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PLGA/赖氨酸接枝氧化石墨烯纳米粒子复合支架对MC3T3细胞成骨分化的影响

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中国组织工程研究 2024年

作者：余双奇丁凡万松陈伟张学俊陈东李强林作丽武汉市普仁医院脊柱外科武汉市普仁医院社医办

背景：骨损伤后如何有效促进骨再生和骨重建一直是临床骨修复研究中的关键问题，利用生物和降解材料搭载生物活性因子在骨修复中具有优秀的应用前景。目的：探究赖氨酸接枝氧化石墨烯(LGA-g-GO)纳米粒子改性的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PL... 详细信息

背景：骨损伤后如何有效促进骨再生和骨重建一直是临床骨修复研究中的关键问题，利用生物和降解材料搭载生物活性因子在骨修复中具有优秀的应用前景。目的：探究赖氨酸接枝氧化石墨烯(LGA-g-GO)纳米粒子改性的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)复合支架对成骨分化及新骨形成的影响。方法：将PLGA溶于二氯甲烷中，利用溶剂挥发法制备PLGA支架；将氧化石墨烯均匀分散于PLGA溶液中制备PLGA/GO复合支架；利用化学接枝法制备LGA-g-GO纳米粒子，将LGA-g-GO纳米粒子按不同的质量比(1%,2%,3%)与PLGA共混构建出PLGA/LGA-g-GO复合支架。表征5组支架的微观形貌、亲水性、蛋白吸附能力。将MC3T3细胞分别接种于5组支架表面，检测细胞增殖与成骨分化情况。结果与结论：(1)扫描电镜下可见PLGA支架表面光滑平坦，其余4组支架表面粗糙，并且随着LGA-g-GO纳米粒子加入量的增加，复合支架的表面粗糙程度加重；PLGA/LGA-g-GO(3%)复合支架的水接触角低于其他4组支架(P <0.05);PLGA/LGA-g-GO(1%,2%,3%)复合支架的蛋白吸附能力强于PLGA、PLGA/GO支架(P <0.05);(2)CCK-8检测显示，PLGA/LGA-g-GO(2%,3%)复合支架可促进MC3T3细胞的增殖；碱性磷酸酶染色与茜素红染色显示，PLGA/LGA-g-GO(2%,3%)组细胞碱性磷酸酶活性高于其他3组(P <0.05),PLGA/GO组、PLGA/LGA-g-GO(1%,2%,3%)组钙沉积多于PLGA组(P <0.05);(3)结果表明，PLGA/LGA-g-GO复合支架能够促进成骨细胞的增殖和成骨分化，有利于骨损伤后的骨再生和骨重建。

关键词：聚乳酸-羟基乙酸共聚物赖氨酸氧化石墨烯纳米粒子复合支架骨再生生物组织工程

长链非编码RNAKCNK15-AS1靶向微RNA-140-5p对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎症因子表达的影响

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中华骨与关节外科杂志 2024年第5期17卷 459-466页

作者：孙鹏张国华陈超斌刘彬陈美周一林杨翾武汉市普仁医院骨关节外科武汉430081

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)KCNK15-AS1是否通过靶向微RNA-140-5p(miR-140-5p)影响骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、凋亡,炎症因子表达及细胞外基质(ECM)合成。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测KCNK15-AS1和miR-140-5p在OA软骨组织中的表达。在OA软骨细胞中转染si-KCNK15-AS1,噻唑蓝(MTT)和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡,蛋白质印迹法(WB)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原(Collagen typeⅡ)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、MMP-9、MMP-13的表达。双荧光素酶活性检测分析KCNK15-AS1与miR-140-5p的靶向关系。si-KCNK15-AS1和anti-miR-140-5p共转染,观察干扰miR-140-5p表达对抑制KCNK15-AS1表达诱导的OA软骨细胞增殖、凋亡,炎症因子表达及ECM合成的影响。结果:与正常软骨组织比较,OA软骨组织中KCNK15-AS1表达量明显增加(P<0.05),miR-140-5p表达量显著减少(P<0.05)。抑制KCNK15-AS1表达明显提高OA软骨细胞24 h、48 h、72 h的吸光度(OD)值和CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量、Aggrecan、Collagen typeⅡ水平(P<0.05),显著降低细胞凋亡率、p21、Bax蛋白水平、IL-6、TNF-α、IL-8、MMP-3、MMP-9、MMP-13水平(P<0.05)。KCNK15-AS1靶向miR-140-5p抑制miR-140-5p的表达。干扰miR-140-5p表达逆转了抑制KCNK15-AS1表达对OA软骨细胞增殖、ECM合成的促进作用,对细胞凋亡、炎症因子表达的抑制作用。结论:LncRNA KCNK15-AS1通过靶向调控miR-140-5p表达影响OA软骨细胞增殖、凋亡、炎症因子表达及ECM合成。

关键词：长链非编码RNA KCNK15-AS1 微RNA-140-5p 软骨细胞增殖炎症细胞外基质

LncRNA PVT1靶向miR-146a对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞TLR4通路免疫效应的影响

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中国老年学杂志 2024年第12期 3029-3034页

作者：孙沛姜振伟武汉市普仁医院检验科

目的探讨长链非编码核糖核酸浆细胞瘤可变异位基因(LncRNA PVT)1靶向微小核糖核酸(miR)-146a对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞Toll样受体(TLR)4通路免疫效应的影响。方法采用结核分枝杆菌株H37Rv感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,分别向感... 详细信息

目的探讨长链非编码核糖核酸浆细胞瘤可变异位基因(LncRNA PVT)1靶向微小核糖核酸(miR)-146a对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞Toll样受体(TLR)4通路免疫效应的影响。方法采用结核分枝杆菌株H37Rv感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,分别向感染细胞转染LncRNA PVT1干扰阴性对照(si-NC)、si-LncRNA PVT1、miR-146a模拟物(miR-146a mimics)、miR-146a mimics阴性对照(miR-NC)、si-LncRNA PVT1+miR-146a抑制剂阴性对照(NC inhibitor)、si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor,记为si-NC组、si-LncRNA PVT1组、miR-146a mimcs组、miR-NC组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组、si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组，另取未转染的感染细胞为对照组。转染48 h后，倒置荧光显微镜观测转染效率；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平；实时荧光定量-聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞LncRNA PVT1和miR-146a、TLR4、髓样分化因子(MyD88)、核转录因子(NF)-κB p65 mRNA表达；Western印迹检测细胞TLR4、MyD88、NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达水平；双荧光素酶报告基因及RT-qPCR法检测LncRNA PVT1与miR-146a、miR-146a与TLR4的靶向作用。结果 si-NC组、si-LncRNA PVT1组、miR-146a mimcs组、miR-NC组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组、si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组转染效率(81.21±4.15)%、(85.68±3.49)%、(86.55±5.03)%、(84.63±4.29)%、(83.41±4.73)%、(80.67±3.95)%;与对照组、si-NC组、miR-NC组比较，miR-146a mimics组、si-LncRNA PVT1组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组和si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组TNF-α和IL-6水平显著下降，miR-146a表达显著上升，TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达和p-NF-κB p65蛋白表达显著下降(P<0.01);与si-LncRNA PVT1组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组比较，si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组TNF-α和IL-6水平上升，TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达和p-NF-κB p65蛋白表达上升，差异有统计学意义(P<0.01);LncRNA PVT1直接靶向调控miR-146a; miR-146a直接靶向调控TLR4。结论抑制LncRNA PVT1可促进结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞的免疫效应，可能与靶向miR-146a抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路、下调TNF-α和IL-6水平相关。

关键词：长链非编码核糖核酸浆细胞瘤可变异位基因LncRNA(PVT)1 微小核糖核酸-146a Toll样受体4 免疫效应

PLGA/赖氨酸接枝氧化石墨烯纳米粒子复合支架对MC3T3细胞成骨分化的影响

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中国组织工程研究 2025年第4期29卷 707-712页

作者：余双奇丁凡万松陈伟张学俊陈东李强林作丽武汉市普仁医院脊柱外科湖北省武汉市430081 武汉市普仁医院社医办湖北省武汉市430081

背景:骨损伤后如何有效促进骨再生和骨重建一直是临床骨修复研究中的关键问题,利用生物和降解材料搭载生物活性因子在骨修复中具有优秀的应用前景。目的:探究赖氨酸接枝氧化石墨烯(LGA-g-GO)纳米粒子改性的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)... 详细信息

背景:骨损伤后如何有效促进骨再生和骨重建一直是临床骨修复研究中的关键问题,利用生物和降解材料搭载生物活性因子在骨修复中具有优秀的应用前景。目的:探究赖氨酸接枝氧化石墨烯(LGA-g-GO)纳米粒子改性的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)复合支架对成骨分化及新骨形成的影响。方法:将PLGA溶于二氯甲烷中,利用溶剂挥发法制备PLGA支架;将氧化石墨烯均匀分散于PLGA溶液中制备PLGA/GO复合支架;利用化学接枝法制备LGA-g-GO纳米粒子,将LGA-g-GO纳米粒子按不同的质量比(1%,2%,3%)与PLGA共混构建出PLGA/LGA-g-GO复合支架。表征5组支架的微观形貌、亲水性、蛋白吸附能力。将MC3T3细胞分别接种于5组支架表面,检测细胞增殖与成骨分化情况。结果与结论:①扫描电镜下可见PLGA支架表面光滑平坦,其余4组支架表面粗糙,并且随着LGA-g-GO纳米粒子加入量的增加,复合支架的表面粗糙程度加重;PLGA/LGA-g-GO(3%)复合支架的水接触角低于其他4组支架(P<0.05);PLGA/LGA-g-GO(1%,2%,3%)复合支架的蛋白吸附能力强于PLGA、PLGA/GO支架(P<0.05);②CCK-8检测显示,PLGA/LGA-g-GO(2%,3%)复合支架可促进MC3T3细胞的增殖;碱性磷酸酶染色与茜素红染色显示,PLGA/LGA-g-GO(2%,3%)组细胞碱性磷酸酶活性高于其他3组(P<0.05),PLGA/GO组、PLGA/LGA-g-GO(1%,2%,3%)组钙沉积多于PLGA组(P<0.05);③结果表明,PLGA/LGA-g-GO复合支架能够促进成骨细胞的增殖和成骨分化,有利于骨损伤后的骨再生和骨重建。

关键词：聚乳酸-羟基乙酸共聚物赖氨酸氧化石墨烯纳米粒子复合支架骨再生生物组织工程

自噬在大鼠睾丸扭转致缺血再灌注损伤中的作用机制

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海军军医大学学报 2024年第1期45卷 57-63页

作者：胡志徐律孙伟付桥张炜陈一衍褚浩武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院)光谷院区泌尿外科武汉430014 武汉大学附属同仁医院(武汉市第三医院)泌尿外科武汉430000

目的探讨自噬在大鼠睾丸扭转所致缺血再灌注损伤(I/RI)中的作用机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/RI组、I/RI+雷帕霉素(RAPA)组和I/RI+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组10只。后3组大鼠建立左侧睾丸扭转(720°,1 h)复位模型... 详细信息

目的探讨自噬在大鼠睾丸扭转所致缺血再灌注损伤(I/RI)中的作用机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/RI组、I/RI+雷帕霉素(RAPA)组和I/RI+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组10只。后3组大鼠建立左侧睾丸扭转(720°,1 h)复位模型,I/RI+RAPA组和I/RI+3-MA组大鼠造模前分别给予自噬激动剂RAPA和自噬抑制剂3-MA干预。于睾丸复位12 h后取各组大鼠左侧睾丸和附睾,收集精子进行精子质量分析,采用H-E染色观察睾丸组织病理变化,采用试剂盒检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC),采用TUNEL染色检测睾丸组织细胞凋亡水平,通过蛋白质印迹法检测睾丸组织中自噬相关蛋白(Beclin1、p62)和凋亡相关蛋白(Bcl2、Bax、cleaved caspase 3)表达水平。结果与假手术组比较,I/RI组大鼠精子质量下降,睾丸曲细精管排列松散,生殖细胞减少、脱落,睾丸组织SOD活性、T-AOC降低(均P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),p62和Bcl2蛋白表达水平降低(均P<0.05),Beclin1、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平升高(均P<0.05),凋亡生殖细胞明显增多。与I/RI组比较,I/RI+RAPA组大鼠精子质量提高,睾丸曲细精管排列正常,睾丸组织SOD活性、T-AOC升高(均P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),Beclin1和Bcl2蛋白表达水平升高(均P<0.05),p62、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平降低(均P<0.05),凋亡生殖细胞减少;I/RI+3-MA组大鼠精子质量下降,睾丸曲细精管排列松散,睾丸组织SOD活性、T-AOC降低(均P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),Beclin1和Bcl2蛋白表达水平降低(均P<0.05),p62、Bax和cleaved caspase 3蛋白表达水平升高(均P<0.05),凋亡生殖细胞增多。结论激活自噬可改善I/RI大鼠精子质量和睾丸组织病理损伤,缓解氧化应激,抑制生殖细胞凋亡。

关键词：睾丸扭转缺血再灌注损伤自噬氧化性应激生殖细胞细胞凋亡

囊袋张力环联合Toric人工晶状体植入治疗高度近视合并角膜散光的白内障

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华中科技大学学报（医学版） 2024年第2期53卷 233-238页

作者：罗艳杨慧肖泽锋武汉市第一医院眼科武汉430015

目的研究伴有角膜散光的高度近视白内障患者进行超声乳化+环曲面人工晶状体(Toric intraocular lens,Toric IOL)及囊袋张力环(capsular tension ring,CTR)植入术的临床效果及稳定性。方法通过回顾性研究,分析在武汉市第一医院行白内障... 详细信息

目的研究伴有角膜散光的高度近视白内障患者进行超声乳化+环曲面人工晶状体(Toric intraocular lens,Toric IOL)及囊袋张力环(capsular tension ring,CTR)植入术的临床效果及稳定性。方法通过回顾性研究,分析在武汉市第一医院行白内障超声乳化吸除术的高度近视伴有角膜散光的患眼54例(76眼),其中31例(38眼)联合植入Toric IOL及CTR(联合组),23例(38眼)单纯植入Toric IOL(对照组)。术后随访6个月,比较两组患者术前及术后视力、角膜内皮细胞密度、人工晶状体旋转度、残余散光度,以及并发症发生情况。结果术后6月,两组患者裸眼远视力(uncorrected distance visual acuity,UCVA)、最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)均显著高于术前,联合组术后UCVA(LogMAR)优于对照组,差异有统计学意义[(0.34±0.15)vs.(0.46±0.25),P0.05)。联合组术后并发症总发生率低于对照组(P<0.05)。结论对于高度近视伴角膜散光的白内障患者,术中植入Toric IOL的同时联合应用CTR,安全性好,能够改善Toric IOL旋转稳定性,提高视觉质量,并且减少并发症。

关键词：囊袋张力环人工晶状体高度近视白内障散光

miR-217靶向PI3K/Akt通路增强阿霉素对急性髓系白血病的敏感性

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中国实验血液学杂志 2024年第1期32卷 39-44页

作者：干定云吴军周曼陈婉姜雯武汉市第三医院血液内科湖北武汉430070

目的:探讨miR-217对急性髓系白血病细胞增殖及阿霉素敏感性的影响。方法:构建mimic NC和mi R-217 mimic载体转染至HL-60细胞中,q PCR检测转染效率。不同浓度的阿霉素处理细胞24和48 h,CCK-8法检测阿霉素化学敏感性并筛选阿霉素的最佳处... 详细信息

目的:探讨miR-217对急性髓系白血病细胞增殖及阿霉素敏感性的影响。方法:构建mimic NC和mi R-217 mimic载体转染至HL-60细胞中,q PCR检测转染效率。不同浓度的阿霉素处理细胞24和48 h,CCK-8法检测阿霉素化学敏感性并筛选阿霉素的最佳处理浓度和时间。将细胞分为对照、mimic NC、mi R-217 mimic、阿霉素和mi R-217 mimic+阿霉素共5组,流式细胞术检测细胞凋亡,qPCR检测miR-217、PI3K和Akt3的表达,Western blot检测PI3K/Akt通路蛋白PI3K、Akt3和凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达,双荧光素酶验证mi R-217和Akt3的关系。结果:mi R-217 mimic能够增强HL-60细胞对阿霉素的敏感性,阿霉素的最佳处理浓度和时间为160 ng/ml、48 h。与对照组相比,mi R-217 mimic组和阿霉素组细胞凋亡率、mi R-217和Bax蛋白水平显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白和PI3K、Akt3 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.01);与阿霉素组相比,mi R-217 mimic+阿霉素组细胞凋亡率、mi R-217和Bax蛋白水平显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白和PI3K、Akt3 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.01)。双荧光素酶实验表明mi R-217与Akt3之间存在靶向调控关系。结论:mi R-217靶向Akt3调控PI3K/Akt通路,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡并增强阿霉素对急性髓系白血病细胞的敏感性。

关键词： miR-217 急性髓系白血病阿霉素 PI3K/Akt通路

老年髋部骨折医护一体康复管理系统的研发与应用

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护理管理杂志 2024年第1期24卷 84-87,92页

作者：樊素芬黄静吴红玲孙鹏石雨周丽丽武汉科技大学附属普仁医院护理部武汉市430081 武汉科技大学医学院护理系武汉市430065 武汉科技大学附属普仁医院骨科武汉市430081

目的构建老年髋部骨折医护一体康复管理系统并评价其应用效果。方法采用便利抽样法,选取系统应用前2022年7月至11月的96例患者为对照组,进行传统康复训练;系统应用后2022年12月至2023年7月的102例患者为试验组,利用系统进行评估-计划-实... 详细信息

目的构建老年髋部骨折医护一体康复管理系统并评价其应用效果。方法采用便利抽样法,选取系统应用前2022年7月至11月的96例患者为对照组,进行传统康复训练;系统应用后2022年12月至2023年7月的102例患者为试验组,利用系统进行评估-计划-实施-评价全流程的康复训练。结果试验组患者的髋关节功能、自我效能感、自我护理能力、功能锻炼依从性和满意度评分显著高于对照组(P<0.01)。结论老年髋部骨折医护一体康复管理系统的应用可优化临床康复护理工作流程,有助于加速患者康复,改善康复效果。

关键词：老年髋部骨折医护一体信息化护理管理康复护理

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腰椎间盘髓核组织工程研究进展

中国医学科学院学报 2024年第1期46卷 88-97页

作者：李强丁凡刘晓柳武汉科技大学医学院武汉430065 武汉科技大学附属普仁医院脊柱外科武汉430033

腰椎间盘退行性病变(退变)是脊柱外科常见多发疾病之一,临床以腰痛、下肢麻木和大小便功能障碍等为主要症状,其发生发展由多个因素共同决定,但目前病理生理学和细胞生物学机制尚未完全清晰。髓核组织工程是结合生物组织学和材料科学治... 详细信息

腰椎间盘退行性病变(退变)是脊柱外科常见多发疾病之一,临床以腰痛、下肢麻木和大小便功能障碍等为主要症状,其发生发展由多个因素共同决定,但目前病理生理学和细胞生物学机制尚未完全清晰。髓核组织工程是结合生物组织学和材料科学治疗疾病的一种新兴生物疗法,可有效治疗腰椎间盘退变。临床医师正确认识髓核组织工程和腰椎间盘退变之间的复杂关系,了解髓核组织工程在腰椎间盘退变中的应用及其机制,有利于临床上腰椎间盘退变治疗、腰椎间盘退变治疗后康复和人群腰椎间盘退变预防工作开展。

关键词：腰椎间盘退行性病变组织工程髓核修复细胞移植