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大豆异黄酮抑制Slit2/MAPK信号通路对牙周炎大鼠牙槽骨吸收和炎症反应的影响

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中国免疫学杂志 2024年第6期40卷 1131-1136页

作者：代喆颖郭怡刘阳李汶嘉周辉武汉市第三医院口腔科武汉430000

目的:基于Slit同源物2(Slit2)/P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨大豆异黄酮(SIF)对牙周炎大鼠牙槽骨吸收和炎症反应的影响。方法:将大鼠分为对照组(Control)、模型组(Model)、SIF低剂量组(L-SIF,25 mg/kg)、SIF高剂量组(H-SIF,7... 详细信息

目的:基于Slit同源物2(Slit2)/P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨大豆异黄酮(SIF)对牙周炎大鼠牙槽骨吸收和炎症反应的影响。方法:将大鼠分为对照组(Control)、模型组(Model)、SIF低剂量组(L-SIF,25 mg/kg)、SIF高剂量组(H-SIF,75 mg/kg),每组10只,除对照组外,其余各组使用丝线结扎大鼠上颌第一磨牙的牙颈部建立牙周炎模型。L-SIF组和H-SIF组大鼠灌胃相应剂量SIF,Control组和Model组灌胃等量生理盐水,1次/d,连续4周。给药结束后,ELISA检测大鼠血清Slit2、TNF-α、IL-6、IL-1β水平;Micro-CT扫描检测釉牙骨质界至牙槽骨嵴顶(CEJ-ABC)距离和骨矿物质密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV),评估牙槽骨丢失情况;HE染色和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色评估组织炎症反应、骨吸收和破骨细胞活性;免疫组织化学法(IHC)检测牙周组织骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达;Western blot检测牙周组织Slit2、P38 MAPK、p-P38 MAPK蛋白表达。结果:与Control组相比,Model组大鼠血清Slit2和TNF-α、IL-1β、IL-6水平、CEJ-ABC距离、牙周组织病理学损伤评分、破骨细胞数量、RANKL阳性表达、Slit2蛋白水平和p-P38 MAPK/P38 MAPK显著升高,BMD和BV/TV、牙周组织OPG阳性表达显著降低(均P<0.05);与Model组相比,L-SIF组和H-SIF组大鼠血清Slit2和TNF-α、IL-1β、IL-6水平、CEJ-ABC距离、牙周组织病理学损伤评分、破骨细胞数量、RANKL阳性表达、Slit2蛋白水平和p-P38 MAPK/P38 MAPK显著降低,BMD和BV/TV、牙周组织OPG阳性表达显著升高(P<0.05),且H-SIF组上述指标变化显著优于L-SIF组(P<0.05)。结论:SIF可抑制牙周炎大鼠牙槽骨吸收和炎症反应,改善牙周炎,其作用机制可能与抑制Slit2/P38 MAPK信号通路有关。

关键词：大豆异黄酮牙周炎牙槽骨吸收 Slit同源物2 P38丝裂原活化蛋白激酶

苦参碱通过Hippo信号通路促进大鼠皮肤创面愈合及血管生成

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医学研究与战创伤救治 2024年第1期37卷 23-31页

作者：曾华郑勇周林冯上新唐俊孙妍婧罗玮武汉市中医医院肛肠科武汉430014 武汉市中医医院病理科武汉430014 湖北省第三人民医院全科医学科武汉430030

目的探讨苦参碱(MT)对皮肤创面愈合的影响及可能机制。方法在48只大鼠中成功建立全层皮肤切除创伤模型,将模型大鼠随机分为阴性对照组(模型组,涂抹100μL等渗盐水)、阳性药物组(PD组,涂抹100μL的京万红软膏)、苦参碱组(MT组,涂抹浓度为... 详细信息

目的探讨苦参碱(MT)对皮肤创面愈合的影响及可能机制。方法在48只大鼠中成功建立全层皮肤切除创伤模型,将模型大鼠随机分为阴性对照组(模型组,涂抹100μL等渗盐水)、阳性药物组(PD组,涂抹100μL的京万红软膏)、苦参碱组(MT组,涂抹浓度为200 ng/mL的苦参碱混合液100μL)、苦参碱+维替泊芬组(MT+VP组,涂抹苦参碱混合液100μL后,腹腔注射100 mg/kg维替泊芬),每组12只。各组每日给药1次,持续7 d。比较各组大鼠的创面愈合率、病理组织损伤情况、CD31阳性染色细胞比例,以及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平。蛋白免疫印迹检测(Western blot)Hippo通路相关蛋白表达。结果造模后3、7、14 d时,与模型组创面愈合率[(14.02±1.87)%、(36.23±3.62)%、(65.53±3.85)%]相比,PD组[(21.36±2.51)%、(61.86±3.13)%、(94.26±0.26)%]和MT组[(21.57±2.24)%、(54.35±3.66)%、(94.18±3.13)%]均明显升高(P<0.05);与MT组相比,MT+VP组创面愈合率[(18.35±2.03)%、(43.68±3.54)%、(74.26±3.55)%]均明显降低(P<0.05)。造模后7 d,与模型组(186.75±18.53、85.73±10.15、57.96±5.85)相比,PD组(89.75±9.75、43.12±5.75、8.76±1.13)和MT组(92.57±23.62、46.62±6.54、12.36±1.06)的IL-1β、IL-6、TNF-α水平均明显降低(P<0.05),CD31阳性染色细胞百分比明显升高(P<0.05),MST1、LAST1和YAP蛋白磷酸化水平明显升高(P<0.05),而YAP核移位明显降低(P<0.05)。与MT组相比,MT+VP组IL-1β、IL-6、TNF-α水平均明显升高,CD31阳性染色细胞百分比明显降低,MST1、LAST1和YAP蛋白磷酸化水平明显降低,而YAP核移位明显增加(P<0.05)。与模型组皮肤创面完全愈合时间[(26.33±0.94)d]和瘢痕厚度[(0.58±0.11)mm]相比,PD组[(19.50±0.82)d、(0.24±0.04)mm]和MT组[(19.00±0.50)d、(0.25±0.04)mm]明显减少(P<0.05);与MT组相比,MT+VP组创面完全愈合时间[(22.33±0.94)d]和瘢痕厚度[(0.41±0.04)mm]均明显增加(P<0.05)。结论苦参碱能够通过抑制炎症反应、促进血管生成加速全层皮肤切除创伤大鼠的皮肤创面愈合,这一过程可能涉及苦参碱对Hippo-Yap通路的激活效应。

关键词：皮肤创面愈合苦参碱炎症血管生成 Hippo通路

土木香内酯通过上调电压依赖性阴离子通道1调控SCC-25口腔鳞癌细胞的能量代谢和凋亡

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中国老年学杂志 2024年第16期 4034-4039页

作者：王鹏陈慧代喆颖彭红江铃周晖武汉市第三医院口腔科

目的分析土木香内酯(ALT)通过上调电压依赖性阴离子通道(VDAC)1调控SCC-25口腔鳞癌细胞(OSCC)的能量代谢和凋亡。方法将SCC-25细胞分为NC组(转染NC质粒)、ALT 10、20、30μmol/L组(分别以10、20、30μmol/L浓度ALT处理细胞)、小干扰VD... 详细信息

目的分析土木香内酯(ALT)通过上调电压依赖性阴离子通道(VDAC)1调控SCC-25口腔鳞癌细胞(OSCC)的能量代谢和凋亡。方法将SCC-25细胞分为NC组(转染NC质粒)、ALT 10、20、30μmol/L组(分别以10、20、30μmol/L浓度ALT处理细胞)、小干扰VDAC1(siVC)-2组(转染siVC-2质粒)、siVC-2+ALT 10μmol/L组(siVC-2质粒+10μmol/L浓度ALT处理细胞)、siVC-2+ALT 20μmol/L组(siVC-2质粒+20μmol/L浓度ALT处理细胞)、siVC-2+ALT 30μmol/L组(siVC-2质粒+以30μmol/L浓度ALT处理细胞)。CCK-8检测不同浓度ALT作用细胞后细胞活力。线粒体膜电位(JC-1)试剂盒和二氢乙锭(DHE)探针分别用来检测线粒体膜电位和活性氧的变化；葡萄糖和乳酸试剂盒检测细胞内葡萄糖和乳酸变化；采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。Western印迹检测各组行线粒体通路凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的多聚ADP核糖聚合酶(Cleaved-PARP)和糖酵解蛋白组织己糖激酶(HK)2、乳酸脱氢酶(LDH)A及VDAC1蛋白表达水平。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测不同浓度ALT组中VDAC1 mRNA表达水平。结果 ALT随着浓度依赖性显著抑制细胞的活性(P三磷酸(ATP)水平，差异显著(P<0.05)。ALT呈浓度依赖性下调糖酵解相关蛋白HK2和LDHA表达，差异显著(P<0.05)。ALT呈浓度依赖性促进VDAC1 mRNA及蛋白表达，差异显著(P<0.05)。与siVC-2组相比，siVC-2+10、20、30μmol/L ALT组中细胞凋亡率明显上升，葡萄糖、乳酸水平及ATP含量减少，差异显著(P<0.05)。结论 ALT通过上调VDAC1表达降低细胞糖酵解能力，促进细胞凋亡。

关键词：土木香内酯电压依赖性阴离子通道1 口腔鳞癌细胞代谢凋亡

八肽胆囊收缩素对谷氨酸诱导的海马星形胶质细胞GLT-1表达的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2024年第1期53卷 33-38页

作者：施媛李明霞高珊付葵彭坚武汉市第三医院麻醉科武汉430070

目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对谷氨酸(Glu)诱导的海马星形胶质细胞谷氨酸转运体1(GLT-1)表达的影响。方法分离小鼠海马星形胶质细胞,检测不同浓度CCK-8对小鼠海马星形胶质细胞的毒性。将细胞分为对照组、Glu组、Glu+0.1μmol/L CC... 详细信息

目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对谷氨酸(Glu)诱导的海马星形胶质细胞谷氨酸转运体1(GLT-1)表达的影响。方法分离小鼠海马星形胶质细胞,检测不同浓度CCK-8对小鼠海马星形胶质细胞的毒性。将细胞分为对照组、Glu组、Glu+0.1μmol/L CCK-8组、Glu+0.5μmol/L CCK-8组和Glu+1.0μmol/L CCK-8组。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,生化试剂盒检测细胞培养上清液中Glu含量,qRT-PCR检测GLT-1和谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)mRNA的表达,Western blot检测Caspase-3、Bcl-2、GLT-1和GLAST蛋白的表达,ELISA检测细胞培养上清中TNF-α的含量。结果不同浓度的CCK-8对小鼠海马星形胶质细胞的增殖均无明显影响。与对照组相比,Glu组细胞增殖能力、细胞中Bcl-2蛋白、GLT-1、GLAST mRNA和蛋白表达水平显著降低(均P<0.01),细胞凋亡率、细胞外Glu含量、细胞中Caspase-3蛋白表达水平、细胞上清中TNF-α水平显著升高(均P<0.01);与Glu组相比,Glu+0.5μmol/L CCK-8组和Glu+1.0μmol/L CCK-8组细胞增殖能力、细胞中Bcl-2蛋白、GLT-1、GLAST mRNA和蛋白表达水平显著升高(均P<0.05),细胞凋亡率、细胞外Glu含量、细胞中Caspase-3蛋白表达水平、细胞上清中TNF-α水平显著降低(均P<0.01)。结论 CCK-8能够抑制Glu诱导的星形胶质细胞的炎症反应,促进GLT-1的表达,降低细胞外Glu的浓度,促进细胞增殖并抑制凋亡。

关键词：八肽胆囊收缩素谷氨酸谷氨酸转运体-1 星形胶质细胞

臀部双侧V-Y推进岛状皮瓣修复肛周Paget病术后缺损的应用

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中华皮肤科杂志 2024年第1期57卷 58-61页

作者：岳超王涛段梦莹戴叶芹彭建中沈忠宋秀祖杭州市第三人民医院皮肤科杭州310009 杭州市第三人民医院肛肠科杭州310009

目的探讨臀部双侧V-Y推进岛状皮瓣修复肛周Paget病术后继发肛周缺损的临床效果.方法回顾性分析2009年1月至2021年1月期间杭州市第三人民医院皮肤科13例肛周Paget病患者在肿瘤切净后采用臀部双侧V-Y推进岛状皮瓣修复肛周缺损的临床资料... 详细信息

目的探讨臀部双侧V-Y推进岛状皮瓣修复肛周Paget病术后继发肛周缺损的临床效果.方法回顾性分析2009年1月至2021年1月期间杭州市第三人民医院皮肤科13例肛周Paget病患者在肿瘤切净后采用臀部双侧V-Y推进岛状皮瓣修复肛周缺损的临床资料,总结术后臀部恢复情况以及对肛门排便功能的影响.结果 13例肛周缺损面积4.8 cm × 5.6 cm~12.2 cm × 16.4 cm,采用臀部双侧V-Y推进岛状皮瓣修复缺损,全部一期愈合.1例行临时性回肠造口术,3个月后行回肠造口回纳术后,肛门排便功能恢复;1例合并直肠癌,行乙状结肠永久性造口术分流粪便,肛门排便功能丧失.随访1~6年,13例患者臀部形态对称,12例肛门保留者排便功能正常.未合并其他恶性肿瘤的12例肛周Paget患者术后肿瘤无复发,3例患者出现肛门轻度狭窄,无肛门黏膜外翻,无伤口裂开;1例合并肛管腺癌的肛周Paget病患者在术后1年出现双侧腹股沟淋巴结、髂内淋巴结转移,半年后死亡.结论臀部双侧V-Y推进岛状皮瓣血供可靠,推进幅度大,可修复肛周较大面积的皮肤缺损.

关键词：佩吉特病,乳腺外肛周缺损岛状皮瓣 V-Y推进修复

自噬在大鼠睾丸扭转致缺血再灌注损伤中的作用机制

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海军军医大学学报 2024年第1期45卷 57-63页

作者：胡志徐律孙伟付桥张炜陈一衍褚浩武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院)光谷院区泌尿外科武汉430014 武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院)泌尿外科武汉430000

目的探讨自噬在大鼠睾丸扭转所致缺血再灌注损伤(I/RI)中的作用机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/RI组、I/RI+雷帕霉素(RAPA)组和I/RI+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组10只。后3组大鼠建立左侧睾丸扭转(720°,1 h)复位模型... 详细信息

目的探讨自噬在大鼠睾丸扭转所致缺血再灌注损伤(I/RI)中的作用机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/RI组、I/RI+雷帕霉素(RAPA)组和I/RI+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组10只。后3组大鼠建立左侧睾丸扭转(720°,1 h)复位模型,I/RI+RAPA组和I/RI+3-MA组大鼠造模前分别给予自噬激动剂RAPA和自噬抑制剂3-MA干预。于睾丸复位12 h后取各组大鼠左侧睾丸和附睾,收集精子进行精子质量分析,采用H-E染色观察睾丸组织病理变化,采用试剂盒检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC),采用TUNEL染色检测睾丸组织细胞凋亡水平,通过蛋白质印迹法检测睾丸组织中自噬相关蛋白(Beclin1、p62)和凋亡相关蛋白(Bcl2、Bax、cleaved caspase 3)表达水平。结果与假手术组比较,I/RI组大鼠精子质量下降,睾丸曲细精管排列松散,生殖细胞减少、脱落,睾丸组织SOD活性、T-AOC降低(均P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),p62和Bcl2蛋白表达水平降低(均P<0.05),Beclin1、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平升高(均P<0.05),凋亡生殖细胞明显增多。与I/RI组比较,I/RI+RAPA组大鼠精子质量提高,睾丸曲细精管排列正常,睾丸组织SOD活性、T-AOC升高(均P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),Beclin1和Bcl2蛋白表达水平升高(均P<0.05),p62、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平降低(均P<0.05),凋亡生殖细胞减少;I/RI+3-MA组大鼠精子质量下降,睾丸曲细精管排列松散,睾丸组织SOD活性、T-AOC降低(均P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),Beclin1和Bcl2蛋白表达水平降低(均P<0.05),p62、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平升高(均P<0.05),凋亡生殖细胞增多。结论激活自噬可改善I/RI大鼠精子质量和睾丸组织病理损伤,缓解氧化应激,抑制生殖细胞凋亡。

关键词：睾丸扭转缺血再灌注损伤自噬氧化性应激生殖细胞细胞凋亡

表观弥散系数定量评估兔肢体高压电烧伤早期肌肉进行性损伤

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中国医学影像技术 2024年

作者：阮鹏葛映红熊梦烨谭一清陈曦孙斯琴武汉市第三医院武汉大学附属同仁医院放射科

目的观察表观弥散系数（ADC）定量评价兔肢体高压电烧伤早期肌肉进行性损伤的价值。方法选取20只健康成年兔建立兔肢体高压电烧伤模型，并将其随机分为0.5、24、48及72h组，每组5只，分别于造模后各相应时间采集右后肢MR弥散加权成像（... 详细信息

目的观察表观弥散系数（ADC）定量评价兔肢体高压电烧伤早期肌肉进行性损伤的价值。方法选取20只健康成年兔建立兔肢体高压电烧伤模型，并将其随机分为0.5、24、48及72h组，每组5只，分别于造模后各相应时间采集右后肢MR弥散加权成像（DWI），并于其后取双侧肢体肌肉行HE染色；对比各组电流入口及出口损伤核心肌肉与正常肌肉的ADC、肌纤维密度（MFD）及肌纤维短径（D）值，分析兔损伤核心肌肉ADC值与MFD及D值的相关性。结果各组内入口及出口损伤核心肌肉与正常肌肉ADC值、入口与出口损伤核心肌肉ADC值差异均有统计学意义（P均＜0.05）；入口及出口核心损伤肌肉ADC值随造模时间延长而降低（P均＜0.05），而正常肌肉ADC值在不同时间点差异无统计学意义（P＞0.05）。入口及出口损伤核心肌肉MFD值随造模时间延长而降低（P均＜0.05），而正常肌肉MFD值，以及入口、出口损伤核心和正常肌肉D值在造模不同时间点差异均无统计学意义（P均＞0.05）。损伤核心肌肉ADC与MFD值正相关(rs=0.846，P＜0.05)、与D值呈负相关（r=－0.507，P＜0.05）。结论 ADC可定量评价兔肢体高压电烧伤早期肌肉进行性损伤。

关键词：烧伤,电弥散磁共振成像肌,骨骼病理学兔

miR-217靶向PI3K/Akt通路增强阿霉素对急性髓系白血病的敏感性

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中国实验血液学杂志 2024年第1期32卷 39-44页

作者：干定云吴军周曼陈婉姜雯武汉市第三医院血液内科湖北武汉430070

目的:探讨miR-217对急性髓系白血病细胞增殖及阿霉素敏感性的影响。方法:构建mimic NC和mi R-217 mimic载体转染至HL-60细胞中,q PCR检测转染效率。不同浓度的阿霉素处理细胞24和48 h,CCK-8法检测阿霉素化学敏感性并筛选阿霉素的最佳处... 详细信息

目的:探讨miR-217对急性髓系白血病细胞增殖及阿霉素敏感性的影响。方法:构建mimic NC和mi R-217 mimic载体转染至HL-60细胞中,q PCR检测转染效率。不同浓度的阿霉素处理细胞24和48 h,CCK-8法检测阿霉素化学敏感性并筛选阿霉素的最佳处理浓度和时间。将细胞分为对照、mimic NC、mi R-217 mimic、阿霉素和mi R-217 mimic+阿霉素共5组,流式细胞术检测细胞凋亡,qPCR检测miR-217、PI3K和Akt3的表达,Western blot检测PI3K/Akt通路蛋白PI3K、Akt3和凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达,双荧光素酶验证mi R-217和Akt3的关系。结果:mi R-217 mimic能够增强HL-60细胞对阿霉素的敏感性,阿霉素的最佳处理浓度和时间为160 ng/ml、48 h。与对照组相比,mi R-217 mimic组和阿霉素组细胞凋亡率、mi R-217和Bax蛋白水平显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白和PI3K、Akt3 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.01);与阿霉素组相比,mi R-217 mimic+阿霉素组细胞凋亡率、mi R-217和Bax蛋白水平显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白和PI3K、Akt3 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.01)。双荧光素酶实验表明mi R-217与Akt3之间存在靶向调控关系。结论:mi R-217靶向Akt3调控PI3K/Akt通路,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡并增强阿霉素对急性髓系白血病细胞的敏感性。

关键词： miR-217 急性髓系白血病阿霉素 PI3K/Akt通路

山柰酚通过抑制PI3K/AKT信号通路抑制COPD模型细胞炎症反应和细胞外基质损伤

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中药材 2024年 2063-2066页

作者：丁敏甄海宁王倩何芳武汉市第三医院

目的:探讨山柰酚对慢性阻塞性肺疾病(COPD)细胞模型炎症反应和细胞外基质(ECM)损伤的影响及其机制。方法:采用香烟提取物处理BEAS-2B细胞构建COPD模型细胞,以不同浓度的山柰酚分别处理正常BEAS-2B细胞和COPD模型细胞,CCK-8检测细胞增殖... 详细信息

目的:探讨山柰酚对慢性阻塞性肺疾病(COPD)细胞模型炎症反应和细胞外基质(ECM)损伤的影响及其机制。方法:采用香烟提取物处理BEAS-2B细胞构建COPD模型细胞,以不同浓度的山柰酚分别处理正常BEAS-2B细胞和COPD模型细胞,CCK-8检测细胞增殖活力,筛选山柰酚的最佳作用浓度。将BEAS-2B细胞分为空白对照组、模型组、山柰酚组和山柰酚+740Y-P(PI3K/AKT激活剂)组。CCK-8检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA检测细胞上清中IL-1β、TNF-α、ICTP、PICP水平,Western Blot检测细胞中p-AKT1和AKT1蛋白的表达。结果:山柰酚的最佳作用浓度为10μmol/L。与空白对照组比较,模型组细胞增殖活力显著降低,细胞凋亡率及细胞上清中IL-1β、TNF-α、ICTP、PICP水平和细胞中p-AKT1/AKT1水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,山柰酚组细胞增殖活力显著升高,细胞凋亡率及细胞上清中IL-1β、TNF-α、ICTP、PICP水平和细胞中p-AKT1/AKT1水平显著降低(P<0.01)。740Y-P能逆转山柰酚的上述作用(P<0.05或P<0.01)。结论:山柰酚能抑制COPD炎症反应和ECM损伤,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路的激活有关。

关键词：山柰酚 PI3K/AKT信号通路慢性阻塞性肺疾病炎症反应细胞外基质