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Toll样受体4在β2GPI诱导小鼠骨髓来源树突状细胞成熟过程中的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第1期30卷 15-18页

作者：刘敬敬周红解鸿翔胥亚张晓蕾孔祥民谢娅超何超江苏大学基础医学与医学技术学院江苏镇江212013

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在β2糖蛋白I(β2GPI)诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)成熟过程中的作用。方法体外联合使用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)诱导TLR4正常(C3H/HeN)及TLR4缺陷(... 详细信息

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在β2糖蛋白I(β2GPI)诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)成熟过程中的作用。方法体外联合使用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)诱导TLR4正常(C3H/HeN)及TLR4缺陷(C3H/HeJ)小鼠的骨髓细胞为未成熟树突状细胞(iDC)。用β2GPI或LPS(阳性对照)对iDC进一步刺激后,采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞术分析细胞表面分子变化,ELISA测定细胞因子IL-12和TNF-α的分泌水平。结果同C3H/HeJ小鼠相比,C3H/HeN小鼠iDC经β2GPI或LPS刺激后,细胞突起较多,形态上更成熟;细胞表面分子CD11c和MHC-Ⅱ的表达量更高(P<0.05);细胞因子IL-12和TNF-α的分泌更强(P<0.01)。结论 TLR4在β2GPI诱导小鼠骨髓细胞来源的树突状细胞成熟过程中起重要作用。

关键词：抗磷脂综合征 132GPI 树突状细胞 Toll样受体4

用四环素诱导调控表达系统构建弓形虫脂肪酸合成酶FABZ缺陷株

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2014年第4期32卷 264-267页

作者：吴亮薛兰兰王晓吴腊梅姜旭淦陈盛霞江苏大学基础医学与医学技术学院镇江212013

目的构建基于四环素诱导调控表达系统的刚地弓形虫β-酮脂酰ACP合成酶(FABZ)缺陷株。方法从弓形虫基因组中扩增fabz基因并构建四环素调控诱导表达载体pTetO7-Sag1-FABZ-Ty-DHFR,电穿孔法导入弓形虫TATi株,通过乙胺嘧啶抗性和极限稀释法... 详细信息

目的构建基于四环素诱导调控表达系统的刚地弓形虫β-酮脂酰ACP合成酶(FABZ)缺陷株。方法从弓形虫基因组中扩增fabz基因并构建四环素调控诱导表达载体pTetO7-Sag1-FABZ-Ty-DHFR,电穿孔法导入弓形虫TATi株,通过乙胺嘧啶抗性和极限稀释法筛选FABZ缺陷株,蛋白质印迹(Western blotting)检测虫体内附加表位标签Ty的表达。在5×105个FABZ缺陷株弓形虫速殖子培养液中加入脱水四环素(终浓度为1μg/ml),Western blotting检测带有Ty标签的FABZ表达情况。结果筛选获得的缺陷株可表达带有Ty标签的转运肽型FABZ和成熟型FABZ。FABZ缺陷株弓形虫速殖子培养液中加入脱水四环素24 h和48 h后,转运肽型FABZ表达量均较对照组显著降低(P<0.05)。结论构建了由脱水四环素调控表达的弓形虫FABZ缺陷株。

关键词：刚地弓形虫脂肪酸代谢酶四环素诱导调控表达系统缺陷株

屋尘螨变应原Der p 33重组蛋白制备及血清IgE结合率

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中国媒介生物学及控制杂志 2023年第1期34卷 21-25,30页

作者：杨李王楠滕飞翔马桂芳孙金霞江苏医药职业学院医学技术学院/基础医学部江苏盐城224005

目的制备屋尘螨变应原第33组分(Der p 33)重组蛋白,并检测其与血清IgE结合率。方法参考GenBank(No. AUX14773)公布的Der p 33核酸序列设计引物,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增Der p 33基因,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后,连接pE... 详细信息

目的制备屋尘螨变应原第33组分(Der p 33)重组蛋白,并检测其与血清IgE结合率。方法参考GenBank(No. AUX14773)公布的Der p 33核酸序列设计引物,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增Der p 33基因,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后,连接pET-28a(+)载体,热转化至大肠埃希菌,挑取阳性重组质粒测序。将pET-28a(+)-Der p 33质粒转入大肠埃希菌Rosetta 2(DE3)plysS中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)大量诱导表达,柱层析纯化后,进行免疫印迹分析。采用生物信息学软件预测Der p 33的结构和理化特性。结果获得了Der p 33的编码基因,全长1 383 bp,编码460个氨基酸,相对分子质量为51 432.81。预测其二级结构包括α-螺旋(40.87%)、β-转角(7.17%)、延伸链(17.39%)和无规则卷曲(34.57%)。获得重组蛋白纯度>95.00%。免疫印迹检测重组Der p 33血清IgE结合率为18.75%(3/16)。结论成功克隆了Der p 33基因,重组蛋白有血清IgE结合活性,为屋尘螨变应原组分诊断试剂以及脱敏治疗生物制品的研发奠定了基础。

关键词：屋尘螨克隆表达蛋白纯化生物信息学

TRAF6在抗β_2GPI/β_2GPI复合物诱导THP-1细胞表达组织因子时的活化

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第5期27卷 487-490页

作者：许国莹周红文海平郭东琳周芳陈东东解鸿翔江苏大学基础医学与医学技术学院江苏镇江212013

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRN... 详细信息

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRNA水平,发色底物法检测细胞TF活性;RT-qPCR及Western blot分别检测细胞TRAF6mRNA和蛋白表达情况;进一步采用蛋白酶体抑制剂MG-132,观察是否能够干预抗β2GPI/β2GPI复合物对细胞的刺激效应。结果:抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)能够刺激THP-1细胞表达TF mRNA及活性,与对照相比差异显著(P<0.05);使细胞TRAF6 mRNA和蛋白表达均增加,并显示时间相关性,分别在刺激15 min和30 min时表达至高峰;MG-132(5μmol/L)明显抑制抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)对THP-1细胞TRAF6 mRNA和蛋白的刺激效应及TF的诱导表达。结论:抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,TRAF6被激活并发挥重要作用。

关键词：抗磷脂综合征抗β2GPI/β2GPI tumor necrosis factor receptor-associated factor6 组织因子

葛根素对脐带间质干细胞增殖与成骨分化的作用

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药学学报 2011年第6期46卷 738-741页

作者：蔡花吴乐乐孙晓春朱伟钱晖胡嘉波许文荣江苏大学基础医学与医学技术学院江苏镇江212013

葛根素是从豆科植物野葛的干燥根中提取的一种异黄酮类化合物[1]。已广泛应用于临床,可治疗多种疾病,如冠心病、心绞痛、心肌梗死等[2？4]。文献报道葛根素能够促进大鼠成骨细胞增殖,抑制破骨细胞的骨吸收活性。

关键词：葛根素脐带间质干细胞成骨分化

信息技术背景下发挥医学高校兼职教学督导职能的方法——以河南中医药大学基础医学院为例

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河南农业 2018年第30期 10-11页

作者：李晓娟崔利宏曹珊河南中医药大学基础医学院

随着教育信息技术的发展和教育理念的更新,学校和教师更加重视学生的个性化发展和综合素质的提高。随着高校教育信息化的推进,教学督导也面临着全新的机遇和挑战。为更好地发挥教学督导在高校教学质量保障体系中的重要作用,增加在职一... 详细信息

随着教育信息技术的发展和教育理念的更新,学校和教师更加重视学生的个性化发展和综合素质的提高。随着高校教育信息化的推进,教学督导也面临着全新的机遇和挑战。为更好地发挥教学督导在高校教学质量保障体系中的重要作用,增加在职一线教师加入教学督导队伍显得尤为重要。

关键词：信息技术高校兼职教学督导

不同性别及长期运动对大鼠肝脏羟自由基代谢与脂质过氧化作用的影响

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中国应用生理学杂志 2009年第2期25卷 149-150,220页

作者：陈月芳蒋璐车力龙钱海肖德生江苏大学基础医学与医学技术学院江苏镇江212013

目的:观察长期运动对大鼠肝脏自由基的影响,及不同性别间可能的差异。方法:SD大鼠随机分为雄性运动组(MEG),雄性静息组(MSG),雌性运动组(FEG),雌性静息组(FSG)。运动组游泳每天2小时,每周游泳5 d(休息2 d),持续3个月。期满后检测肝脏OH.... 详细信息

目的:观察长期运动对大鼠肝脏自由基的影响,及不同性别间可能的差异。方法:SD大鼠随机分为雄性运动组(MEG),雄性静息组(MSG),雌性运动组(FEG),雌性静息组(FSG)。运动组游泳每天2小时,每周游泳5 d(休息2 d),持续3个月。期满后检测肝脏OH.及MDA水平,并分析性别差异。结果:抑制OH.能力FEG(18.78±2.77 U/mg pro)显著高于FSG(14.36±3.94 U/mgpro)(P<0.01),MEG(16.56±3.44 U/mg pro)显著高于MSG(12.85±2.00 U/mg pro)(P<0.05);MDA含量FEG(0.499±0.095 nmol/mg pro)显著低于FSG(0.625±0.073 nmol/mg pro)(P<0.01),MEG与MSG之间无显著差异;肝脏OH.与MDA水平无显著相关。结论:长期运动可降低雌雄大鼠肝脏OH.含量,无性别差异;降低雌性但不影响雄性肝脏脂质过氧化水平,性别差异明显。

关键词：运动羟自由基脂质过氧化肝脏

凝血因子Ⅶa促进SW620细胞增殖与迁移的机制探讨

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中华肿瘤杂志 2009年第7期31卷 485-489页

作者：石文霞周红李娜黄宏亮周保成江苏大学基础医学与医学技术学院镇江212013

目的体外探讨凝血因子Ⅶa促进结肠癌细胞株SW620增殖与迁移的作用机制。方法采用蛋白酶激活受体2激动剂（PAR2-AP）、凝血因子Ⅶa等处理SW620细胞，以实时定量PCR检测SW620细胞中自细胞介素8（IL-8）、组织因子（TF）及半胱氨酸蛋白酶7... 详细信息

目的体外探讨凝血因子Ⅶa促进结肠癌细胞株SW620增殖与迁移的作用机制。方法采用蛋白酶激活受体2激动剂（PAR2-AP）、凝血因子Ⅶa等处理SW620细胞，以实时定量PCR检测SW620细胞中自细胞介素8（IL-8）、组织因子（TF）及半胱氨酸蛋白酶7（caspase-7）mRNA的表达水平；以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清IL-8蛋白的含量；以Xa生成法检测细胞TF活性；以Western blot法检测细胞磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（P—p38MAPK）水平。结果PAR2-AP、凝血因子Ⅶa能够增加SW620细胞中IL-8基因和蛋白的表达，上调TFmRNA水平及活性，下调caspase-7基因表达和P-p38MAPK水平，单克隆抗TF及抗PAR2抗体均可抑制凝血因子Ⅶa的作用。结论凝血因子Ⅶa与细胞表面TF形成复合物，通过活化PAR2，上调结肠癌细胞株SW620中IL-8、TF的表达，下调细胞caspase-7表达，从而促进细胞增殖与迁移能力，p38MAPK在此过程中起负性调节作用。

关键词：结肠肿瘤受体,PAR2 因子Ⅶa 细胞增殖

质谱分析在具有肾脏意义的单克隆免疫球蛋白病中的应用

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中华内科杂志 2023年第4期62卷 471-474页

作者：王鑫鹭徐静孟丽媛潘晓霞上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏内科上海200025 上海交通大学基础医学院基础医学公共技术平台上海200025

以质谱为核心的蛋白质组学技术可分析肾组织病理标本的蛋白表达谱,有效鉴定沉积于肾组织的单克隆蛋白成分,提高了具有肾脏意义的单克隆免疫球蛋白病(MGRS)诊断的准确率,推动了疾病相关生物标志物的发现及发病机制的研究,本文就质谱分析... 详细信息

以质谱为核心的蛋白质组学技术可分析肾组织病理标本的蛋白表达谱,有效鉴定沉积于肾组织的单克隆蛋白成分,提高了具有肾脏意义的单克隆免疫球蛋白病(MGRS)诊断的准确率,推动了疾病相关生物标志物的发现及发病机制的研究,本文就质谱分析在MGRS中应用的最新进展进行了综述。

关键词：单克隆免疫球蛋白病质谱分析法