诱导的成骨细胞凋亡中发挥作用,及其潜在的作用机制。方法:采用不同浓度(0,0.5,1,2.5,5,10μmol/L)的圣草素或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(5μmol/L)处理地塞米松预处理的成骨细胞MC3T3‐E1,然后用血红素加氧酶1的过表达载体(pcDNA-HMOX1)和空载体(pcDNA vector)转染MC3T3‐E1细胞。分别采用CCK-8和流式细胞术检测细胞活力和凋亡;采用ELISA检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性;采用Western blotting检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、Atg5和Atg12表达,凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达,以及AMP蛋白激活激酶(AMPK)和p-AMPK蛋白表达。结果与结论:①低浓度的圣草素对MC3T3-E1细胞无毒性,且促进细胞增殖,并以剂量依赖性的方式促进自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、Atg5和Atg12表达,降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性,抑制Bax蛋白表达,促进Bcl-2蛋白表达,减少地塞米松诱导的MC3T3-E1细胞凋亡;②此外圣草素可显著促进成骨细胞中血红素加氧酶1的表达;过表达血红素加氧酶1促进AMPK磷酸化,激活自噬,抑制地塞米松诱导的成骨细胞凋亡;③而3-甲基腺嘌呤处理抵消了血红素加氧酶1过表达对MC3T3-E1细胞的影响;④提示低浓度圣草素对成骨细胞无毒性,可以通过上调血红素加氧酶1的表达激活AMPK信号通路,从而促进自噬,抑制地塞米松诱导的成骨细胞凋亡;圣草素具有治疗糖皮质激素诱导骨质疏松症的巨大潜力。

关键词：圣草素地塞米松血红素加氧酶1 MC3T3‐E1细胞 AMPK通路

芪黄健脾滋肾颗粒改善MRL/lpr小鼠肾脏损害机制研究

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：尚双双李明黄传兵安徽中医药大学第一附属医院风湿病科

目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录因子5(IncRNA GAS5)/miR-21/软脂酰化磷蛋白（Sprouty1）轴，研究芪黄健脾滋肾颗粒（QJZ）治疗MRL/lpr小鼠肾脏损害的疗效及作用机制。方法选取10只C57BL/6雌性小鼠为对照组，40只MRL/lpr雌... 详细信息

目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录因子5(IncRNA GAS5)/miR-21/软脂酰化磷蛋白（Sprouty1）轴，研究芪黄健脾滋肾颗粒（QJZ）治疗MRL/lpr小鼠肾脏损害的疗效及作用机制。方法选取10只C57BL/6雌性小鼠为对照组，40只MRL/lpr雌性小鼠随机分为模型组、泼尼松组、QJZ组、吗替麦考酚酯组，每组10只；泼尼松组予以泼尼松溶液灌胃，QJZ组予以泼尼松+QJZ溶液灌胃，吗替麦考酚酯组予以泼尼松+吗替麦考酚酯溶液灌胃，对照组及模型组予以等量生理盐水，干预8周。二喹啉甲酸检测尿蛋白定量；ELISA检测肾损害指标[肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）]、细胞因子[白介素（IL）-1、IL-6和肿瘤相关因子（TNF-α）、免疫学指标[抗dsDNA抗体、C3、C4];HE、Masson染色、肾脏病理损伤进行活动性指数（AI）及慢性指数（CI）评分评价小鼠肾脏组织病变；RT-qPCR检测小鼠肾脏lncRNA GAS5、miR-21-5p、Sprouty1、细胞外信号调节激酶（ERK）1/2、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）基因的表达；Western Blot检测小鼠肾脏Sprouty1、ERK1/2、CREB蛋白的表达。结果病理结果显示，模型组小鼠肾脏出现大量炎症、不同程度纤维化、系膜区细胞过度增殖等病理改变，AI与CI评分升高（P<0.01）。与模型组比较，QJZ能改善小鼠肾脏病理病变，降低AI与CI评分（P<0.01）；降低尿蛋白、SCr、BUN(P<0.01)，降低抗dsDNA抗体，升高补体C3、C4，降低细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α水平（P<0.01）。与对照组比较，模型小鼠肾脏中GAS5的表达降低，miR-21-5p的表达升高，Sprouty1的表达下降（P<0.01）,ERK/CREB通路的磷酸化水平升高（P<0.01）。与模型组比较，QJZ能够上调GAS5、下调miR-21-5p、上调Sprouty1的表达（P<0.01），抑制ERK/CREB通路的磷酸化（P<0.01）。结论 QJZ可能通过lncRNA GAS5/miR-21-5p/Sprouty1信号轴，抑制ERK/CREB通路磷酸化，抑制肾小球系膜细胞增殖，减少炎症因子产生，改善系统性红斑狼疮肾脏损害。

关键词： MRL/lpr小鼠肾损害肾小球系膜细胞增殖芪黄健脾滋肾颗粒中药复方

基于硬皮病线粒体相关基因的人工神经网络模型的构建

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南方医科大学学报 2024年第5期44卷 920-929页

作者：左志威孟庆良崔家康郭克磊卞华河南中医药大学骨伤学院//河南省中医院风湿病科河南郑州450008 南阳理工学院河南省张仲景方药与免疫调节重点实验室河南南阳473004

目的建立基于GEO数据库硬皮病线粒体相关基因的机器学习和人工神经网络联合诊断模型并评价其效果。方法通过GEO数据库获取3份硬皮病芯片。其中GSE95065及GSE59785合并作为实验数据集并提取线粒体相关基因表达量,使用随机森林、LASSO回归... 详细信息

目的建立基于GEO数据库硬皮病线粒体相关基因的机器学习和人工神经网络联合诊断模型并评价其效果。方法通过GEO数据库获取3份硬皮病芯片。其中GSE95065及GSE59785合并作为实验数据集并提取线粒体相关基因表达量,使用随机森林、LASSO回归和SVM算法筛选硬皮病线粒体相关特征基因,并用特征基因构建人工神经网络模型,用10折交叉验证模型准确性。来用验证数据集GSE76807对模型进一步验证,利用ROC曲线下面积值评估模型准确性。用RT-qPCR实验验证关键基因mRNA相对表达量。最后用CIBERSORT算法预估硬皮病与筛选出的潜在生物标志物的生物信息学关联。结果共获取差异基因24个,其中上调基因11个,下调基因13个。通过3种机器学习算法筛选到最相关的7个线粒体相关特征基因(POLB、GSR、KRAS、NT5DC2、NOX4、IGF1、TGM2),并构建人工神经网络诊断模型。使用该模型绘制了实验组和验证组诊断的ROC曲线,AUC值为0.984。验证组AUC为0.740。10折交叉验证AUC平均值大于0.980。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,硬皮病中POLB(P=0.004)、GSR(P=0.029)、KRAS(P=0.007)、NOX4(P=0.019)、IGF1(P=0.008)、TGM2(P<0.0001)表达量明显上调,而NT5DC2(P=0.001)表达量在硬皮病组中明显下调。免疫细胞浸润显示,特征基因与滤泡辅助T细胞、幼稚B细胞、静息树突状细胞、记忆激活CD4+T细胞、巨噬细胞M0、单核细胞、记忆静息CD4+T细胞和肥大细胞激活等相关。结论构建了硬皮病特征基因的人工神经网络诊断模型,为探索硬皮病发病机制提供了一个新视角。

关键词：硬皮病线粒体人工神经网络免疫细胞浸润机器学习

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超重和肥胖对纤维肌痛综合征患者症状、整体病情及生活质量的影响

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北京大学学报(医学版) 2024年

作者：龙梅娟王怡丹武诗雅李梓豪李延婷李阳焦娟中国中医科学院广安门医院风湿病科

目的：探索超重和肥胖对中国纤维肌痛综合征（fibromyalgia syndrome，FMS）患者的症状严重程度和生活质量的影响。方法：采用横断面调查的研究方法采集2018年10月至2021年12月就诊于广安门医院风湿病科门诊435例FMS患者的身高、体重、... 详细信息

目的：探索超重和肥胖对中国纤维肌痛综合征（fibromyalgia syndrome，FMS）患者的症状严重程度和生活质量的影响。方法：采用横断面调查的研究方法采集2018年10月至2021年12月就诊于广安门医院风湿病科门诊435例FMS患者的身高、体重、性别和年龄等一般资料数据，压痛点个数、普遍疼痛指数及症状严重性量表作为疾病诊断指标，疼痛视觉模拟评分、贝克（Beck）抑郁量表、压力感知量表（perceived stress scale，PSS），匹兹堡睡眠质量指数（Pittsburg sleep quality index，PSQI）及多维疲劳量表用于评估疾病疼痛及负性情绪、压力感知、睡眠质量、疲劳症状的严重程度，采用修订版纤维肌痛影响问卷、纤维肌痛症状量表（fibromyalgia severity，FS）以及生活质量评价量表（36 item short-form health survey，SF-36）评价FMS患者的整体病情及生活质量。同时招募50例性别和年龄匹配的健康志愿者作为对照组，并采用协方差分析在校正年龄和性别的基础上探索超重和肥胖对FMS患者的影响。结果：采用中国体重指数（body mass index，BMI）标准，正常体重组和超重和肥胖组FMS患者分别有242例（59%）和170例（41%），平均BMI分别为（21.66±1.42） kg/m2和（26.25±1.83） kg/m2。与正常体重的FMS患者相比，超重和肥胖患者的PSS评分（P=0.010）、PSQI子维度睡眠效率评分（P＜0.001）及FS评分（P=0.025）均更高，SF-36量表子维度的生理机能评分（P=0.041）更低；而健康对照组正常体重者与超重和肥胖者以上指标相比差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：相较于正常体重FMS患者，超重和肥胖患者压力感知水平更高、睡眠效率更低、纤维肌痛症状严重程度更高，同时表现为以生理机能下降为主的低水平生活质量。由此可见，FMS患者积极控制体重将有助于改善睡眠效率和心理状态、提高生理机能，并减轻整体病情。

关键词：纤维肌痛综合征慢性疼痛体重减重

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冬病夏治三联疗法治疗阳虚型寒痹验案1例

风湿病与关节炎 2024年第8期13卷 31-34页

作者：潘宏伟王颂歌袁静河南风湿病医院河南郑州450045

寒痹又称痛痹,是因寒邪为主导致的肢体关节经脉痹阻不通,出现以肢体关节冷痛、遇冷加重、得热痛减为临床特征的一类风湿病。根据寒痹的定义,历代医家将与寒邪相关的痹病统归为“寒痹”,因而寒痹有多种病名。《灵枢·寿夭刚柔第六》中有... 详细信息

寒痹又称痛痹,是因寒邪为主导致的肢体关节经脉痹阻不通,出现以肢体关节冷痛、遇冷加重、得热痛减为临床特征的一类风湿病。根据寒痹的定义,历代医家将与寒邪相关的痹病统归为“寒痹”,因而寒痹有多种病名。《灵枢·寿夭刚柔第六》中有:“寒痹之为病也,留而不去,时痛而皮不仁。”直至明清之后,寒痹的病名逐渐统一。寒痹与痛痹含义相同,寒痹指病之因,痛痹指病之状[1]。阳虚型寒痹是临床中比较常见的一种证型,其临床表现多具有痹病日久不愈、肢体关节怕风怕冷、遇冷痛甚的特征,阳气不足时,更易受到寒邪侵袭,加重怕风怕冷症状[2]。

关键词：寒痹阳虚型冬病夏治三联疗法虚邪瘀医案

基于“虚邪瘀”理论对河南风湿病医院类风湿关节炎数据库研究结论的初步总结

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风湿病与关节炎 2024年第7期13卷 77-80页

作者：李云龙王亚静娄玉钤河南风湿病医院河南郑州450045

根据娄多峰教授“虚邪瘀”理论对河南风湿病医院类风湿关节炎数据库的研究结论进行分析、总结,发现类风湿关节炎的有些表现临床意义与传统认识不一致,如口干、盗汗不能作为阴虚证的关键指标,关节热痛不能作为热痹的关键指标,关节遇冷痛... 详细信息

根据娄多峰教授“虚邪瘀”理论对河南风湿病医院类风湿关节炎数据库的研究结论进行分析、总结,发现类风湿关节炎的有些表现临床意义与传统认识不一致,如口干、盗汗不能作为阴虚证的关键指标,关节热痛不能作为热痹的关键指标,关节遇冷痛增不能作为寒痹的关键指标,“上肢多风下肢多湿”“春季多风,秋季多燥”,及冬季发病与夏季发病不能作为中医辨证依据。同时也验证与传统认识一致的表现,如腰膝酸软是肝肾不足证的关键表现,游走痛可以作为风邪的关键指标,阴雨天加重的患者数量更多、病程更长、病情更重,冬季加重是典型的临床表现,伴有足部肿胀患者症状更为严重,生气后加重患者容易形成虚、邪、瘀三个方面胶着难解的顽痹,活动后减轻的患者晨僵更明显。

关键词：类风湿关节炎 HFRA数据库虚邪瘀结论总结综述

尪痹胶囊治疗活动性类风湿关节炎多中心、随机双盲、平行对照研究

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中国中西医结合杂志 2024年第1期44卷 44-48页

作者：吴金联苏励黄清春王薇萍苏晓王勇翟付明刘雅文上海中医药大学附属龙华医院风湿免疫科上海200032 广东省中医院风湿病科广州510006 上海市光华中西医结合医院风湿病科上海200052 上海市中医医院风湿病科上海200071 华润三九医药股份有限公司广东518110

目的观察尪痹胶囊治疗活动性类风湿关节炎(RA)的临床疗效和安全性。方法招募的114例活动性RA患者中,101例符合纳入标准,采用区组随机化方法,分别按中心分层,选取段长为2,借助SAS9.4软件PROC PLAN过程语句,给定种子数,将受试者以1:1随机... 详细信息

目的观察尪痹胶囊治疗活动性类风湿关节炎(RA)的临床疗效和安全性。方法招募的114例活动性RA患者中,101例符合纳入标准,采用区组随机化方法,分别按中心分层,选取段长为2,借助SAS9.4软件PROC PLAN过程语句,给定种子数,将受试者以1:1随机分入治疗组(52例)和对照组(49例),治疗组给予尪痹胶囊+甲氨蝶呤(MTX),对照组给予尪痹胶囊模拟剂+MTX治疗,疗程12周。通过比较治疗前后的基于血沉(ESR)的28个关节疾病活动评分(DAS28-ESR)、基于C反应蛋白(CRP)的28个关节疾病活动评分(DAS28-CRP)、DAS28-ESR缓解率、DAS28-CRP缓解率、ESR、CRP、类风湿因子(RF)和抗环瓜氨酸抗体(ACPA)、患者视觉模拟评分(VAS)、医生VAS评分、关节疼痛数、关节肿胀数、健康评定问卷(HAQ)评分和中医证候积分等指标评估尪痹胶囊的疗效,通过观察安全性指标和不良反应评估尪痹胶囊安全性。结果101例患者治疗过程中脱落5例,最终纳入分析96例,治疗组49例,对照组47例。与本组治疗前比较,两组治疗后DAS28-CRP、患者VAS评分、医生VAS评分、关节压痛数、关节肿胀数、HAQ评分及中医证候积分均下降(P<0.05);治疗组CRP、DAS28-ESR评分下降更明显(P<0.05)。与对照组治疗后比较,治疗组DAS28-ESR及中医证候积分下降更明显(P<0.05)。结论尪痹胶囊联用MTX治疗活动性RA较单用MTX临床疗效更好,安全性良好(中国临床试验注册中心,***1900026079)。

关键词：类风湿关节炎尪痹胶囊甲氨蝶呤临床疗效和安全性随机双盲、平行对照研究中西医结合

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中药汤剂治疗膝骨关节炎的研究进展

风湿病与关节炎 2024年第9期13卷 72-76页

作者：李云龙冯文杰河南风湿病医院河南郑州450045

中药汤剂是我国应用最早、最广泛的一种剂型,采用中医辨证论治,制备简单易行,吸收快,能迅速发挥药效。中药汤剂治疗膝骨关节炎(骨痹)有两千多年的历史,中医辨证认为正虚是骨痹的主要病因病机,外邪是其发生的重要条件,瘀血、痰浊、气滞... 详细信息

中药汤剂是我国应用最早、最广泛的一种剂型,采用中医辨证论治,制备简单易行,吸收快,能迅速发挥药效。中药汤剂治疗膝骨关节炎(骨痹)有两千多年的历史,中医辨证认为正虚是骨痹的主要病因病机,外邪是其发生的重要条件,瘀血、痰浊、气滞是其重要病理产物。搜集近年来中药汤剂治疗膝骨关节炎相关文献发现,膝骨关节炎的治疗可分为补肝肾为主、祛邪为主、活血化瘀为主三类,与娄多峰教授的“虚邪瘀”治痹理论相符。

关键词：膝骨关节炎骨痹中药汤剂综述