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穿山龙薯蓣皂苷通过调控自噬治疗胶原诱导性关节炎小鼠模型的机制

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 645-651页

作者：江涛由涌夏东帅薄思涵王永为高亚贤宋鸿儒承德医学院基础医学院免疫学教研室河北承德067000 承德医学院基础医学院解剖学教研室河北承德067000 河北北方学院医学检验学院免疫学教研室河北张家口075000

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫... 详细信息

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫的50只小鼠随机分组为CIA模型组、雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷低、中、高剂量组,另有10只小鼠注射等量生理盐水作为对照组。在对小鼠进行连续14天灌胃治疗并观察各组小鼠足爪的炎症程度,取下各组小鼠脾、腹股沟淋巴结和踝关节、膝关节,对踝关节、膝关节进行HE染色,检测各组淋巴结、脾组织中mRNA和蛋白质水平的相关自噬指标。结果与CIA模型组相比,穿山龙薯蓣皂苷高剂量组关节炎指数(AI)评分降低(P免疫细胞浸润、骨质侵蚀、软骨破坏和滑膜增生的症状;雷公藤组与穿山龙薯蓣皂苷中、高剂量组对CIA模型有不同程度的治疗作用,可以减轻和预防症状。与CIA模型组相比,雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷治疗组中LC3、Beclin-1的mRNA水平和蛋白水平的表达升高,p62的mRNA水平和蛋白水平的表达降低。结论穿山龙薯蓣皂苷可能通过抑制自噬对CIA模型小鼠起到治疗作用。

关键词：穿山龙薯蓣皂苷自噬类风湿性关节炎胶原诱导性关节炎 p62 LC3 Beclin-1

溃疡性结肠炎患者结肠黏膜组织微小RNA-155和细胞因子信号转导抑制因子1表达与疾病严重程度的相关性

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中国医学科学院学报 2024年第3期46卷 334-340页

作者：张霞贾慧宇宋维轩赵汉清河北北方学院附属第二医院消化内科河北张家口075100 河北北方学院附属第二医院检验科河北张家口075100 张家口宣钢医院放射科河北张家口075100 河北北方学院附属第二医院中医科河北张家口075100

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者结肠黏膜组织微小RNA-155(miR-155)、细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)表达水平与疾病严重程度的关系。方法选取2021年9月至2023年6月河北北方学院附属第二医院收治的UC患者130例。按照改良Mayo评分系统... 详细信息

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者结肠黏膜组织微小RNA-155(miR-155)、细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)表达水平与疾病严重程度的关系。方法选取2021年9月至2023年6月河北北方学院附属第二医院收治的UC患者130例。按照改良Mayo评分系统将患者分为活动期组(n=85)和缓解期组(n=45);根据改良Truelove和Witts分型标准将UC活动期患者分为轻度组(n=35)、中度组(n=30)和重度组(n=20)。同时选取健康体检行结肠镜检查或结肠单发息肉切除术后复查结肠镜结果正常并排除其他疾病者共90例作为对照组。收集UC患者病变显著的结肠段黏膜组织和对照组距肛门20 cm处正常结肠黏膜组织。采用荧光定量PCR法测定组织中miR-155、SOCS1 mRNA表达水平,免疫组织化学法测定组织中SOCS1蛋白表达情况,分析UC患者结肠黏膜组织miR-155、SOCS1 mRNA和改良Mayo评分的相关性,评价miR-155、SOCS1 mRNA表达水平对UC活动期患者发生重度病情的预测价值。结果与对照组和缓解期组比较,活动期组结肠黏膜组织miR-155表达水平显著升高,SOCS1 mRNA表达水平、SOCS1蛋白阳性表达率显著降低(P均<0.001)。轻、中、重度组UC活动期患者结肠黏膜组织miR-155表达水平和改良Mayo评分依次升高,SOCS1 mRNA表达水平依次降低(P均<0.001)。UC患者结肠黏膜组织miR-155与改良Mayo评分呈正相关,SOCS1 mRNA与改良Mayo评分呈负相关(P均<0.001)。miR-155高表达(OR=2.762,95%CI=1.284~5.944,P=0.009)、SOCS1 mRNA低表达(OR=2.617,95%CI=1.302~5.258,P=0.007)、改良Mayo评分≥12分(OR=3.232,95%CI=1.450~7.204,P=0.004)是影响UC活动期患者发生重度病情的危险因素。miR-155和SOCS1 mRNA联合预测UC活动期患者发生重度病情的曲线下面积为0.920。结论miR-155、SOCS1 mRNA的表达水平与UC活动期患者的病情严重程度存在相关性,两者联合对UC活动期患者发生重度病情的预测效能较高。

关键词：溃疡性结肠炎微小RNA-155 细胞因子信号转导抑制因子1 疾病严重程度重度病情

迷走神经活化的胆碱能抗炎通路在糖尿病肾病中的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第3期40卷 341-347页

作者：张萍杨博常晓彤河北北方学院临床检验诊断学重点实验室河北张家口075000

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病患者死亡的主要驱动因素,其患病率在全球范围内呈上升趋势。DN的发生发展与复杂的慢性低度炎症密切相关。在糖尿病患者中,高血糖和高血脂会导致损伤相关分子模式的释放,触发Janus激酶/信号... 详细信息

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病患者死亡的主要驱动因素,其患病率在全球范围内呈上升趋势。DN的发生发展与复杂的慢性低度炎症密切相关。在糖尿病患者中,高血糖和高血脂会导致损伤相关分子模式的释放,触发Janus激酶/信号转导与转录激活子3(Janus kinase/signal transducer and activator of transcription 3,JAK/STAT3)、核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)-蛋白质激酶B(protein kinase B,PKB或Akt)等促炎细胞信号通路的活化,以及白介素-1(interleukin-1,IL-1)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等促炎细胞因子的产生,这些促炎因子是导致肾损伤的关键致病介质,从糖尿病的初始阶段到晚期肾衰竭中均发挥着多重作用。迷走神经是自主神经系统的关键组成部分,其通过介导胆碱能抗炎通路(cholinergic anti-inflammatory pathway,CAP)发挥抗炎作用。在DN时,迷走神经活性下降,胆碱能抗炎系统受损,促炎与抗炎反应失调,肾的炎症和损伤加重。而利用神经免疫相互作用,通过迷走神经刺激术激活CAP,则可调控炎症信号通路及炎性细胞因子,改善DN的炎症和损伤状态。本文将对炎症细胞因子和炎症信号通路在DN发生发展中的作用,以及迷走神经活化的胆碱能抗炎通路对DN的改善作用进行综述,以期为DN等慢性炎症相关疾病的治疗策略研究及应用提供理论基础。

关键词：糖尿病肾病炎症迷走神经胆碱能抗炎通路

柚皮素对TNBS致溃疡性结肠炎小鼠炎症损伤及血液高凝的保护作用

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中药药理与临床 2024年

作者：吴苗苗武彩霞刘重洋王越冯志芳贺伟河北北方学院中医学院河北北方学院生命科学研究中心河北北方学院药学院&河北省神经药理学重点实验室

目的：探讨枳实有效成分柚皮素对2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导小鼠溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）的炎症损伤及血液高凝的保护作用。方法：60只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、柚皮素60、40、20 mg/kg组及... 详细信息

目的：探讨枳实有效成分柚皮素对2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导小鼠溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）的炎症损伤及血液高凝的保护作用。方法：60只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、柚皮素60、40、20 mg/kg组及美沙拉秦500 mg/kg组，所有组别预给药7 d，实验第7 d禁食不禁水24 h，除正常对照组外，其余5组小鼠均以TNBS100 mg/kg与50%乙醇等体积混匀进行灌肠造模，造模结束后继续给药3 d，试验结束后，小鼠眼眶取血检测出血时间（BT）、全血凝固时间（CT）及血液流变学；HE染色观察小鼠结肠组织病理改变；ELISA法测定小鼠血清中小鼠组织因子（TF）、白细胞介素6（IL-6）的含量及小鼠结肠组织中核因子κB（NF-κB）、κB抑制蛋白激酶α（IKKα）的含量；免疫荧光及Western Blot法测定小鼠结肠组织中血管内皮生长因子A（VEGFA）、缺氧诱导因子α（HIF-1α）蛋白的表达。结果：与正常对照组相比，UC模型对照组小鼠结肠组织病理损伤严重，BT、CT、血液在高切（200/s）、中切（50/s）、低切（10/s）切变率下的全血黏度、血浆黏度、红细胞比容显著升高（P＜0.01），血清中TF、IL-6，结肠组织中NF-κB、IKKα的含量及结肠组织中VEGFA、HIF-1α蛋白的表达显著升高（P＜0.01）；与模型对照组相比，柚皮素各剂量组小鼠状况明显好转，小鼠BT、CT明显缩短（P＜0.05），小鼠全血黏度、血浆黏度及红细胞比容显著降低（P＜0.01），小鼠血清中TF和IL-6、小鼠结肠组织中NF-κB和IKKα含量及VEGFA、HIF-1α蛋白的表达明显降低（P＜0.05）。结论: 柚皮素对 UC 小鼠有较好的治疗作用，其作用机制可能与减轻炎症反应，改善血液高凝有关。

关键词：柚皮素溃疡性结肠炎炎症血液高凝

持续血滤治疗重症急性胰腺炎B淋巴细胞比例特征及与液体负荷状态对预后的协同作用

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中国免疫学杂志 2024年

作者：刘斐姚杰张丽骞王毅苗乔志飞李树铁翟丽萍刘春艳河北北方学院附属第一医院重症医学科河北北方学院附属第一医院麻醉科

目的：探究持续血滤治疗重症急性胰腺炎（SAP）患者B淋巴细胞比例特征及与液体负荷（FL）状态对预后的协同作用。方法：选择2020年6月～2023年6月于我院行持续血滤治疗的SAP患者80例为研究对象，根据患者从入院或病情变化开始到行持续... 详细信息

目的：探究持续血滤治疗重症急性胰腺炎（SAP）患者B淋巴细胞比例特征及与液体负荷（FL）状态对预后的协同作用。方法：选择2020年6月～2023年6月于我院行持续血滤治疗的SAP患者80例为研究对象，根据患者从入院或病情变化开始到行持续血滤治疗之前的FL情况，将其分为低液体负荷组（n=25，FL＜5%）、高液体负荷组（n=25，5%≤FL＜10%）、液体超负荷组（n=30，FL≥10%）。对比分析三组患者基线资料与生化资料。Kaplan-Meier生存曲线分析不同FL状态下经持续血滤治疗后SAP患者的生存情况，log-rank检验比较分析组间死亡率。多因素Logistic回归模型分析不同FL状态下SAP患者预后的影响因素。非条件Logistic回归模型分析FL状态与B淋巴细胞在SAP患者预后中的相乘交互作用，通过Andersson等编制的交互作用计算表分析其相加交互作用。通过受试者工作特征（ROC）曲线分析FL状态联合B淋巴细胞判断患者预后的价值。结果：三组患者持续性血液滤开始时间、持续性血液滤时间、血小板活化因子（PAF）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、T淋巴细胞亚群(CD4+、CD4+/CD8+)、免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）、B淋巴细胞比较差异显著（P＜0.05）。Kaplan-Meier生存曲线结果显示，液体超负荷组的50 d病死率显著高于低液体负荷组(χ2=6.349，P=0.016)和高液体负荷组(χ2=4.827，P=0.024)。与生存组比较，死亡组PAF显著增加（P＜0.05），持续性血液滤开始时间、持续性血液滤时间、CD4+、IgA、IgM、B淋巴细胞显著降低（P＜0.05）。进一步多因素Logistic回归分析结果显示，以低/高液体负荷组为参照，液体超负荷组B淋巴细胞为影响患者病死率的保护因素。交互作用分析结果显示，液体超负荷与B淋巴细胞≤4.95%在患者预后中存在相乘（OR=6.139，95%CI：1.233～19.547）和相加（OR=6.052，95%CI：5.293～7.168）交互作用。ROC曲线分析结果显示，FL状态和B淋巴细胞联合判断患者预后准确度较高（P＜0.05，AUC＞0.85）。结论：液体超负荷患者B淋巴细胞显著少于低/高液体负荷患者，B淋巴细胞是影响经持续血滤治疗SAP患者预后的保护因素，液体负荷状态与B淋巴细胞在患者预后中存在相乘和相加交互作用，二者联合可较准确地判断SAP患者的预后。

关键词：液体负荷持续性血液滤重症急性胰腺炎 B淋巴细胞预后

“新医科”背景下基于OBE理念的混合式教学模式在医学检验技术专业中的应用研究

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河北北方学院学报（自然科学版） 2024年第10期40卷 59-61页

作者：徐志伟侯丽娟张效云常晓彤董明纲宋桂芹河北北方学院医学检验学院生物化学教研室河北张家口075000

“新医科”建设的核心是医学知识体系的重塑,在此背景下,为适应行业发展和社会需求,构建基于OBE(outcome-based education)理念的混合式教学模式,培养学生学习的自主性和积极性,促进教学质量的提升,为培养能引领未来检验医学发展的卓越... 详细信息

“新医科”建设的核心是医学知识体系的重塑,在此背景下,为适应行业发展和社会需求,构建基于OBE(outcome-based education)理念的混合式教学模式,培养学生学习的自主性和积极性,促进教学质量的提升,为培养能引领未来检验医学发展的卓越检验医师提供新的路径。

关键词：新医科 OBE理念混合式教学模式医学检验技术

M细胞靶向配体促进H9N2禽流感病毒抗原递送的口服黏膜疫苗研究

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中国动物传染病学报 2024年

作者：王智乐袁佳欣卢佳慧吕文杰李欣蕊张瑞华李龙飞徐彤河北北方学院预防兽医学重点实验室

为了研制有效递送H9N2禽流感HA抗原的口服黏膜疫苗，本研究将M细胞配体OmpH与H9N2禽流感病毒血凝素基因HA1相连接，扩增了HA1-OmpH片段，该片段克隆至乳酸菌表达载体pMG36e，电转化乳酸乳球菌MG1363，构建了能够融合表达H9N2 HA1和OmpH... 详细信息

为了研制有效递送H9N2禽流感HA抗原的口服黏膜疫苗，本研究将M细胞配体OmpH与H9N2禽流感病毒血凝素基因HA1相连接，扩增了HA1-OmpH片段，该片段克隆至乳酸菌表达载体pMG36e，电转化乳酸乳球菌MG1363，构建了能够融合表达H9N2 HA1和OmpH的重组乳酸乳球菌MG1363-pMG36e-HA1-OmpH。利用SDS-PAGE证实目的蛋白HA1-OmpH获得了表达，WesternBlot证实表达的目的蛋白具有免疫反应性。以此重组菌口服免疫1日龄雏鸡，每只鸡口服2×109CFU菌液，免疫两次，免疫间隔10 d，每次连续免疫3 d。在第二次免疫后第10 d采集血清与气管灌洗液，并利用Elisa和HI检测其抗体与细胞因子水平。结果显示本研究构建的重组乳酸乳球菌MG1363-pMG36e-HA1-OmpH口服黏膜疫苗血凝效价明显高于空白对照组，也显著高于MG1363-pMG36e-HA1对照组。同时血清抗体IgY、sIgA水平显著高于空白对照组，也显著高于MG1363-pMG36e-HA1对照组。此外，与空白对照组和MG1363-pMG36e-HA1对照组相比，该MG1363-pMG36e-HA1-OmpH口服黏膜疫苗能显著提高雏鸡气管灌洗液中细胞因子水平。免疫结束10 d后进行攻毒试验，结果显示MG1363-pMG36e-HA1-OmpH显著缓减攻毒鸡的临床症状，抑制肺脏组织病理学损伤和炎症反应，降低肺组织的病毒滴度。结果证实M细胞配体OmpH能够将HA1蛋白靶向于M细胞，促进抗原的吸收，增强口服疫苗的免疫效果。

关键词： H9N2禽流感病毒 M细胞配体 OmpH 乳酸乳球菌

胆碱能抗炎途径在肥胖介导的胰岛素抵抗中的作用

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中国免疫学杂志 2024年第4期40卷 888-893页

作者：周璐瑾刘新月常晓彤河北北方学院临床检验诊断学重点实验室张家口075000

肥胖与糖尿病、高血压、心绞痛和关节炎等多种疾病有关,已成为日益严重的全球性公共健康问题。慢性低度炎症和免疫系统激活参与肥胖相关胰岛素抵抗发病机制。胰岛素是唯一可降低血糖的激素,通过胰岛素信号通路发挥作用。正常情况下,机... 详细信息

肥胖与糖尿病、高血压、心绞痛和关节炎等多种疾病有关,已成为日益严重的全球性公共健康问题。慢性低度炎症和免疫系统激活参与肥胖相关胰岛素抵抗发病机制。胰岛素是唯一可降低血糖的激素,通过胰岛素信号通路发挥作用。正常情况下,机体促炎系统和抗炎系统通过相互作用维持机体免疫平衡。促炎和抗炎反应动态平衡决定了炎症发生、发展与结局。炎症信号通路激活可诱导中枢和外周组织胰岛素抵抗,Toll样受体4(TLR4)介导的信号通路是产生促炎反应的重要通路之一。已知高脂饮食与慢性低度炎症过程有关,饱和脂肪酸可激活TLR4受体,刺激炎症细胞因子表达,抑制胰岛素信号传导。抗炎系统中,胆碱能抗炎途径(CAP)是一条神经免疫调节途径,具有快速、可逆、准确且能适应炎症输入信号变化等特点,主要由迷走神经、脾脏与脾交感神经、乙酰胆碱和α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)组成,CAP激活可改善肥胖诱导的炎症和胰岛素抵抗。本文围绕肥胖介导的炎症、CAP抗炎途径及其与胰岛素抵抗的关系进行综述,丰富胰岛素抵抗的分子免疫机制,为胰岛素抵抗相关疾病抗炎诊疗研究提供基础。

关键词：胰岛素抵抗炎症信号通路胆碱能抗炎途径

RANBP9调控TGF-β诱导结肠癌Colo320细胞凋亡的机制研究

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中国比较医学杂志 2024年第7期 39-47页

作者：班汝波杨婕琳王晓媛武雪亮路永刚河北北方学院附属第一医院普通外科河北北方学院附属第一医院消化内科河北省人民医院实验室

目的探讨Ran蛋白微管组织中心结合蛋白(RANBP9)靶向调控转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达，及其对结直肠癌Colo320细胞凋亡的影响。方法分析TCGA数据库中625例结肠癌组织以及20例正常结肠组织中RANBP9... 详细信息

目的探讨Ran蛋白微管组织中心结合蛋白(RANBP9)靶向调控转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达，及其对结直肠癌Colo320细胞凋亡的影响。方法分析TCGA数据库中625例结肠癌组织以及20例正常结肠组织中RANBP9的表达数据，KMPLOT分析RANBP9的表达与结肠癌患者生存期的关系。人类蛋白免疫组化数据库分析TGF-β1在正常结肠组织和结肠癌组织中的表达情况，使用UALCAN数据库分析TGF-β1的表达与结肠癌患者生存期的关系。双荧光素酶实验分析RANBP9和TGF-β1的关系。将pcDNA3.1-GFP-RANBP9和pcDNA3.1-GFP-RANBP9-NC分别转染至实验组和对照组细胞中，转染完成后细胞常规培养，另设立正常组细胞，不经过转染操作，常规培养；噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide, MTT)法检测各组细胞的生长活力，流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率，JC-1染色检测各组细胞的线粒体膜电位，Western blot检测各组细胞中RANBP9和TGF-β1的表达。结果 RANBP9在结肠癌组织中的表达明显降低，与RANBP9表达低的患者相比，RANBP9高表达的结肠癌患者具有较高的生存期曲线，TGF-β1在结肠癌组织的表达明显升高，与TGF-β1表达高的患者相比，TGF-β1低表达的患者具有较高的生存期曲线，差异均具有统计意义(P<0.05)。在结肠癌中，RANBP9能靶向调控TGF-β1的表达。与正常组细胞相比，实验组细胞的生长活力、线粒体的膜电位、TGF-β1的表达明显下调，细胞的凋亡率和RANBP9的表达明显升高，差异均具有统计意义(P<0.05)。结论 RANBP9能靶向调控TGF-β1的表达，促使结肠癌细胞Colo320的生长活力和线粒体膜电位下降，诱导其凋亡。

关键词： Ran蛋白微管组织中心结合蛋白转化生长因子β1 结直肠癌细胞凋亡