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蛋白酶抑制剂对人类肥大细胞类胰蛋白酶和类糜蛋白酶催化活性的调节(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第9期24卷 85-91+113页

作者：何韶衡陈谱陈韩秋汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所汕头 515031 中国

目的:在同一实验系统中研究蛋白酶抑制剂对人类肥大细胞类胰蛋白酶和类糜蛋白酶催化活性的调节作用。方法:应用高盐提取、肝素凝胶亲和层析和S-200凝胶过滤层析的方法纯化人肺类胰蛋白酶和人皮肤类糜蛋白酶,蛋白酶抑制剂对类胰蛋白酶和... 详细信息

目的:在同一实验系统中研究蛋白酶抑制剂对人类肥大细胞类胰蛋白酶和类糜蛋白酶催化活性的调节作用。方法:应用高盐提取、肝素凝胶亲和层析和S-200凝胶过滤层析的方法纯化人肺类胰蛋白酶和人皮肤类糜蛋白酶,蛋白酶抑制剂对类胰蛋白酶和类糜蛋白酶催化活性的调节作用则由酶-底物反应实验来测定。结果:纯化后的类胰蛋白酶和类糜蛋白酶的比活分别为2.1U/mg蛋白质和4.9U/mg蛋白质。两种纯化产物在SDS-PAGE上均显示为单一条带。非内源性蛋白酶抑制剂N-(1-羟基-2-萘基)-L-精氨酰-L-脯氨酰胺-盐酸、亮肽素、antipain、苯甲脒、鱼精蛋白可抑制90％的类胰蛋白酶催化活性,而大豆胰蛋白酶抑制剂、Z-异亮氨酸-谷氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸-CO2甲基、抑凝乳蛋白酶素则抑制类糜蛋白酶催化活性的95％,内源性蛋白酶抑制剂α1-抗胰蛋白酶和分泌性白细胞蛋白酶抑制剂抑制90％以上的类糜蛋白酶催化活性,但乳铁蛋白却表现出具有增加类糜蛋白酶催化活性的作用,这三种内源性蛋白酶抑制剂均表现出较弱的抑制类胰蛋白酶的作用。结论:本实验所采用的蛋白酶抑制剂具有相对好的类胰蛋白酶或类糜蛋白酶选择性,表明它们可被应用于抑制剂药物的开发过程中。

关键词：类胰蛋白酶类糜蛋白酶肥大细胞乳铁蛋白蛋白酶抑制剂

含胍基类肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂的特性及功能研究进展

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中国药学杂志 2004年第10期39卷 727-730页

作者：王贤杰何韶衡汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所广东汕头515031

目的介绍含胍基类肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂的特性及功能研究进展。方法利用PubMed,Medline,Google Search,JBC-Search,HighWire等软件查阅了国内外的所有相关文献,并对相关内容进行了概括和总结。结果目前共有5种含胍基化合物被发... 详细信息

目的介绍含胍基类肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂的特性及功能研究进展。方法利用PubMed,Medline,Google Search,JBC-Search,HighWire等软件查阅了国内外的所有相关文献,并对相关内容进行了概括和总结。结果目前共有5种含胍基化合物被发现具有抑制类胰蛋白酶活性的作用,其中APC2059已经完成了Ⅱ期临床试验。结论含胍基类肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂是一类可望成为临床治疗药物的化合物。

关键词：肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂胍基

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植物过敏性蛋白质及其生物学功能(英文)

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第9期35卷 789-792页

作者：李东栋何韶衡汕头大学医学院变态反应与炎症学研究所汕头大学医学院变态反应与炎症学研究所汕头515031

在引起I型超敏反应的变应原中 ,植物的花粉、果实和汁液可以分别作为吸入性变应原 (inhalentallergen)、食入性变应原 (ingestentallergen)、接触性变应原 (contactentallergen)使过敏者患上鼻炎、哮喘、枯草热等疾病。而其中引起这些... 详细信息

在引起I型超敏反应的变应原中 ,植物的花粉、果实和汁液可以分别作为吸入性变应原 (inhalentallergen)、食入性变应原 (ingestentallergen)、接触性变应原 (contactentallergen)使过敏者患上鼻炎、哮喘、枯草热等疾病。而其中引起这些超敏反应的植物类蛋白质本身在植物体内亦行使着特定的生物学功能。对这些植物类过敏性蛋白质的研究不仅在植物学本身研究中具有一定意义 ,同时在变态反应性疾病的免疫治疗中亦具有重要的应用价值。目前 ,这类涉及植物学、免疫学和变态反应学的研究逐渐形成了一个新的交叉研究领域。

关键词：植物过敏性蛋白质功能变态反应

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豚草花粉泛过敏原同源基因克隆与序列分析

中华微生物学和免疫学杂志 2004年第3期24卷 169-173页

作者：陶爱林何韶衡汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所 515031

目的　克隆豚草花粉泛过敏原同源基因。方法　采用生物信息学分析方法对众多的花粉过敏原基因进行序列同源性比较 ,以序列保守区域为依据设计合成简并引物 ,在特殊的RT PCR条件下 ,结合RACE技术对豚草花粉中的过敏原全长基因进行克隆 ;... 详细信息

目的　克隆豚草花粉泛过敏原同源基因。方法　采用生物信息学分析方法对众多的花粉过敏原基因进行序列同源性比较 ,以序列保守区域为依据设计合成简并引物 ,在特殊的RT PCR条件下 ,结合RACE技术对豚草花粉中的过敏原全长基因进行克隆 ;通过Northern杂交及序列分析初步确定基因产物是否为花粉过敏原。结果　获得了 3个新的全长基因。序列分析显示 :所得过敏原同源基因与数十种不同种属来源的过敏原肌动蛋白结合蛋白 (profilin)具有较高的同源性 ,初步认定其为泛过敏原 ,并暂命名为Amba 8(t)。Northern杂交证实该基因在花粉中表达。结论　采用本研究方法成功地在豚草花粉中克隆到 3个泛过敏原基因。

关键词：基因克隆泛过敏原豚草同源基因生物信息学 RACE技术

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食入性过敏原杏仁蛋白组分的双向电泳分析

细胞与分子免疫学杂志 2004年第4期20卷 473-477页

作者：李东栋何韶衡汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所广东汕头515031

目的 :应用蛋白质双向电泳的分析技术 ,对一种主要的食入性过敏原杏仁果实的蛋白质组分进行分析。方法 :通过三氯乙酸法提取杏仁果实总蛋白质 ,通过等电聚焦和第 2向SDS PAGE分析获得完整的杏仁果实全蛋白质的图谱 ,并应用相应分析软件 ... 详细信息

目的 :应用蛋白质双向电泳的分析技术 ,对一种主要的食入性过敏原杏仁果实的蛋白质组分进行分析。方法 :通过三氯乙酸法提取杏仁果实总蛋白质 ,通过等电聚焦和第 2向SDS PAGE分析获得完整的杏仁果实全蛋白质的图谱 ,并应用相应分析软件 (ImageMaster 2D)对电泳图谱进行分析。结果 :通过等电聚焦和第 2向SDS PAGE ,有 188个不同的蛋白质组分被检测出来。其中大约 2 8%的蛋白质等电点 (pI)在 4 .5～ 5 .5之间 ,大约 6 2 %的蛋白质的相对分子质量 (Mr)在 (2 0～ 2 5 )× 10 3 之间。结论 :所获得的高分辨率的双向电泳图谱 ,是我国杏仁果实蛋白质第一张完整的蛋白质图谱 ,为今后杏仁果实中致敏蛋白质的检测 ,分离、基因克隆和变应原的标准化奠定了基础。

关键词：杏仁果实变应原蛋白质组分双向电泳

抗人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂单克隆抗体的制备与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第1期22卷 54-57页

作者：陈玉珍何韶衡周艳春黄阗刘岳宁陈霖霏汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所广东汕头515031

目的制备抗人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(hSL-PI)单克隆抗体(mAb)。方法以hSLPI为免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hSLPI mAb。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞术、激... 详细信息

目的制备抗人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(hSL-PI)单克隆抗体(mAb)。方法以hSLPI为免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hSLPI mAb。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞术、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性。结果获得4株可稳定分泌抗hSLPI mAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb均为IgM。Western blot分析表明,此株mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为12000。免疫组化染色表明,mAb与肺和结肠组织的上皮细胞、疑似肥大细胞、扁桃体和包皮组织的疑似肥大细胞的反应性均呈阳性。流式细胞术分析显示,4株mAb与人肺腺癌细胞系A549细胞中的SLPI均呈阳性反应。激光共聚焦扫描显微镜观察,荧光标记的阳性反应物主要位于A549细胞的胞质内。结论成功地制备抗hSLPI mAb,为变态反应性疾病和炎症性疾病的研究工作提供了有用的试剂。

关键词：人分泌性白细胞蛋白酶抑制剂单克隆抗体特性鉴定

2005—2023年广东省南澳县肺结核流行特征分析

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结核与肺部疾病杂志 2024年第4期5卷 317-324页

作者：赵文丽方梓昊徐雁南刘苏洋林健雄陈壮濠符慧陈蕊明常巧呈汕头大学公共卫生学院汕头515063 广东省汕头市结核病防治所汕头515031

目的:分析南澳县2005—2023年监测数据中结核病报告发病流行特征和变化规律,为结核病防控措施的制定提供参考依据。方法:通过“中国疾病预防控制信息系统”的子系统“结核病管理信息系统”筛选2005—2023年广东省汕头市南澳县登记管理... 详细信息

目的:分析南澳县2005—2023年监测数据中结核病报告发病流行特征和变化规律,为结核病防控措施的制定提供参考依据。方法:通过“中国疾病预防控制信息系统”的子系统“结核病管理信息系统”筛选2005—2023年广东省汕头市南澳县登记管理的肺结核患者病案数据。南澳县各年度人口学资料来源于《南澳统计年鉴》。采用描述性流行病学方法分析2005—2023年南澳县肺结核监测报告数据,描述其发病的主要特征,并采用Joinpoint回归模型分析结核病的发病变化趋势。结果:2005—2023年南澳县共报告结核病患者1636例,年均报告发病率为134.79/10万,其中病原学阳性肺结核患者占34.72%(568/1636),发病率曲线呈波动分布[平均年度变化百分比(AAPC)=-5.478%,P<0.001]。无明显季节性高峰。在报告的1636例患者中,男性1211例,女性425例;利福平耐药患者9例,且均为男性;发病年龄以60~69岁人群为主(415例,占25.37%);职业以家务及待业为主(628例,占38.39%)。结论:南澳县结核病发病率总体呈现下降趋势,应进一步加强对男性、老年人、家务及待业人群的防控。

关键词：结核,肺发病率流行病学研究小地区分析

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特异性类胰蛋白酶抑制剂双苯甲脒对肥大细胞分泌的调控作用

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第1期19卷 100-102页

作者：谢华何韶衡汕头大学医学院变态反应学和炎症学研究所广东汕头515031

目的:研究新型的特异性类胰蛋白酶抑制剂双苯甲脒,对肥大细胞稳定性的影响。方法:扁桃体组织经酶消化后,将细胞成分用全HEPES缓冲盐溶液(HBSS)重新悬浮。肥大细胞激发和抑制剂作用的试验在试管中37℃条件下完成。类胰蛋白酶水平用ELIS... 详细信息

目的:研究新型的特异性类胰蛋白酶抑制剂双苯甲脒,对肥大细胞稳定性的影响。方法:扁桃体组织经酶消化后,将细胞成分用全HEPES缓冲盐溶液(HBSS)重新悬浮。肥大细胞激发和抑制剂作用的试验在试管中37℃条件下完成。类胰蛋白酶水平用ELISA法测定。结果:同时加入扁桃体细胞悬液中的双苯甲脒,可以剂量依赖的方式抑制抗IgE诱导的类胰蛋白酶释放。仅1 mg/L(1.54μmol/L)的双苯甲脒,即可抑制肥大细胞释放类胰蛋白酶达52％,10 mg/L则能抑制76％的释放。将预培养时间延长30 min,对双苯甲脒的抑制作用无明显影响。在培养到45 min时,双苯甲脒可抑制高达47％的基础类胰蛋白酶释放。与细胞培养15 min后,抗IgE抗体(1g/L)或钙离子导入剂(CI,1 μmol/L)引起的类胰蛋白酶释放的量,分别为基础分泌量的3.2和2.6倍。但是,当细胞与全HBSS预培养超过10 min后,肥大细胞对抗IgE抗体或CI的反应性明显降低。结论:双苯甲脒能够抑制人类扁桃体肥大细胞的IgE依赖性类胰蛋白酶释放。因此,有望开发成为一种新型的肥大细胞稳定剂。

关键词：特异性类胰蛋白酶抑制剂双苯甲脒肥大细胞调控作用

过敏性紫癜患儿血浆白细胞介素分泌谱及其临床意义

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中华儿科杂志 2005年第4期43卷 312-313页

作者：陈谱何韶衡陈穗广东汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所 515031

为探讨过敏性紫癜 (Henoch-Schonlein purpura,HSP) 患儿T细胞、中性粒细胞(Neu)、嗜酸性粒细胞(Eos)、肥大细胞(MC)及其分泌的白细胞介素(IL)水平改变及临床意义,我们对2001年9月至2003年8月在我院住院HSP患儿进行了血浆IL-4、8、10、1... 详细信息

为探讨过敏性紫癜 (Henoch-Schonlein purpura,HSP) 患儿T细胞、中性粒细胞(Neu)、嗜酸性粒细胞(Eos)、肥大细胞(MC)及其分泌的白细胞介素(IL)水平改变及临床意义,我们对2001年9月至2003年8月在我院住院HSP患儿进行了血浆IL-4、8、10、16、17、18、γ干扰素(IFN-γ)和嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)值检测.现报道如下.

关键词：过敏性紫癜临床意义患儿分泌血浆嗜酸性粒细胞趋化因子白细胞介素(IL) 2003年8月中性粒细胞 2001年 IFN-γ 肥大细胞 IL-4 γ干扰素 T细胞 HSP