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牙龈卟啉单胞菌持留菌通过上调叉头盒转录因子1信号通路诱发巨噬细胞炎症反应

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中华口腔医学杂志 2024年第7期59卷 672-680页

作者：王川王蕾蕾李璇金力坚曹正国武汉大学口腔医(学)院牙周科武汉430079 武汉大学口腔医(学)院、口颌系统重建与再生全国重点实验室、口腔生物医学教育部重点实验室、口腔医学湖北省重点实验室武汉430079 香港大学牙医学院牙周与种植科中国香港999077

目的探索牙龈卟啉单胞菌(Pg)持留菌(Ps)对巨噬细胞免疫炎症反应的影响及其作用机制。方法将Pg(ATCC 33277)悬浮培养和生物膜培养至对数末期(72 h)后,不使用药物处理以及使用高浓度甲硝唑(100 mg/L)和(或)阿莫西林(100 mg/L)处理不同时间... 详细信息

目的探索牙龈卟啉单胞菌(Pg)持留菌(Ps)对巨噬细胞免疫炎症反应的影响及其作用机制。方法将Pg(ATCC 33277)悬浮培养和生物膜培养至对数末期(72 h)后,不使用药物处理以及使用高浓度甲硝唑(100 mg/L)和(或)阿莫西林(100 mg/L)处理不同时间,分别为空白对照组、甲硝唑组、阿莫西林组、甲硝唑+阿莫西林组,采用血平板计数法检测持留菌生成数量,细菌活死染色检测Ps的生存状态;不使药物处理以及使用Pg和甲硝唑处理的PgPs(M-PgPs)刺激巨噬细胞,分别为空白对照组(不经任何处理)、Pg组、M-PgPs组;通过透射电镜观察细菌进入细胞内部的情况;使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测巨噬细胞内炎症相关指标的表达情况;通过RT-qPCR检测巨噬细胞叉头盒转录因子1(FOXO1)信号通路的激活情况;利用共聚焦免疫荧光显微镜检测FOXO1在巨噬细胞内的分布情况。使用FOXO1抑制剂(Fi)和激活剂(Fa)处理巨噬细胞后,用Pg和M-PgPs刺激巨噬细胞,分别为空白对照组(不经任何处理)、Pg组、M-PgPs组、Fi组、Fi+Pg组、Fi+M-PgPs组、Fa组、Fa+Pg组和Fa+M-PgPs组,通过RT-qPCR和ELISA法检测巨噬细胞内炎症相关指标的表达情况。结果悬浮培养和生物膜中的Pg经过高浓度的甲硝唑和(或)阿莫西林处理后,均无法被完全杀灭,且存活的Ps可重新生长形成菌落;Pg和M-PgPs均可进入巨噬细胞内部且巨噬细胞中的炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达量[Pg组分别为(2392±188)、(162±29)、(5558±661)、(789±155)μg/L;M-PgPs组分别为(2415±420)、(155±3)、(5732±782)、(821±176)μg/L]均显著高于空白对照组[分别为(485±140)、(21±9)、(2332±87)、(77±7)μg/L](均P<0.01)。同时,Pg和M-PgPs均可促进巨噬细胞内FOXO1入核,巨噬细胞内FOXO1信号通路相关基因FOXO1、BCL6和KLF2 mRNA的相对表达量均显著高于空白对照组(均P<0.05)。另外,Fi+Pg组IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的蛋白表达量[分别为(1081±168)、(70±8)、(1976±544)、(420±47)μg/L]均显著低于Pg组[分别为(4411±137)、(179±6)、(5161±929)、(934±24)μg/L](均P<0.05);Fi+M-PgPs组IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的蛋白表达量[分别为(1032±237)、(74±10)、(1861±614)、(405±32)μg/L]均显著低于M-PgPs组[分别为(4342±314)、(164±17)、(4438±1374)、(957±25)μg/L](均P<0.05)。相反,Fa+Pg组IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α蛋白表达量[分别为(8198±1825)、(431±28)、(8919±650)、(2186±301)μg/L]以及Fa+M-PgPs组蛋白表达量[分别为(8159±2627)、(475±26)、(8995±653)、(2255±387)μg/L]均显著高于Pg组和M-PgPs组(均P<0.05)。结论PgPs对甲硝唑和阿莫西林表现出高度耐药性;M-PgPs通过上调FOXO1信号通路诱发巨噬细胞的免疫炎症反应,该作用与未经药物处理的Pg无显著差异。

关键词：牙周炎紫单胞菌龈叉头转录因子类持留菌巨噬细胞免疫炎症反应

基于环介导等温技术检测人甲流H1N1病毒的响应面优化分析

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中国当代医药 2024年第16期31卷 116-121页

作者：蔡文凯郝宗杰苏业俣林艺平厦门医学院药学系福建厦门361000 武汉兰丁云医学检验实验室有限公司检验科湖北武汉430000 厦门市集美区疾病预防控制中心检验科福建厦门361000

目的为了建立人甲型流感H1N1病毒的环介导等温扩增(LAMP)体系,本研究以H1N1病毒核酸扩增效率为指标,通过响应面分析优化探讨LAMP检测H1N1流感病毒的最佳反应条件。方法根据Box-Benhnken响应设计原理,对影响LAMP反应关键因素(甜菜碱浓度... 详细信息

目的为了建立人甲型流感H1N1病毒的环介导等温扩增(LAMP)体系,本研究以H1N1病毒核酸扩增效率为指标,通过响应面分析优化探讨LAMP检测H1N1流感病毒的最佳反应条件。方法根据Box-Benhnken响应设计原理,对影响LAMP反应关键因素(甜菜碱浓度、引物浓度、反应温度)进行三因素三水平响应面法优化。同时选取60例确诊甲流临床核酸样本和60例健康受试者核酸样本,分别采用聚合酶链反应(PCR)技术和LAMP检测技术进行比对评估(评估指标包括灵敏度、特异性、准确度)。结果响应面回归模型能较好地预测LAMP检测效果与甜菜碱浓度、引物浓度和反应温度之间的关系,经过优化LAMP反应体系提高检测灵敏度和缩短反应时间。同时与PCR检测结果相比,LAMP检测实现100%的灵敏度、98.9%的特异性和99.2%的准确度,检测下限可达100 copies/ml。结论本研究建立的H1N1甲流LAMP检测是一种高效、灵敏、特异性高且不需要复杂设备的检测方法,适用于基层医疗卫生机构或居家自测,对季节性甲流病毒监测及暴发时应急检测具有重要意义。

关键词：响应面分析法环介导等温扩增甲流H1N1检测即时检测

改良髋臼前倾角及外展角校验系统在腰椎融合患者人工全髋关节置换术中的应用研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第5期38卷 576-582页

作者：熊昌军左云周严小康王冠付豪姜学明武汉中西医结合骨科医院骨关节科武汉430079 武汉体育学院附属医院骨关节科武汉430079

目的探讨采用改良髋臼前倾角及外展角校验系统辅助腰椎融合患者人工全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)中髋臼杯放置的准确性及疗效。方法回顾分析2018年1月—2023年6月45例因骨关节炎行THA患者的临床资料,患者既往均接受腰椎... 详细信息

目的探讨采用改良髋臼前倾角及外展角校验系统辅助腰椎融合患者人工全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)中髋臼杯放置的准确性及疗效。方法回顾分析2018年1月—2023年6月45例因骨关节炎行THA患者的临床资料,患者既往均接受腰椎融合术。THA术中26例采用改良髋臼前倾角及外展角校验系统(观察组),19例未采用该系统(对照组)。两组患者性别、年龄、身体质量指数、手术侧别、腰椎融合节段数量以及术前Harris评分等基线资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。比较两组患者术后髋臼假体位置、髋关节功能(Harris评分)以及并发症发生情况。结果观察组术中髋臼杯均在安全区(前倾角25°~30°),术后1例(3.85%)位于安全区外;对照组术后9例(47.37%)位于安全区外;两组术后比较差异有统计学意义(P0.05),观察组术后髋臼外展角小于对照组(P0.05);组内各时间点间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论腰椎融合患者THA术中可应用改良髋臼前倾角及外展角校验系统获得理想髋臼杯植入角度。

关键词：人工全髋关节置换术髋臼假体前倾角外展角腰椎融合术

三七叶总皂苷调控miR-204对癫痫大鼠海马神经元的保护作用

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武汉大学学报（医学版） 2024年第4期45卷 391-397页

作者：许可张菁华李鑫杨立顺天津市北辰区中医医院脑病科天津300400 天津市北辰区中医医院检验科天津300400

目的:探究三七叶总皂苷(TSPNL)对癫痫(EP)大鼠miRNA-204和海马神经元损伤的影响。方法:将75只SD大鼠随机分为空白对照组、EP组、TSPNL组、TSPNL+Antagomir-NC组、TSPNL+Antagomir-miR-204组,每组15只。采用锂-毛果芸香碱制备EP大鼠模型... 详细信息

目的:探究三七叶总皂苷(TSPNL)对癫痫(EP)大鼠miRNA-204和海马神经元损伤的影响。方法:将75只SD大鼠随机分为空白对照组、EP组、TSPNL组、TSPNL+Antagomir-NC组、TSPNL+Antagomir-miR-204组,每组15只。采用锂-毛果芸香碱制备EP大鼠模型。给予相应的干预后,观察大鼠行为学变化;使用脑电图(EEG)监测大鼠脑电图改变情况;RT-qPCR检测海马组织miR-204、原肌球蛋白相关激酶B(TrkB)、白细胞介素(IL)1β、IL-6的mRNA表达;HE染色检测海马组织病理学变化;免疫荧光法(IF)检测海马组织神经元特异核蛋白(NeuN)阳性细胞数;流式细胞仪检测海马神经元细胞凋亡率;Western Blot检测海马组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达。结果:与EP组比,TSPNL组和TSPNL+Antagomir-NC组大鼠的Racine评分、90 min内癫痫发作次数和持续时间、棘慢波数目、海马组织TrkB mRNA、IL-1βmRNA和IL-6 mRNA表达、神经元细胞凋亡率、Bax和Caspase-3表达降低(P<0.05),海马组织miR-204表达、海马CA1、CA3区NeuN阳性细胞数、Bcl-2表达升高(P<0.05),海马CA1区、CA3区神经元损伤明显减轻;且miR-204的拮抗剂可明显加重海马神经元损伤,逆转TSPNL的抗EP作用。结论:TSPNL可能通过上调miR-204的表达,保护EP大鼠海马神经元损伤。

关键词：三七叶总皂苷癫痫海马神经元凋亡 MicroRNA-204

麦芽醇提物对肠道微生物区系中大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌机制

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中南药学 2024年第9期22卷 2374-2379页

作者：陶梦娟张莉武华军金文平巴红平王彬陈永刚武汉科技大学医学部武汉430065 湖北省食品质量安全监督检验研究院武汉430075 武汉市临床检验中心检验科武汉430030 武汉市第三医院药学部武汉430060

目的探讨麦芽醇提物对肠道微生物的抗菌活性及体外的抑菌机制。方法微量肉汤稀释法测定各微生物的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),在不同时间点绘制麦芽醇提物处理前后大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的生长曲线。通过荧光显微镜、... 详细信息

目的探讨麦芽醇提物对肠道微生物的抗菌活性及体外的抑菌机制。方法微量肉汤稀释法测定各微生物的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),在不同时间点绘制麦芽醇提物处理前后大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的生长曲线。通过荧光显微镜、结晶紫染色实验以及乳酸脱氢酶活性、碱性磷酸酶含量变化来探究其作用机制。结果麦芽醇提物对选取的8种肠道微生物抑菌效果明显,其中对大肠埃希菌与金黄色葡萄球菌MBC均为25,MIC均为12.5 mg·mL^(-1)。经麦芽醇提物作用后,与对照组相比,大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌生物膜形成能力减弱,且呈剂量依赖关系;随着麦芽醇提物浓度的增加,在细菌暴露于2MIC的条件下,其细胞膜的破损程度相较于对照组比较严重;细菌乳酸脱氢酶活性也随着浓度的增加逐渐下降,与对照组相比差异有统计学意义;大肠埃希菌与金黄色葡萄球菌的碱性磷酸酶分别在3 h、6 h时活性最高,随之趋于平稳。结论麦芽醇提物对肠道微生物具有显著的抗菌活性,主要通过破坏细胞膜的完整性导致胞内物质外泄造成细菌死亡。

关键词：麦芽醇提物肠道微生物抑菌机制

静脉-肺动脉体外膜氧合在心脏移植术后右心衰竭中的应用

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中华胸心血管外科杂志 2024年第2期40卷 110-113页

作者：徐月陈瑾任仕杰杨佳武汉亚洲心脏病医院体外循环科武汉430022 武汉亚洲心脏病医院重症监护室武汉430022

原发性移植物功能障碍-右心衰竭可导致严重的血流动力学并发症,甚至需要机械循环辅助。体外膜氧合装置是此类患者的常用选择,但国内暂无静脉-肺动脉插管体外膜氧合技术应用的报道。本研究回顾性分析我中心2例采用静脉-肺动脉插管体外膜... 详细信息

原发性移植物功能障碍-右心衰竭可导致严重的血流动力学并发症,甚至需要机械循环辅助。体外膜氧合装置是此类患者的常用选择,但国内暂无静脉-肺动脉插管体外膜氧合技术应用的报道。本研究回顾性分析我中心2例采用静脉-肺动脉插管体外膜氧合技术治疗心脏移植术后右心衰竭患者病例资料,总结经验,供临床参考。

关键词：体外膜氧合右心衰竭肺动脉插管患者病例机械循环辅助移植物功能血流动力学心脏移植术后

血清ADAMTS13水平与接受ECMO治疗患者的预后关系

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中国卫生标准管理 2024年第4期15卷 110-113页

作者：陈华桂肖杰万剑波丁冬梅马兰湖南医药学院第一附属医院检验科湖南怀化418000 爱尔眼科医院集团股份有限公司检验部湖南长沙410125 武汉大学附属爱尔眼科医院检验科湖北武汉430064 长沙爱尔眼科医院检验科湖南长沙410015 南宁爱尔眼科医院检验科广西南宁530004 哈尔滨爱尔眼科医院检验科黑龙江哈尔滨150000

目的分析血清血管性血友病因子特异性裂解酶(a disintegrin-like and metalloprotease with thrombospondin type1 motif,member 13,ADAMTS13)水平与接受体外膜肺氧合(extracorporeal membrane oxygenation,ECMO)治疗患者的预后关系。方法本研究选取2020年1月—2022年6月在湖南医药学院第一附属医院接受ECMO治疗的42例患者,按照ECMO撤离1个月内预后分为生存组(n=29)和死亡组(n=13)。通过分析接受ECMO治疗患者的血清ADAMTS13水平,分析血清ADAMTS13与接受ECMO治疗患者的预后。结果生存组年龄小于死亡组(P0.05)。生存组平均动脉压为(54.24±5.81)mmHg、氧合指数为(178.84±29.38)mmHg,均高于死亡组的(52.56±4.42)mmHg、(155.71±23.12)mmHg;生存组急性生理与慢性健康评分(acute physiology and chronic health evaluation-Ⅱ,APACHE-Ⅱ)评分为(22.51±2.62)分,低于生存组的(27.35±3.85)分(P室射血分数和ECMO流量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ECMO治疗后,2组血清ADAMTS13水平升高。生存组ECMO治疗前1 h及治疗后24 h、48 h血清ADAMTS13水平高于死亡组,差异有统计学意义(P<0.001)。ECMO治疗48 h后血清ADAMTS13水平为ECMO辅助治疗患者死亡的独立危险因素(P<0.001)。结论接受ECMO治疗患者的血清ADAMTS13水平降低与预后不佳相关。

关键词： ADAMTS13 ECMO 预后危险因素平均动脉压氧合指数

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0.1%他克莫司软膏治疗面部肉芽肿1例

中华皮肤科杂志 2024年第2期57卷 168-169页

作者：赵梦洁蒋思宋继权武汉大学中南医院皮肤科武汉430071

患者女,19岁,因左下眼睑丘疹1个月余于2018年11月28日就诊。1个月前无明显诱因左下眼睑出现粟粒大小丘疹,逐渐增多,曾于外院就诊,诊断为“带状疱疹”,予阿昔洛韦乳膏外用,皮损无明显好转,仍逐渐增多增大,遂就诊于我科,诊断为“颜面粟粒... 详细信息

患者女,19岁,因左下眼睑丘疹1个月余于2018年11月28日就诊。1个月前无明显诱因左下眼睑出现粟粒大小丘疹,逐渐增多,曾于外院就诊,诊断为“带状疱疹”,予阿昔洛韦乳膏外用,皮损无明显好转,仍逐渐增多增大,遂就诊于我科,诊断为“颜面粟粒性狼疮”。

关键词：下眼睑阿昔洛韦乳膏面部肉芽肿他克莫司软膏带状疱疹颜面粟粒性狼疮丘疹

血清异常凝血酶原用于辅助诊断肝细胞癌临床价值的评估:一项基于中国人群的多中心病例对照研究

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中华肝脏病杂志 2024年第7期32卷 650-656页

作者：梁携儿程黎明许颂霄张钧陈红松濮存莹樊蓉侯金林南方医科大学南方医院感染内科暨肝病中心广州510515 华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科武汉430030 浙江省肿瘤医院检验科杭州310006 浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科杭州310016 北京大学人民医院北京大学肝病研究所北京100044 罗氏诊断产品(上海)有限公司医学科学事务部上海200126

目的综合评估Elecsys血清异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)检测试剂在中国人群中辅助诊断肝细胞癌(HCC)的临床价值。方法研究采用多中心病例-对照设计,连续收集首次确诊且未经治疗的HCC患者样本、良性肝病患者样本和干扰性样本进行Elecsys PIVKA... 详细信息

目的综合评估Elecsys血清异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)检测试剂在中国人群中辅助诊断肝细胞癌(HCC)的临床价值。方法研究采用多中心病例-对照设计,连续收集首次确诊且未经治疗的HCC患者样本、良性肝病患者样本和干扰性样本进行Elecsys PIVKA-Ⅱ与甲胎蛋白(AFP)检测,并对受试者的多项临床信息进行汇总分析。计算特定阳性截断值下PIVKA-Ⅱ(21.29 ng/ml)和AFP(400 ng/ml)用于HCC诊断的效能。采用Kruskal-Wallis检验或受试者操作特征曲线进行统计学分析。结果最终在5家中心共纳入448例受试者,其中包括185例HCC病例。以良性肝病组为对照组时,PIVKA-Ⅱ的诊断灵敏度和准确率均高于AFP:84.86%对比30.81%和89.01%对比63.66%,而特异度略低。敏感性分析显示在该特定阳性截断值下,PIVKA-Ⅱ的临床性能在AFP阴性受试者亚组、不同病因亚组及多个巴塞罗那癌症分期的HCC患者亚组(含早期HCC)中的灵敏度均>80%。同时,PIVKA-Ⅱ的受试者操作特征曲线下面积亦略高于AFP(0.9200对比0.8809)。结论Elecsys PIVKA-Ⅱ在中国人群中的临床性能良好且稳定,有潜力改善临床AFP阴性HCC诊断和早期HCC监测中的漏诊现状以进一步提升中国人群HCC精准辅助诊断效率。

关键词：肝细胞癌甲胎蛋白血清异常凝血酶原早期原发性肝癌截断值诊断