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重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质构建转基因组织工程材料

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4851-4858页

作者：宁寅宽刘林志周次腊隆宇斌邵阳市中心医院血管外科湖南省邵阳市422000 邵阳市中心医院内分泌科湖南省邵阳市422000 邵阳市中心医院脊柱外科湖南省邵阳市422000

背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路。目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与... 详细信息

背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路。目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与脱钙骨基质体外构建转基因组织工程材料的生物矿化特性。方法:细胞贴壁及密度离心法获得兔骨髓间充质干细胞,增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒以感染复数为100转染第5代兔骨髓间充质干细胞,体外观察转染细胞与未转染细胞的增殖能力、细胞表型、细胞周期以及成骨诱导后碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素表达的差异;增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质在体外构建转基因组织工程材料,对其进行扫描电镜观察及元素能谱分析。结果与结论:增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞后,在转染24,48 h细胞增殖较未转染细胞缓慢(P 0.05);增强型绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞在脱钙骨基质支架上有较好的生物相容性,根据荧光表达强度推测目的基因在2周左右发挥最大生物学功能,且出现了钙磷矿化物沉积,体现出优越的生物矿化特性。

关键词：重组慢病毒载体增强绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞基因治疗生物学特性

儿童肱骨髁上骨折的内外侧和外侧固定比较:系统综述与荟萃分析

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中国组织工程研究 2025年第27期29卷 5924-5932页

作者：陈臻陈曦李晓婷陈达鑫洪伟武汕头市中心医院中医骨伤病区广东省汕头市515000 汕头市中心医院针灸科广东省汕头市515000

目的:肱骨髁上骨折是儿童肘部骨折中最常见的类型,对于移位的肱骨髁上骨折,闭合复位固定是首选的治疗方案,但是对于选择合适的技术仍存在分歧。因而,此次荟萃分析旨在评估单侧和双侧交叉钉固定对儿童肱骨髁上骨折的疗效,为临床治疗提供... 详细信息

目的:肱骨髁上骨折是儿童肘部骨折中最常见的类型,对于移位的肱骨髁上骨折,闭合复位固定是首选的治疗方案,但是对于选择合适的技术仍存在分歧。因而,此次荟萃分析旨在评估单侧和双侧交叉钉固定对儿童肱骨髁上骨折的疗效,为临床治疗提供参考。方法:全面检索PubMed、Embase、Web of Science和the Cochrane Library建库以来至2023-01-06发表的相关随机对照试验,比较儿童肱骨髁上骨折内外侧交叉固定和单纯外侧固定两种术式的疗效差异,主要观察指标是影像学结果(Baumann角丢失、提携角丢失)、肘关节功能和常见并发症(医源性尺神经损伤、针道感染)。结果:①共纳入18项研究;②两组Baumann角丢失(P=0.47)、提携角丢失(P=0.47)情况相比无统计学差异;外侧固定组与内外侧交叉固定组关节功能恢复评分优秀的患儿比例分别为70.7%和74.9%,差异无显著性意义(P=0.12);两组在针道感染发生率上同样无统计学差异(P=0.9),但内外侧交叉固定组医源性尺神经损伤的风险更高(P=0.02);③然而,当采用小切口联合探查时,内外侧交叉固定组尺神经损伤的频率与外侧固定组相比无统计学差异(P=0.2);④在GartlandⅢ型亚组中,两组在关节功能恢复评分优秀率(P=0.13)、尺神经损伤(P=0.13)和针道感染(P=0.61)方面均无统计学差异。结论:荟萃分析结果显示,与外侧固定技术相比,内外侧交叉固定方法更容易造成前臂的医源性神经损伤,但同时也增加了结构的稳定性。不过,通过小切口方法联合内外侧交叉固定似乎可以降低患者神经损伤的风险。因此,儿童肱骨髁上骨折治疗采用小切口结合内外侧交叉固定可能是一种既保证结构稳定、又安全的固定方法。

关键词：肱骨髁上骨折外侧固定内外侧交叉固定外科固定尺神经损伤荟萃分析骨科植入物

PRC1靶向调控Hippo通路促进肾癌细胞增殖和迁移能力

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武汉大学学报(医学版) 2025年第1期 36-40页

作者：万梓宇王霞郑张节王豪阿尔斯·马旦也提彭建平武汉大学中南医院泌尿外科

目的：研究胞质分裂蛋白1(PRC1)对肾癌细胞的增殖和迁移能力的影响并探讨其在肾癌中的作用。方法：使用Gepia2数据库分析PRC1在肾癌中的差异表达和预后。在Caki-1细胞系中使用CRISPR/Cas9技术敲低PRC1的表达。设置对照组和PRC1敲低组（K... 详细信息

目的：研究胞质分裂蛋白1(PRC1)对肾癌细胞的增殖和迁移能力的影响并探讨其在肾癌中的作用。方法：使用Gepia2数据库分析PRC1在肾癌中的差异表达和预后。在Caki-1细胞系中使用CRISPR/Cas9技术敲低PRC1的表达。设置对照组和PRC1敲低组（KO1#、KO2#）,通过CCK-8增殖实验、平板克隆实验、Transwell实验分别观察PRC1对肾癌细胞增殖、迁移能力的影响。通过皮下荷瘤实验评估PRC1在体内的致瘤能力。对PRC1敲除的Caki-1细胞进行RNA-seq测序分析PRC1在肾癌中潜在的致癌机制。结果：PRC1在肾癌组织的表达明显高于癌旁组织（P<0.05）。PRC1高表达的肾癌患者预后更差(P<0.05)，在敲低PRC1后,CCK-8结果显示,PRC1敲低后肾癌细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。平板克隆形成实验结果显示,PRC1敲低后细胞集落形成能力显著下降(P<0.05)。Transwell实验显示，PRC1敲低后细胞迁移能力显著下降(P<0.05)。此外，敲低PRC1的表达抑制了体内荷瘤的致瘤能力。通过对敲除PRC1的Caki-1细胞进行RNA测序，我们发现了Hippo通路是PRC1在肾癌中潜在的作用靶点。结论：PRC1在肾癌组织中表达显著增加，显示出与肾癌不良预后的关联。PRC1通过调控Hippo通路来促进肾癌细胞的增殖和迁移。

关键词：肾癌 PRC1 Hippo通路

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影响小儿腹腔镜下腹股沟疝修补术后效果的危险因素及护理对策

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临床研究 2025年第1期33卷 143-147页

作者：王玲玲张之臣韩玲河南省新乡市中心医院普通外科河南新乡453000 新乡市第四人民医院泌尿外科河南新乡453000

目的探究小儿腹腔镜下腹股沟疝修补术(LIHR)后效果的危险因素及护理对策。方法回顾性分析河南省新乡市中心医院2021年5月至2022年5月收治的87例腹股沟疝患儿的临床资料,根据术后恢复情况将患儿分为恢复良好组及恢复不良组,收集两组患者... 详细信息

目的探究小儿腹腔镜下腹股沟疝修补术(LIHR)后效果的危险因素及护理对策。方法回顾性分析河南省新乡市中心医院2021年5月至2022年5月收治的87例腹股沟疝患儿的临床资料,根据术后恢复情况将患儿分为恢复良好组及恢复不良组,收集两组患者的一般社会学特征和疾病相关特征,选择Logistic回归分析有差异项目,分析腹股沟疝患儿接受LIHR术后恢复不良的主要影响因素,并构建受试者工作特征(ROC)曲线对危险因素的预测效能进行验证。结果本研究共纳入87例行LIHR术患儿,23例患儿恢复较差,占26.44%,纳入恢复不良组,64例患儿恢复良好,占73.56%,纳入恢复良好组;两组患儿在哭闹情况、术前年龄别体重Z值(WAZ)、疝嵌顿、改良的耶鲁术前焦虑状态量表(m-YPAS)评分及TIMP-2比较,差异有统计学意义(P40分及TIMP-2水平偏低均是患儿术后恢复不良的危险因素。基于多因素分析的危险因素构建ROC曲线,结果显示哭闹情况的曲线下面积(AUC)值为0.712,敏感度为0.783,特异度为0.641;术前WAZ值≤-2的AUC值为0.698,敏感度为0.739,特异度为0.656;疝嵌顿的AUC值为0.678,敏感度为0.652,特异度为0.703;m-YPAS评分>40的AUC值为0.692,敏感度为0.696,特异度为0.688;TIMP-2水平偏低的AUC值为0.694,敏感度为0.531,特异度为0.870,均能预测术后恢复不良的发生。结论哭闹多、术前WAZ值≤-2、嵌顿疝、m-YPAS评分>40分及术前TIMP-2水平较低均是影响腹股沟疝患儿LIHR术后恢复不良的危险因素,护理人员应予以重视,采取有效措施,提高患儿预后。

关键词：腹股沟疝腹腔镜腹股沟疝修补术疝嵌顿营养不良

黄芪三七合剂抑制lncRNA Gm51500/Adam12轴改善CKD肾脏纤维化

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中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：林婧怡韩壤乐徐玲慧谭睿陟粟宏伟王丽西南医科大学附属中医医院中西医结合研究中心西南医科大学附属中医医院泌尿外科

目的：通过对单侧输尿管结扎小鼠组及黄芪三七合剂干预组的肾脏进行转录组测序，利用生物信息学验证差异显著的lncRNA，探究黄芪三七合剂（AP）对改善肾脏纤维化的潜在机制。方法：将24只C57小鼠分为假手术组、肾脏纤维化组、黄芪三七... 详细信息

目的：通过对单侧输尿管结扎小鼠组及黄芪三七合剂干预组的肾脏进行转录组测序，利用生物信息学验证差异显著的lncRNA，探究黄芪三七合剂（AP）对改善肾脏纤维化的潜在机制。方法：将24只C57小鼠分为假手术组、肾脏纤维化组、黄芪三七合剂干预组（3.944 g/kg）及厄贝沙坦阳性对照干预组，每组6只小鼠。采用单侧输尿管结扎（UUO）建立肾纤维化小鼠模型。术后予以灌胃给药，连续给药7 d后处死动物并采集标本。通过HE、Masson染色分析黄芪三七合剂对肾纤维化病理损伤的改变，同时通过Western blot、免疫组化检测各组肾脏组织Fn、α-SMA的蛋白水平，评估黄芪三七合剂对肾纤维化的缓解作用。随后通过转录组测序，获取了lncRNA的表达信息，在分析数据质量、GO富集和差异lncRNA后进行Quantitative Real-time PCR（qPCR）验证，根据测序所获得的差异lncRNA及靶点分析结果，在体外过表达lncRNA Gm51500/Adam12，用免疫组化及免疫荧光染色和qPCR验证的方式，研究其在黄芪三七合剂保护肾脏纤维化中的作用机制。结果：与模型组比较，黄芪三七合剂干预组小鼠的肾脏纤维化明显减轻，其肾脏组织中α-SMA、Fn的蛋白水平及lncRNA的表达量均显著下调（P<0.0001）。筛选并验证3个lncRNA在模型组增加且AP干预后显著降低，分别为lncRNA Gm29994、Gm51500及Gm35391。靶点分析显示lncRNA Gm51500与Adam12的关系最显著。动物实验结果表明，Adam12在UUO小鼠肾脏中高表达，AP干预后被显著抑制。随后的细胞实验证实，过表达lncRNA Gm51500可上调TGF-β诱导的肾小管细胞纤维化以及Adam12的表达。细胞回复实验明确了过表达Adam12逆转了AP对肾小管细胞损伤和纤维化的抑制作用。结论：黄芪三七合剂可以改善肾脏纤维化，基于转录组测序发现lncRNA Gm51500/Adam12轴可能是黄芪三七合剂改善肾脏纤维化的潜在靶点。

关键词：黄芪三七合剂肾脏纤维化 lncRNA 高通量测序

机械敏感通道Piezo 1和Piezo 2促进幼鼠神经源性膀胱纤维化的初步研究

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现代泌尿外科杂志 2025年

作者：吕磊张艳平李琦王俊魁杨帅周钊凯李帅文一博刘亚凯司国威刘星辰文建国郑州大学第一附属医院泌尿外科河南省小儿尿动力国际联合实验室郑州大学第一附属医院小儿外科郑州大学第一附属医院超声科新乡医学院第一附属医院泌尿外科信阳市中心医院妇科

目的探究机械敏感通道Piezos(Piezo 1和Piezo 2)在神经源性膀胱(NB)幼鼠中的变化及其对膀胱纤维化的作用,为临床寻找治疗NB的新靶点提供参考。方法将30只雌性幼年SD大鼠按随机数表法分为5组:假手术组(Sham组)、神经离断2周组(NB-2W组... 详细信息

目的探究机械敏感通道Piezos(Piezo 1和Piezo 2)在神经源性膀胱(NB)幼鼠中的变化及其对膀胱纤维化的作用,为临床寻找治疗NB的新靶点提供参考。方法将30只雌性幼年SD大鼠按随机数表法分为5组:假手术组(Sham组)、神经离断2周组(NB-2W组)、神经离断6周组(NB-6W组)、神经离断+Piezos抑制剂2周组(NB-P-2W组)和神经离断+Piezos抑制剂6周组(NB-P-6W组),每组6只。通过离断幼鼠L6及S1脊神经构建NB动物模型,神经离断组造模后不进行干预,神经离断+Piezos抑制剂组则在造模后每2天腹腔注射Piezos抑制剂GsMTx4(10 mg/kg)。在离断后2周和6周进行幼鼠膀胱测压和超声检查,并取膀胱组织检测Piezos及纤维化相关指标Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的相对表达水平。结果膀胱测压显示,NB-2W组幼鼠基础膀胱压力明显升高,NB-6W组略有下降但仍高于Sham组(P<0.05)。NB-P-2W组的基础膀胱压力低于NB-2W组但较Sham组高,NB-P-6W组的基础膀胱压力低于NB-6W组但高于Sham组(P<0.05)。与Sham组比较,NB-2W组和NB-6W组最大膀胱测压容量(MCC)出现先升高后下降趋势(P<0.05)。与NB-2W组比较,NB-P-2W组的漏尿点压(BLPP)更低,MCC和膀胱顺应性(BC)更高(P<0.05);与NB-6W组比较,NB-P-6W组的BLPP更低,MCC和BC更高(P<0.05)。HE、MASSON染色及超声结果显示,随着神经离断时间延长,膀胱纤维化逐渐加重,膀胱壁粗糙增厚,内可见结石,肾脏逐渐出现肾盂扩张积水,而NB-P-2 W组和NB-P-6 W组纤维化程度轻于NB-2 W组和NB-6 W组,未见上尿路扩张积水。此外,Weston blot及免疫组化结果显示NB-2W组和NB-6W组的Piezos、CollagenⅠ及α-SMA的相对表达水平明显高于Sham组(P<0.01);NB-P-2W组和NB-P-6W组的Piezos、CollagenⅠ及α-SMA的相对表达水平则分别低于NB-2W组和NB-6W组(P<0.01)。结论机械敏感通道Piezos在NB幼鼠中表达升高,可能参与膀胱纤维化进展,但其机制有待进一步研究。

关键词： Piezo 1 Piezo 2 神经源性膀胱膀胱纤维化幼鼠机械敏感通道

piR-7472影响电压调控钾离子通道促进小鼠成骨细胞分化的机制

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2868-2874页

作者：隆宇斌王湘斌樊基耿杨厚志杨洋李勇邵阳市中心医院脊柱外科湖南省邵阳市422000 天津医科大学研究生院天津市300070 邵阳市中心医院肿瘤内科湖南省邵阳市422000

背景:现有研究在PIWI相互作用RNA(piRNA)抗骨质疏松方面取得了重大进展,但piRNA发挥功能的具体靶点和相关机制仍有待探索。目的:探讨piR-7472对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)分化的影响及下游机制。方法:①12只C57/BL6J小鼠随机分为假手... 详细信息

背景:现有研究在PIWI相互作用RNA(piRNA)抗骨质疏松方面取得了重大进展,但piRNA发挥功能的具体靶点和相关机制仍有待探索。目的:探讨piR-7472对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)分化的影响及下游机制。方法:①12只C57/BL6J小鼠随机分为假手术组和卵巢切除组,每组6只,术后8周通过Micro-CT检测小鼠的骨量,RT-qPCR检测piR-7472的表达;②将MC3T3-E1细胞分为NC mimics组、piR-7472 mimics组、NC inhibitor组与piR-7472 inhibitor组,转染后成骨诱导7 d采用RT-qPCR检测piR-7472、骨桥蛋白、胶原蛋白Ⅰ、Runt相关转录因子2、钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1 mRNA的表达;成骨诱导7 d采用Western blot检测骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1(KCNF1)蛋白表达;成骨诱导14 d通过碱性磷酸酶染色检测碱性磷酸酶的表达;成骨诱导21 d通过茜素红染色检测矿化结节数量;③双荧光素酶报告基因实验观察piR-7472是否能与钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1相结合。结果与结论:①与假手术组相比,卵巢切除组小鼠骨密度、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量明显下降,骨小梁分离度明显升高,并且骨组织中piR-7472 mRNA表达明显下调;②与NC组相比,piR-7472 mimics组骨桥蛋白、胶原蛋白Ⅰ、Runt相关转录因子2的mRNA表达明显升高,骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2的蛋白表达明显升高,矿化沉积与碱性磷酸酶表达增多;与NC inhibitor组相比,piR-7472 inhibitor组骨桥蛋白、胶原蛋白Ⅰ、Runt相关转录因子2的mRNA表达明显降低,骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2的蛋白表达明显降低,矿化沉积与碱性磷酸酶表达降低;③通过miRanda数据库预测发现piR-7472能与KCNF1相互作用;双荧光素酶报告基因实验发现piR-7472 mimcis能与钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1结合并促进其表达。结果表明:piR-7472能够促进成骨前体细胞MC3T3-E1成骨分化,其发挥作用的机制可能是通过促进KCNF1表达实现的。

关键词：成骨细胞MC3T3-E1 PIWI相互作用RNA 成骨分化骨质疏松症电压调控的钾离子通道 KCNF1

基于风格迁移的柔性输尿管内窥镜图像深度估计

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天津大学学报（自然科学与工程技术版） 2025年第1期58卷 47-55页

作者：辛运帏尹晶晶赵煜代煜崔亮殷小涛南开大学网络空间安全学院天津300071 天津市网络与数据安全技术重点实验室天津300071 南开大学机器人与信息自动化研究所天津300350 民航总医院泌尿外科北京100123 解放军总医院第四医学中心泌尿外科北京100048

输尿管内窥镜手术是目前针对肾结石的主流治疗方案,其外形细长、镜体柔软,能够灵活穿越人体自然腔道的内径狭窄的尿道和输尿管,检查视野范围更广,使医生能够更好地观察到病变区域.但一般的输尿管内窥镜仅配备单目摄像头进行配合手术操作... 详细信息

输尿管内窥镜手术是目前针对肾结石的主流治疗方案,其外形细长、镜体柔软,能够灵活穿越人体自然腔道的内径狭窄的尿道和输尿管,检查视野范围更广,使医生能够更好地观察到病变区域.但一般的输尿管内窥镜仅配备单目摄像头进行配合手术操作,无法借助额外设备获取数据导致了其图像信息的匮乏;同时,相比于胃肠、鼻镜等手术场景,本研究的肾内场景在不具备公开数据集的同时,图像质量参差不齐,表面纹理细节不足,孔洞区域褶皱少,受模糊反光等干扰大,都易使深度估计受到影响针对以上问题,提出了一种基于改进风格迁移模型的深度估计方法.该方法首先根据术前CT图像重建肾脏内部腔道模型并提取中心路径,将虚拟内窥镜的摄像头设置在插值后的路径点上,构建了虚拟内窥镜漫游图像与深度估计图像一一对应的数据集,并基于此数据集训练了一个深度估计模型;随后,使用添加高效通道注意力(ECA)模块的改进风格迁移模型,将真实内窥镜图像域迁移至虚拟内窥镜图像域;最后,再将经由风格迁移产生的虚拟内窥镜图像送入上述训练得来的深度估计模型中,最终实现真实内窥镜图像的深度估计.所提方法的可行性及有效性在输尿管钬激光碎石术的图像中得到验证.

关键词：深度估计风格迁移注意力机制深度学习

人尿源性干细胞的分离培养及诱导分化为平滑肌细胞

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4076-4082页

作者：陈佳汇戴晓琪徐彦钢李远超黄妹詹一飞杜宇轩李鎏强郭耀川卞军赖德辉广州医科大学附属第五医院泌尿外科广东省广州市510000 广州市中西医结合医院泌尿外科广东省广州市510000 广州中医药大学临床针灸康复学院广东省广州市510000

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞... 详细信息

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向。鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞诱导方案效能的对比研究仍较为匮乏。目的:旨在分离、培养及鉴定人尿源性干细胞,并比较两种不同成平滑肌诱导方案的效果。方法:采用多次离心法从11份健康成人志愿者尿液中分离提取尿源性干细胞,使用流式细胞仪进行表面标志物的鉴定,通过成骨、成脂诱导分化来验证尿源性干细胞的多向分化潜能。尿源性干细胞分别在含转化生长因子β1以及转化生长因子β1联合血小板衍生生长因子的成平滑肌细胞诱导分化培养基中诱导分化14 d,采用免疫荧光染色和Western blot检测平滑肌特异性蛋白(α-SMA、SM22)的表达差异。结果与结论:①成功从8份健康人尿液中分离出尿源性干细胞,细胞呈“米粒”样,具有很好的分裂增殖能力;②尿源性干细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD73、CD90和CD44,极低表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45,不表达CD19、CD105和HLA-DR;③经成骨和成脂诱导分化后,可见明显的钙结节和脂滴形成,茜素红染色和油红O染色结果呈阳性;④成平滑肌诱导培养14 d,免疫荧光染色显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组尿源性干细胞成平滑肌诱导分化率显著高于转化生长因子β1组(P<0.005);⑤成平滑肌诱导培养14 d,Western blot检测显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组α-SMA和SM22蛋白表达量显著高于转化生长因子β1组(P<0.005)。结果表明:尿源性干细胞可以通过多次离心法无创分离获取;相较于单纯转化生长因子β1,转化生长因子β1/血小板衍生生长因子联合应用能显著提高尿源性干细胞诱导分化为平滑肌细胞的效率。

关键词：尿源性干细胞诱导分化平滑肌细胞转化生长因子β1 血小板衍生生长因子组织工程