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西达本胺联合PD-1抑制剂对结直肠癌小鼠CD8+T细胞抗肿瘤功能的影响

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解放军医学杂志 2024年第1期49卷 99-107页

作者：董亮李祥高志涛贾慧婕赵铁锁新乡医学院基础医学院免疫学系河南新乡453003 解放军总医院第一医学中心生物治疗科北京100853 新乡医学院检验学院河南新乡453003

目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂西达本胺联合程序性死亡受体-1(PD-1)抑制剂对结直肠癌小鼠模型(MC38-OVA)中CD8^(+)T细胞抗肿瘤功能的影响。方法动物实验:采用背部皮下注射法构建MC38-OVA结直肠癌小鼠模型。将MC38-OVA荷瘤小鼠... 详细信息

目的探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂西达本胺联合程序性死亡受体-1(PD-1)抑制剂对结直肠癌小鼠模型(MC38-OVA)中CD8^(+)T细胞抗肿瘤功能的影响。方法动物实验:采用背部皮下注射法构建MC38-OVA结直肠癌小鼠模型。将MC38-OVA荷瘤小鼠随机分为对照组、西达本胺组、anti-PD-1组、西达本胺^(+)anti-PD-1组,每组20只。观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况及存活率;采用流式细胞仪检测小鼠肿瘤微环境中CD8^(+)T细胞、CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞、OVA抗原特异性CD8^(+)T细胞的数量及比例,以及肿瘤组织内调节性T细胞(Treg)、髓系衍生抑制细胞(MDSC)、肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的表达变化。细胞实验:采用流式细胞仪检测0、10、25、50、100、200 nmol/L西达本胺处理的CD8^(+)T细胞及MC38-OVA肿瘤细胞的凋亡情况。采用流式细胞计数法及Ki-67抗体标记法检测0、100 nmol/L西达本胺处理的CD8^(+)T细胞及MC38-OVA肿瘤细胞的增殖情况。取CD8^(+)T细胞,设置对照组、西达本胺组、anti-PD-1组与西达本胺^(+)anti-PD-1组,与MC38-OVA肿瘤细胞按预设效靶比共培养,采用流式细胞仪检测CD8^(+)T细胞的杀伤能力。经0、100 nmol/L西达本胺处理的CD8^(+)T细胞与相同数量的MC38-OVA肿瘤细胞共培养,采用流式细胞仪检测CD107a的表达情况。结果荷瘤小鼠肿瘤生长及生存分析结果显示,与对照组比较,西达本胺^(+)anti-PD-1组荷瘤小鼠肿瘤生长明显受抑(P<0.05),生存率明显增高(P<0.01)。西达本胺组、anti-PD-1组、西达本胺^(+)anti-PD-1组肿瘤浸润CD8^(+)T细胞比例及数量明显高于对照组(P<0.05)。西达本胺^(+)anti-PD-1组CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞、OVA抗原特异性CD8^(+)T细胞比例及数量明显高于对照组、西达本胺组、anti-PD-1组(P<0.05)。体外实验显示,西达本胺可增强CD8^(+)T细胞的杀伤能力及CD107a的表达(P<0.05)。结论西达本胺联合PD-1抑制剂可明显增强瘤内浸润CD8^(+)T细胞的数量及功能,诱导抗原特异性CD8^(+)T细胞数量增多,减轻小鼠肿瘤负荷。

关键词： T淋巴细胞免疫检查点抑制剂程序性死亡受体-1 西达本胺

混合式教学模式下影响学生学科成绩的因素分析——以医学免疫学课程为例

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中国免疫学杂志 2024年第4期40卷 828-831页

作者：解博红张国俊孙爱平赵铁锁杨子善许芝山谷妍蓉宋向凤新乡医学院基础医学院免疫学系新乡453003 新乡医学院检验学院新乡453003

随着信息技术快速发展,混合式教学模式逐渐成为多数高校的主流教学模式。如何评价学生的学习成效,分析影响学生成绩的因素,是该教学模式的重点研究方向。本文以新乡医学院医学免疫学课程混合式教学为例,介绍混合式教学的实施过程和评价... 详细信息

随着信息技术快速发展,混合式教学模式逐渐成为多数高校的主流教学模式。如何评价学生的学习成效,分析影响学生成绩的因素,是该教学模式的重点研究方向。本文以新乡医学院医学免疫学课程混合式教学为例,介绍混合式教学的实施过程和评价体系,分析影响学生成绩和学习成效的主要因素,着重探讨形成性评价和“翻转课堂”对学生学科成绩的影响。

关键词：混合式教学学习成效影响因素

在flashBAC杆状病毒表达系统中制备人GⅡ.4型诺如病毒样颗粒

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微生物学报 2024年第10期 3798-3808页

作者：刘志鹏肖锦宁段良伟王琼梓王向鹏新乡医学院医学技术学院河南省免疫与靶向药物重点实验室新乡医学院第三附属医院检验科

【目的】人诺如病毒(human norovirus, HuNoV)是全球范围内引起人急性胃肠炎的主要病原之一，目前尚无有效的疫苗对该病毒进行预防。本研究旨在利用flashBAC杆状病毒表达系统，制备HuNoV病毒样颗粒(virus-like particles, VLP)，为研发H... 详细信息

【目的】人诺如病毒(human norovirus, HuNoV)是全球范围内引起人急性胃肠炎的主要病原之一，目前尚无有效的疫苗对该病毒进行预防。本研究旨在利用flashBAC杆状病毒表达系统，制备HuNoV病毒样颗粒(virus-like particles, VLP)，为研发HuNoV疫苗奠定基础。【方法】将GⅡ.4型HuNoV的VP1蛋白全长基因序列进行密码子优化后合成，克隆至杆状病毒pBacPAK9转移载体，获得pBacPAK9-8his-VP1重组质粒。酶切、测序鉴定正确后将重组质粒与线性baculovirus plasmid (Bacmid)共转染SF9细胞，获得含有VP1基因的重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Hi-Five(HF)细胞进行表达，利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)和Western blotting分析VP1蛋白的表达。用镍柱亲和层析方法纯化VP1蛋白；对纯化后的VP1蛋白进行SDS-PAGE和Western blotting检测。使用高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)对纯化的VP1蛋白进行纯度鉴定。利用透射电镜观察VLP。【结果】构建了pBacPAK9-8his-VP1重组质粒，VP1蛋白在HF细胞中主要在细胞质内表达，分子量约为58 kDa。HPLC结果显示VP1蛋白纯度大于99%，透射电镜可以观察到形状规则、大小均一、直径约为30-40 nm的VLP。【结论】利用杆状病毒表达系统制备了GⅡ.4型HuNoV的VLP，为HuNoV疫苗的研发奠定了基础。

关键词：人诺如病毒 VP1蛋白杆状病毒表达系统病毒样颗粒

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二甲双胍与三氧化二砷对KG1a细胞增殖的抑制作用

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中国实验血液学杂志 2024年第1期32卷 66-70页

作者：黄李文惠刘萌桂淑敏冯明明刘慧司晓慧牛新清新乡医学院医学技术学院河南省免疫与靶向药物重点实验室河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心河南新乡453003

目的:探讨二甲双胍协同三氧化二砷对急性髓系白血病KG1a细胞增殖的影响及其可能的机制。方法:采用CCK-8法检测二甲双胍、三氧化二砷以及联合应用对KG1a细胞的杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测应用二甲双胍协同三氧化二砷... 详细信息

目的:探讨二甲双胍协同三氧化二砷对急性髓系白血病KG1a细胞增殖的影响及其可能的机制。方法:采用CCK-8法检测二甲双胍、三氧化二砷以及联合应用对KG1a细胞的杀伤作用;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测应用二甲双胍协同三氧化二砷对KG1a细胞凋亡的影响;Western blot检测胞内凋亡、自噬相关蛋白的表达。结果:二甲双胍与三氧化二砷联合及单独应用均可抑制KG1a细胞增殖,诱导KG1a细胞凋亡,联合用药组增殖抑制率及凋亡率高于单独用药组(P<0.05)。联合用药诱导KG1a细胞中Caspase 8和P62蛋白表达上调且高于单药组(P<0.05)。结论:二甲双胍能协同三氧化二砷杀伤KG1a细胞,其作用机制可能与诱导凋亡和增强自噬有关。

关键词：三氧化二砷二甲双胍急性髓系白血病 Caspase 8 P62

乳腺癌组织中PXMP4的表达及其对乳腺癌细胞生物学行为的影响

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临床与实验病理学杂志 2024年第9期40卷 923-930页

作者：李巍张静雨布海霞陈庆庆孙许朋千新来贺国洋新乡医学院法医学院新乡453003 新乡医学院基础医学院新乡453003 新乡医学院第三附属医院病理科新乡453003

目的探讨乳腺癌组织中过氧化物酶体膜蛋白4(peroxisomal membrane protein 4, PXMP4)的表达及其对乳腺癌细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响。方法采用生物信息学和免疫组化分析乳腺癌组织... 详细信息

目的探讨乳腺癌组织中过氧化物酶体膜蛋白4(peroxisomal membrane protein 4, PXMP4)的表达及其对乳腺癌细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响。方法采用生物信息学和免疫组化分析乳腺癌组织中PXMP4的表达。在乳腺癌细胞中干扰或过表达PMXP4后,Western blot分析细胞Cyclin D1、E-cadherin、vimentin及N-cadherin的表达。利用CCK-8和平板克隆实验分析乳腺癌细胞的增殖能力。划痕愈合和Transwell分析乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。利用慢病毒构建PXMP4沉默的MCF-7细胞系,裸鼠皮下和尾静脉注射PXMP4沉默的MCF-7细胞,观察皮下瘤和肺转移数量。结果生物信息学和免疫组化分析显示乳腺癌组织中PXMP4表达水平显著升高(P<0.05),且PXMP4表达高的乳腺癌患者预后不良(P<0.05)。临床病理分析发现PXMP4的表达与肿瘤分级和淋巴结转移相关(P<0.05)。细胞实验显示:干扰PXMP4抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和EMT进程(P<0.05);反之,过表达PXMP4促进乳腺癌细胞增殖、侵袭及EMT进程(P<0.05)。裸鼠体内实验显示:PXMP4沉默后,肺转移瘤数目、皮下肿瘤的大小及组织中Ki67的表达显著降低(P<0.05)。结论 PXMP4的表达与乳腺癌肿瘤分级及淋巴结转移相关,且PXMP4促进乳腺癌细胞增殖、侵袭和EMT进程。

关键词：乳腺癌 PXMP4 EMT 增殖侵袭转移

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钆塞酸二钠增强MRI的LI-RADS征象术前预测GPC3阳性肝细胞癌及术后复发的研究

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中华放射学杂志 2024年第1期58卷 64-70页

作者：张宁武明辉于长江周怡然王聪师丹丹朱绍成新乡医学院河南省人民医院影像科新乡453003 河南省人民医院影像科郑州450003

目的探讨基于肝胆特异性对比剂钆塞酸二钠增强肝脏影像报告和数据系统2018版(LI-RADS v2018)影像征象预测磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)阳性肝细胞癌(HCC)的效能,评估GPC3阳性HCC患者术后复发的相关临床影像学特征。方法本研究为队列研究,... 详细信息

目的探讨基于肝胆特异性对比剂钆塞酸二钠增强肝脏影像报告和数据系统2018版(LI-RADS v2018)影像征象预测磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)阳性肝细胞癌(HCC)的效能,评估GPC3阳性HCC患者术后复发的相关临床影像学特征。方法本研究为队列研究,回顾性收集2017年1月至2021年12月在河南省人民医院行钆塞酸二钠增强MRI并接受肝肿瘤切除术的122例HCC患者,GPC3阳性患者96例,GPC3阴性患者26例。分析HCC病灶的LI-RADS v2018定义的影像学征象。对患者进行为期40个月的随访,确定无复发生存期(RFS)。采用logistic回归分析确定GPC3阳性的危险因素,构建影像模型,并联合患者甲胎蛋白水平,构建临床-影像模型。使用受试者操作特征曲线评估模型预测GPC3阳性的效能。以Kaplan-Meier法绘制生存曲线,log-rank检验用于比较GPC3阳性与阴性患者的RFS。以Cox回归评估影响GPC3阳性HCC复发的危险因素。结果logistic多因素回归结果显示晕环状强化(OR=5.685,95%CI 1.229~26.287,P=0.026)、肝胆期肿瘤边缘不规则突起(OR=4.431,95%CI 1.684~11.663,P=0.003)为GPC3阳性的独立危险因素,影像模型预测GPC3阳性的曲线下面积(AUC)为0.745(95%CI 0.636~0.854),临床-影像模型的AUC为0.776(95%CI 0.677~0.876)。GPC3阳性组平均RFS为22个月,阴性组平均RFS为32个月,差异有统计学意义(χ^(2)=5.15,P=0.023)。多因素Cox回归分析结果表明动脉期周边高强化(HR=5.460,95%CI 1.966~15.162,P=0.001)、微血管浸润(HR=2.402,95%CI 1.210~4.769,P=0.012)、门静脉癌栓(HR=3.226,95%CI 1.114~9.344,P=0.031)是GPC3阳性HCC肝肿瘤切除术后复发的独立危险因素。结论基于肝胆特异性对比剂钆塞酸二钠增强LI-RADS v2018影像学征象构建的模型可有效预测GPC3阳性HCC,动脉期周边高强化、微血管浸润、门静脉癌栓是GPC3阳性HCC术后复发的独立危险因素。

关键词：癌,肝细胞磁共振成像磷脂酰肌醇蛋白聚糖类肝脏影像报告与数据系统

ZWINT和CDK2在乳腺癌中的表达及与临床病理特征的关系和诊断价值

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新医学 2024年第1期55卷 5-11页

作者：张芳芳韩一菲王靖楠邹炎应莉李娜河南省新乡医学院第三附属医院新乡453003 河南省新乡医学院病理学系新乡453003 河南省新乡医学院三全学院新乡453003

目的探讨ZW10结合因子(ZWINT)和细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)的相关性及其在乳腺癌病理诊断中的价值。方法通过GEPIA数据库分析ZWINT在乳腺癌和正常乳腺组织之间的表达差异,以及在乳腺癌中ZWINT和CDK2表达的相关性。通过Kaplan-Meier Pl... 详细信息

目的探讨ZW10结合因子(ZWINT)和细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)的相关性及其在乳腺癌病理诊断中的价值。方法通过GEPIA数据库分析ZWINT在乳腺癌和正常乳腺组织之间的表达差异,以及在乳腺癌中ZWINT和CDK2表达的相关性。通过Kaplan-Meier Plotter数据库预测ZWINT的表达与乳腺癌患者预后的关系。收集84例乳腺癌及其配对癌旁组织石蜡包埋病理标本和20例乳腺癌及其配对的癌旁组织新鲜标本,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫组织化学检测乳腺癌和癌旁正常乳腺组织中ZWINT和CDK2的mRNA及蛋白的表达,分析ZWINT和CDK2与乳腺癌临床病理特征的关系,并采用关联分析分析ZWINT和CDK2的相关性;采用受试者操作特征(ROC)曲线评估ZWINT和CDK2在乳腺癌病理诊断中的价值。结果数据库分析结果显示,ZWINT在乳腺癌组织中高表达,在乳腺癌中ZWINT和CDK2的表达呈正相关(r_(s)=0.600,P系数检验的关联程度相同,为0.322(P=0.003),而列联系数为0.306(P=0.003),ZWINT蛋白和CDK2蛋白表达密切相关。ZWINT和CDK2的ROC曲线的曲线下面积分别为0.886和0.818,对乳腺癌均具有较高的诊断价值。结论ZWINT和CDK2与乳腺癌的发生发展及预后相关,检测ZWINT和CDK2有助于乳腺癌的病理诊断。

关键词：乳腺癌 ZW10结合因子细胞周期蛋白依赖激酶2 临床病理特征诊断价值

CDC20通过稳定NLRP3的表达促进食管癌细胞增殖的研究

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中国癌症杂志 2024年第5期34卷 473-484页

作者：关瑞瑞郝茜张雅琦孙庆港陈怡恬李秀敏周祥韩涛新乡医学院健康中原研究院新乡市分子癌学重点实验室河南新乡453003 新乡医学院第三附属医院消化内科河南新乡453003 复旦大学附属肿瘤医院肿瘤研究所复旦大学上海医学院肿瘤学系上海200032 新乡医学院基础医学院河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院消化内科河南新乡453003

背景与目的:食管癌(esophageal carcinoma,ESCA)是死亡率较高的恶性肿瘤之一,其发生、发展的机制不明。CDC20被认为具有癌基因功能,其表达失调与肿瘤的发生、发展密切相关。CDC20在多种肿瘤中表达升高,敲低CDC20能够抑制肿瘤细胞增殖。N... 详细信息

背景与目的:食管癌(esophageal carcinoma,ESCA)是死亡率较高的恶性肿瘤之一,其发生、发展的机制不明。CDC20被认为具有癌基因功能,其表达失调与肿瘤的发生、发展密切相关。CDC20在多种肿瘤中表达升高,敲低CDC20能够抑制肿瘤细胞增殖。NLRP3是炎症小体的主要成分之一,炎症小体失调与肿瘤的发生、发展也密切相关。本研究旨在探究CDC20是否通过NLRP3促进ESCA细胞增殖,同时分析其调控机制。方法:通过癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和GTEx公共数据库分析ESCA患者中CDC20和NLRP3基因的表达水平。收集新乡医学院第一附属医院收治的80例ESCA患者的临床病理学资料和组织,通过免疫组织化学染色检测NLRP3在ESCA患者中的蛋白表达水平。本研究通过新乡医学院第一附属医院伦理委员会的审批(编号:EC-021-137)。通过短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)技术检测敲低CDC20和NLRP3基因后对食管鳞状细胞癌细胞系EC9706和KYSE150增殖能力的影响。通过免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)、蛋白酶体抑制剂和泛素化实验检测CDC20是否与NLRP3相互作用,以及阐明CDC20是否通过泛素化途径调控NLRP3表达。结果:TCGA数据库分析结果显示,ESCA组织中CDC20和NLRP3 mRNA表达水平明显高于癌旁组织。免疫组织化学结果也进一步显示,与癌旁组织相比,CDC20、NLRP3在ESCA组织中蛋白表达水平升高。敲低CDC20和NLRP3基因可抑制ESCA细胞增殖。Co-IP、蛋白酶体抑制剂和泛素化实验证实CDC20通过NLRP3的LRR区与NLRP3相互作用,且CDC20通过促进NLRP3泛素化稳定其表达。结论:CDC20和NLRP3在ESCA癌组织中表达上调,且CDC20通过泛素化NLRP3稳定其表达,从而促进ESCA细胞增殖,提示CDC20和NLRP3可能是ESCA潜在的诊断靶向标志物。

关键词：食管癌 CDC20 NLRP3 泛素化增殖

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基于政策工具的河南省医养结合政策文本分析

中国卫生事业管理 2024年第2期41卷 225-230页

作者：郭跃伟毛君王明永苗志卜勇军张慕洋新乡医学院医学人文学院河南新乡453003 新乡医学院卫生健康管理学院商丘医学高等专科学校新乡医学院第三附属医院新乡医学院公共卫生学院

目的:选取2016~2023年河南省医养结合政策文本为研究对象,研究分析政策文本内容的特征及不足,提出合理化建议,为完善河南省医养结合政策体系提供参考。方法:以政策工具为视角,结合参与主体维度构建二维分析框架,采用内容分析法对27个政... 详细信息

目的:选取2016~2023年河南省医养结合政策文本为研究对象,研究分析政策文本内容的特征及不足,提出合理化建议,为完善河南省医养结合政策体系提供参考。方法:以政策工具为视角,结合参与主体维度构建二维分析框架,采用内容分析法对27个政策文本进行分析,得到有效编码172条。结果:政策工具结构不平衡,供给型政策工具占29%,需求型政策工具占8%,环境型政策工具占63%;参与主体分布不均衡,政府参与占61%,养老机构参与占8%,医疗卫生机构参与占16%,社会组织参与占12%,健康产业参与占3%。结论:河南省医养结合政策内容丰富、层次鲜明、目标清晰,但政策工具结构不平衡、参与主体分布不均衡,要优化政策工具间结构、协调各参与主体在政策工具中分布、加强各参与主体在各个政策工具中的交互协作,促进河南省医养结合政策发展。

关键词：医养结合政策工具参与主体内容分析法