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长链非编码RNA TUG1对宫颈癌细胞放射敏感性的影响

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中华放射肿瘤学杂志 2024年第5期33卷 454-460页

作者：王亚茹张冬丽曲长萍河南大学淮河医院妇产科开封475000

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)通过调控自噬对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法构建放射抵抗的宫颈癌细胞株HeLa/IR和SiHa/IR。用细胞克隆形成实验评估HeLa/IR和SiHa/IR细胞的放射敏感性;实时反转录PC... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)通过调控自噬对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法构建放射抵抗的宫颈癌细胞株HeLa/IR和SiHa/IR。用细胞克隆形成实验评估HeLa/IR和SiHa/IR细胞的放射敏感性;实时反转录PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中lncRNA TUG1的表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞中自噬蛋白Beclin1、微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、p62的表达。将NC-siRNA、TUG1-siRNA、TUG1-siRNA+雷帕霉素(自噬激活剂)转染至HeLa/IR和SiHa/IR细胞,分别命名为NC-siRNA组、TUG1-siRNA组、TUG1-siRNA+雷帕霉素组。用RT-qPCR检测lncRNA TUG1的转染效率;Western blot检测沉默lncRNA TUG1对自噬蛋白表达的影响;流式细胞术分别检测沉默lncRNA TUG1对HeLa/IR和SiHa/IR细胞增殖能力和凋亡的影响。采用t检验分析两组之间的差异,单因素方差分析进行多组间的比较。结果与HeLa、SiHa细胞比较,HeLa/IR、SiHa/IR细胞的存活分数显著升高,细胞中lncRNA TUG1的表达均显著升高,自噬蛋白Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达均明显升高,p62蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与NC-siRNA组比较,TUG1-siRNA组HeLa/IR、SiHa/IR细胞中lncRNA TUG1的表达、细胞活力明显降低,细胞凋亡率明显升高,Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达明显降低,p62蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与TUG1-siRNA组比较,TUG1-siRNA+雷帕霉素组HeLa/IR细胞中Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达均明显升高,p62蛋白表达明显降低,细胞活力明显降低,细胞凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默lncRNA TUG1可通过调节自噬增强宫颈癌细胞的放射敏感性。

关键词：宫颈肿瘤长链非编码RNA TUG1 放射敏感性自噬凋亡

lncRNA GACAT3通过调控miR-497/YAP1轴对胶质瘤放疗敏感性的影响及机制研究

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中华放射肿瘤学杂志 2024年第4期33卷 346-352页

作者：何涛李振江徐晨阳丁炳谦河南大学淮河医院神经外科开封475000

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)胃癌相关转录本3(GACAT3)在胶质瘤细胞放射敏感性中的作用及机制。方法实时反转录PCR(RT-qPCR)实验检测lncRNA GACAT3、miR-497在人星形胶质细胞NHA和胶质瘤细胞U251中的表达。将NC-siRNA、GACAT3-siRNA... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)胃癌相关转录本3(GACAT3)在胶质瘤细胞放射敏感性中的作用及机制。方法实时反转录PCR(RT-qPCR)实验检测lncRNA GACAT3、miR-497在人星形胶质细胞NHA和胶质瘤细胞U251中的表达。将NC-siRNA、GACAT3-siRNA转染至U251细胞中,使用X射线照射处理细胞,克隆形成实验检测U251细胞存活分数,流式细胞术检测U251细胞凋亡,蛋白质印迹法实验检测U251细胞中胱天蛋白酶3(Caspase-3)蛋白的表达。通过生物信息学软件和双荧光素酶报告基因实验预测和验证lncRNA GACAT3与miR-497以及miR-497与Yes相关蛋白1(YAP1)的靶向关系。将NC mimic、miR-497 mimic、GACAT3-siRNA与NC抑制剂、GACAT3-siRNA与miR-497抑制剂共转染至U251细胞中,通过克隆形成实验、流式细胞术、蛋白质印迹法实验检测过表达miR-497以及lncRNA GACAT3通过调控miR-497对U251细胞放射敏感性的影响。结果与NHA细胞相比,lncRNA GACAT3在U251细胞中的表达明显升高,miR-497在U251细胞中的表达明显降低(P<0.05)。敲低GACAT3后,照射后的U251细胞存活分数明显降低,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白的表达均明显升高(P<0.05)。lncRNA GACAT3靶向并负调控miR-497的表达。过表达miR-497可显著降低照射后的U251细胞存活分数,升高细胞凋亡率和Caspase-3蛋白的表达。抑制miR-497可显著逆转lncRNA GACAT3敲低对U251细胞放射敏感性的促进作用。miR-497靶向并负调控YAP1的表达。结论敲低lncRNA GACAT3可通过调控miR-497/YAP1轴增强胶质瘤细胞的放射敏感性。

关键词：神经胶质瘤 lncRNA GACAT3 放疗敏感性 miR-497

丁基苯酞通过PRDM5改善氧化应激引起的神经元细胞凋亡

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中国临床药理学杂志 2024年第1期40卷 17-21页

作者：何康高永涛徐晨阳段国庆河南大学淮河医院神经外科河南开封475000

目的探讨丁基苯酞对氧化应激诱导的神经元细胞PC-12凋亡的影响及其作用机制。方法将PC-12细胞分成Vector组[二甲基亚砜(DMSO)+转染vector质粒]、丁基苯酞+vector组(DMSO+25μmol·L^(-1)丁基苯酞+转染vector质粒)、PRDM5组[DMSO+转染PR... 详细信息

目的探讨丁基苯酞对氧化应激诱导的神经元细胞PC-12凋亡的影响及其作用机制。方法将PC-12细胞分成Vector组[二甲基亚砜(DMSO)+转染vector质粒]、丁基苯酞+vector组(DMSO+25μmol·L^(-1)丁基苯酞+转染vector质粒)、PRDM5组[DMSO+转染PR结构域蛋白5(PRDM5)过表达质粒]、丁基苯酞+PRDM5组(DMSO+25μmol·L^(-1)丁基苯酞+转染PRDM5过表达质粒)。用流式细胞术检测神经元细胞的凋亡水平;用蛋白质印迹法检测切割的胱天蛋白酶3(Cleaved-caspase 3)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)的表达水平;用分子对接分析丁基苯酞与PRDM5的结合位点。结果Vector组、丁基苯酞+vector组、PRDM5组、丁基苯酞+PRDM5组的细胞凋亡水平分别为(63.52±5.72)%、(20.48±3.56)%、(79.48±8.13)%和(22.58±3.01)%;Cleaved-caspase 3表达水平分别为0.89±0.09、0.29±0.03、1.12±0.09和0.31±0.05;Bcl-2表达水平分别为0.31±0.02、0.79±0.05、0.12±0.01和0.89±0.11;Bax表达水平分别为0.83±0.08、0.25±0.03、1.03±0.11和0.27±0.03。Vector组的上述指标与PRDM5组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。丁基苯酞与PRDM5存在结合(自由能为-12.55 kcal·mol-1),结合位点为K413和D414。结论丁基苯酞与PRDM5的K413R和D414A结合,抑制了PRDM5的功能进而改善了氧化应激引起的神经元细胞凋亡。

关键词：丁基苯酞 PR结构域蛋白5 氧化应激神经元细胞凋亡

KCNMA1单核苷酸多态与托吡酯治疗癫痫患儿疗效的相关性分析

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中国医院药学杂志 2024年第15期44卷 1811-1815页

作者：李艳阳徐晨阳高永涛河南大学淮河医院儿科河南开封475000 河南大学淮河医院神经外科河南开封475000

目的:探讨高导钙和电压依赖K+(BK)钾通道的α-亚基(KCNMA1)单核苷酸多态与托吡酯治疗癫痫患儿疗效的相关性。方法:纳入2017年1月至2022年1月河南大学淮河医院收治的癫痫患儿746例,一代测序检测癫痫患儿KCNMA1的基因序列。根据序列,对照... 详细信息

目的:探讨高导钙和电压依赖K+(BK)钾通道的α-亚基(KCNMA1)单核苷酸多态与托吡酯治疗癫痫患儿疗效的相关性。方法:纳入2017年1月至2022年1月河南大学淮河医院收治的癫痫患儿746例,一代测序检测癫痫患儿KCNMA1的基因序列。根据序列,对照组为KCNMA1野生型患儿,突变组为KCNMA1突变型患儿,A138V组为A138V突变患儿,C495G组为C495G突变患儿,N599D组为N599D突变患儿。托吡酯治疗后,分析不同组患儿碱性磷酸酶(ALP)和血钙(SC)水平、疗效及不良反应的差异。结果:746例癫痫患儿中,KCNMA1野生型有660例,突变型有86例。KCNMA1 A138V、C495G、N599D及R800W的频率分别为4.96%、2.95%、1.74%、1.88%。与对照组比较,突变组的治疗有效率更低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,C495G组的治疗有效率更低(P<0.05)。托吡酯治疗后,与对照组比较,突变组患儿ALP水平更高(P<0.05)。托吡酯治疗后,对照组和突变组患儿SC水平的差异无统计学意义。托吡酯治疗后,与对照组比较,C495G组和R800W组患儿的ALP水平均更高(P<0.05)。与对照组相比,突变组患儿具有更高的不良反应发生率。与对照组相比,A138V组和C495G组患儿具有更高的不良反应发生率。结论:KCNMA1单核苷酸多态C495G和R800W与托吡酯疗效具有相关性,A138V和C495G与托吡酯带来的不良反应具有相关性。

关键词： KCNMA1 单核苷酸多态托吡酯癫痫

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冠心病发病与幽门螺杆菌感染相关性研究

中国病原生物学杂志 2024年第10期19卷 1153-1157页

作者：姚新亮鲁雪丽钟晓鸣河南大学淮河医院河南开封475000

目的分析冠心病患者幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染情况及患者血脂、炎性因子水平,探析冠心病发病与Hp感染的相关性。方法选取108例冠心病患者及100例健康人群,检测Hp感染情况。对所有患者进行冠状动脉造影与颈动脉斑块检查... 详细信息

目的分析冠心病患者幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染情况及患者血脂、炎性因子水平,探析冠心病发病与Hp感染的相关性。方法选取108例冠心病患者及100例健康人群,检测Hp感染情况。对所有患者进行冠状动脉造影与颈动脉斑块检查,对比Hp阳性与Hp阴性患者冠状动脉造影结果与颈动脉斑块特征。采集患者静脉血,对比Hp阳性与Hp阴性患者血脂及炎症因子水平。将Hp阳性冠心病患者进行分组,对比联合治疗组与常规治疗组患者治疗前及治疗6个月后的血脂水平。结果冠心病患者Hp阳性率为50.93%(55/108),对照组为34.00%(34/100),冠心病患者Hp阳性率高于对照组(P0.05)。Ⅰ型Hp感染与Ⅱ型Hp感染冠心病患者的单支、2支、3支冠状动脉病变比例差异无统计学意义(P>0.05)。Hp阳性患者与Hp阴性患者单支、3支冠状动脉病变构成比差异有统计学意义(P0.05),治疗6个月后,联合治疗组TC、TG、LDL-C、HDL-C水平分别为(4.00±0.64)mmol/L、(1.28±0.38)mmol/L、(2.57±0.56)mmol/L、(1.40±0.31)mmol/L,常规治疗组分别为(4.62±0.54)mmol/L、(1.31±0.31)mmol/L、(3.12±0.60)mmol/L、(1.22±0.28)mmol/L,两组TC、LDL-C、HDL-C水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论冠心病患者Hp感染率高于健康人群,Hp阳性患者血脂、炎症因子水平高于Hp阴性患者,Hp感染可能影响人体脂质代谢功能而导致冠心病的发病。对Hp阳性冠心病患者进行抗幽门螺杆菌治疗,可有效提升治疗效率,改善患者血脂水平。

关键词：冠心病幽门螺杆菌血脂血清炎症因子

circRNA TCF25靶向miR-128b对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

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中国医科大学学报 2024年第3期53卷 198-206页

作者：夏书官王声任阳光田艳艳左永刚河南大学淮河医院甲状腺乳腺外科河南开封475000

目的探究环状RNA(circRNA)转录因子25(TCF25)靶向微RNA-128b(miR-128b)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响。方法收集人乳腺癌细胞MCF-7培养至对数生长期,将MCF-7细胞随机分为空白组(未转染)、si-NC组(转染si-NC)、si-circRNA TCF25组(转染si-circRNA TCF25)、pcDNA-circRNA TCF25组(转染pcDNA-circRNA TCF25)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-128b mimic组(转染miR-128b模拟物)、miR-128b inhibitor组(转染miR-128b抑制剂)、pcDNA-circRNA TCF25+miR-128b mimic组(转染pcDNA-circRNA TCF25和miR-128b模拟物),每组6个复孔。转染48 h后,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中circRNA TCF25、miR-128b表达;RNase R酶消化实验进行环状RNA鉴定;核浆分离法检测circRNA TCF25的亚细胞定位;噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;RT-qPCR检测磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)、细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)mRNA表达;Western blotting检测PTEN、Ki-67、caspase-3、活化的caspase-3蛋白表达;双荧光素酶报告实验分析circRNA TCF25与miR-128b的靶向关系。结果与对照组比较,circRNA TCF25的相对表达量在RNase R酶处理后并无显著变化(P>0.05),而线性TCF25的相对表达量在经RNase R酶处理后降低(P<0.05);circRNA TCF25在胞质中的相对表达量高于细胞核(P<0.05)。与空白组和si-NC组比较,si-circRNA TCF25组细胞增殖活力降低,凋亡率升高,Ki-67 mRNA及蛋白表达降低,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达升高;pcDNA-circRNA TCF25组细胞增殖活力升高,凋亡率降低,Ki-67 mRNA及蛋白表达升高,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与空白组和miR-NC组比较,miR-128b mimic组细胞增殖活力降低,凋亡率升高,Ki-67 mRNA及蛋白表达降低,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达升高,miR-128b inhibitor组细胞增殖活力升高,凋亡率降低,Ki-67 mRNA及蛋白表达升高,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与pcDNA-circRNA TCF25组比较,pcDNA-circRNA TCF25+miR-128b mimic组细胞增殖活力降低,凋亡率升高,Ki-67 mRNA及蛋白表达降低,PTEN、caspase-3、活化的caspase-3 mRNA及蛋白表达升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。双荧光素酶实验结果证实了circRNA TCF25可靶向调控miR-128b。结论circRNA TCF25可能通过靶向抑制miR-128b表达,促进Ki-67表达,抑制PTEN、caspase-3、活化的caspase-3表达,发挥促进人乳腺癌细胞MCF-7增殖,抑制其凋亡的作用。

关键词：环状RNA转录因子25 微RNA-128b 乳腺癌增殖凋亡

高压氧治疗对缺氧缺血性脑病新生儿血清GFAP和Tau蛋白表达水平的影响及其预测价值

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中华航海医学与高气压医学杂志 2024年第4期31卷 491-495页

作者：谢春丹王莹莹高杰河南大学淮河医院儿科开封475000

目的探讨高压氧(HBO)治疗对缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、Tau蛋白表达水平的影响及其预测价值。方法回顾性分析2021年10月至2022年10月河南大学淮河医院儿科收治的108例HIE新生儿(观察组)的临床资料,根据新生... 详细信息

目的探讨高压氧(HBO)治疗对缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、Tau蛋白表达水平的影响及其预测价值。方法回顾性分析2021年10月至2022年10月河南大学淮河医院儿科收治的108例HIE新生儿(观察组)的临床资料,根据新生儿病情严重程度将其分为轻度组(n=38)、中度组(n=46)、重度组(n=24),对照组选择同期50例健康新生儿。观察组入院后均进行对症治疗及高压氧辅助治疗,再根据其出生后28 d内的预后情况分为存活组(n=87)与死亡组(n=21)。采用酶联免疫吸附法测定新生儿治疗前后血清GFAP、Tau蛋白水平。HIE新生儿的影响因素采用非条件Logistic回归模型进行分析,采用多因素Logistic回归分析血清GFAP、Tau蛋白水平对HIE新生儿预后的预测价值。结果观察组新生儿治疗后血清GFAP、Tau蛋白水平明显低于治疗前[(108.35±26.49)ng/L vs.(138.42±35.67)ng/L,P<0.001;(5.12±1.28)ng/ml vs.(7.05±1.34)ng/ml,P<0.001]。非条件Logistic回归模型分析结果显示,死亡组新生儿Apgar评分明显低于存活组(P<0.001),开始治疗日龄及治疗后Tau蛋白、C-反应蛋白、白细胞介素-6、治疗后GFAP水平高于存活组新生儿(P<0.05或P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,病情严重程度、开始治疗日龄、治疗后血清GFAP及Tau蛋白水平是HIE新生儿死亡的独立危险因素(P<0.01)。受试者工作特征曲线显示,治疗后血清GFAP、Tau蛋白联合预测新生儿预后的曲线下面积为0.82,灵敏度和特异度分别为85.26%、76.34%,明显高于GFAP、Tau蛋白单独使用的预测价值。结论HIE新生儿HBO治疗后血清GFAP、Tau蛋白水平偏高与病情严重程度和预后相关,血清GFAP、Tau蛋白联合应用具有较好的预后预测价值。

关键词：缺氧缺血性脑病新生儿高压氧胶质纤维酸性蛋白 Tau蛋白预后

高表达LINC00626通过JAK1/STAT3/KHSRP信号轴促进食管胃结合部腺癌转移的恶性进展

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 541-552页

作者：张锋范林林康霞韦海涛李丽河南大学淮河医院胸外科河南开封475001 河南大学护理与健康学院河南开封475001

目的探究LINC00626通过JAK1/STAT3/KHSRP信号轴调控食管胃结合部腺癌的恶性进展及分子机制。方法收集并比较食管胃结合部腺癌组织和癌旁组织LINC00626、KHSRP的表达水平。qRT-PCR法检测食管腺癌细胞系(OE-19、TE-7、BIC-1、FLO-1、SK-G... 详细信息

目的探究LINC00626通过JAK1/STAT3/KHSRP信号轴调控食管胃结合部腺癌的恶性进展及分子机制。方法收集并比较食管胃结合部腺癌组织和癌旁组织LINC00626、KHSRP的表达水平。qRT-PCR法检测食管腺癌细胞系(OE-19、TE-7、BIC-1、FLO-1、SK-GT-4、BE-3)与正常食管上皮细胞系(Het-1A)中LINC00626、KHSRP的表达差异。利用慢病毒试剂,构建稳定敲降LINC00626的OE-19、TE-7细胞和稳定过表达LINC00626的FLO-1、SK-GT-4。取对数生长期OE-19细胞分为sh-NC组(转染LV3-NC慢病毒)、sh-LINC00626组(转染敲降LINC0062慢病毒),TE-7细胞同上分组;取对数生长期FLO-1细胞分为Vector组(转染LV6-NC慢病毒)、INC00626组(转染过表达LINC0062慢病毒),SK-GT-4细胞同上分组。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、Transwell迁移/侵袭实验检测敲降和过表达LINC00626后对食管腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力。裸鼠皮下成瘤实验、肺转移实验检测敲降和过表达LINC006266在活体动物体内的作用。Western blot实验检测敲降和过表达LINC00626后KHSRP和JAK/STAT通路蛋白的表达情况。结果LINC00626和KHSRP在食管胃结合部腺癌组织和食管腺癌细胞中表达量显著升高(P<0.05)。敲降LINC00626后,体内和体外食管腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭水平显著下降(P<0.01),过表达LINC00626后则效果反之(P<0.01)。在敲降LINC0626后,JAK/STAT信号通路中JAK1、STAT3磷酸化水平明显降低(P<0.05),过表达LINC00626后情况则反之(P<0.05)。结论LINC00626通过JAK1/STAT3/KHSRP信号轴调控食管胃结合部腺癌转移的恶性进程。

关键词：食管胃结合部腺癌 LINC00626 JAK1/STAT3 KHSRP 转移

术前中性粒细胞与淋巴细胞比值和血小板与淋巴细胞比值与CRS术后复发的相关性分析

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第2期38卷 133-139页

作者：张亚明李智勇王书敬郭丹丹王光辉河南大学淮河医院耳鼻咽喉头颈外科河南开封475000 开封市人民医院急诊科

目的:探讨术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)和血小板与淋巴细胞比值(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR)与慢性鼻窦炎(CRS)术后复发风险的相关性。方法:收集2018年10月-2022年2月在河南大学淮河医院耳鼻咽喉头颈外科初次行功能性内镜鼻窦手术的CRS患者临床资料。随访至2023年2月,研究终点定义为患者术后复发或随访时间截止。根据受试者工作曲线分析获得术前NLR和PLR最佳临界值,分别将其分为高、低水平亚组,并比较组间患者的临床特征及术后复发率;根据患者术后复发情况将患者分为未复发CRS和复发CRS,采用Kaplan-Meier生存曲线和logistic回归分析探讨NLR和PLR与CRS术后复发的相关性。结果:共纳入630例CRS患者,其中高NLR组382例,高PLR组140例。高NLR组和高PLR组CRS患者的术后复发率分别显著高于低NLR组和低PLR组,差异有统计学意义(P<0.05)。复发CRS的NLR、PLR水平和高NLR、高PLR比例均高于未复发CRS,差异有统计学意义(P<0.05),同样复发CRS的病程和变应性鼻炎(AR)伴发率均显著高于未复发CRS,差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,高NLR组和高PLR组CRS较低NLR组和低PLR组术后复发率显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,logistic回归分析显示,高NLR组、高PLR组的病程和合并AR与CRS术后复发风险增加显著相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:术前高NLR和高PLR均是CRS术后复发的独立危险因素,其有望成为CRS患者术后预后评估和风险分层的新指标。此外,病程和合并AR与CRS术后复发风险显著相关。

关键词：慢性鼻窦炎中性粒细胞与淋巴细胞比值血小板与淋巴细胞比值手术复发