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基于HS-GC-MS分析建昌帮特色姜制星朴片炮制过程中挥发性成分的动态变化

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中国实验方剂学杂志 2024年第20期30卷 127-134页

作者：陈雨迅徐万爱吴静雨卢美琪孟令邦徐城郑海连张娴张娜龚千锋于欢江西中医药大学药学院南昌330004

目的:通过研究姜制星朴片炮制过程中挥发性成分的组成与含量变化,揭示建昌帮特色炮制方法对厚朴挥发性成分变化过程及减毒增效炮制机制的影响。方法:按设置的时间点分别对生厚朴、姜汁闷润厚朴及炒后堆闷厚朴进行取样,采用顶空气相色谱... 详细信息

目的:通过研究姜制星朴片炮制过程中挥发性成分的组成与含量变化,揭示建昌帮特色炮制方法对厚朴挥发性成分变化过程及减毒增效炮制机制的影响。方法:按设置的时间点分别对生厚朴、姜汁闷润厚朴及炒后堆闷厚朴进行取样,采用顶空气相色谱-质谱法(HS-GC-MS)分析样品挥发性成分含量,通过峰面积归一化法得到各成分的相对质量分数,采用SIMCA 14.1软件对样品数据进行主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1为指标筛选其炮制过程中的差异性成分。结果:厚朴样品中共鉴定出挥发性成分68种,其中部分化学成分结构相似者变化趋势也类似,同时存在化合物间相互转化的现象。与生品比较,姜汁闷润厚朴中42种成分相对质量分数上升,25种成分相对质量分数下降,独有成分19种,生品独有成分4种;与姜汁闷润厚朴比较,堆闷前期厚朴中环苜蓿烯、(+)-α-蒎烯等11种成分相对质量分数上升,三环萜、α-姜黄烯等5种成分相对质量分数下降,堆闷前期厚朴独有3种成分,姜汁闷润厚朴独有4种成分;与堆闷前期厚朴比较,堆闷后期样品中(+)-α-蒎烯、莰烯等8种成分相对质量分数上升,芳樟醇、α-瑟林烯等6种成分相对质量分数下降。在厚朴炮制过程中,第20天样品前后化学成分组成明显变化,姜汁闷润与堆闷前期、堆闷前期与堆闷后期均可明显区分。结论:在姜制星朴片制备过程中,姜汁加入可使刺激成分含量降低,在姜汁加入、炒制与堆闷等多个阶段中,有效成分的含量持续增加,炮制20 d左右时饮片质量可能发生明显变化,该研究可为挖掘姜制星朴片减毒增效机制研究提供基础。

关键词：厚朴炮制姜制星朴片顶空气相色谱-质谱法(HS-GC-MS) 挥发性成分主成分分析(PCA) 正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)

山楂有机酸通过PI3K/AKT和MAPK信号通路保护心肌缺血再灌注损伤的缺血后适应作用

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中药药理与临床 2024年第7期40卷 42-48页

作者：权赫秀龚铭罗涛席俊丽韩英李永鑫杨明邵峰唐芳瑞江西中医药大学中医学院生命科学学院生理学教研室南昌330004 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004 江西中医药大学中医心理学与脑科学重点实验室江西省中医药管理局南昌330004 南昌大学第一附属医院血液净化中心南昌330004

目的:探讨山楂有机酸通过缺血后适应保护心肌缺血再灌注(I/R)损伤的作用机制。方法:采用Langendorff离体心脏灌流装置对SD大鼠心脏进行缺血再灌注并记录心脏动力学改变,从再灌注期开始全程在灌流液中给予不同浓度的山楂有机酸。采用三... 详细信息

目的:探讨山楂有机酸通过缺血后适应保护心肌缺血再灌注(I/R)损伤的作用机制。方法:采用Langendorff离体心脏灌流装置对SD大鼠心脏进行缺血再灌注并记录心脏动力学改变,从再灌注期开始全程在灌流液中给予不同浓度的山楂有机酸。采用三苯四唑氯(TTC)染色评估心肌梗死面积。采用CellTiter 96■溶液细胞增殖法测定心肌细胞存活率;流式细胞仪检测H_(2)O_(2)(过氧化氢)诱导的心肌细胞凋亡;采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、细胞内丙二醛(MDA)生成、抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]活力;以试剂盒检测半胱氨酸天冬氨酸酶-3(Caspase-3)和Caspase-9活力;Western blot法检测线粒体凋亡调控蛋白(BAX和BCL-2)、磷酸化丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(p-P38)的表达变化。结果:与空白对照组相比,模型对照组的左心室舒张压显著降低,心肌梗死面积显著增加,细胞活力显著下降(P室舒张压(P<0.01),降低了心肌I/R损伤引起的梗死面积(P<0.01),明显提高了心肌细胞存活率,降低了过氧化氢致心肌细胞损伤的LDH泄漏和MDA生成、提高了SOD和GSH-Px活力(P<0.05或P<0.01),明显降低过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡以及Caspase-3和Caspase-9活力,下调BAX、BCL-2蛋白表达(P<0.05或P<0.01),上调p-AKT和p-ERK蛋白表达(P<0.05),下调p-JNK和p-P38的蛋白表达(P<0.01),PI3K特异性抑制剂LY294002、JNK和P38特异性激动剂Anisomycin以及ERK特异性抑制剂PD98059降低山楂有机酸100μg/mL对过氧化氢引起的细胞存活率升高和Caspase-3活力的降低(P<0.05或P<0.01)。结论:PI3K/AKT和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路可能介导了山楂有机酸通过缺血后适应提高抗氧化酶活力、抑制心肌细胞凋亡,保护心肌I/R损伤的作用。

关键词：山楂有机酸心肌缺血再灌注损伤缺血后适应氧化应激抗氧化酶细胞凋亡磷脂酰肌醇3-羟激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶和丝裂原活化蛋白激酶信号通路

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玫瑰花抗衰老机制研究进展

中华中医药学刊 2024年

作者：管咏梅张煜薇李丽琴赵氏淳董欢欢潘华平臧振中陈丽梅江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室江西中医药大学药学院江西中医药大学附属医院

玫瑰花作为延缓衰老的理气类中药，具有悠久的药食两用史，是抗衰、保肝等相关方剂中高频次出现的抗衰老药物。现代科学研究进一步揭示，玫瑰花蕴含挥发油、多糖、黄酮、多酚及多种必需氨基酸等成分，成分间协同增效机制产生显著的生物... 详细信息

玫瑰花作为延缓衰老的理气类中药，具有悠久的药食两用史，是抗衰、保肝等相关方剂中高频次出现的抗衰老药物。现代科学研究进一步揭示，玫瑰花蕴含挥发油、多糖、黄酮、多酚及多种必需氨基酸等成分，成分间协同增效机制产生显著的生物效应；通过清除体内自由基、调节炎症信号通路、增强免疫防御机制等多途径，有效提升机体的抗氧化应激能力和抗衰老水平，为其在现代抗衰老领域的应用提供科学依据。传统中医理论深刻指出，情志不畅是加速机体衰老的重要因素之一，长期累积可导致肝脏功能失调。肝脏作为疏泄气机、调节情志的关键脏器，其功能衰退被视为机体衰老过程的起点。玫瑰花可疏肝胆之郁气，调理肝胆气机、缓解情志抑郁，保持肝气正常疏泄从而延缓衰老。本文旨在整合传统中医理论与现代科学研究成果，总结玫瑰花生物学活性、概括其药理学作用及抗衰老内在机制，并基于中医情志失常-肝失疏泄加速衰老理论学说探析疏肝解郁药效延缓衰老作用，为玫瑰花抗衰老研究提供新的思路和方法。

关键词：玫瑰花抗衰老抗氧化抗炎免疫调节保肝抗衰

鸦胆子苷B与肠道菌群相互作用及对人肺癌A549细胞的抑制作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 160-166页

作者：石凌钰王文敏冯育林杨世林万阳陈道峰温泉江西中医药大学南昌330006 江西中医药大学创新药物与高效节能降耗制药设备国家重点实验室南昌330006 复旦大学药学院上海201203

目的:分析鸦胆子苷B和肠道菌群相互作用,以及其代谢产物对人肺癌A549细胞的抑制活性,探讨鸦胆子苷B对非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的价值。方法:采用肠道菌群体外温孵培养法,将鸦胆子苷B与人肠道菌群体外共孵育,通过超高效液相色谱-四极杆-... 详细信息

目的:分析鸦胆子苷B和肠道菌群相互作用,以及其代谢产物对人肺癌A549细胞的抑制活性,探讨鸦胆子苷B对非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的价值。方法:采用肠道菌群体外温孵培养法,将鸦胆子苷B与人肠道菌群体外共孵育,通过超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)分析代谢转化产物。采用细胞增殖与活性检测法(CCK-8法)检测原型物鸦胆子苷B及其代谢产物对人肺癌A549细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度(IC_(50))。取健康雄性大鼠5只,经灌胃给药鸦胆子苷B药液(2 mg·kg^(-1)),连续7 d,分别采集大鼠给药前和给药后的粪便,基于16S rRNA高通量测序分析鸦胆子苷B给药前后肠道菌群变化。结果:鸦胆子苷B可被人肠道菌群经脱糖基水解代谢为鸦胆子苦醇,原型物和转化产物对A549细胞的IC50分别为1755.50、19.57μmol·L^(-1),代谢产物对A549细胞增殖的抑制活性显著优于鸦胆子苷B。肠道菌群分析结果显示,与给药前比较,给药后大鼠肠道菌群α多样性和β多样性未发生明显变化。物种丰度方面,门水平上,鸦胆子苷B降低了放线菌门、变形菌门的物种相对丰度,增加了厚壁菌门、髌骨菌门、蓝细菌门的物种相对丰度;属水平上,鸦胆子苷B降低了葡萄球菌属、气球菌属、嗜冷菌属的物种相对丰度,增加了罗姆布茨菌属、乳杆菌属、狭义梭菌属1、Norank-f-norank-o-Clostridia-UCG-014、苏黎世杆菌属、异杆菌属、糖杆菌念珠菌属的物种相对丰度。功能预测结果显示,与给药前比较,给药后大鼠肠道功能均未发生显著变化。结论:鸦胆子苷B可在肠道菌群作用下脱糖基,转化为苷元鸦胆子苦醇,抗肿瘤活性显著提高。服用鸦胆子苷B不会使肠道菌群结构和功能发生显著变化,造成肠道微生态平衡失调,且给药鸦胆子苷B后出现对NSCLC患者有益的肠道菌群变化。

关键词：鸦胆子鸦胆子苷B 鸦胆子苦醇肠道菌群代谢转化人肺癌A549细胞非小细胞肺癌(NSCLC) 16S rRNA高通量测序

大黄黄连泻心汤及其加减方改善2型糖尿病研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：安冬翟艳会高艳奎柳荣周琦朱向东梁永林甘肃中医药大学江西中医药大学宁夏医科大学

2型糖尿病（T2DM）以胰岛素抵抗（IR）和胰岛素分泌缺陷为发病基础，具体机制尚未明确，目前研究涉及糖脂毒性、炎症反应、氧化应激损伤及线粒体功能障碍等机制。现代中医学者根据T2DM临床特征及自然发展进程，将其命名为“糖络病”，... 详细信息

2型糖尿病（T2DM）以胰岛素抵抗（IR）和胰岛素分泌缺陷为发病基础，具体机制尚未明确，目前研究涉及糖脂毒性、炎症反应、氧化应激损伤及线粒体功能障碍等机制。现代中医学者根据T2DM临床特征及自然发展进程，将其命名为“糖络病”，即早期主要表现为血糖异常，随着病程进展，逐渐致全身脉与络广泛损害，最终导致脉络病变的一类疾病。其中脾瘅（肥胖型）是T2DM临床最为常见的类型，“内热致消”贯穿T2DM发病及并发症发生的始终，内热为病机之要。对此临床应用经方大黄黄连泻心汤及其加减方治疗取得显著疗效。笔者通过梳理大黄黄连泻心汤溯源及证治特点、治疗T2DM的临床应用研究及实验基础研究，包括调节糖脂代谢紊乱、改善胰岛素抵抗、调节炎症反应、抗氧化应激损伤、调控自噬相关信号通路、调节肠道菌群、抑制细胞焦亡、减轻内质网应激等作用机制。以期为大黄黄连泻心汤及其加减方防治T2DM及相关并发症的进一步研究提供方向、为将其开发为针对肥胖型T2DM 实现快速降糖的优势中成药提供参考及更好指导该药的临床推广。

关键词： 2型糖尿病大黄黄连泻心汤胰岛素抵抗糖脂代谢研究进展

左归丸通过调控p38 MAPK/ERK信号通路抑制乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：付剑江梅殷珑麻俊超朱小翠王伟吕红江西中医药大学恶性肿瘤中医药诊疗与康复江西省重点实验室

目的：探讨左归丸的抗乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制。方法：为了模拟乳腺癌诱导的破骨性骨转移，本实验采用含50% 乳腺癌细胞MDA-MB-231培养上清的条件培养基培养RAW264.7细胞；实验中左归丸的给药浓度分别为含体积分数5%和10%的左... 详细信息

目的：探讨左归丸的抗乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制。方法：为了模拟乳腺癌诱导的破骨性骨转移，本实验采用含50% 乳腺癌细胞MDA-MB-231培养上清的条件培养基培养RAW264.7细胞；实验中左归丸的给药浓度分别为含体积分数5%和10%的左归丸含药血清。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨细胞活化情况；酶联免疫吸附法（ELISA）检测RAW264.7细胞Cathepsin K分泌；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测骨钙素（OCN）、唾液酸蛋白（BSP）mRNA表达水平；采用免疫共沉淀法检测Runx2与核心结合因子β亚基（CBF-β）间相互作用；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Runt-related transcription factor 2（Runx2）、磷酸化（p-）Runx2、细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）、p-ERK1/2、p38 丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、p-p38 MAPK以及CBF-β等蛋白表达。结果：与空白组相比，MDA-MB-231细胞上清组TRAP阳性细胞数目、Cathepsin K分泌显著增加；p-Runx2蛋白表达、与CBF-β相互作用结合能力、BSP和OCN mRNA表达、p-p38 MAPK和p-ERK1/2蛋白表达显著降低（P<0.01）。与MDA-MB-231细胞上清组相比，左归丸含药血清可显著减少TRAP阳性细胞数目、Cathepsin K分泌（P<0.01），显著增加p-Runx2蛋白表达、BSP和OCN mRNA表达、p-p38 MAPK和p-ERK1/2蛋白表达，并促进Runx2与CBF-β相互作用（P<0.01），而Runx2表达则未见明显改变。与空白组相比，BVD-523组p-p38 MAPK和p-ERK1/2蛋白表达显著降低（P<0.01）；与BVD-523组相比，低、高浓度左归丸含药血清组p-p38 MAPK表达较BVD-523组显著升高（P<0.01），高浓度左归丸含药血清组p-ERK1/2表达也显著升高（P<0.01），低剂量组则无显著差异。结论：左归丸可以通过诱导破骨细胞内骨形成的关键性转录调节蛋白Runx2磷酸化而抑制破骨细胞活化，这一过程与p38 MAPK/ERK信号转导途径的活化密切相关。

关键词：左归丸破骨性骨转移乳腺癌 runt相关转录因子2 p38丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶信号通路

基于多项理论认识下的中医药干预IgA肾病足细胞损伤研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第4期30卷 198-208页

作者：刘永芳刘晖扬陈帮明周莉江西中医药大学附属九江市中医院江西九江332000

免疫球蛋白A(IgA)肾病是我国最常见的原发性肾小球疾病,临床主要表现为蛋白尿、血尿、高血压、水肿、高尿酸血症等,大部分患者起病隐匿,30%~40%患者在确诊10~20年后发展为终末期肾脏病,依赖透析或肾移植维持生命,危害巨大。蛋白尿是该... 详细信息

免疫球蛋白A(IgA)肾病是我国最常见的原发性肾小球疾病,临床主要表现为蛋白尿、血尿、高血压、水肿、高尿酸血症等,大部分患者起病隐匿,30%~40%患者在确诊10~20年后发展为终末期肾脏病,依赖透析或肾移植维持生命,危害巨大。蛋白尿是该病常见临床表现,多数患者表现为少量至中等量蛋白尿,10%~24%患者表现为大量蛋白尿,蛋白尿是影响IgA肾病肾功能进展的主要危险因素。足细胞是肾小球滤过屏障的末端部分,多种因素影响导致足细胞损伤后出现的足细胞足突融合、脱落等是IgA肾病常见组织学病变,且是导致蛋白尿及病程持续进展的关键因素。目前西医针对足细胞损伤的治疗缺乏针对性,干预手段有限,常使用糖皮质激素等药物治疗,不良反应较多。根据足细胞生理功能、损伤后的病理生理学改变及组织形态学改变等,认为其与中医“玄府理论”“肾络癥瘕”“络病理论”和“干血理论”等密切相关。越来越多研究显示,具有多环节、多途径、多靶点等作用特点的中医药干预IgA肾病足细胞损伤疗效明显,能起到保护足细胞、减少蛋白尿的作用,具有较好的应用与研究前景。该文系统总结了IgA肾病足细胞损伤机制与形态学改变、中医理论对足细胞损伤的认识以及中医药治疗IgA肾病足细胞损伤研究进展,以期为中医药干预IgA肾病足细胞损伤的进一步研究与应用提供参考。

关键词：免疫球蛋白A(IgA)肾病足细胞损伤中医理论中药治疗

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基于HS-GC-MS及智能感官技术分析赤石脂炒陈皮炮制前后的挥发性成分差异

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：辛力温佳文龚文慧赵蓓蓓严世豪陈华师乐海平张金莲薛艳华江西中医药大学建昌帮药业有限公司

目的：通过分析赤石脂炒陈皮炮制前后颜色、气味及挥发性成分的差异，探讨炮制后健脾功效增强的物质基础及辅料赤石脂炮制饮片的科学内涵。方法：通过顶空气相色谱-质谱法（HS-GC-MS）对炮制前后样品的挥发性成分进行鉴定及相对定量，... 详细信息

目的：通过分析赤石脂炒陈皮炮制前后颜色、气味及挥发性成分的差异，探讨炮制后健脾功效增强的物质基础及辅料赤石脂炮制饮片的科学内涵。方法：通过顶空气相色谱-质谱法（HS-GC-MS）对炮制前后样品的挥发性成分进行鉴定及相对定量，利用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）对其挥发性成分进行分析，根据变量重要性投影（VIP）值>1.5的原则筛选得到炮制前后的挥发性差异成分，并结合色差仪、电子鼻等智能感官技术识别经赤石脂炒制前后陈皮的色度和气味信息，运用Pearson相关性分析探究挥发性差异成分与色度值之间的关联。结果：从陈皮及赤石脂炒陈皮中共鉴定出112个挥发性成分，其中陈皮检出成分83个、赤石脂炒陈皮检出成分96个，并筛选出α-蒎烯、β-月桂烯、芳樟醇、桧烯、罗勒烯异构体混合物、A-罗勒烯、δ-榄香烯7个差异性成分。陈皮经赤石脂炮制后L*、b*和E*ab降低，a*值升高（P<0.01）；S4、S5、S10、S13传感器响应值升高，S3、S8传感器响应值降低（P<0.05）；相关性分析显示，α-蒎烯、β-月桂烯与L*值、E*ab值呈负相关，与a*值呈正相关；桧烯与L*值、E*ab值呈正相关；芳樟醇与L*值、E*ab值呈正相关，与a*值呈负相关；罗勒烯异构体混合物与L*值呈正相关。结论：陈皮经赤石脂炮制后外观颜色、气味及挥发性成分显著变化，α-蒎烯、β-月桂烯、桧烯、芳樟醇、A-罗勒烯等成分是赤石脂炒陈皮炮制前后挥发性成分的特征性成分，可为陈皮及其炮制品的质量评价和临床应用提供参考。

关键词：陈皮炮制赤石脂 α-蒎烯 β-月桂烯顶空气相色谱-质谱法(HS-GC-MS) 智能感官技术

基于NF-κB信号通路的糖尿病病理机制及中医药干预研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 246-255页

作者：王梦璐石璐何昶昊安永铖吕迎兰王晨李慧敏张慧琳黄艳付宛鑫单子轶赵保胜北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学生命科学学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029

随着人民生活水平的提高,糖尿病的发展形势日益严峻。糖尿病是一种慢性炎症性疾病,患者体内伴随着核转录因子-κB(NF-κB)的表达异常。NF-κB存在于多种组织细胞中,参与调节与免疫功能和炎症有关的多种基因,在机体受到外界刺激的情况下... 详细信息

随着人民生活水平的提高,糖尿病的发展形势日益严峻。糖尿病是一种慢性炎症性疾病,患者体内伴随着核转录因子-κB(NF-κB)的表达异常。NF-κB存在于多种组织细胞中,参与调节与免疫功能和炎症有关的多种基因,在机体受到外界刺激的情况下可被多种因子激活,从而使机体产生炎症等反应。以往对于NF-κB的研究更多的是在癌症领域,尚未对相关信号通路治疗糖尿病的病理机制及中医药治疗进展做系统阐述。查阅国内外相关文献资料发现,在糖尿病发生发展过程中,NF-κB并不是孤立的,而与炎症、氧化应激、能量代谢相关信号分子均有关联并参与介导炎症、胰岛β细胞凋亡、胰岛素信号传导等生理功能。因此阻断NF-κB信号通路的传导有利于治疗糖尿病。目前西医的治疗手段主要包括口服降糖药和注射胰岛素,但不良反应较明显,中医药在治疗糖尿病方面具有靶点多、作用广、疗效优等特点,具有补气活血、理气化痰、清热解毒、滋阴润燥功效的中药及复方可以通过抗炎等作用有效干预NF-κB信号通路在体内的异常表达。该文总结NF-κB信号通路及其与糖尿病的关联关系,并就近5年来中医药干预NF-κB信号通路治疗糖尿病的现代研究进展进行综述,以期为基于NF-κB信号通路探讨糖尿病新的病理机制奠定实验室基础,为糖尿病防治及相关中药新药研发提供新的作用靶点与研究方向。

关键词：核转录因子-κB 信号通路糖尿病炎症中医药