检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

双峰驼感染魏氏梭菌与溶血性曼氏杆菌的防治

中国草食动物科学 2024年第1期44卷 63-67页

作者：张学虎宋福超兰喜张勇张掖市动物卫生监督所张掖734000 甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原学国家重点实验室兰州730046

2022年5月以来,甘肃省某养驼场的部分驼羔先后出现阵咳、呼吸急促、步态摇摆等症状,个别伴有腹泻,并在短期内连续死亡。经现场调查及临床检查后,初步怀疑为细菌性病原感染所致。为探明病因并控制病情,现场采集发病驼羔血清及鼻拭子进行... 详细信息

2022年5月以来,甘肃省某养驼场的部分驼羔先后出现阵咳、呼吸急促、步态摇摆等症状,个别伴有腹泻,并在短期内连续死亡。经现场调查及临床检查后,初步怀疑为细菌性病原感染所致。为探明病因并控制病情,现场采集发病驼羔血清及鼻拭子进行实验室检测;同时对病死驼羔进行解剖观察,无菌采集内脏组织及肠内容物进行实验室检测。剖检发现,病死驼羔胃肠道及肺脏组织病变较为明显;镜检可见革兰阳性菌和革兰阴性菌;实验室检测发现,魏氏梭菌和溶血性曼氏杆菌核酸呈阳性。表明驼羔发病是由于感染了魏氏梭菌和溶血性曼氏杆菌引起的。通过采取紧急免疫、隔离治疗、消毒灭源等综合措施后,驼羔病情逐步好转,养驼场恢复了正常生产。

关键词：双峰驼魏氏梭菌溶血性曼氏杆菌诊断防治

多房棘球绦虫apomucin基因qPCR引物的筛选及潜在应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第5期34卷 394-398页

作者：苏梦郭小腊杨静邵忠伟丁军涛项海涛骆学农郑亚东孙晓林甘肃农业大学动物医学院兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃动物寄生虫病重点实验室兰州730046 新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

目的筛选多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis）apomucin基因（Em-apo）的qPCR最佳引物，探索该基因的表达水平。方法根据GeneDB中4种Em-apo序列，设计引物并通过荧光定量PCR（qPCR）对引物进行分析，确定每对引物的特异性、... 详细信息

目的筛选多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis）apomucin基因（Em-apo）的qPCR最佳引物，探索该基因的表达水平。方法根据GeneDB中4种Em-apo序列，设计引物并通过荧光定量PCR（qPCR）对引物进行分析，确定每对引物的特异性、PCR扩增效率。利用筛选得到的最佳引物，分别检测经阿苯达唑（5 μg/ml）和胰岛素（100 ng/ml）培养处理的多房棘球绦虫原头节（1 000个）Em-apo表达水平的变化，用稀释阿苯达唑的DMSO和胰岛素的PBS作为各自的对照。结果筛选分别得到了Em-apo-1、Em-apo-2/3、Em-apo-4和内参基因actin的特异引物各1对，qPCR熔解曲线分析结果显示，每对引物的扩增产物只出现单峰，且扩增效率均为95%～101%。qPCR分析结果显示，与DMSO对照组（1.00）相比，多房棘球绦虫原头节经阿苯达唑处理后，Em-apo-1、Em-apo-2/3和Em-apo-4的表达水平均有所上升，分别为1.51±0.27、1.39±0.30和1.14±0.18，三者差异无统计学意义（P〉0.05）；与PBS对照组（1.00）相比，原头节经胰岛素处理后，Em-apo表达水平的变化不一，其中Em-apo-1的表达水平基本不变，Em-apo-4的表达水平有所下降，而Em-apo-2/3明显下调（0.73±0.09），但三者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论本实验筛选确定的Em-apo基因的qPCR引物特异，可用于Em-apo基因表达水平的检测。多房棘球绦虫原头节经阿苯达唑和胰岛素处理后，对Em-apo-1、Em-apo-2/3和Em-apo-4的表达水平有一定的影响。

关键词：多房棘球绦虫 apomucin基因 qPCR 阿苯达唑胰岛素

一例牛支原体与溶血性曼氏杆菌混合感染的诊断与治疗

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黑龙江畜牧兽医 2023年第16期 83-87,134,135页

作者：张学虎赵兴绪张勇宋福超刘永杰兰喜甘肃农业大学动物医学院兰州730070 张掖市动物卫生监督所甘肃张掖734000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原学国家重点实验室兰州730046

为了探明引起甘肃省张掖市某养殖场牛只死亡的病原,试验通过临床检查及剖检观察对发病牛只进行初步诊断;然后无菌采集病死牛只的鼻拭子及肺脏组织样品,采用TaqMan探针实时荧光定量PCR方法对3种牛呼吸道疾病的重要病原(牛支原体、溶血性... 详细信息

为了探明引起甘肃省张掖市某养殖场牛只死亡的病原,试验通过临床检查及剖检观察对发病牛只进行初步诊断;然后无菌采集病死牛只的鼻拭子及肺脏组织样品,采用TaqMan探针实时荧光定量PCR方法对3种牛呼吸道疾病的重要病原(牛支原体、溶血性曼氏杆菌及多杀性巴氏杆菌)进行快速检测,并根据诊断结果对有疑似症状及明显症状的牛只进行对症治疗。结果表明:牛只发病时主要表现为精神不振、干嗽气喘、鼻腔流出气泡状黏液等症状,从症状明显到死亡的时间为6~8 h。剖检可见肺脏出现“大理石”样病变,肠系膜淋巴结肿大。所检的10份鼻拭子样品中有6份为牛支原体核酸阳性,4份为溶血性曼氏杆菌核酸阳性;所检的10份肺脏组织样品中有6份为牛支原体核酸阳性,2份为溶血性曼氏杆菌核酸阳性;所有鼻拭子及肺脏组织样品中多杀性巴氏杆菌核酸均为阴性。将发病牛只进行隔离转移后,使用加米霉素注射液、硫酸头孢喹肟等抗生素结合“板黄口服液”等中药制剂进行治疗,并将养殖场外环境及圈舍进行彻底消杀,随后大部分发病牛只逐渐恢复健康,养殖场恢复正常运行。说明该养殖场发病牛只感染了牛支原体与溶血性曼氏杆菌,采取隔离治疗、彻底消杀等综合措施后,取得了较好的效果。

关键词：牛支原体溶血性曼氏杆菌牛呼吸道疾病混合感染诊断防治

干扰旋毛虫GAD基因对其抗酸能力影响的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2022年第2期44卷 187-194页

作者：张妍孟诗孟小晴高远王爽赵亚王姗姗郭琨宋铭忻东北农业大学动物源性人兽共患病黑龙江省重点实验室黑龙江哈尔滨150030

为研究旋毛虫谷氨酸脱羧酶(GAD)基因在其谷氨酸依赖型抗酸系统2(AR2)中的作用,本研究根据GenBank中登录的旋毛虫GAD基因序列,设计3条靶向该基因的siRNA(GAD-siRNA1~GAD-siRNA3)及一条阴性对照NC siRNA。将这4条siRNA以2μmol/L的剂量通... 详细信息

为研究旋毛虫谷氨酸脱羧酶(GAD)基因在其谷氨酸依赖型抗酸系统2(AR2)中的作用,本研究根据GenBank中登录的旋毛虫GAD基因序列,设计3条靶向该基因的siRNA(GAD-siRNA1~GAD-siRNA3)及一条阴性对照NC siRNA。将这4条siRNA以2μmol/L的剂量通过浸染法分别转染旋毛虫肌幼虫(后均简写为肌幼虫),12 h后分别采用荧光定量PCR和western blot检测各siRNA的干扰效果;采用不同剂量的最佳siRNA按照上述方法转染确定最佳干扰剂量。结果显示,2μmol/L的GAD-siRNA1(后简写为siRNA1)对GAD基因的干扰效果最好。将2μmol/L siRNA1、NC siRNA分别在不同pH值的培养液中利用浸染法分别转染肌幼虫,培养不同时间后分别计算各组存活率;同时利用荧光定量PCR方法检测GAD基因的转录水平;采用比色法建立γ-氨基丁酸(GABA)的标准曲线,通过酶活性公式和标准曲线计算酸环境培养0.5 h后各组培养液中GAD的酶活性并测定其pH值。存活率结果显示,随培养时间的增加,同一pH值培养液中各组肌幼虫的存活率均降低,其中siRNA1组肌幼虫的存活率明显低于PBS和NC siRNA组(NC组)(P研究首次证实了旋毛虫谷氨酸依赖型抗酸机制在其抵抗酸环境过程中发挥的作用,为旋毛虫抗酸系统的全面研究奠定了基础,并为旋毛虫病的预防提供了新思路。

关键词：旋毛虫 RNA干扰谷氨酸脱羧酶

siRNA-881干扰GLS基因对旋毛虫肌幼虫抗酸能力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2022年第1期44卷 73-79页

作者：孟诗张妍杨啸赵亚高远王爽刁子洋郭琨宋铭忻东北农业大学动物源性人兽共患病黑龙江省重点实验室黑龙江哈尔滨150030

为探究旋毛虫肌幼虫中是否存在谷氨酰胺依赖性抗酸机制(AR4),本研究根据GenBank中旋毛虫肌幼虫谷氨酰胺酶(TsGLS)基因序列设计3条特异性siRNA分子,并通过浸泡法分别导入旋毛虫肌幼虫体内,利用荧光定量PCR(qPCR)、western blot以及间接... 详细信息

为探究旋毛虫肌幼虫中是否存在谷氨酰胺依赖性抗酸机制(AR4),本研究根据GenBank中旋毛虫肌幼虫谷氨酰胺酶(TsGLS)基因序列设计3条特异性siRNA分子,并通过浸泡法分别导入旋毛虫肌幼虫体内,利用荧光定量PCR(qPCR)、western blot以及间接免疫荧光试验(IFA),筛选沉默效果最佳的siRNA分子,并确定其最佳转染条件,结果显示,siRNA-881为基因沉默最佳的siRNA分子,且转染12 h、2μmol/L浓度、培养3 d为最佳基因沉默条件。在不同的酸性条件下培养并检测转染siRNA后旋毛虫肌幼虫的存活率,进一步将转染siRNA-881的旋毛虫肌幼虫接种小鼠,分析TsGLS基因沉默对减虫率、保姆细胞壁厚度及子代肌幼虫基因转录水平的影响。转染siRNA-881后旋毛虫肌幼虫的存活率结果显示,在pH 2.5培养2 h时的存活率明显低于其他酸性环境下;转染siRNA-881的旋毛虫肌幼虫接种小鼠后7 d旋毛虫成虫减虫率和35 d旋毛虫肌幼虫减虫率分别为61.64%和66.71%;将保姆细胞壁厚度与PBS对照组比较,siRNA-881组(15.90±1.301)保姆细胞壁厚度降低了39.78%;siRNA-881转染旋毛虫肌幼虫后,子一代肌幼虫TsGLS基因的转录水平较亲代相比降低30.30%。以上结果表明,旋毛虫具有类似于大肠杆菌中存在的谷氨酰胺依赖性抗酸系统(AR4),抑制旋毛虫TsGLS基因表达可明显降低旋毛虫肌幼虫抗酸能力。本研究首次证实通过RNA干扰技术可有效抑制旋毛虫肌幼虫TsGLS基因的表达,使该虫的抗酸能力减弱,且在宿主肠道的定植能力下降,该结果为研究旋毛虫的致病机制及其感染的防治提供新思路。

关键词：旋毛虫肌幼虫谷氨酰胺酶 RNA干扰抗酸

基于转录组数据分析环形泰勒虫对诱导宿主细胞转化相关基因的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2022年第12期53卷 4398-4409页

作者：赵保才赵帅阳关贵全罗建勋曹天行张志刚石苗刘军龙赵洪喜宁夏大学农学院银川750021 中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

本试验主要通过研究布帕伐醌(BW720)处理前后,环形泰勒虫转化牛单核细胞(TaNMⅠ)转录组数据的变化情况,为进一步研究环形泰勒虫诱导宿主细胞转化的分子机制奠定基础。以环形泰勒虫感染的牛单核细胞为试验材料,设置对照组(二甲基亚砜,DM... 详细信息

本试验主要通过研究布帕伐醌(BW720)处理前后,环形泰勒虫转化牛单核细胞(TaNMⅠ)转录组数据的变化情况,为进一步研究环形泰勒虫诱导宿主细胞转化的分子机制奠定基础。以环形泰勒虫感染的牛单核细胞为试验材料,设置对照组(二甲基亚砜,DMSO)和试验组(BW720),利用Illumina HiSeq4000测序平台进行高通量测序,将测序得到的原始数据(Raw reads)与GenBank和Rfam数据库进行比对过滤,通过质控获得最终数据(Clean read)。利用Venn分析软件筛选出DMSO组和BW720组中差异表达明显的基因,进行功能注释(GO)以及信号通路(KEGG)分析。随机选择10个基因,利用荧光定量PCR(qPCR)检测基因在不同处理条件下细胞中的表达量。在验证测序结果的准确性后,选出差异表达明显的基因,分析其在TaNMⅠ细胞的凋亡、增殖等信号通路方面的作用。结果显示:BW720组和DMSO组中分别得到6854019704和6627265854条Raw reads,过滤、质控后分别得到22925606和22171427条Clean reads。BW720组和DMSO组中筛选出差异表达明显的基因共计4054个(P共同差异表达的基因367个,其中,显著上调的196个,显著下调的171个。同时,qPCR验证随机选择10个基因的表达趋势与转录组测序结果一致,表明测序结果可靠。然后对差异表达基因进行GO功能注释,筛选到与细胞增殖相关的20个生物学过程、15个细胞组分以及11个分子功能条目。KEGG富集分析结果显示,在Top20的信号通路中筛选出与环形泰勒虫转化细胞有关的一些信号通路,如:癌症信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等。对这些信号通路进一步分析发现:PI3KR3、FOXO1、IL23A、FZD3、AKT、MMP9等基因在环形泰勒虫转化细胞的研究中也有相关文献的报道。本研究表明,在TaNMⅠ细胞中DAPK1、FZD3、FOXO3、PI3KR3等可能在感染细胞无限增殖的过程中发挥作用,为后续研究TaNMⅠ细胞无限增殖机制奠定了基础。

关键词：环形泰勒虫牛单核细胞转录组信号通路

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

青海地区牦牛牛支原体核酸检测分析

中国兽医学报 2022年第9期42卷 1851-1855,1868页

作者：王方国陈胜利颜新敏郝华芳兰仕梅李章程马丽娜储岳峰曹随忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046 四川农业大学动物医学院四川成都611130

为了解青海地区牦牛牛支原体分子流行情况,本试验采用荧光定量PCR(qPCR)方法对2018-2019年采集青海地区的636份牦牛鼻拭子进行牛支原体核酸检测,并对不同地区、年份、年龄、性别、饲养模式的牦牛牛支原体核酸检测结果进行统计分析。结... 详细信息

为了解青海地区牦牛牛支原体分子流行情况,本试验采用荧光定量PCR(qPCR)方法对2018-2019年采集青海地区的636份牦牛鼻拭子进行牛支原体核酸检测,并对不同地区、年份、年龄、性别、饲养模式的牦牛牛支原体核酸检测结果进行统计分析。结果显示,牛支原体的总检出率为21.86%(139/636),牛支原体在青海不同地区(海北州、海南州、西宁市、海西州)牦牛群存在不同程度的流行(0%~44%);2018年11月检出率为18.02%,2019年6月检出率26.37%;雌性检出率(27.84%)高于雄性检出率(18.41%),差异性显著(P研究为明确青海地区牦牛牛支原体流行情况,为制定合理的防制措施提供了参考数据。

关键词：青海牦牛牛支原体核酸检测

非洲猪瘟病毒感染致猪生理生化指标变化的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2022年第10期52卷 1317-1322页

作者：闫文倩杨博郝雨杨金柯史喜绢杨行张大俊陈玲玲刘湘涛郑海学张克山中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730000

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起猪的一种高度致死性传染病,给养猪业造成了严重的经济损失。血液学参数、凝血参数、生理生化指标在兽医学中对疾病的早期发现、严重程度、治疗... 详细信息

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起猪的一种高度致死性传染病,给养猪业造成了严重的经济损失。血液学参数、凝血参数、生理生化指标在兽医学中对疾病的早期发现、严重程度、治疗效果等方面具有重要的示症性意义。本文综述了ASFV感染致猪生理生化指标变化的研究进展,作者提出了自己的展望观点,以期为从猪生理和生化角度了解ASFV致病机制提供参考。

关键词：非洲猪瘟病毒猪生理生化指标

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

鸡颗粒溶素的原核表达及生物活性分析

中国兽医学报 2018年第9期38卷 1725-1730,1734页

作者：袁如意马雪婷殷昊龚振兴杨顺利曲自刚韩政岚刘保红刘晓丽蔡建平中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730070 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

为了克隆表达纯化鸡颗粒溶素（chicken granulysin,ChGNLY）并进行活力鉴定。本试验以基因组数据库预测的ChGNLY基因为模板设计引物,对提取的鸡脾脏总RNA进行RT-PCR,扩增得到的ChGNLY基因插入pMD-19T载体中并测序。将测序正确的GNLY基... 详细信息

为了克隆表达纯化鸡颗粒溶素（chicken granulysin,ChGNLY）并进行活力鉴定。本试验以基因组数据库预测的ChGNLY基因为模板设计引物,对提取的鸡脾脏总RNA进行RT-PCR,扩增得到的ChGNLY基因插入pMD-19T载体中并测序。将测序正确的GNLY基因克隆至pGEX-6p-1,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-GNLY,并将其转化至感受态BL21,IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE、Western-blotting和蛋白质谱鉴定融合蛋白的正确性。CellTiter-Glo2.0Assay检测融合蛋白的生物学活性。另外,对GNLY的分子特性进行了生物信息分析。结果显示,测序结果显示克隆的ChGNLY片段长237bp,编码79个氨基酸,所表达的融合蛋白相对分子质量约为36 000。重组ChGNLY融合蛋白能特异性与人颗粒溶素抗体发生反应。纯化后的GNLY融合蛋白经CellTiter-Glo2.0Assay检测,发现其具有剂量依赖性的细胞毒活性。系统发生分析显示GNLY可明显分为4个群。结构分析发现,ChGNLY活性区域表面带有大量正电荷,且位点保守。结果表明,本试验利用原核表达系统成功表达了具有生物学活性的ChGNLY,为ChGNLY后续功能的研究奠定理论基础。

关键词：颗粒溶素原核表达生物信息分析生物学活性